초록 ▼

한국, 유럽 등 화장품 원료 및 완제품 등에 대한 안전성 평가 시 동물실험이 금지됨에 따라 동물실험을 대체할 수 있는 공인된 동물대체시험법의 개발이 시급한 과제로 부각되었고, 이러한 국제적 흐름에 발맞추어 많은 동물대체시험법들이 개발되어 왔다. 안자극 시험법의 경우, 토끼를 이용하여 안자극을 평가하는 Draize 시험법을 대체하기 위한 다양한 안자극 동물대체시험법들이 보고되어 왔지만, 1가지 안자극 동물대체시험만으로 Draize 시험법을 대체하기에는 아직까지는 한계가 있다고 보고되었다. 따라서 본 과제에서는 여러 가지 안자극 동물대

한국, 유럽 등 화장품 원료 및 완제품 등에 대한 안전성 평가 시 동물실험이 금지됨에 따라 동물실험을 대체할 수 있는 공인된 동물대체시험법의 개발이 시급한 과제로 부각되었고, 이러한 국제적 흐름에 발맞추어 많은 동물대체시험법들이 개발되어 왔다. 안자극 시험법의 경우, 토끼를 이용하여 안자극을 평가하는 Draize 시험법을 대체하기 위한 다양한 안자극 동물대체시험법들이 보고되어 왔지만, 1가지 안자극 동물대체시험만으로 Draize 시험법을 대체하기에는 아직까지는 한계가 있다고 보고되었다. 따라서 본 과제에서는 여러 가지 안자극 동물대체시험법들을 조합하여 물질의 안자극을 평가하는 통합독성평가(IATA) 전략(안)을 마련하고자 하였다. 먼저 문헌조사를 통해 5가지의 안자극 동물대체시험법(단시간 노출에 따른 안자극 시험법(STE), 소각막을 이용한 안자극 시험법(BCOP), 유정란의 융모요막을 이용한 안자극 시험법(HET-CAM), 인체각막유사 상피모델을 이용한 안자극 시험법(EpiOcularTM, MCTT))을 선정하였다. 화장품 안자극 동물대체시험법 (단시간 노출법, STE) 가이드라인(안)을 제안하였으며, 또한, STE, BCOP, HET-CAM 시험법의 표준작업지침서를 마련하였다. 그리고 숙련도물질을 이용하여 각 시험법에 대하여 숙련도를 확인하였다. 선정된 시험법을 이용하여 독성물질을 먼저 분류하고, 나머지 물질에 대해 여러 시험법을 거쳐 음성물질을 확실하게 분류하기 위해 STE 또는 BCOP 시험법을 첫 단계로 하고, RhCE 시험법을 마지막 단계로 하는 하향식 접근방식(Top-Down approach)의 전략(안) 1~3과 고가의 RhCE 시험 사용을 최소화하기 위해 2가지 시험법을 동시에 수행하고, 두 시험 결과에 따라 RhCE 시험법을 추가 수행하는 전략(안) 4를 마련하였다. 전략(안)의 예측력을 평가하기 위해 총 81종의 물질을 시험물질로 선정하였으며, 1차 연도에 45종, 2차 연도에 36종의 물질을 대상으로 문헌 결과가 없거나 문헌 결과가 있지만 in vivo UN GHS 분류와 맞지 않는 물질들만 시험을 수행하였다. 그리고 81종 시험물질에 대한 자체연구결과, 기 수행과제 결과 및 문헌 결과를 전략(안) 1~4에 적용하여 전략(안)의 예측력을 평가하였다. 전략(안)의 예측력 평가 결과, RhCE 시험법 중 EpiOcular 시험법을 적용한 경우 정확도와 특이도는 전략(안) 2가 가장 높았으며, 민감도는 전략(안) 1~3이 높은 것을 확인하였다. 그리고 전략(안) 1, 3, 4가 정확도가 낮았으며, 전략(안) 4가 민감도가 낮았다. 전략(안) 1, 3이 특이도가 낮은 것을 확인하였으나, 전략(안) 1~4 모두 정확도, 민감도, 특이도가 80% 이상이었다. 한편, EpiOcular 대신 MCTT 시험법을 적용한 경우 정확도, 특이도는 전략(안) 2가 가장 높았으며, 민감도는 전략(안) 1~3이 높았다. 그리고 전략(안) 3이 정확도, 특이도가 가장 낮았으며, 전략(안) 4가 민감도는 가장 낮은 것을 확인하였다. 전략(안) 모두 정확도와 민감도가 80% 이상이었으며, 특이도는 전략(안) 2만 80% 이상으로 나타났다. 그리고 전략(안) 중 예측력이 가장 높은 전략(안) 2와 문헌 전략과 비교 시 전략(안) 2가 정확도, 민감도, 특이도가 모두 높은 것을 확인하였다. 위의 결과를 바탕으로 국내에서 화장품 원료 등의 안전성 평가 시 사용할 수 있는 전략(안)으로 EpiOcular 시험법을 적용한 전략(안) 1~4와 MCTT 시험법을 적용한 전략(안) 2가 적합할 것으로 사료되며, 각 전략(안)의 장점, 제한점 및 예측력을 고려하여 여건에 따라 취사선택하도록 제안한다.

