보고서 정보
주관연구기관 |
농림축산검역본부 Animal and Plant Quarantine Agency |
연구책임자 |
김진현
|
참여연구자 |
강민수
,
송혜순
,
정옥미
,
정지연
,
권용국
,
박해철
,
박성원
,
강정우
,
정성훈
,
김용상
,
노진형
,
조윤상
,
유미선
,
민수빈
,
윤순식
|
보고서유형 | 연차보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
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발행년월 | 2019-12 |
과제시작연도 |
2019 |
주관부처 |
농림축산식품부 Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs(MAFRA) |
등록번호 |
TRKO202000030792 |
과제고유번호 |
1545019614 |
사업명 |
농림축산검역검사기술개발(R&D) |
DB 구축일자 |
2020-11-21
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키워드 |
닭진드기.친환경.구제제.내성.방제.
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초록
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4. 당해년도 연구결과 요약
O 제1세부과제명: 닭진드기 오염원과 구제제 내성 실태 조사
- 국내 주로 사용되는 모니터링법 별 유효성 비교·분석
ᄋ 산란계 농가 4개소에 대하여 모니터링법 별 포획된 닭진드기 수 및 오염 수준을 비교한 결과, 골판지법, 먼지관찰법 및 육안평가법을 통한 닭진드기 오염 수준은 모두 유사한 수준을 보였으나, 테이프법에서는 실리카를 최근 코팅한 2개 농가의 닭진드기 검출 수준이 다른 모니터링 법에 비교하여 낮았음.
ᄋ 닭진드기 모니터링법 별 장점 및 단점을 비교한 결과, 골판지법 및 테
4. 당해년도 연구결과 요약
O 제1세부과제명: 닭진드기 오염원과 구제제 내성 실태 조사
- 국내 주로 사용되는 모니터링법 별 유효성 비교·분석
ᄋ 산란계 농가 4개소에 대하여 모니터링법 별 포획된 닭진드기 수 및 오염 수준을 비교한 결과, 골판지법, 먼지관찰법 및 육안평가법을 통한 닭진드기 오염 수준은 모두 유사한 수준을 보였으나, 테이프법에서는 실리카를 최근 코팅한 2개 농가의 닭진드기 검출 수준이 다른 모니터링 법에 비교하여 낮았음.
ᄋ 닭진드기 모니터링법 별 장점 및 단점을 비교한 결과, 골판지법 및 테이프법은 닭진드기 오염 수준을 객관적으로 측정 가능한 장점이 있으나 2회 이상 농장 방문 및 트랩 설치 등의 적용이 어려운 단점이 있었으며, 먼지관찰법 및 육안평가법은 적용 방법이 용이한 장점이 있으나, 관찰자의 주관적인 판단으로 오염도를 평가하여 정확성이 부족한 단점이 있음.
ᄋ 닭진드기 모니터링 시 농장의 환경, 과거 적용한 방제법 등을 고려하여 모니터링법을 선택하여야 하며, 객관적인 오염 수준 평가가 가능한 모니터링법과 적용이 용이한 모니터링법을 각 1개 이상을 이용하여 오염 수준을 비교 평가하는 것이 바람직한 것으로 판단됨.
- 닭진드기 유입원 및 농장 내 서식지 조사
ᄋ 닭진드기의 외부 유입 요인을 설문 조사한 결과, 최근 신축한 1개 농가는 중추 입식 후 닭진드기가 유입되었으나 나머지 3개 농가는 기존 오염된 닭진드기에 의한 것으로 확인됨.
ᄋ 산란계 운송(노계 도태) 차량에 대한 닭진드기 오염수준 조사 결과 낮은 오염도를 보였으나 닭 진드기의 생활사를 고려할 때 차량을 통하여 유입된 닭진드기에 의한 농장 전체 오염이 가능 할 것으로 판단됨.
ᄋ 닭진드기의 COI 및 ITS 영역 유전적인 차이를 이용하여 외부 유입 가능성을 조사한 결과, COI 영역은 조사한 14개 농가의 닭진드기 모두 일치하였던 반면 ITS 영역은 3개의 유형으로 구분되어 2차년도에 ITS 영역을 분석하여 외부 유입 가능 여부를 조사할 계획임.
ᄋ 닭진드기의 농장 내 흡기구, 케이지 등 서식지를 확인하기 위하여 설문 조사한 결과, 닭진드기 오염도가 낮은 1개 농가를 제외하고는 3개 농가 모두 계사 내 전체적으로 오염되어 있는 것으 로 확인됨.
