초록 ▼

4. 당해연도 중간결과 요약
ㅇ 구제역바이러스 SATl, SAT2, SAT3, C형 종독주 확보
1. 구제역 발생상황 및 바이러스 분석
- C형 및 SAT3바이러스의 경우 발생이 거의 되지 않아 세계표준연구소의 매칭 결과는 없음
- C형은 최근 비발생이기 때문에 OIE 추천주 (WRLFMD)이자 한국항원뱅크 비축주인 EURO-SA 지역형의 바이러스가 백신주 후보로 바람직할 것으로 생각됨
- SATIS] 경우 지역형 I 및 III 이 발생되고 있으며 매칭 결과로는 참고할 만 한 자료가 충분하지 않으므로, 최

4. 당해연도 중간결과 요약
ㅇ 구제역바이러스 SATl, SAT2, SAT3, C형 종독주 확보
1. 구제역 발생상황 및 바이러스 분석
- C형 및 SAT3바이러스의 경우 발생이 거의 되지 않아 세계표준연구소의 매칭 결과는 없음
- C형은 최근 비발생이기 때문에 OIE 추천주 (WRLFMD)이자 한국항원뱅크 비축주인 EURO-SA 지역형의 바이러스가 백신주 후보로 바람직할 것으로 생각됨
- SATIS] 경우 지역형 I 및 III 이 발생되고 있으며 매칭 결과로는 참고할 만 한 자료가 충분하지 않으므로, 최근 발생바이러스이면서 OIE로 부터 추천되는 지역형 III 이 백신주 후보로 바람직할 것으로 판단됨
- SAT2의 경우 I, III, IV, VII, XIII의 지역형이 발생되고 있으며, OIE 추천주이면서 가장 많이 발생되는 지역형 VII가 백신주 후보로 바람직할 것으로 판단됨
- SAT3의 경우 변이가 심하고 세계적으로 거의 발생이 없어 OIE 추천주인 지역형 I 이 백신 종독주 후보로 바람직할 것으로 판단됨
- 확보된 후보종독주(rFMDV)의 유전적 상동성 분석결과, C형의 유전적인 변이는 여러 후보주 가운데 (상동성은 92-99%) 가장 작었으며, SAT1 의 경우 항원 단백질의 차이는 10% 안팎의 변이를 보였다. SAT2의 경우 단백질의 변아는 10-15%의 차이를 보이고 있으며, SAT3의 경우 SAT3 23M 4/81이 가장 유사한 바이러스로 확인되었다. 2013년 우간다에서 발생된 바이러스와는 83%의 유사성만 확인되었다.

2. 최근 발생바이러스 및 백신 후보주 항원단백질 분석
- C형은 최근 발생은 없고, 과거 발생한 바이러스간에 일부 VP1 GH loop부분에서만 약간 변이될 뿐 큰 차이는 보이지 않았음.
- SAT1 은 VP1 서열의 변이만이 두드러지게 나타나는 경향을 보였다. SAT1 5SA와 BOT 1/68의 경우 95%의 유사성을 보였기 때문에 서로 방어 가능한 유사한 바이러스로 파악되었다.
- SAT2의 경우도 VP1 에서 많은 변이가 확인되었으며, VP1 의 유전적인 특징에 따라 방어능 변화 유도가 가능할 것으로 판단되는 변이서 열 6곳이 관찰됨.
- SAT3의 경우 세계적으로 거의 발생이 없어 최근 발생바이러스와의 매칭결과는 확인할 수 없으며, 일부 바이러스에서는 VP1 이외에도 VP3 및 VP2 부위에서도 strain 마다 특징적인 대량의 변이가 관찰됨.

