초록 ▼

□ 연구개요
최근에 Necroptosis라고 하는 새로운 형태의 programmed cell death가 발견되면서 종양발전과 관련한 이러한 세포사멸체계의 기능에 대한 관심이 높아져 왔다. 한편, RIPK3라 불리는 kinase는 이러한 necroptosis기 유도되는 신호전달에 핵심역활을 하는 효소중의 하나로서, 본 연구에서 사용한 mouse melanoma세포를 비롯한 많은 인간의 암종에서 RIPK3가 결여되어 있음을 입증되었다. 특히 본 연구에서는 종양전이 모델로 사용하는 B16F10 melanoma 세포주에 RIPK3의

□ 연구개요
최근에 Necroptosis라고 하는 새로운 형태의 programmed cell death가 발견되면서 종양발전과 관련한 이러한 세포사멸체계의 기능에 대한 관심이 높아져 왔다. 한편, RIPK3라 불리는 kinase는 이러한 necroptosis기 유도되는 신호전달에 핵심역활을 하는 효소중의 하나로서, 본 연구에서 사용한 mouse melanoma세포를 비롯한 많은 인간의 암종에서 RIPK3가 결여되어 있음을 입증되었다. 특히 본 연구에서는 종양전이 모델로 사용하는 B16F10 melanoma 세포주에 RIPK3의 발현이 결여되어 있음에 주목하고, 종양전이와 관련한 RIPK3의 기능을 동물모델에서 입증하는 한편 관련된 분자기전을 규명하고 인간암에서도 유사성이 발견되는지 확인함이 목표이다.

□ 연구 목표대비 연구결과
B16F10 melanoma 세포에서 RIPK3 발현이 전이능에 미치는 영향
RIPK3 단백질 발현이 결여된 B16F10 melanoma세포주에 RIPK3유전자를 도입할 경우 마우스에서 암성장과 폐로의 전이능이 현저히 줄어둠
따라서, RIPK3의 발현은 B16 melanoma의 성장과 전이에 불리하게 작용하는 것으로 나타남.
전이억제 및 성장억제와 관련한 세포의 특성변화 및 관련기전
RIPK3의 발현이 in vitro에서 B16F10 세포성장, migration능, invasion 능에는 영향을 주지 않으나 colony formation과 colony 성장능 그리고 necroptotic cell death의 민감능에 영향줌
그러나 death유도능이 결여된 mutant RIPK3의 발현은 전이나 성장의 억제가 관찰되지 않았고 RIPK3발현에 의해 나타난 in vitro에서의 변화도 나타나지 않음
따라서, RIPK3의 성장 및 전이 억제능은 본 효소의 cell death기능과 관련이 있는 것으로 나타남.
RIPK3발현이 암성장과 전이와 관련한 유전자의 발현에 미치는 영향
RIPK3발현에 의한 multi clone에서 유의한 변화를 보인 유전자들을 선별하고, 추가 실험을 진행하여, 종양전이능에 영향을 미치는 신규유전자 두 개를 발굴함
인체암에서 본 연구에서 확인된 사실과 유사한 현상이 확인되는가?
인체로부터 얻어진 제자리 유방암과 악성암에서 RIPK3 및 신호전달 관련 분자들의 발현량 및 활성 비교에서 RIPK3의 발현자체는 유의한 증가를 보이지 않았으나, necroptosis 신호전달과정에서 RIPK3와 결합을 하는 분자들인 MLKL의 발현과 RIPK1의 phosphorylation은 유의한 수준의 증가를 보여줌

□ 연구개발결과의 중요성
본 연구를 통하여
Necroptotic death라는 시스템이 일어나는 시점과 지점에 따라 종양의 전이에 다른 영향을 줄수 있음을 제시하였고 , ripk3가 종양 성장 및 전이와 관련한 마케분자로 서 맞춤 표적으로의 가능성을 제시였으며
인체의 제자리암과 악성암의 분석에서 RIPK3 결합 단백질인 RIPK1의 활성과 MLKL의 발현이 악성암에서 유의한 수준의 증가는 차후 인체암의 악성도분석을 위한 표지분자로서의 활용가능성과 암의 발전과 세포사멸체계의 활성과 관련한 후속 연구의 기반이 될수 있는 근거를 제시하였음.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 3
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 3
• 1. RIPK3 를 발현하는 B16F10 clone제작 및 동물 모델에서의 전이능 조사 및 세포의 특성조사 ... 3
• 2. RIPK3를 발현시킨 세포에서의 유전자 발현 변화를 조사하고 검증(2-3차년도) ... 4
• 3. 인간세포와의 관련성을 조사하기 위해 RIPK3발현이 결여된 인간세포주에서 RIPK3를 발현 시키고 세포의 특성을 관찰하는 한편 인체조직에서 확보된 제자리암과 악성암에서의 RIPK3 및 관련주요분자들의 발현을 관찰 (2-3차년도) ... 5
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 6
• 4. 참고문헌 ... 7
• 5. 연구성과 ... 7
• 끝페이지 ... 7