[보고서]수지상세포 분화 및 면역유도능에 핵심적으로 작용하는 micro RNA 와 CISH 유전자의 후성유전학적 발현 조절 연구

Sunil Kumar

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[국가R&D연구보고서] 수지상세포 분화 및 면역유도능에 핵심적으로 작용하는 micro RNA 와 CISH 유전자의 후성유전학적 발현 조절 연구
Annual Performance Plan for the Individual Basic Research Support Project, 2018-23; National Research Foundation of Korea 원문보기

보고서 정보
주관연구기관	성균관대학교 SungKyunKwan University
연구책임자	Sunil Kumar
보고서유형	최종보고서
발행국가	대한민국
언어	대한민국
발행년월	2022-08
과제시작연도	2022
주관부처	교육부 Ministry of Education
연구관리전문기관	한국연구재단 National Research Foundation of Korea
등록번호	TRKO202300007699
과제고유번호	1345352012
사업명	개인기초연구(교육부)
DB 구축일자	2023-09-20
키워드	후생유전학적 조절.마이크로 알엔에이.수지상세포 분화발생.수지상세포 면역원성.Epigenetic Regulation.microRNA.CISH.DC Development.DC Immunogenicity.

초록 ▼

□ 연구개발 목표 및 내용
○ 최종 목표
현재 수지상세포 분화발생 및 면역유도능에 대한 분자생물학적 후성유전학적 조절 기전은 잘 알려지지 않음. 수지상세포를 이용한 면역세포치료제의 의학적 수요를 충족시키기 위해, 수지상세포 백신은 수지상세포의 분화발생 단계에서의 유전자 발현 조절을 통한 효능개선이 절대적으로 필요함. 이 과제의 목표는 수지상세포의 분화 및 면역유도능을 조절하는 microRNAs와 Cytokine Inducible SH2-domain Protein (CISH)유전자 및 관련 유전자들의 분자생물학적 및 후생유전학적 발현조절 기전을 규명하는 것임. 이 연구를 통해 줄기세포에서 수지상세포로의 분화발생 기전 및 면역유도능에 대한 이해를 증진하고, 나아가서 수지상세포 백신의 효능개선을 위한 새로운 표적분자를 발굴할 수 있을 것으로 기대함.

(출처 : 요약문 2p)

Abstract ▼

□ 연구개발 목표 및 내용
○ 전체 내용
1st year: Identification of miRNAs and genes of interest in association with CISH expression during DC development.

2nd year: Characterization of these miRNAs and genes of interest in association with CISH expression and DC development.

3rd year: Study on the epigenetic and molecular mechanisms involved in the expression of selected miRNAs and CISH during DC development.

4th year: Study on the epigenetic regulation mechanisms underlying the miRNA-mediated CISH expression during DC development and immunogenicity.

5th year: Tumor progression and DC immunotherapy in CISHcKO mice & miRNAKO mice.

□ 연구개발성과
We identified CISH as an important intracellular immune checkpoint that can be targeted to control DC-mediated immune response associated with Th2-disorders. Under this project; I published 5-review articles and 1-book chapter. In addition, this work was presented in 3-international conferences and delivered 3-lectures as an invited speaker.

□ 연구개발성과 활용계획 및 기대 효과
1. Offer insight on epigenetic regulation mechanism underlying DC development.
2. Provide molecular targets usable for improvement of DC vaccine and immunotherapy
3. Shed light on the medical unmet need for CISH deficient patients who are highly susceptible to infectious diseases and tumor.

(source : 요약문 2p)

목차 Contents

COVER ... 1
요 약 문 ... 2
목차 ... 3
1. 연구개발과제의 개요 ... 4
2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 4
3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 정도 ... 5
1) 연구수행 결과 ... 7
4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도 ... 14
5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 14
6. 참고문헌 ... 14
End of Page ... 16

표/그림 (7)

표 DNCB-induced Atopic Dermatitis is more severe in CD11c-cre x CISHfl/fl mice. (A) Study design. Representative mouse image with stastical disease score after DNCB-treatment (N=10). (B) Histopathological (H Filaggrin, Locracin, Histamine (H3) and IL-31expression after DNCB treatment. (D) Serum IgE and IgG1 level in CISHWT and CISHcKO mice after DNCB treatment
표 CISH expression in dermal dendritic cell subsets. (A) Gating strategy: Identification of DC subset (migratory and resident) in CISHWT and CISHcKO mice after DNCB treatment. (B) Different DC-subsets namely; migDC, LC, cDC1, cDC2 and TN population after DNCB treatment in CISHWT and CISHcKO mice
표 CISHcKO mice showed enhanced Th2-skewed inflammation in DNCB-treated mice. (A) Serum ELISA of Th2-associated cytokines. (B) Serum ELISA of Th1-associated cytokines. (C) qRT-PCR of Th2-associated cytokine in skin DCs. (D) qRT-PCR of Th1-associated cytokine in skin DCs. (E) Serum ELISA of IgG1 and IgE level in CISHcKO and CISHWT mice. Supplementary figure: (A) Immunohistochemistry (IHC) of Th2-associated cytokine in skin. (B) Immunohistochemistry (IHC) of Th1-associated cytokine in skin
표 CISH deficiency enhances DC-mediated Th2-cell proliferation. (A) T-cell proliferation after in-vitro co-culture of BMDCs with splenic OT-II T-cells. (B) Activated T-cells showing increased CD4+T-cells polarization as compared to CD8+T-cells after DNCB treatment. (C) Foxp3 quantification in CISHWT and CISHcKO mice after DNCB treatment
표 Mechanism of CISH-mediated regulation of Th2-cytokines in AD. (A) IL-6 expression in CISHWT and CISHcKO mice after DNCB treatment. (B) IL-4 expression in CISHWT and CISHcKO with and without DNCB treatment. IL-6 expression in CD4+/CD8+ T-cells after DNCB treatment in CISHWT and CISHcKO mice. (C) IL-10 and IL-13 expression level wild-type mice under steady state and after DNCB treatment. (D) AD severity with proportional IL-6 elevation
표 CISH overexpressing DCs control DNCB-induced AD. (A) CISH overexpression in BMDCs (Western-blot). (B) CISH overexpression in BMDCs (RT-PCR and qRT-PCR). (C) Mouse image and representative stastical analysis showing the control of disease after AT of CISH overexpressing DCs
표 Therapeutic effects of CISH epigenetic inhibitor on the treatment of DNCB-AD. (A) CISH overexpression in BMDCs (Western-blot). (B) CISH overexpression in BMDCs (RT-PCR, qRT-PCR and FACS). (C) Representative stastical analysis showing the control of disease after AT and topical application of CISH overexpressing DCs and TSA. (D) Histopathological examination showing rescue of epidermal barrier after treatment of epigenetic inhibitor by inducing CISH level

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