비파(Eriobotrya japonica Lindl.)의 산업적 이용을 위한 기초자료를 마련하고자 비파엽(枇杷葉)과 비파인(枇杷仁)의 구체적인 생리활성 탐색과 활성물질을 분리하였다. 비파 잎과 종자의 건조 조건과 추출용매별 항산화 활성의 차이를 비교한 결과, 비파 잎 추출물에서는 생잎의 80% ...
비파(Eriobotrya japonica Lindl.)의 산업적 이용을 위한 기초자료를 마련하고자 비파엽(枇杷葉)과 비파인(枇杷仁)의 구체적인 생리활성 탐색과 활성물질을 분리하였다. 비파 잎과 종자의 건조 조건과 추출용매별 항산화 활성의 차이를 비교한 결과, 비파 잎 추출물에서는 생잎의 80% ethanol 추출물(RLE), 종자 추출물 중에는 동결건조한 종자의 80% ethanol 추출물(FSE)이 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical과 nitric oxide 소거능에서 활성이 가장 뛰어났으며, phenolic compound와 flavonoid 함량에서도 가장 높았다. 항균활성에서도 잎 추출물의 경우 RLE가 시험에 사용된 모든 균주에 대한 높은 항균활성을 보였으며, 종자 추출물에서는 FSE와 건조하지 않은 종자의 80% ethanol 추출물(RSE)의 항균활성이 높게 나타났다. 특히 항생제에 내성을 지닌 MRSA(methicillin resistance Staphylococcus aureus)균주에 대한 항균활성이 높은 수준을 보여 주었다는 것은 주목할 만한 결과였다. 또한 broth dilution assay를 활용한 MIC(minimal inhibitory concentration)측정에서 RLE의 경우, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Staphylococcus epidermidis 균주에 대해 0.025% 정도의 농도에서 생육저해를 보임으로써 천연항균제로서의 개발가능성이 확인되었다. Raw 264.7 세포주에 대한 세포생존율 측정에서 잎과 종자 추출물 모두에서 전반적으로 양호한 생존율을 보임으로써 세포독성은 우려할 만한 수준이 아님을 알 수 있었다. 항암활성에서 위암세포인 AGS(human gastric adenocarcinoma, CRL-1739)에 대하여 대부분의 잎 추출물들이 일정수준의 활성을 보였으나 자궁경부암 세포인 HeLa(Uteri cervix cancer cell)에 대해서는 생잎의 열수추출물(RLW)과 가열건조잎의 열수추출물(DLW)만이 약한 활성을 보였다. 종자 추출물의 경우, AGS에 대해서는 RSE, 건조하지 않은 종자의 열수추출물(RSW) 그리고 FSE가 높은 활성을 보였고, HeLa에 대해서는 FSE와 RSE의 활성이 확인되었다. 비파 잎과 종자의 추출물에서 각각 RLE와 FSE가 전반적으로 높은 활성을 나타냄에 따라, 각 추출물들을 극성차이를 이용한 용매별 분획을 실시하여 활성물질의 분리를 실시하였다. RLE의 분획에서 phenolic compound와 flavonoid 함량은 각각 butanol과 ethylacetate 분획물에서 429.7㎎/g과 246.2㎎/g으로, FSE의 분획에서는 phenolic compound와 flavonoid 함량 모두가 ethylacetate 분획물에서 441.6㎎/g과 284.1㎎/g으로 가장 높게 나타났다. DPPH radical 소거능은 RLE butanol 분획물의 SC50(DPPH radical을 50% 소거하는데 필요한 시료의 농도)이 0.15㎎/㎖로 나타나 대조군인 ascorbic acid에 대한 비교활성에서 229.73%에 이르는 높은 항산화활성을 보였다. FSE의 ethylacetate 분획물도 0.33㎎/㎖로 대조군과의 비교활성에서 103.03%의 항산화활성을 보였다. RLE와 FSE의 분획에 대한 항균활성에서 두 추출물 모두 ethylacetate 분획물의 활성이 높음을 알 수 있었다. Raw 264.7 세포주에 대한 세포생존율 측정에서 RLE, FSE의 분획물 모두에서 전반적으로 양호한 생존율을 보였으나, 특정 농도에서 chloroform 분획물의 독성이 높은 수준으로 나타났다. 