초록

본 연구에서는 의약품의 ¹⁴C-표지방법을 개발하고 약물과 표적단백질 결합에 대한 AMS 분석을 통해 약물의 표적단백질을 규명하고자 하였으며, 표적단백질이 이미 알려진 Imatinib을 사용하여 cABl 단백질과 [¹⁴C]Imatinib과의 결합을 AMS 분석을 통해 규명하였음. 또한 신규생리활성 물질로서 ARS에 우수한 효과를 보이는 RAD1 화합물에 대한 ¹⁴C-표지 및 표적단백질 동정연구를 진행하였음

(출처 : 보고서 요약서 3p)

Abstract ▼

□ Purpose & Contents
❍ Development of [¹⁴C]-labelling methods and its application to synthesis of [¹⁴C]-labeled small molecule drugs in market using commercially available [¹⁴C]substances
❍ Development of target-identification technology using [¹⁴C]d

□ Purpose & Contents
❍ Development of [¹⁴C]-labelling methods and its application to synthesis of [¹⁴C]-labeled small molecule drugs in market using commercially available [¹⁴C]substances
❍ Development of target-identification technology using [¹⁴C]drugs and AMS(accelerator mass spectrometer) for efficient drug discovery
❍ Development of [¹⁴C]-labeling method and analysis of [¹⁴C]drugs by AMS can enable to acquire a basic technology for phase 0 clinical trial using microdosing

□ Results
❍ To secure a basic technology for phase 0 clinical trial, we developed a method to detect target protein of drug by development of [¹⁴C]-labeling method and analysis of [¹⁴C]-labeled drug using AMS
❍ In this study, we developed [¹⁴C]-labeling methods for imatinib, phenytoin and chlorothiazide, which are used in clinics, and a [¹⁴C]-labeling method for RAD1 which is a biologically active small molecule whose target protein is unknown
❍ [¹⁴C]-labeling and target identification of imatinib
• [¹⁴C]Imatinib was synthesized by performing cyclization, Pd-catalyzed cross-coupling, and optimization studies using [¹⁴C]guanidine and enamine precursor
• The complex of [¹⁴C]imatinib and Abl, which is the target of imatinib, was prepared and purified by GPC, and then the binding of [¹⁴C]imatinib to Abl was analyzed by AMS
❍ [¹⁴C]-labeling of RAD1 and target identification
• Alkylation of phenol precursor with [¹⁴C]dimethylsulfate and optimization study were carried out to label of RAD1 which has a therapeutic effect on damage exposure to radiation
• Prior to the study of target identification using [¹⁴C]RAD1, we performed a target identification study using protein panel assay, DARTS technique and biotin-conjugatedRAD1 with cold RAD1

□ Expected Contribution
❍ Current medical use of [¹⁴C] and AMS was limited to microdosing for in vivo and clinical PK study
❍ Currently, the binding of target protein and small molecule ligand was generally analyzed by indirect methods using a probe such as a biotin-conjugated ligand or dye-conjugated ligand
❍ This method requires a structural modification of the drug, which can result in a different result from the parent drug. However, [¹⁴C]-labeled drug is exactly the same as the parent drug which means we can get the exact result on the binding of [¹⁴C]drug to target protein
❍ This highly sensitive method for the binding of [¹⁴C]drug with various proteins in the cell by AMS can help to find the off-targets of drug candidate, which can be used to predict toxicities of drug candidate during the stage of drug development

(출처 : SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 국문 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• 영문목차 ... 6
• 목차 ... 7
• 1. 연구 개발 과제의 개요 ... 8
• 1-1. 연구 개발 목적 ... 8
• 1-2. 연구 개발의 필요성 ... 8
• 1-3. 연구 개발 범위 ... 8
• 2. 국내외 기술 개발 현황 ... 10
• 3. 연구 수행 내용 및 결과 ... 10
• 3-1. 3차년도 연구수행 내용 및 결과 ... 10
• 3-2. 4차년도 연구수행 내용 및 결과 ... 17
• 3-3. 5차년도 연구수행 내용 및 결과 ... 21
• 3-4. 6차년도 연구수행 내용 및 결과 ... 25
• 3-5. 연구 개발 성과 ... 37
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야 기여도 ... 38
• 4-1. 목표 달성도 ... 38
• 4-2. 플랫폼구축사업단과의 연계성 및 기여도 ... 42
• 4-3. 관련 분야 기여도 ... 43
• 5. 연구 결과의 활용 계획 ... 46
• 5-1. 14C-표지 약물과 AMS를 이용한 단백질 결합 분석 프로토콜 ... 46
• 5-2. 추가 연구의 필요성 ... 49
• 5-3. 타 연구로의 응용 ... 50
• 6. 연구 과정에서 수집한 해외 과학 기술 정보 ... 50
• 6-1. 14C 방사성동위원소 및 AMS를 이용한 absolute bioavailability 측정 기술3 ... 50
• 6-2. 14C 방사성동위원소 및 AMS를 이용한 mass balance 시험 기술4 ... 50
• 6-3. 14C 방사성동위원소 및 AMS를 이용한 metabolite profiling 기법5,6 ... 50
• 6-4. Tag(Biotin)-conjugated drug을 이용한 target fishing7,8 ... 51
• 6-5. 표적단백질 동정을 위한 DARTS 기법9 ... 51
• 7. 연구 개발 결과의 보안 등급 ... 52
• 8. 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구 시설·장비 현황 ... 52
• 9. 연구 개발 과제 수행에 따른 연구실 등의 안전 조치 이행 실적 ... 53
• 10. 연구 개발 과제의 대표적 연구 실적 ... 54
• 11. 기타 사항 ... 54
• 12. 참고 문헌 ... 55
• 끝페이지 ... 57