초록 ▼

1. 제1세부과제명: 말레이시아 가금 바이러스(NDV 및 IBV) 특성 분석(농림축산검역본부)
가. NDV 말레이시아 분리주의 특성 분석
1) 말레이시아 분리주 검출을 위한 NDV RT-PCR 진단법 적용
o 말레이시아 가금시료에서 NDV 분리주를 효과적으로 검출하기 위하여, 검역본부에서 개발한 duplex RT-PCR의 검출 효능을 평가하였다. 그 결과, duplex RT-PCR은 말레이시아 NDV 분리주를 모두 검출하고 병원성을 감별할 수 있었다.
2) 말레이시아 유행 NDV의 특성 분석
말레이시아 N

1. 제1세부과제명: 말레이시아 가금 바이러스(NDV 및 IBV) 특성 분석(농림축산검역본부)
가. NDV 말레이시아 분리주의 특성 분석
1) 말레이시아 분리주 검출을 위한 NDV RT-PCR 진단법 적용
o 말레이시아 가금시료에서 NDV 분리주를 효과적으로 검출하기 위하여, 검역본부에서 개발한 duplex RT-PCR의 검출 효능을 평가하였다. 그 결과, duplex RT-PCR은 말레이시아 NDV 분리주를 모두 검출하고 병원성을 감별할 수 있었다.
2) 말레이시아 유행 NDV의 특성 분석
말레이시아 NDV 분리주 16주를 계통분석법어 유전자)으로 유전형을 분석한 결과, 약독형 1주(유전형 II형), 강독형(유전형 VII형)으로 분류되었다.
o 강독형 분리주는 모두 유전형 VII형으로 최소한 5개의 아형(a, b, c, d, h)이 말레이시아에 존재하는 것으로 밝혀졌다. 이 중 56.3% (9/16)가 2004년 말레이시아에서 처음 보고된 제VII형 h아형(VIIh 유전형)으로 분류되었다.
o NDV VIIh형의 국가별 발생 동향을 분석한 결과, NDV VIIh 유전형은 2004년 말레이시아 가금농장(닭)에서 최초로 보고된 후, 2009년 인도네시아, 인도차이나(캄보디아, 베트남), 2011년 중국남부(운남성, 광서성, 귀주성), 2012년 아프리카 남부지역(모잠비크, 짐바브웨, 잠비아, 남아연방)으로 확산되고 있음을 보였다.
o NDV VIIh 유전형 분리주들의 전장 유전자를 계통분석과 simplot법으로 분석한 결과, 2004/2005년(유행초기) 분리주와 2011년 분리주(유생중기), 2013년(유행 후기) 분리주 간에 각각 게놈의 유전적 차이를 보였다. 인도차이나, 중국, 남부 아프리카지역 분리주는 2011년 말레이시아 분리주와 가장 높은 상동성을 보여, 2011년 전후 유행한 바이러스가 주변국 및 아프리카로 확산되었음을 보여주고 있다.
3) 말레이시아 분라도입 NDV의 특성 분석
말레이시아 NDV 분리주 11주에 대해 F 유전자 분석 결과 VIIa형이 3주, VIIh형이 8주였다. MDT, ICPI, F₀ cleavage site motif 등 병원성 분석을 진행하였다.

나. 말레이시아 유행 닭 전염성기관지염(IBV) 특성 분석
1) IBV 말레이시아 분리주 검출을 위한 RT-PCR 진단법 개선
o IBV의 수많은 혈청형과 변종의 존재로, 기존 RT-PCR법의 프라이머 세트에서 말레이시아 IBV 분리주의 검출에 문제점이 확인되었으며, 말레이시아 가금시료에서의 IBV 검출하는 데 한계가 있어 검출 효율을 개선하기 위하여 RT-PCR법의 프라이머 세트를 개선하였다. 개선된 방법은 S 유전자와 N 유전자 각각의 전체 ORF를 증폭하도록 설계하였다. 상기 개발된 PCR 프라이머 세트는 말레이시아 가금시료에서 IBV 검출 및 유전자 분석에 유용함을 확인하였다.
2) 말레이시아 유행 IBV의 특성 분석
o 말레이시아 IBV 분리주 2주의 S 유전자를 분석한 결과, 말레이시아 분리주 MH5365/95 주(신장형)와 V9/04주 (호흡기형) 모두 S 유전자에서 두 종류의 IBV가 재조합된 것으로 타났다. S2 유전자에서는 두 분리주는 같은 유전적 그룹으로 분류되었으나, S1 유전자 부위에서 서로 다른 그룹으로 분류되어 S1 유전자가 IBV의 조직친화성 결정에 중요한 역할을 하는 것으로 나타났다.
3) 말레이시아 분리·도입 IBV의 특성 분석
o 말레이시아 IBV 분리주 10주에 대해 S 유전자 분석 결과 QX형이 1주, 말레이시아 변이형이 4주, 4/91형이 5주 였다. 국내 주요 백신주의 항혈청에 대해 말레이시아 분리주(말레이 시아 변이형)의 중화지수를 실험한 결과 QX 사독백신에 대해 중화능이 있음을 확인하였다.
4) 말레이시아 IBV의 병원성 평가
o 말레이시아 내 IBV 유행형인 QX-like(IBS130/2015)와 Malaysian variant type (IBS037A/2014)의 병원성 평가를 실시한 결과, 폐사율과 신장 친화성 측면에서 QX-like 형이 Malaysian variant에 비해 보다 높은 병원성을 나타내었다. 반면, 호흡기 친화성은 Malaysian variant type이 QX-like보다 높게 나타났다.