- 직접접족법(filterpaper contact method)을 활용한 닭진드기 내성 검사법 확립
ᄋ 닭진드기 구제제 3종에 대하여 직접접촉법을 활용하여 닭진드기 보관 온도 및 기간과 구제제 접촉 시간 별 닭진드기 사멸률을 조사한 결과, 화학제2 및 천연물제1에 대하여는 보관 기간에 관계없이 4°C에 보관된 닭진드기와 25°C, 3일 이내 보관된 닭진드기는 유사한 닭진드기 사멸률을 보였음.
ᄋ 7일 이상 25°C에 보관된 1개 농가의 닭진드기의 사멸률은 다른 시험군보다 높은 사멸률을 보였으며, 또한 2개 농가의 7일 이상 25°C에 보관된 닭진드기에 대하여 증류수를 처리한 대조군 에서는 35%의 높은 폐사율을 보여 내성검사에 활용할 수 없었음.
ᄋ 닭진드기 내성 검사는 닭진드기 채취 후 3일 이내 또는 3일 후 검사 시에는 냉장 온도(4°C)에서 보관 후 시험이 가능한 것으로 확인되었음.
- 지역 별 포획된 닭진드기 구제제 내성 실태 조사
ᄋ 닭진드기 구제제 중 생산되고 있는 8종의 제품에 대하여 직접접촉법을 이용하여 13개 산란계 농가 및 1개 육용종계농가에 대한 닭진드기 사멸률을 조사한 결과, 접촉 24시간 후에는 화학제1, 화학제4 및 천연물제2에 대하여는 모든 농가에서 80% 이상의 높은 사멸률을 보인 반면 화학제2, 화학제5 및 천연물제3에 대하여는 대부분 50% 미만의 낮은 닭진드기 사멸률을 보였고, 화학제3 및 천연물제1은 각각 50~95% 및 38.3~100%의 닭진드기 사멸률을 보여 조사한 농가 로 상이한 결과를 보였음.
ᄋ 48시간 접촉 후 닭진드기 사멸률은 8종의 약제 모두 24시간 접촉 후 보다 다소 높은 닭진드기 사멸률을 보였음.
ᄋ 지역 별 닭진드기 구제제 내성 실태를 비교한 결과, 모든 구제제에 대하여 닭진드기 사멸률의 유의적인 차이는 없었으나, 천연물제1은 호남 및 충청 지역이 영남 지역보다 다소 높은 닭진드기 사멸률을 보였음.
° 음수 투약제품에 대한 닭진드기 내성검사법은 in vitro feeding system을 이용하여 진행 중에 있으며, 또한 신규로 허가된 제품에 대하여는 제품이 출시된 후 내성 생성 여부를 지속적으로 파악할 계획임.
- 닭진드기 구제제 사용 횟수와 내성 생성 양상 비교·분석
ᄋ 닭진드기 구제제 사용 횟수에 따른 내성 생성 여부를 확인한 결과, 천연물제1을 미사용하거나 1회 사용한 농가의 닭진드기 사멸률은 98.3~100%로 2회 이상 사용한 대부분의 농가 (51.7~73.3%)보다 높은 닭진드기 사멸률을 보였음.
O 제2세부과제명: 닭진드기 물리·화학적 방계물질 발굴 및 현장 적용성 평가
- 닭진드기 물리적 방제기술 발굴 및 평가
ᄋ CO2는 CO와 같이 생물 체내에 순환계의 데미지를 주어 독성효과를 나타낼 수 있는 물질로 체표면적이 작은 진드기 등에 소량으로 적용할 시 방제 효과 확인 실험 수행.
ᄋ CO2 가스를 이용하여 닭진드기의 방제효과를 평가한 결과 분사기를 통한 직접분사의 경우 접촉 즉시 약 75%의 사멸률이 나타났으며, 접촉 5일 후 100% 사멸률이 관찰되었음.
ᄋ CO2 가스의 노출시간별 사멸률을 확인하고자 밀폐공간에 드라이아이스를 넣고, 1, 3, 5, 10, 30, 60분 동안 노출시키고 5일간 측정한 결과 접촉시간이 늘어날수록 사멸률이 높게 나타났으며, 노출 후 시간이 증가할수록 사멸률이 증가되었음.
ᄋ 따라서 본 물질을 소화기, 스프레이기 등의 효과적인 장비 적용 시 뚜렷한 방제효과가 나타낼 수 있을 것으로 평가됨.
