초록 ▼

□ 연구개요
○ 동충하초 균사체(Cordyceps sinensis)로 발효한 성숙인삼잎으로부터 면역활성이 우수한 다당을 선택적으로 분리하고, 이에 대한 면역증강 및 항암활성 평가를 진행함. 이후, 활성 다당의 구조를 파악함으로써 발효 인삼잎의 활성-구조 상관관계(activation-structure relationships)를 규명하여 식품 및 바이오의약 소재로써 기초자료를 제공하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
○ 동충하초 균사체로 발효한 인삼잎으로부터 다당을 분리하고, 이에 대한 in vitro 및 i

□ 연구개요
○ 동충하초 균사체(Cordyceps sinensis)로 발효한 성숙인삼잎으로부터 면역활성이 우수한 다당을 선택적으로 분리하고, 이에 대한 면역증강 및 항암활성 평가를 진행함. 이후, 활성 다당의 구조를 파악함으로써 발효 인삼잎의 활성-구조 상관관계(activation-structure relationships)를 규명하여 식품 및 바이오의약 소재로써 기초자료를 제공하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
○ 동충하초 균사체로 발효한 인삼잎으로부터 다당을 분리하고, 이에 대한 in vitro 및 in vivo 상에서 면역활성 및 항전이 활성을 측정하고자 마우스 대식세포를 이용하여 cytokine을 측정하고, NK cell 활성능을 측정한 결과, 단순 인삼잎 열수 추출보다 우수한 활성을 나타내었으며, 항전이 활성에서도 우수한 활성을 나타내는 것으로 확인하였음. 나아가 동충하초 균사체로 발효한 인삼잎으로부터 분리한 다당이 인체에 존재하는 정상세포인 macrophage를 활성화하면 체내에 외부 물질이 침입했을 때 방어해 주는 역할을 하는 chemokine 및 cytokine을 생산한다는 것을 확인하고자, 이에 대한 세포내 신호전달 경로를 확인한 결과, 대식세포 표면에 존재하는 다양한 수용체 (CD14, SR, TLR4, TLR2)를 경유하여 JNK pathway를 거쳐 IL-6, TNF-α 및 NO를 생산한다고 최종 확인하였음. 마지막으로 동충하초 균사체로 발효한 인삼잎 다당의 활성 본체를 규명하기 위해 ion exchange 및 size exclusion chromatography로 정제한 다당을 이용하여 methylation analysis을 분석하였음. 이를 바탕으로 구성당 및 NMR을 분석한 결과 동충하초 균사체로 발효한 인삼잎 다당의 활성 본체는 rhamnogalacturonan-I임을 확인하였고, 이가 발효인 삼잎에서 확인된 면역활성 및 항전이 활성에 기인하는 것으로 최종 확인하였음. 처음 설정한 연구개발 3년에 대한 목표를 모두 달성하였음.

□ 연구개발성과의 활용 계획 및 기대효과(연구개발결과의 중요성)
○ 식품 및 바이오(의약 및 제약) 분야에서 식품소재나 식품 개발은 대부분 약리적 기능만 연구하는데 초점을 두고 있음. 그러나 이에 따른 약리적 기능과 활성 물질 구조의 상관관계 규명이 필수적인 연구로 자리잡고 있음.
○ 본 연구에서는 동충하소 균사체로 발효한 인삼잎을 이용하여 기존에 이미 많이 알려진 인삼잎을 발효함으로써 새로운 접근을 시도하였고, 이에 대한 약리적 기능을 가지는 다당을 선택적으로 분리하였음. 나아가 이와 관련된 면역활성 특성 및 구조 특성을 해명함으로써 경제적 측면에서 기여할 뿐만 아니라 기능성소재 개발의 기초자료로 제공되기에 충분하며 이를 바탕으로 지속적인 연구가 될 수 있는 밑거름이 될 것임.
○ 또한, 본 과제를 통해 도출된 연구결과 (전임상 실험)과 더불어 안전성 평가 및 표준화 연구가 진행된다면 건강기능 식품 소재로 사용하기 충분하다고 판단됨.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 4
• 2.1. 인삼잎 유래 다당의 추출 및 분리 ... 4
• 2.2. 인삼잎 유래 조다당 시료의 일반화학적 특성 ... 4
• 2.3. 인삼잎 유래 조다당 시료의 세포독성 측정 (In vitro) ... 4
• 2.4. 인삼잎 유래 조다당 시료의 macrophage에 대한 cytokine 생산에 미치는 영향 ... 4
• 2.5. 인삼잎 유래 조다당 시료의 NK cell 활성능 측정 (in vivo) ... 5
• 2.6. 발효 인삼잎 유래 조다당 GLF-0의 정맥투여를 통한 항전이 활성 ... 5
• 2.7. NK cell 기능이 제어된 mouse에서의 발효 인삼잎 유래 조다당 GLF-0의 항전이 활성 ... 6
• 2.8. 세포독성 T 림프구에 의한 종양전이주 살해능 측정 ... 6
• 2.9. 발효 인삼잎 유래 조다당 GLF-0의 경구투여에 의한 자연살해세포의 종양살해능 및 항전이 활성 ... 6
• 2.10. 동충하초 균사체 발효 인삼잎 유래 정제다당의 NO 및 cytokine 생산에 미치는 영향 ... 7
• 2.11. 동충하초 균사체 발효 인삼잎 유래 다당에 대한 대식세포의 mRNA gene expression ... 7
• 2.12. 동충하초 균사체 발효 인삼잎 유래 다당에 의한 MAPK 및 NF-κB 활성화 ... 8
• 2.13. Inhibitor를 통한 동충하초 균사체 발효 인삼잎 유래 다당의 cytokine IL-6 및 NO 생산 경로 분석 ... 9
• 2.14. Macrophage receptor-blocking antibodies를 통한 동충하초 균사체 발효 인삼잎 유래 다당의 cytokine IL-6, TNF-α 및 NO 생산 경로 분석 ... 9
• 2.15. GLF2-I의 정제 및 일반화학적 특성 ... 9
• 2.16. Methylation analysis ... 10
• 2.17. NMR 분석 ... 11
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 수준 ... 12
• 1) 정성적 연구개발성과(연구개발결과) ... 12
• 2) 세부 정량적 연구개발성과 ... 12
• 3) 목표 달성 수준 ... 12
• 4) 목표 미달 시 원인 분석 ... 12
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도(연구개발결과의 중요성) ... 13
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 13
• 6. 참고문헌 ... 13
• [붙임1] 세부 정량적 연구개발성과 ... 14
• [붙임2] 연구책임자 대표적 연구실적 및 증빙(요약문 및 사본) ... 16
• 끝페이지 ... 25