<국문초록> 지황(Rehmannia glutinosa)은 현삼과(Scrophulariaceae)에 속하는 다년생 초목으로 그 뿌리를 약재로 이용하고 있다. 한방서적에 의하면 생지황은 신장 및 간기능의 기능을 도와주며, 피를 맑게 하며 염증 제거 등에 효과가 있다고 하였다. 본 연구에서는 생지황(뿌리)의 기능성을 탐색하기 위해 생지황( Ethanol, 70% Ethanol, Methanol, ...
<국문초록> 지황(Rehmannia glutinosa)은 현삼과(Scrophulariaceae)에 속하는 다년생 초목으로 그 뿌리를 약재로 이용하고 있다. 한방서적에 의하면 생지황은 신장 및 간기능의 기능을 도와주며, 피를 맑게 하며 염증 제거 등에 효과가 있다고 하였다. 본 연구에서는 생지황(뿌리)의 기능성을 탐색하기 위해 생지황( Ethanol, 70% Ethanol, Methanol, 동결건조 지황 Methanol, 열수) 추출물 그리고 추출물의 용매 분획물을 이용하여 항산화 활성, 항미생물 활성, ADH(Alcohol dehydrogenase) enzyme activity 활성, macrophage인 RAW264.74 cell line에서의 NO생성 억제능의 영향을 분석하였다. 그 결과, 생지황 Ethanol 추출물에서 가장 좋은 항산화 활성을 보였으며, 이때 Alcohol dehydrogenase(ADH)에 저해 활성은 45.56% 였다. 이 Ethanol 추출물을 다시 Hexane, CHCl3, EtOAc, BuOH, Water으로 용매 분획하여 항산화 활성, ADH 저해 활성, Cell viability 및 NO 생성 억제능을 검정한 결과 EtOAc 분획 층에서 가장 높은 항산화 활성을 보였고, 이때의 SC50 값은 54 ㎍/mL였다. BuOH 분획층에서는 높은 ADH 저해 활성(30.37%)이 보였고, Hexane, EtOAc 분획층에서 NO 생성 억제능이 관찰되었다. 이는 국소적인 만성 염증 작용에 의한 과다한 NO 생성을 억제하여 생지황의 뿌리 EtOH 추출물이 항염증 작용 있는 것으로 사료된다. 또한, EtOAc 분획층에서 강한 항산화 활성을 보여 항산화 본체를 알아 보기 위해 이 분획층을 silica gel adsorption column chromatography, HPLC을 이용하여 항산화 활성 물질을 분리. 단리하였고, 기기분석을 통한 구조규명을 하였다. compound 1은 1H, 13C-NMR, LC-ESI-MS 분석한 결과 cinnamic acid 골격에 gallic acid가 결합한 화합물인 1-galloyl-2-(8-hydroxyethene)-5-methoxyl benzene으로 SC50 값 17.25 ㎍/mL 였으며 생지황 1 g에 0.12 mg이 함유되어 있는 것으로 확인되었다. compound 2 또한, 기기분석 통한 구조 규명을 한 결과 주로 식물체에 존재하는 것으로 높은 항산화 활성을 가지고 있는 acteoside임 밝혀졌다. 이때 acteoside의 SC50 값 5.90 ㎍/mL이었고 생지황 1 g에 2.94 mg이 함유되어 있는 것으로 확인되었다. 마주송이풀과 밀몽화 봉우리에서의 acteoside 의 함량은 0.01~0.07%의 수준으로 함유되어 있는 것으로 보고 되고 있는 반면에 생지황 뿌리에 0.29%의 대단히 많은 량의 acteoside가 함유되어 있음을 확인되어 기능성 소재개발 가능성이 대단히 높은 것으로 판단되었다.
<국문초록> 지황(Rehmannia glutinosa)은 현삼과(Scrophulariaceae)에 속하는 다년생 초목으로 그 뿌리를 약재로 이용하고 있다. 한방서적에 의하면 생지황은 신장 및 간기능의 기능을 도와주며, 피를 맑게 하며 염증 제거 등에 효과가 있다고 하였다. 본 연구에서는 생지황(뿌리)의 기능성을 탐색하기 위해 생지황( Ethanol, 70% Ethanol, Methanol, 동결건조 지황 Methanol, 열수) 추출물 그리고 추출물의 용매 분획물을 이용하여 항산화 활성, 항미생물 활성, ADH(Alcohol dehydrogenase) enzyme activity 활성, macrophage인 RAW264.74 cell line에서의 NO생성 억제능의 영향을 분석하였다. 그 결과, 생지황 Ethanol 추출물에서 가장 좋은 항산화 활성을 보였으며, 이때 Alcohol dehydrogenase(ADH)에 저해 활성은 45.56% 였다. 이 Ethanol 추출물을 다시 Hexane, CHCl3, EtOAc, BuOH, Water으로 용매 분획하여 항산화 활성, ADH 저해 활성, Cell viability 및 NO 생성 억제능을 검정한 결과 EtOAc 분획 층에서 가장 높은 항산화 활성을 보였고, 이때의 SC50 값은 54 ㎍/mL였다. BuOH 분획층에서는 높은 ADH 저해 활성(30.37%)이 보였고, Hexane, EtOAc 분획층에서 NO 생성 억제능이 관찰되었다. 이는 국소적인 만성 염증 작용에 의한 과다한 NO 생성을 억제하여 생지황의 뿌리 EtOH 추출물이 항염증 작용 있는 것으로 사료된다. 또한, EtOAc 분획층에서 강한 항산화 활성을 보여 항산화 본체를 알아 보기 위해 이 분획층을 silica gel adsorption column chromatography, HPLC을 이용하여 항산화 활성 물질을 분리. 단리하였고, 기기분석을 통한 구조규명을 하였다. compound 1은 1H, 13C-NMR, LC-ESI-MS 분석한 결과 cinnamic acid 골격에 gallic acid가 결합한 화합물인 1-galloyl-2-(8-hydroxyethene)-5-methoxyl benzene으로 SC50 값 17.25 ㎍/mL 였으며 생지황 1 g에 0.12 mg이 함유되어 있는 것으로 확인되었다. compound 2 또한, 기기분석 통한 구조 규명을 한 결과 주로 식물체에 존재하는 것으로 높은 항산화 활성을 가지고 있는 acteoside임 밝혀졌다. 이때 acteoside의 SC50 값 5.90 ㎍/mL이었고 생지황 1 g에 2.94 mg이 함유되어 있는 것으로 확인되었다. 마주송이풀과 밀몽화 봉우리에서의 acteoside 의 함량은 0.01~0.07%의 수준으로 함유되어 있는 것으로 보고 되고 있는 반면에 생지황 뿌리에 0.29%의 대단히 많은 량의 acteoside가 함유되어 있음을 확인되어 기능성 소재개발 가능성이 대단히 높은 것으로 판단되었다.
