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문제 정의
- 따라서 본 연구에서는 품종별 지황의 주요성분인 catalpol 함량 및 항산화 특성을 비교하여, 농가에 고품질의 지황품종을 보급하고 이를 활용하여 기능성식품 및 의약품으로의 개발하기 위한 기초자료로 제공하고자 한다.
제안 방법
- 45 μm)로 여과하여 기기분석에 사용하였다. 본 실험의 실험방법에 의한 catalpol 함량 분석은 HPLC(Waters, Milford, MA, USA)를 사용하였다. 이동상 조건은 1% acetonitrile, 유속은 1 min/mL로 하고, HPLC column은 Agilent TC-C18(Analytical, 4.
- 반응이 끝난 후 2% TCA용액과 1% TBA용액을 잘 섞은 후 100℃에서 20분간 반응한 후 냉각하여 원심분리 하였다. 상징액을 분광광도계를 이용하여 532 nm에서 흡광도를 측정하였으며 라디칼 소거능(%)을 계산한 후 각 농도별 라디칼 소거능에 대한 검량선에서 라디칼 소거능이 50%가 되는 농도인 IC50을 구하였다.
- 지황의 수분함량을 측정하기 위해 각각의 시료를 일정량 취하여(3 g 이하) 적외선 수분 측정기(Sartorius, Gottingen, Germany)를 사용하여 측정하였다. 시료는 3회 반복 측정하여 그 평균값을 구하였다.
- 시료용액 50 μL에 1.5×10-4 mM DPPH(D9132, Sigma, St. Louis, MO, USA)용액 150 μL을 첨가하여 30분 반응 후에 분광광도계를 이용하여 515 nm에서 흡광도를 측정하였으며 라디칼 소거능(%)을 계산한 후 각 농도별 라디칼 소거능에 대한 검량선에서 라디칼 소거능이 50%가 되는 농도인 IC50을 구하였다.
- 지황의 수분함량을 측정하기 위해 각각의 시료를 일정량 취하여(3 g 이하) 적외선 수분 측정기(Sartorius, Gottingen, Germany)를 사용하여 측정하였다. 시료는 3회 반복 측정하여 그 평균값을 구하였다.
- 지황의 지표성분으로 알려진 catalpol의 함량을 측정하기 위해 HPLC를 이용하여 분석하였다. 고강, 수원10호, 수원11호, 지황1호, 고려 생지황의 catalpol 함량은 Table 2에 나타내었다.
대상 데이터
- Sample injection volume은 10 μL이며, 검출기는 UV detector를 사용하였고, 분석파장은 206 nm로 하여 측정하였다.
- 본 실험에서 사용한 생지황은 5가지 품종으로 고강, 수원 10호, 수원11호, 지황1호는 금산군 농업기술센터 특화작목에서 시험 재배한 품종이며, 고려지황은 금산군 남이면 농가에서 재배한 GAP지황을 사용하였다. 표준품 catalpol은 Chromadex Inc.
- 2에 나타내었다. 본 실험에서 사용한 시료는 1 mg/g, 2 mg/g, 4 mg/g, 20 mg/g, 40 mg/g의 각각 농도에서 농도에 의존적으로 free radical 소거활성이 인정되었다. 품종별 지황의 DPPH radical 소거능의 IC50(라디칼을 50% 소거시키는데 필요한 농도)값을 wet basis로 산출한 결과 고강 240.
데이터처리
- 실험 결과는 SPSS(Statistical Package for Social Sciences, SPSS Inc., Chicago, IL, USA) software package 프로그램 중에서 분산분석(ANOVA)을 실시하여 유의성이 있는 경우에 Duncan의 다중범위검정(Duncan's multiple range test)으로 시료간의 유의차를 검증하였다(p<0.05).
이론/모형
- Catalpol 함량 분석은 Zhu 등(10)의 연구 방법에 의하여 최적의 조건을 설정하였다. 잘게 썬 생지황을 동결건조 하여 분말화한 후 2 g을 취하여 30% 메탄올 100 mL을 넣고, 잘 혼합한 후 2시간 동안 초음파진탕 추출하였다.
