초록 ▼

Ⅳ. 연구개발결과
1. MCB(마스터 세포은행) 제조 및 특성 분석
내용 : MCB 제조 및 banking
- Preparation of Master Cell Bank (400 vials)
결과 : MCB (400바이알) 제조 완료

내용 : MCB 특성 분석
- Sterility 시험, Mycoplasma 부정시험, 바이러스 부정 시험
결과 : MCB 특성 분석 (Sterility 시험, Mycoplasma 부정시험, 바이러스 부정 시험) 완료

2. 약리연구
내용 : i

Ⅳ. 연구개발결과
1. MCB(마스터 세포은행) 제조 및 특성 분석
내용 : MCB 제조 및 banking
- Preparation of Master Cell Bank (400 vials)
결과 : MCB (400바이알) 제조 완료

내용 : MCB 특성 분석
- Sterility 시험, Mycoplasma 부정시험, 바이러스 부정 시험
결과 : MCB 특성 분석 (Sterility 시험, Mycoplasma 부정시험, 바이러스 부정 시험) 완료

2. 약리연구
내용 : in vivo 효능평가
- 폐암 HCC827/GR, 위암 MKN45, 폐암 or GBM U87MG
결과 : HCC827/GR (EGFR mutation, cMET amplification), LU0858 (EGFR mutation, cMET amplification), MKN45 (cMET amplification), U87MG (HGF autocrine), EBC-1 (cMET amplification) 세포주를 이용한 xenograft 시험에서 CKD-702의 우수한 항암효과 확인 완료.

내용 : PK/PD 분석
(폐암 EBC-1)
결과 : EBC-1 세포주를 이용한 xenograft 시험에서 CKD-702 투여 후 PK와 PD (cMET/EGFR signaling) 결과를 통해 PK/PD 모델링 분석 완료.

내용 : in vitro 효능평가 및 기전연구
- 암세포주 panel assay, signaling, receptor internalization, migration, immunogenicity
결과 : CKD-702는 cMET과 EGFR의 ECD에 결합하며, 두 수용체와 ligand의 결합을 차단, 세포내제화 및 degradation 시킴으로써 효과적으로 암세포 증식 신호를 차단함. CKD-702의 암세포증식 저해능, cMET과 EGFR 관련신호전달물질 억제 효과는 대조항체인 EM-1 (JNJ-372, JNJ-61186372, Janssen) 보다 우수함. 또한 in vitro immunogenicity assay를 통해 CKD-702의 면역원성이 낮음을 확인하였음.

3. GLP 독성 연구
내용 : 용량설정시험
결과 : 용량설정시험에서, CKD-702를 원숭이에 50, 100 mg/kg/dose 용량으로 4주간 주 1회 등속 정맥 투여함. 시험 결과, 투여기간 동안 시험물질에 의한 어떠한 변화도 관찰되지 않음. 따라서, HNSTD는 100 mg/kg/dose로 판단됨.

내용 : 4주 반복투여독성시험
결과 : 원숭이 4주 반복투여독성시험에서, CKD-702를 10, 30, 100 mg/kg/dose 용량으로 4주간 주 1회 등속정맥투여하고, 추가로 4주간 회복기를 두고 관찰 결과, 투여기간동안 CKD-702 투여에 의한 독성은 관찰되지 않았음. 안전성 약리 평가에서도 중추신경계, 심혈관계, 호흡기계에 약물에 의한 영향은 없었음. 따라서, HNSTD는 100 mg/kg/dose로 판단됨.

내용 : ADA분석
결과 : 원숭이 4주 반복투여독성시험에서 항 CKD-702 항체를 측정하였음. 총 22 마리의 동물 중 3마리의 동물에서 항 CKD-702 항체가 측정되었음. 100 mg/kg/dose 투여 암컷 1수, 30 mg/kg/dose 투여군 수컷 1수, 10mg/kg/dose 수컷 1수에서 ADA가 검출되었으며, 모두 전신노출에도 영향이 있었음.
회복기인 Day56에 ADA를 측정했을 때, 100 mg/kg/dose 투여군 2수에서 ADA가 관찰되었음. 전신노출에 영향을 미쳤을 가능성은 있으나, 별도로 노출을 확인하지는 않았음.

내용 : Tissue Cross-Reactivity test
결과 : CKD-702의 조직교차반응을 확인하기 위해 3명의 사람에서 37 가지 장기에 대한 슬라이드가 사용되었고, 평가를 위해 면역화학염색법을 수행하였음. 시험 결과, 반응성이 나타난 조직은 정상적으로 cMET 또는 EGFR이 발현하는 것으로 알려진 조직으로, CKD-702가 예상치 못한 장기에 결합하지 않음을 확인하였음.