각각의 분획물에 대한 항암활성에서 RLE와 FSE의 분획 중 butanol 분획물의 활성이 AGS와 HeLa 모두에서 높게 나타났다. Column chromatography에 의해 RLE-BuOH, FSE-BuOH, FSE-EtOAc 분획물에서 분리된 sub-fraction의 항산화활성에서 FSE-E1이 가장 뛰어난 활성을 보였다. Phenolic compound와 flavonoid 함량에서도 FSE-E1에서 각각 570.0㎎/g과 465.5㎎/g으로 가장 높은 함량을 나타냈다. 또한 MRSA에 대한 항균활성에서 FSE-E1의 활성이 가장 높게 나타났다. 그러나 Staphylococcus aureus에 대한 항균활성은 모든 sub-fraction에서 전혀 나타나지 않음으로써 균주에 따라서는 단일물질 또는 단일물질군만으로 충분한 항균활성을 나태내지 못할 수도 있음을 알 수 있었다. AGS에 대한 항암활성에서 RLE-B2가 1㎎/㎖ 농도에서 69.80%의 저해율을 보임으로써 높은 항암활성을 보였고, HeLa에 대한 항암활성에서는 1㎎/㎖ 농도에서 35.18%의 저해율로 FSE-B4의 활성이 상대적으로 높게 나타났다. 또한 RLE-B2와 FSE-B4 sub-fraction의 Raw 264.7에 대해 100% 전후의 세포생존율을 보임으로써 정상세포에 대한 독성없이 암세포만의 생장을 선택적으로 저해하는 것으로 나타났다.
비파(Eriobotrya japonica Lindl.)의 산업적 이용을 위한 기초자료를 마련하고자 비파엽(枇杷葉)과 비파인(枇杷仁)의 구체적인 생리활성 탐색과 활성물질을 분리하였다. 비파 잎과 종자의 건조 조건과 추출용매별 항산화 활성의 차이를 비교한 결과, 비파 잎 추출물에서는 생잎의 80% ethanol 추출물(RLE), 종자 추출물 중에는 동결건조한 종자의 80% ethanol 추출물(FSE)이 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical과 nitric oxide 소거능에서 활성이 가장 뛰어났으며, phenolic compound와 flavonoid 함량에서도 가장 높았다. 항균활성에서도 잎 추출물의 경우 RLE가 시험에 사용된 모든 균주에 대한 높은 항균활성을 보였으며, 종자 추출물에서는 FSE와 건조하지 않은 종자의 80% ethanol 추출물(RSE)의 항균활성이 높게 나타났다. 특히 항생제에 내성을 지닌 MRSA(methicillin resistance Staphylococcus aureus)균주에 대한 항균활성이 높은 수준을 보여 주었다는 것은 주목할 만한 결과였다. 또한 broth dilution assay를 활용한 MIC(minimal inhibitory concentration)측정에서 RLE의 경우, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Staphylococcus epidermidis 균주에 대해 0.025% 정도의 농도에서 생육저해를 보임으로써 천연항균제로서의 개발가능성이 확인되었다. Raw 264.7 세포주에 대한 세포생존율 측정에서 잎과 종자 추출물 모두에서 전반적으로 양호한 생존율을 보임으로써 세포독성은 우려할 만한 수준이 아님을 알 수 있었다. 항암활성에서 위암세포인 AGS(human gastric adenocarcinoma, CRL-1739)에 대하여 대부분의 잎 추출물들이 일정수준의 활성을 보였으나 자궁경부암 세포인 HeLa(Uteri cervix cancer cell)에 대해서는 생잎의 열수추출물(RLW)과 가열건조잎의 열수추출물(DLW)만이 약한 활성을 보였다. 