초록 ▼

□ 연구의 목적 및 내용
■ 연구목적: Protoarray 스크리닝을 통해 발굴된 메니에르병 진단 바이오마커의 유용성을 확인하고, 이 마커를 이용한 진단용 multi-immunoassay kit의 prototype을 개발한다.
■ 연구내용
1. 발굴된 자가항체의 바이오마커로서의 유용성을 추가로 검증
● 현재까지 protoarray와 LC-MS/MS를 통하여 메니에르병 환자의 내임파낭액과 혈청에서 발굴된 타겟항원 후보를 메니에르병 환자의 혈청과 동물 내이단백을 반응시키는 immunoprecipitation과 LC

□ 연구의 목적 및 내용
■ 연구목적: Protoarray 스크리닝을 통해 발굴된 메니에르병 진단 바이오마커의 유용성을 확인하고, 이 마커를 이용한 진단용 multi-immunoassay kit의 prototype을 개발한다.
■ 연구내용
1. 발굴된 자가항체의 바이오마커로서의 유용성을 추가로 검증
● 현재까지 protoarray와 LC-MS/MS를 통하여 메니에르병 환자의 내임파낭액과 혈청에서 발굴된 타겟항원 후보를 메니에르병 환자의 혈청과 동물 내이단백을 반응시키는 immunoprecipitation과 LCMS/ MS를 통하여 검증.
2. 바이오마커 추가 발굴.
● 환자의 내임파낭액에서 미량단백질 분석 및 추가 proteomics 분석을 통해 바이오마커 후보물질을 추가 발굴.
● 환자의 혈장에서 10개의 protoarray를 추가로 시행하여 바이오마커 후보물질을 추가 발굴.
3. 동물모델과 배양세포에서의 자가면역기전 연구
● 마우스 내이조직/내임파낭 배양세포와 환자의 혈청을 이용하여 Immunoprecipitation, mass spectrometry, immunohistochemistry를. 시행하여 반응 항원을 확인하고, 메니에르병의 타겟이 되는 내이의 위치를 확인하고. affinity column을 이용하여 자가항체를 분리함.
4. 확인된 바이오마커를 토대로 메니에르병 진단을 위한 immunoassay kit를 개발.
● 민감도와 특이도를 향상시킨 기능성 파릴렌 박막을 이용한 진단키트의 개발.
5. 개발된 진단키트의 유용성 검증
● 개발된 진단키트에서 실제 임상 메니에르병 환자의 혈청과의 반응율과 임상양상과의 상관성을 확인.

□ 연구결과
■ 메니에르병 증상을 가지는 양측성 돌발성 난청 환자에서의 자가면역반응 규명
- 결과 1: 양측성 돌발성 난청 환자의 자가면역 타겟 항원의 검증 (Protoarray 실험)
- 결과 2: 양측성 돌발성 난청 환자 및 메니에르병 환자의 자가항체와 내이조직간의 반응성을 확인함.
- 결과 3: Immunoprecipitation과 LC-MS/MS를 통한 자가항체 및 타겟 항원 후보물질 규명함
- 결과 4: 메니에르병 환자의 내림프낭에서 교감신경성 자극이 이온수송에 미치는 영향 확인함
- 결과 5: 자가면역성 메니에르병 환자에서 비디오두부충동검사를 이용한 잔존 평형기능을 확인하고 이를 유전성 내림프수종의 대표적 질환인 전정도수관확장증 환자의 결과와 비교분석함.