Traditionally, Rehmannia glutinosa have been widely used as a folk medicine for the cure of coelenteron, detoxification, and hematosis. In recent years, many studies on functional properties of a major bioactive compound of Rehmannia glutinosa, has been reported. In this study, functional propertie...
Traditionally, Rehmannia glutinosa have been widely used as a folk medicine for the cure of coelenteron, detoxification, and hematosis. In recent years, many studies on functional properties of a major bioactive compound of Rehmannia glutinosa, has been reported. In this study, functional properties of various extracts of raw Rehmannia glutinosa roots were investigated in terms of antioxidant and alcohol dehydrogenase (ADH) inhibition activities. In various root extracts, DPPH free radical scavenging activity was observed in all extracts, especially the ethanol extract showed highest radical-scavenging activity and strong ADH inhibition activity was also found in the ethanol extracts. The ethanol extracts were dissolved with water and fractionated with n-hexane, CHCl3, EtOAc and BuOH. Ethyl acetate fraction showed strong radical-scavenging activity and hexane fractions of the ethanol extract showing antioxidant activity inhibited nitrite oxide production in RAW 264.7 cell line, while cell viability increased by butanol and water fraction. The inhibitory activity of ADH was observed in butanol fraction. Among the various extracts of Rehmannia glutinosa roots using 5 solvents, ethanol extract showed relatively high antioxidative activity and desirable extraction yield. The extract was dissolved in water and sequentially fractionated with n-hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and the highest radical scavenging activity was found in ethyl acetate fraction. The fraction was further fractionated through silica gel adsorption column chromatography, and high performance liquid chromatography(HPLC) to purify antioxidant-active substances. Chemical structures of the purified sub stances(compound 1 and 2) were determined by electron-impact ionization mass spectrometry (EI-MS) and nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. These substances were identified as compound 1 and acteoside. The SC50 values of the compound 1(1-galloyl-2-(8-hydroxyethene)-5-methoxyl benzene) and compound 2(acteoside) were 17.25 ㎍/mL and 5.90 ㎍/mL, and their contents in Rehmannia glutinosa roots were 0.12 ㎎/g and 2.94 ㎎/g fresh weight, respectively.
Traditionally, Rehmannia glutinosa have been widely used as a folk medicine for the cure of coelenteron, detoxification, and hematosis. In recent years, many studies on functional properties of a major bioactive compound of Rehmannia glutinosa, has been reported. In this study, functional properties of various extracts of raw Rehmannia glutinosa roots were investigated in terms of antioxidant and alcohol dehydrogenase (ADH) inhibition activities. In various root extracts, DPPH free radical scavenging activity was observed in all extracts, especially the ethanol extract showed highest radical-scavenging activity and strong ADH inhibition activity was also found in the ethanol extracts. The ethanol extracts were dissolved with water and fractionated with n-hexane, CHCl3, EtOAc and BuOH. Ethyl acetate fraction showed strong radical-scavenging activity and hexane fractions of the ethanol extract showing antioxidant activity inhibited nitrite oxide production in RAW 264.7 cell line, while cell viability increased by butanol and water fraction. The inhibitory activity of ADH was observed in butanol fraction. Among the various extracts of Rehmannia glutinosa roots using 5 solvents, ethanol extract showed relatively high antioxidative activity and desirable extraction yield. The extract was dissolved in water and sequentially fractionated with n-hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and the highest radical scavenging activity was found in ethyl acetate fraction. The fraction was further fractionated through silica gel adsorption column chromatography, and high performance liquid chromatography(HPLC) to purify antioxidant-active substances. Chemical structures of the purified sub stances(compound 1 and 2) were determined by electron-impact ionization mass spectrometry (EI-MS) and nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. These substances were identified as compound 1 and acteoside. The SC50 values of the compound 1(1-galloyl-2-(8-hydroxyethene)-5-methoxyl benzene) and compound 2(acteoside) were 17.25 ㎍/mL and 5.90 ㎍/mL, and their contents in Rehmannia glutinosa roots were 0.12 ㎎/g and 2.94 ㎎/g fresh weight, respectively.
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