2. 제2세부과제명: 말레이시아 가금 바이러스 분리 및 역학정보 수집 (말레이시아 UPM)
가. 말레이시아 가금 시료 채취
o 2016/2017년 기간동안 말레이시아 본섬의 남부와 북부 및 인도네시아 보르네오 섬 북부의 동 말레이시아에 이르기까지 광범위한 지역에서 ND 또는 IB 발생으로 의심되는 가금 농장으로 부터 시료(기관, 맹장편도, 신장 등)를 채취하여, 바이러스 분리용 시료로 사용하였다.

나. 말레이시아 가금 시료로부터 NDV 및 IBV 분리 및 동정
o 상기에서 채취한 가금시료로부터 4개 지역(Sarawak, Penang, Johor, Perak) 9개 육계 농장에서 NDV를, 5개 지역(Sabah, Sarawak, Penang, Johor, Perak) 8개 육계농장에 서 IBV를 분리하였다.
o 말레이시아에서 ND 발생은 북부 지방 가금농장에서 주로 확인이 되었으며, IB 발생은 말레이시아 전역에서 확인 되었다.
o 그러나, 말레이시아 가금농장의 어떠한 시료에서도 조류인플루엔자 바이러스는 분리되지 않았다.

다. 말레이시아 NDV 및 IBV 분리주의 국내도입
o 현재까지 분리된 NDV 및 IBV 말레이시아 분리주들은 종란 계대를 통하여 안정화 및 순수분리 작업을 진행하였으며, 바이러스의 병원성, 면역원성, 항원성, 국내 상용백신의 방어 효능 등을 분석하기 위하여 NDV 및 IBV 각 11주를 국내 도입하였다.

라. 말레이시아 야생조류 시료 채취 및 NDV 분리 시도
o 현재까지 알려진 바 없는 말레이시아 지역 야생조류의 NDV 분포 현황을 파악하기 위하여 서로 다른 2개 지역 13종의 야생조류로부터 96점의 스왑 시료를 채취하고 NDV 분리를 진행하였다. 5주의 HA능 보유 바이러스 분리 결과, 그 중 1주(Black swan에서 분리) 만 NDV 항체에 대한 반응성을 나타내었으며, 또 다른 1주(Little Stint에서 분리)는 계태아 치사율이 60%에 달하였다.

(출처 : 요약 1p)

Abstract ▼

Newcastle disease (ND) and infectious bronchitis (IB) are devastating poultry diseases in many Asian countries including Malaysia, causing substantial economic losses in the poultry industry of both countries. ND is endemic poultry disease in Malaysia and sporadic NDV outbreaks have been reported in

Newcastle disease (ND) and infectious bronchitis (IB) are devastating poultry diseases in many Asian countries including Malaysia, causing substantial economic losses in the poultry industry of both countries. ND is endemic poultry disease in Malaysia and sporadic NDV outbreaks have been reported in commercial poultry farms.

Molecular characterization of the NDV and IBV isolated from various vaccinated poultry farms in Malaysia is important to determine the genotypes of NDV and IBV. Molecular characterization is also crucial in identification of the emergence of new NDV genotypes as well as the new IB variants. To date, genotype VII NDV still remains as the predominant NDV strain that circulating in Malaysia. On the other hand, there are 3 IBV serotypes have been reported in Malaysia, namely QX-like, 793/B (4/91) and Malaysian variant. Both QX-like and Malaysian variant IBV are predominant and frequently isolated from the commercial broilers and layers. QX-like stari was more pathogenic, caused higher mortality and showed higher tissue tropism for the kidney than the variant strain. In contrast the Malaysian variant strain showed high tissue tropism for the respiratory tract compared. Both strains are able to infect the respiratory tract and kiney of chicken irrespective of age.

There is increasing evidence that wild birds are natural carriers of avirulent class I NDV and class II NDV strains. As NDV is able to infect many species of birds, surveillance of NDV in wild birds is important. Low virulence wild-bird viruses could become more virulent in domestic birds. In Malaysia, the epidemiology and prevalence of NDV in wild birds is not well-known. 96 swab sample from 13 species wild birds were use to isolate NDV. 5 strain have hemagglutination abillity. One strain from black swan was confirm as NDV(VIIa). The isolation of NDV from wild birds carried out in this project provides valuable information on the prevention and control of NDV.

(출처 : Abstract 42p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• I. 연구배경 및 목표 ... 4
• 1. 연구배경 ... 4
• 2. 연구최종목표 ... 5
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 5
• II. 연구방법 및 수행전략 ... 6
• 1. 재 료 ... 6
• 2. 연구전략 및 방법 ... 6
• III. 연구결과 ... 7
• 1. 제1세부과제명: 말레이시아 가금 바이러스(NDV 및 IBV) 특성 분석(농림축산검역본부) ... 7
• 2. 제2세부과제명: 말레이시아 가금 바이러스 분리 및 역학정보 수집 (말레이시아 UPM) ... 27
• IV. 연구결과요약 ... 34
• V. 고 찰 ... 37
• VI. 참고자료 ... 39
• VII. 영문초록 ... 42
• 끝페이지 ... 42