3. 구제역바이러스의 세포에서의 중식성 분석
- 후보백신주로 검토된 C형 바이러스 (C-Ob R) 가 대표적인 항원 생산 세포인 BHK -21 cell에서 가장 좋은 증식성을 보였으며, SAT1 이 그 다음으로 증식성이 좋았으며, SAT2와 SAT3 바이러스는 유사한 바이러스 증식성을 보였음.
- One-step growth 특성분석에서도 바이러스 접종 12시간부터 4종의 모든 바이러스에서 최대역가를 보였음.
- 항원의 대량 배양의 전단계로 개발 중인 부유세포 배양에서 확보된 후보바이러스의 증식성을 예비 평가한 결과 대부분 바이러스는 증식되는 양상을 보여주었고 적절한 배양조건과 해당세포에 바이러스가 적합하도록 적응 단계가 필요할 것으로 파악되었음.
- 바이러스의 불활화는 불활화제 처리후 3시간 이내 후보 바이러스는 모두 불활화 되었다.

4. 구제역 C, SAT1, SAT2, SAT3 항원에 대한 면역원성 시험결과
- 유산양에서 C형과 SAT2 type 바이러스가 면역성이 가장 좋았으며, 그 다음 SAT3 순으로 평가되었음
- 대부분 접종항원에 대한 면역형성은 접종 3주에서 가장 높은 면역형성능을 보였음.
- SAT1 의 경우 비교적 낮은 면역성을 보였으며, 항체는 면역 후 2-3주까지 상승되다가 4주에 낮아지는 현상이 관찰되었음.

5. 항체의 교차면역성 시험 결과
- 대부분의 바이러스는 고유 혈청형에 맞는 항체반응성을 보였음
- 돼지에서 감염 후 각 혈청형에 따라 181-1,024배의 중화항체 반응성을 보였음
- C형과 SAT2가 돼지에서 감염 후 항체가가 비교적 높게 형성되었음.

6. 마우스에서의 면역 및 방어시험 결과
- SAT1, SAT3, C에 대해서 마우스 접종후 공격접종으로 방어능을 확인하였음

7. 소 및 기니픽에서의 면역혈청 확보
- 소에서 후보주를 접종하고 3주후 혈액을 채취하였음
- 기니픽에서 후보주를 접종하고 3주후 혈액을 채취하였음

8. SAT1, SAT2, SAT3 C 백신 후보주 선정
- 면역원성 및 방어능이 우수한 혈청형별 2종의 후보주를 선발함


(출처 : 4. 당해연도 중간결과 요약 1p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• I. 연구배경 및 목표 ... 3
• 1. 연구배경 ... 3
• 2. 현황 및 문제점 ... 3
• 3. 연구개발의 최종목표 ... 4
• 4. 연차별 연구개발 목표와 내용 ... 4
• II. 연구방법 및 수행전략 ... 5
• 1. 재 료 ... 5
• 2. 연구전략 및 방법 ... 5
• III. 연구결과 ... 5
• 1. 구제역 발생 상황 분석 ... 5
• 2. 다양한 세포에서 구제역바이러스의 중식성 분석 ... 12
• 3. 구제역 백신 후보주 4종의 바이러스별 불활화 시간조사 ... 14
• 3. 백신 후보주의 목적동물에서의 면역원성 ... 14
• 4. 백신 후보주의 백신접종 및 공격접종 ... 16
• 5. SAT1, SAT2, SAT3, C형의 종독 후보주 요약 ... 18
• IV. 연구결과 요약 ... 19
• 1. 구제역 발생상황 및 바이러스 분석 ... 19
• 2. 최근 발생바이러스 및 백신 후보주 항원단백질 분석 ... 19
• 3. 구제역바이러스의 세포에서의 중식성 분석 ... 19
• 4. 구제역 C, SAT1, SAT2, SAT3 항원에 대한 면역원성 시험결과 ... 20
• 5. 항체의 교차면역성 시험 결과 ... 20
• 6. 마우스에서의 면역 및 방어시험 결과 ... 20
• 7. 소 및 기니픽에서의 면역혈청 확보 ... 20
• 8. SAT1, SAT2, SAT3 C 백신 후보주 선정 ... 20
• V. 금후 추진계획 ... 20
• 1. 항원량의 결정 ... 20
• 2. 모체이행항체 극복평가 ... 20
• 3. 야외시험을 통한 평가 ... 20
• VI. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 21
• VII. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ... 21
• VIII. 주요연구 변경사항 ... 21
• IX. 참고문헌 ... 22
• 끝페이지 ... 22