종자 추출물의 경우, AGS에 대해서는 RSE, 건조하지 않은 종자의 열수추출물(RSW) 그리고 FSE가 높은 활성을 보였고, HeLa에 대해서는 FSE와 RSE의 활성이 확인되었다. 비파 잎과 종자의 추출물에서 각각 RLE와 FSE가 전반적으로 높은 활성을 나타냄에 따라, 각 추출물들을 극성차이를 이용한 용매별 분획을 실시하여 활성물질의 분리를 실시하였다. RLE의 분획에서 phenolic compound와 flavonoid 함량은 각각 butanol과 ethylacetate 분획물에서 429.7㎎/g과 246.2㎎/g으로, FSE의 분획에서는 phenolic compound와 flavonoid 함량 모두가 ethylacetate 분획물에서 441.6㎎/g과 284.1㎎/g으로 가장 높게 나타났다. DPPH radical 소거능은 RLE butanol 분획물의 SC50(DPPH radical을 50% 소거하는데 필요한 시료의 농도)이 0.15㎎/㎖로 나타나 대조군인 ascorbic acid에 대한 비교활성에서 229.73%에 이르는 높은 항산화활성을 보였다. FSE의 ethylacetate 분획물도 0.33㎎/㎖로 대조군과의 비교활성에서 103.03%의 항산화활성을 보였다. RLE와 FSE의 분획에 대한 항균활성에서 두 추출물 모두 ethylacetate 분획물의 활성이 높음을 알 수 있었다. Raw 264.7 세포주에 대한 세포생존율 측정에서 RLE, FSE의 분획물 모두에서 전반적으로 양호한 생존율을 보였으나, 특정 농도에서 chloroform 분획물의 독성이 높은 수준으로 나타났다. 각각의 분획물에 대한 항암활성에서 RLE와 FSE의 분획 중 butanol 분획물의 활성이 AGS와 HeLa 모두에서 높게 나타났다. Column chromatography에 의해 RLE-BuOH, FSE-BuOH, FSE-EtOAc 분획물에서 분리된 sub-fraction의 항산화활성에서 FSE-E1이 가장 뛰어난 활성을 보였다. Phenolic compound와 flavonoid 함량에서도 FSE-E1에서 각각 570.0㎎/g과 465.5㎎/g으로 가장 높은 함량을 나타냈다. 또한 MRSA에 대한 항균활성에서 FSE-E1의 활성이 가장 높게 나타났다. 그러나 Staphylococcus aureus에 대한 항균활성은 모든 sub-fraction에서 전혀 나타나지 않음으로써 균주에 따라서는 단일물질 또는 단일물질군만으로 충분한 항균활성을 나태내지 못할 수도 있음을 알 수 있었다. AGS에 대한 항암활성에서 RLE-B2가 1㎎/㎖ 농도에서 69.80%의 저해율을 보임으로써 높은 항암활성을 보였고, HeLa에 대한 항암활성에서는 1㎎/㎖ 농도에서 35.18%의 저해율로 FSE-B4의 활성이 상대적으로 높게 나타났다. 또한 RLE-B2와 FSE-B4 sub-fraction의 Raw 264.7에 대해 100% 전후의 세포생존율을 보임으로써 정상세포에 대한 독성없이 암세포만의 생장을 선택적으로 저해하는 것으로 나타났다.
In recent years, cultivation of Eriobotrya japonica L.(loquat) is on the increase around a southern area in Korea. For the purpose of make a basic materials for practical use of Eriobotrya japonica as medicinal or functional materials, the study was carried out an investigation of concrete physiolog...