4. 공정개발 및 시료 생산
내용 : 임상원료 생산 공정개발 및 원액생산
- DS (1000L 배양기 기준) 2 batch 생산 완료
결과 : 1000L 배양 규모 3배치 원료의약품 제조 완료

내용 : 바이러스 제거능 검증
결과 : 바이러스 제거능 검증 완료

내용 : QC 시험 및 성적서 발행
결과 : DS 3 batch QC시험 완료 및 성적서 발행

내용 : 원액 안정성 시험
결과 : 6개월 이상 장기보존 안정성 확보 및 가속 안정성 (6개월) 자료 확보 완료

5. 특성분석, 기준 및 시험법 개발
내용 : 생물학적 분석 (ADCC 등)
결과 : CKD-702 생물학적 활성 분석 (ADCC 및 CDC) 완료: ADCC 활성 확인되었으나 CDC 활성은 확인되지 않았음.

내용 : 구조 및 물리화학적 특성 분석
결과 : CKD-702 구조 및 물리화학적 특성 항목 10종 (아미노산 조성, 펩티드맵핑, N-/C- 말단서열, 이황화결합, 분자량, 흡광계수, 고차구조, 열역학적 특성 등) 분석 완료

내용 : 기준 및 시험법 확립
- SOP 작성, 분석법 기술 이전
결과 : 원액 및 완제 기시법 확립 완료
- 자사개발 기시법 10종 SOP 작성 및 등록 완료
- 자사개발 기시법 10종 적격성 평가 완료 및 CMO 분석법 기술이전 완료

6. 완제의약품 (DP) 생산
내용 : 임상1상 시험약 사전 안정성 평가용 완제 생산
- DP 2 batch 생산 완료
결과 : 완제 의약품 (DP) 2배치 제조 완료

내용 : Lot release test
결과 : DP 2 batch Lot release 수행

내용 : QC 시험 및 성적서 발행
결과 : DP 2 batch QC 시험 완료 및 성적서 발행

내용 : 안정성 시험 확인
- 장기 5 ± 3℃, 12개월, 가속 25±2℃/상대습도 60±5%, 6개월
결과 : 6개월 이상 장기보존 안정성 확보 및 가속 안정성 (6개월) 자료 확보 완료

7. IND 제출/승인
내용 : 임상 프로토콜 및 IND 자료 작성
결과 : 비임상시험에 관한 자료, 임상시험용의약품 관련 제조 및 품질에 관한 자료, 임상시험에 관련된 자료 작성 완료

내용 : 국내 IND 제출 및 승인
결과 : 한국 식약처에 자료 제출 (‘19.12.13 부)
한국 식약처 임상1상 승인 (‘20.1.30 부)

(출처 : 요약문 5p)

Abstract ▼

Ⅳ. Results
1. Manufacturing and Characterization of MCB (Master Cell Bank)
Contents : MCB Manufacturing and banking
- Preparation of Master Cell Bank (400 vials)
Results : Completion of MCB (400 vials) manufacturing and banking

Contents : MCB Characterization
- Sterility Test,

Ⅳ. Results
1. Manufacturing and Characterization of MCB (Master Cell Bank)
Contents : MCB Manufacturing and banking
- Preparation of Master Cell Bank (400 vials)
Results : Completion of MCB (400 vials) manufacturing and banking

Contents : MCB Characterization
- Sterility Test, Mycoplasma negative test, Virus negative test
Results : Completion of MCB characterization pertaining to sterility test, mycoplasma negative test, virus negative test

2. Pharmacology Study
Contents : in vivo Efficacy evaluation
- Lung cancer HCC827/GR, Gastric cancer MKN45, Lung cancer or GBM U87MG
Results : CKD-702 demonstrated promising anti-tumor efficacy in tumor models with primary activating EGFR mutations and cMET amplification (HCC827/GR and LU0858) as well as in models where cMET is activated in either a ligand-dependent (U87MG) or ligand-independent manner (MKN45 and EBC-1).

Contents : PK/PD Analysis (Lung cancer EBC-1)
Results : Mouse PK/PD modeling was conducted using PK, and PD (cMET/EGFR signaling) data observed in EBC-1 xenograft mice.

Contents : in vitro Efficacy evaluation and Study of Mode-of-Action
- Panel assay, signaling, receptor internalization, migration, immunogenicity
Results : CKD-702 binds to extracellular domains of cMET and EGFR with high affinity. It inhibits signaling via both cMET and EGFR receptors by blocking their ligands binding and by internalizing and degrading both receptors.
CKD-702 showed superior activity in inhibiting cell growth and cMET/EGFR-related signaling molecules compared to EM1 (JNJ-372, JNJ-61186372). The results of in vitro immunogenicity assay confirmed that CKD-702 had low immunogenicity.