- DPPH(2,2-diphenyl-1-picryl hydrazyl) radical 소거능은 Blois의 방법에 의하여 측정하였다(12). 건조 시료 1.
- Hydroxyl radical 소거능은 Weicheng과 Wang의 방법에 의하여 측정하였다(13). 각각의 건조 시료 1.
- 페놀성 물질이 phosphmolybic acid와 청색을 나타내는 현상을 이용한 방법으로 Foline-Denis법의 방법을 사용하여 분석하였다(11). 각각의 건조 시료 1.
성능/효과
- 1에 나타내었다. 고강, 수원10호, 수원11호, 지황1호, 고려의 총 phenol 함량은 각각 0.446, 0364, 0.358, 0.440, 0.459 mg/g(wet basis)으로 고려지황의 총 phenol 함량이 가장 높았다. 침지용매에 따른 숙지황의 품질특성 연구에서는 건지황과 시판 숙지황의 폴리페놀 함량은 5.
- 고강, 수원10호, 수원11호, 지황1호, 고려지황을 동결건조 한 시료의 catalpol 함량은 각각 491.6, 370.5, 389.0, 409.6, 579.5mg/g(dry base), 수분함량을 고려한 생지황의 경우에는 108.2, 94.2, 85.2, 85.6, 144.9mg/g(wet base)으로, 고려지황의 catalpol 함량이 가장 높았다(p<0.05).
- 각각의 시료는 1 mg/g, 2 mg/g, 4 mg/g에서 농도에 의존적으로 강한 항산화 활성이 있는 것으로 사료된다. 또한 고강, 수원10호, 수원11호, 지황1호, 고려의 hydroxyl radical IC50값을 wet basis로 산출한 결과 각각 46.7, 67.4, 63.5, 44.8, 38.8 mg/g이었으며, 고려지황의 IC50 값이 가장 낮아 hydroxyl radical 소거능이 가장 높게 나타났다. 식물체는 사용부위에 따라 전자공여능의 차이를 나타내며, 품종에 따라 차이를 보인다.
- 품종별 지황의 수분함량은 Table 1에 나타내었다. 본 실험에서 사용한 생지황의 구입당시의 수분함량은 고강, 수원 10호, 수원11호, 지황1호, 고려는 각각 77.6, 77.4, 78.4, 75.8, 78.1%이었으며, 동결건조 후 각각의 시료의 수분함량은 4.2, 2.6, 2.0, 4.0, 3.8%를 나타내었다(p＜0.05). 지황1호를 이용한 숙지황 제조기술 연구에서 지황1호의 수분함량은 76.
- 03 μg/mL라 하였다. 본 연구결과와 비교 시 지황의 항산화성이 우수한 것으로 사료된다.
- 01)로 매우 높은 음의 상관관계를 나타내었다. 이는 본 연구결과와 마찬가지고 품종별 지황의 유효성분인 catalpol 함량 및 총 phenol 함량이 많을수록 항산화 활성이 우수한 것을 알 수 있다.
- 지황의 catalpol 함량과 항산화 활성(IC50) 간의 상관계수는 각각 1.000, -0.918(p<0.05)로 음의 상관관계를 보였으며, 총 페놀함량과 항산화 활성(IC50) 간의 상관계수는 1.000, -0.978(p<0.01)로 매우 높은 음의 상관관계를 나타내었다.
- 본 실험에서 사용한 시료는 1 mg/g, 2 mg/g, 4 mg/g, 20 mg/g, 40 mg/g의 각각 농도에서 농도에 의존적으로 free radical 소거활성이 인정되었다. 품종별 지황의 DPPH radical 소거능의 IC50(라디칼을 50% 소거시키는데 필요한 농도)값을 wet basis로 산출한 결과 고강 240.6 mg/g, 수원10호는 270.2 mg/g, 수원10호는 355.7 mg/g, 지황1호는 245.3 mg/g, 고려는 205.8 mg/g으로 고려지황의 IC50이 가장 낮아 항산화능이 가장 높게 나타났다. Lee 등(23)의 시판 한약재에 대한 항산화 활성 검정의 연구에서 값은 696.
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