- 닭진드기 화학적 방제물질 발굴 및 평가
ᄋ 문헌탐색을 통해 고삼추출물, 백두옹추출물, 계피추출물, 목향추출물을 방제물질로 선정함.
ᄋ 고삼추출물(50배~500배)을 노출시간 별로(1~72시간) 적용결과 고농도 및 노출시간이 길수록 높은 보정살충율※(0~46%)을 나타내었음
ᄋ 백두옹(50배~500배)을 노출시간 별로(1~72시간) 적용 결과 고농도 및 노출시간이 길수록 높은 보정살충율(0~8%)을 나타내었음
ᄋ 계피(50배~500배)을 노출시간 별로(1~72시간) 적용결과 고농도 및 노출시간이 길수록 높은 보정살충율(0~26%)을 나타내었음
ᄋ 목향(50배~500배)을 노출시간별로(1~72시간) 적용결과 고농도 및 노출시간이 길수록 높은 보정살충율(0~22%)을 나타내었음
* 보정살충율 : (실험군사멸률-대조군사멸률)/(100-대조군사멸률)*100
O 제3세부과제명: 닭진드기 생물학적 방제물질 발굴 및 현장 적용
- 닭진드기 생물학적 방제물질 탐색 및 선발
ᄋ 진드기 방제효과가 보고되어 있는 곤충병원성 곰팡이 중 후보균주를 선발하기 위하여 ATCC, KACC, 충북대, 식물검역기술개발센터 등에서 분양받은 B. bassiana, M. anisopliae, L. attenuatum, Asp. flavus, P. lilacinus 등 종 18개의 곰팡이 균주를 확보함.
ᄋ 각 곰팡이 균주 별 PDA/PDB 배지를 이용, 배양 및 계대법을 확립하였고, 균주별 집락, 포자, 균사의 모습을 관찰하여 형태학적 동정을 실시하였음.
ᄋ 균주별 유전학적 동정을 위하여, ITS gene을 타겟으로 하는 프라이머 제작 및 PCR 법을 구축하였고, PCR 결과 및 염기서열 분석을 통해 Genbank 등록된 균주와의 상동성이 98-100% 임을 확인하였음.
ᄋ 곰팡이 균주의 실험실 내 대량 배양법 확립 및 곰팡이 균주 배양액 전처리를 통한 효과평가에 사용할 포자를 얻고 1x107/ml 로 희석 후 직접 접촉법에 활용함.
- 닭진드기 방제효과 검사법 구축 및 방제효과 실험
ᄋ 기존 보고된 방법을 참조하여 닭 혈액, Cryotube, 트랜스퍼 피펫, 파라필름을 이용, 실험실 내 닭진드기 인공 배양법 구축하였고 배양 일자 별 생존율 시험 중임.
ᄋ 확보된 곤충병원성 곰팡이 중 B. bassiana 7 균주의 닭진드기에 대한 방제효과를 평가하기 위하여 직접 접촉법(Filter paper method)을 실시한 결과, 닭진드기의 곰팡이 접촉 후 3~4 일 이후 치사율이 높아지기 시작하였고, 5일 이후부터 닭진드기 표면에 곰팡이 감염이 관찰되어 사멸함을 확인할 수 있었으며, 7 균주 중 치사율이 높은 2 균주를 선발 예정임.
ᄋ 확보된 곤충병원성 곰팡이 중 M. anisopliae 3 균주의 닭진드기에 대한 방제효과를 평가하기 위한 직접 접촉법을 실시한 결과, 닭진드기의 곰팡이 접촉 후 3-4일 이후 치사율이 급격히 높아졌고 4일 이후부터 닭진드기 표면에 곰팡이 감염이 관찰되며 사멸함을 확인할 수 있었으며, 3 균주 중 방제효과가 높은 2 균주를 선발 할 예정임.
ᄋ B. bassiana 및 M. anisopliae 균주의 방제효과를 서로 비교한 결과, M. anisopliae의 방제 효과가 더 높음을 확인할 수 있었음.
(출처 : 요약 2p)
목차 Contents
- 표지 ... 1
- I. 연구배경 및 목표 ... 5
- 1. 연구배경 ... 5
- 2. 연구최종목표 ... 6
- 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 7
- II. 연구방법 및 수행전략 ... 8
- 1. 재 료 ... 8
- 2. 연구전략 및 방법 ... 9
- III. 연구결과 ... 11
- IV. 연구결과요약 ... 33
- V. 금후 추진계획 ... 37
- VI. 참고자료 ... 38
- 끝페이지 ... 39
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