□ 연구결과의 활용계획
1. 메니에르병의 진단키드의 시장성. 메니에르병의 유병율을 고려할때 진단 키트가 제품화된다면 연 수백원대 이상의 매출 규모가 예상됨.
2. Immunoassay Kit의 활용. 메니에르병에서의 진단키트 확보 기술은 베체트병,갑상선염, SLE등 아직 정확한 진단 방법이 없는 자가면역질환에 적용될 수 있음.
3. 메니에르병의 병인 연구 메니에르병의 자가항체 바이오마커를 발굴은 자가면역기전을 중심으로 한 메니에르병의 병인연구에 획기적인 전기가 되며 이는 적절한 치료법의 연구에 필수적임. 감별진단이 필요한 자가면역 질환의 연구에 정보를 제공함으로써 확실한 병인을 모르던 질환의 병리기전 연구를 위한 기초자료의 제공함.
4. 메니에르병의 새로운 치료법 개발의 기초마련
현재 메니에르병을 완치시키거나 병의 진행을 막을 수 있는 치료법은 아직까지 없음. 본 연구에 의해 메니에르병 자가면역기전과 항원이 밝혀질 경우 항염증 치료 및 면역억제치료를 위한 기초 자료를 제공할 뿐 아니라 새로운 치료약물의 개발에 기초 자료를 마련할 수 있음.

(출처 : 한글요약문 4p)

Abstract ▼

□ Purpose& contents
■ Purpose: To identify efficacy of biomarker for diagnosis of Meniere’s disease via screening with Protoarray and develop prototype of multi-immunoassay kit
■ Contents
1. Verify the efficacy of identified autoimmune biomarkers
- elucidate immunoreaction between human

□ Purpose& contents
■ Purpose: To identify efficacy of biomarker for diagnosis of Meniere’s disease via screening with Protoarray and develop prototype of multi-immunoassay kit
■ Contents
1. Verify the efficacy of identified autoimmune biomarkers
- elucidate immunoreaction between human serum of patients with Meniere’s disease and inner ear protein of mouse and find the target antigen candidates
2. Unveil novel biomarkers for Meniere’s disease
- Perform protoarray for 10 patients wih Meniere’s disease and unravel new biomarkers
3. Immunoreaction mechanism in mouse model and cultured endosac epithelia
- IP, Mass analysis, IHC in mouse inner ear tissue/cultured human endosac epithelia
- establish Meniere’s disease mouse model
4. Validate the developed diagnostic prototype kit

□ Result
1. Elucidate the mechanism of autoimmune reaction in bilateral sudden sensorineural hearing loss similar with Meniere’s disease
- Identification of autoimmune target antigens in bilateral sudden sensorineural hearing loss
- Immunoreaction between mouse inner ear tissue and auto antibody in bilateral sudden sensorineural hearing loss
- found candidates for auto antigens which interacted with autoantibodies by IP and LC-MS/MS
- Effect of autonomic stimulation on ion transport in endolymphatic sac of patients with Meniere’s disease
- Identification of the effect of immune reaction on vestibular function in Meniere’s disease patients in which high frequency vestibular function was well-preserved. Possible target for immune reaction should be type 2 hair cells.

□ Expected Contribution
1. Immunoassay Kit for Meniere’s disease
- this kit can be applied to various autoimmune diseases such ac Bechet’s disease, Thyroiditis, SLC and Meniere’s disease
2. Mechanism of Meniere’s disease
- In the aspect of academic view, the unveiled mechanism of Meniese’s disease related to autoimmune reaction make it possible to find the therapeutic drugs for Meniese’s disease in the respect of immune response.

(출처 : SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• 연구계획 요약문 ... 3
• 연구결과 요약문 ... 4
• 한글요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• 연구내용 및 결과 ... 6
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 6
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 7
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 7
• 4. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 15
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 17
• 6. 연구과정에서 수집한 해외 과학기술정보 ... 18
• 7. 주관연구책임자 대표적 연구실적 ... 19
• 8. 참고문헌 ... 19
• 9. 연구성과 ... 22
• 10. 국가과학기술지식정보서비스에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 24
• 11. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 24
• 12. 기타사항 ... 25
• [별첨1] 대 표 연 구 실 적 ... 26
• [별첨2] 세부 목표 관련 증빙 ... 37
• 끝페이지 ... 49