In recent years, cultivation of Eriobotrya japonica L.(loquat) is on the increase around a southern area in Korea. For the purpose of make a basic materials for practical use of Eriobotrya japonica as medicinal or functional materials, the study was carried out an investigation of concrete physiological activities and an isolation of activated component from leaf and seed of Eriobotrya japonica. In the test for an investigation into a difference of activity according to the condition such as drying method and extract solvent, an 80% ethanol extract of raw leaf(RLE) from leaf was showed the highest ability in antioxidative activity including determination of total phenolic compound and flavonoid content, DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical and nitric oxide scavenging ability. In extract of seed part, an 80% ethanol extract of lyophilized seed(FSE) was exhibited more high antioxidative effects than other extract of seed. In antimicrobial activity by the disc diffusion assay and the broth dilution assay, RLE was showed high antimicrobial activity against all strains. In extract of seed part, FSE and 80% ethanol extract of raw seed(RSE) were exhibited more high activities than other extract of seed. Particularly, it's a significant result that the extracts were showed activity of high level against MRSA(methicillin resistance Staphylococcus aureus). Moreover, in MIC(minimal inhibitory concentration) measurement by the broth dilution assay, RLE was exhibited growth inhibition at concentration of around 0.025% against Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis, and Staphylococcus epidermidis. And the viability of Raw 264.7 cell as cytotoxicity was measured by MTT (3-[4,5-dimethyl-2-thiazolyl]-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) assay in each extracts. Cytotoxicity of extracts were not significant because all extracts were showed fine viabilities. In anticancer activity test, all extracts of leaf were showed some inhibitory activity against AGS(human gastric adenocarcinoma, CRL-1739), but in the test against HeLa(Uteri cervix cancer cell), only a hot water extract of raw leaf(RLW) and a hot water extract of oven dried leaf at 90℃(DLW) were showed slight inhibitory activity. RSE, FSE and a hot water extract of raw seed(RSW) from seed part were showed anticancer activity against AGS, and FSE and RSE were showed better activity than extracts of leaf against HeLa. In the activity search based on the extract, RLE of leaf extract and FSE of seed extract were showed more high activity than other conditions in each parts. Therefore, RLE and FSE were carried out fractionation by various solvent with different polarity for isolation of activated component. A butanol fraction of RLE was showed the highest activity in DPPH radical scavenging ability as 0.15㎎/㎖ of SC50(concentration of sample required to scavenge the formation of DPPH radicals by 50%) value. It is relative activity of 229.73% compared with vitamin C. An ethylacetate fraction of FSE was exhibited 0.33㎎/㎖ of SC50 value as a similar activity of vitamin C. The total phenolic compound content of butanol fraction of RLE and the flavonoid content of ethylacetate fraction of RLE were found to be 429.7㎎/g and 246.2㎎/g respectively and it is the highest contents in the fraction of RLE. Besides the total phenolic compound and flavonoid content of ethylacetate fraction of FSE were found to be 441.6㎎/g and 284.1㎎/g respectively. In antimicrobial activity by the disc diffusion assay, an ethylacetate fractions of RLE and FSE were showed high activities against all strains. In the viability of Raw 264.7 cell as cytotoxicity, all fractions of RLE and FSE were showed fine viabilities. However high sample concentration such as 5㎎/㎖ of chloroform fraction was exhibited more significant cytotoxicity. In anticancer activity, a butanol fractions of RLE and FSE were showed high inhibitory activity against AGS and HeLa. In antioxidative activities of sub-fractions from RLE-BuOH, FSE-BuOH, and FSE-EtOAc isolated by column chromatography, FSE-E1 sub-fraction was showed the highest activity. Moreover the total phenolic compound and flavonoid content of FSE-E1 sub-fraction was found to be 570.0㎎/g and 465.5㎎/g respectively. And FSE-E1 sub-fraction was exhibited the strongest ability in antimicrobial activity against MRSA. However every sub-fractions were not showed antimicrobial effect against Staphylococcus aureus. In anticancer activity, RLE-B2 sub-fraction was showed strong activity against AGS with inhibitory rate of 69.80% at concentration of 1㎎/㎖. FSE-B4 sub-fraction was exhibited relatively high anticacer activity against HeLa with inhibitory rate of 35.18% at concentration of 1㎎/㎖.