3. GLP Toxicity Study
Contents : Dose Range-finding Study
Results : In a dose range finding study in monkeys, CKD-702 was administered once a week for 4 weeks by IV infusion at dose levels of 50, 100 mg/kg/dose. No test article-related changes were observed during the dosing period. Therefore, HNSTD was considered to be 100 mg/kg.

Contents : 4-week Repeated Dose Toxicity Study
Results : In a 4-week repeat dose study in monkeys, CKD-702 was administered once a week for 4weeks by iv infusion at dose levels of 10, 30, 100 mg/kg/dose following a 4-week recovery peroid. There were no test article-related adverse findings by the end of recovery period. In safety pharmacology, CKD-702 did not affect on CNS, cardiovascular or respiratory system. Therefore, HNSTD was considered to be 100 mg/kg/dose.

Contents : ADA Analysis
Results : In a 4-week repeat dose study in monkeys, anti-CKD-702 antibodies were determined. Out of 22 treated animals, three animals were positive. One females at 100 mg/kg was positive for anti-CKD-702 antibodies on Day28 which appeared to impact systemic exposure to CKD-702 on Day22. One male at 10 mg/kg (animal number 2001) and one male at 30 mg/kg (animal number 3001) were positive for anti-CKD-702 antibodies on Day 28 and appeared to impact systemic exposure to CKD-702 on Day 22.
In recovery period, two animals at 100 mg/kg were positive on Day 56. The potential impact of anti-CKD-702 antibodies was not assessed for Day 56.

Contents : Tissue Cross-Reactivity test
Results : Tissue cross reactivity of CKD-702 was determined using thirty-seven normal human tissues, from at least three separate donors, via an indirect immunohistochemistry procedure.
The observed cross-reactivities were considered to be consistent with normal expression of c-Met and/or EGFR. There were no unexpected tissue cross-reactivities by CKD-702 in the tissues examined in this study.

4. Bio-process Development and Sample Production
Contents : Bio-process Development and Production of Drug Substance (DS) for clinical use
- DS (1000L culture scale) 2 batch production
Results : Completion of 3 batches drug substance manufacturing at the 1,000L culture scale.

Contents : Verification of Virus Clearance
Results : Completion of verification of virus clearance

Contents : QC Test, Release of DS/DP and Issue of Certificate-of-Analysis (COA)
Results : Completion of QC test for 3 batches of DS and issue of Certificate-of-Analysis.

Contents : Stability Test of DS
Results : Completion of Long-term stability test for 6 months and accelerated condition stability test

5. Biological analysis and physicochemical characterization
Contents : Biological Property Analysis (ADCC etc.)
Results : Completion of biological property analysis (ADCC and CDC): confirmation for ADCC effect but no CDC effect

Contents : Structural and Physicochemical Property Analysis
Results : Completion of structural and physicochemical property analysis for CKD-702 (amino acid composition, peptide mapping, N-/C- term sequence, disulfide bond, molecular weight, extinction coefficient, higher order structure, thermodynamic property etc.)

Contents : Establishment of Test Procedure and Acceptance Criteria
- Standard Operating Procedure (SOP) Preparation, Analytical Method Transfer
Results : Completion of establishment for test procedure and acceptance criteria for DS and DP
- Registration of 10 kinds of analysis SOPs
- Completion of both qualification and transfer to CMO for 10 kinds of analysis methods

6. Production of Drug Product (DP)
Contents : Production of Drug Product (DP) for Preliminary Stability Test
- DP 2 batch production
Results : Completion of 2 batches of drug product (DP) manufacturing

Contents : Lot release test
Results : Completion of lot release for 2 batches of DP

Contents : QC test and Issue of the COAs
Results : Completion of QC test for 2 batches of DP and release of COAs

Contents : Verification of Stabilities
- Long-term stability 5±3℃, 12 months
- Accelerated condition stability 25±2℃/relative humidity 60±5%, 6 months
Results : Completion of long-term stability test for 6 months and accelerated condition stability test

7. IND Filing / Approval
Contents : Writing the Protocol of Clinical Trial and Documents for IND
Results : Documentation of preclinical animal studies, manufacturing informations, clinical protocols and investigator information

Contents : IND Filing and Approval in Korea
Results : KFDA approval of IND Application to initiate Phase I Clinical Trial (Jan. 30, 2020)

(source : SUMMARY 9p)