(출처 : 요약문 2p)

Abstract ▼

The importance of the development of alternative test methods is growing with the ban of animal testings for the safety evaluation of cosmetic ingredients and products in Europe, Korea etc. Therefore, many countries around the world have currently developed alternative test methods. For eye irritati

The importance of the development of alternative test methods is growing with the ban of animal testings for the safety evaluation of cosmetic ingredients and products in Europe, Korea etc. Therefore, many countries around the world have currently developed alternative test methods. For eye irritation test methods, various alternative test methods have been proposed to replace the Draize test method using rabbits, but it was confirmed that they are not fully used now as a stand-alone replacement test for the Draize test method.
Therefore, this study aimed to establish the draft on integrated approach to testing and assessment (IATA) in combination with several test methods to evaluate eye irritation. In this study, based on our literature review, we selected 5 alternative test methods—Bovine Corneal Opacity and Permeability (BCOP), Short Time Exposure (STE), Hen's Egg Test Chorioallantoic Membrane (HET-CAM), and Reconstructed human Cornea-like Epithelium (RhCE) test method (EpiOcular; MCTT). We proposed a draft of domestic guideline on STE test method and established standard operating procedures of STE, BCOP, HET-CAM. We also confirmed proficiencies of the laboratory in performing the test method using proficiency substances. Based on the selected test methods, we adopted Top-Down approach strategies 1 to 3 by using STE and BCOP test methods at the first stage and RhCE test method at the final stage. We performed the two test methods simultaneously, and depending on the results, we conducted RhCE test method additionally as the strategy 4.
In this study, we selected 81 test chemicals in total to evaluate predictive capacity on the said strategy. We selected 45 test chemicals in the first year of our study, and 36 test chemicals in the second year of our study. Among the test chemicals, some that don’t have literature results, or are not discordant in UN GHS Category even though having literature results were performed using selected test methods. Based on results from our study, previous study and the literature of 81 test chemicals, we evaluated the predictive capacities of these strategies. The results indicated that, when EpiOcular test method is used, the strategy 2 shows the highest accuracy and specificity, while the strategy 1, 2 and 3 show high sensitivity. While the strategy 1, 3, 4 show low accuracy, the strategy 4 shows the lowest sensitivity and the strategy 1, 3 show low specificity.
In terms of accuracy, sensitivity and specificity, all strategies show higher than 80%. On the other hand, when MCTT method is used instead of EpiOcular method, the strategy 2 shows the highest accuracy and specificity, while the strategy 1 to 3 show high sensitivity. The strategy 3 has the lowest accuracy and specificity while the strategy 4 has the lowest sensitivity. In terms of accuracy and specificity, all the strategies shows higher than 80%. In terms of sensitivity, only the strategy 2 shows higher than 80%. When we compared the strategy 2 having the highest predictive capacity with literature strategy, it was confirmed that accuracy, sensitivity and specificity of the strategy 2 is high. Based on the above results, we concluded that the strategies 1 to 4 using EpiOcular test method and strategy 2 using MCTT test method are considered as the most appropriate test method on safety evaluation of cosmetic ingredients and products.
Therefore, we propose to choose one of these strategies based on the advantages, limitations and predictive capacity of each strategy.

(출처 : Summary 3p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 요약문 ... 2
• Summary ... 3
• 목차 ... 4
• 연구개발과제 연구결과 ... 5
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 5
• 제2장 연구개발과제의 국내･외 연구개발 현황 ... 7
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 25
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 104
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련 분야 기여도 ... 106
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 107
• 제7장 참고문헌 ... 109
• 제8장 첨부서류 ... 118
• 끝페이지 ... 119