In recent years, cultivation of Eriobotrya japonica L.(loquat) is on the increase around a southern area in Korea. For the purpose of make a basic materials for practical use of Eriobotrya japonica as medicinal or functional materials, the study was carried out an investigation of concrete physiological activities and an isolation of activated component from leaf and seed of Eriobotrya japonica. In the test for an investigation into a difference of activity according to the condition such as drying method and extract solvent, an 80% ethanol extract of raw leaf(RLE) from leaf was showed the highest ability in antioxidative activity including determination of total phenolic compound and flavonoid content, DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical and nitric oxide scavenging ability. In extract of seed part, an 80% ethanol extract of lyophilized seed(FSE) was exhibited more high antioxidative effects than other extract of seed. In antimicrobial activity by the disc diffusion assay and the broth dilution assay, RLE was showed high antimicrobial activity against all strains. In extract of seed part, FSE and 80% ethanol extract of raw seed(RSE) were exhibited more high activities than other extract of seed. Particularly, it's a significant result that the extracts were showed activity of high level against MRSA(methicillin resistance Staphylococcus aureus). Moreover, in MIC(minimal inhibitory concentration) measurement by the broth dilution assay, RLE was exhibited growth inhibition at concentration of around 0.025% against Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis, and Staphylococcus epidermidis. And the viability of Raw 264.7 cell as cytotoxicity was measured by MTT (3-[4,5-dimethyl-2-thiazolyl]-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) assay in each extracts. Cytotoxicity of extracts were not significant because all extracts were showed fine viabilities. In anticancer activity test, all extracts of leaf were showed some inhibitory activity against AGS(human gastric adenocarcinoma, CRL-1739), but in the test against HeLa(Uteri cervix cancer cell), only a hot water extract of raw leaf(RLW) and a hot water extract of oven dried leaf at 90℃(DLW) were showed slight inhibitory activity. RSE, FSE and a hot water extract of raw seed(RSW) from seed part were showed anticancer activity against AGS, and FSE and RSE were showed better activity than extracts of leaf against HeLa. In the activity search based on the extract, RLE of leaf extract and FSE of seed extract were showed more high activity than other conditions in each parts. Therefore, RLE and FSE were carried out fractionation by various solvent with different polarity for isolation of activated component. A butanol fraction of RLE was showed the highest activity in DPPH radical scavenging ability as 0.15㎎/㎖ of SC50(concentration of sample required to scavenge the formation of DPPH radicals by 50%) value. It is relative activity of 229.73% compared with vitamin C. An ethylacetate fraction of FSE was exhibited 0.33㎎/㎖ of SC50 value as a similar activity of vitamin C. The total phenolic compound content of butanol fraction of RLE and the flavonoid content of ethylacetate fraction of RLE were found to be 429.7㎎/g and 246.2㎎/g respectively and it is the highest contents in the fraction of RLE. Besides the total phenolic compound and flavonoid content of ethylacetate fraction of FSE were found to be 441.6㎎/g and 284.1㎎/g respectively. In antimicrobial activity by the disc diffusion assay, an ethylacetate fractions of RLE and FSE were showed high activities against all strains. In the viability of Raw 264.7 cell as cytotoxicity, all fractions of RLE and FSE were showed fine viabilities. However high sample concentration such as 5㎎/㎖ of chloroform fraction was exhibited more significant cytotoxicity. In anticancer activity, a butanol fractions of RLE and FSE were showed high inhibitory activity against AGS and HeLa. In antioxidative activities of sub-fractions from RLE-BuOH, FSE-BuOH, and FSE-EtOAc isolated by column chromatography, FSE-E1 sub-fraction was showed the highest activity. Moreover the total phenolic compound and flavonoid content of FSE-E1 sub-fraction was found to be 570.0㎎/g and 465.5㎎/g respectively. And FSE-E1 sub-fraction was exhibited the strongest ability in antimicrobial activity against MRSA. However every sub-fractions were not showed antimicrobial effect against Staphylococcus aureus. In anticancer activity, RLE-B2 sub-fraction was showed strong activity against AGS with inhibitory rate of 69.80% at concentration of 1㎎/㎖. FSE-B4 sub-fraction was exhibited relatively high anticacer activity against HeLa with inhibitory rate of 35.18% at concentration of 1㎎/㎖.
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