[학위논문]3T3-L1 Pre-adipocyte 세포에서 비타민 U (s-methylmethionine sulfonium chloride)의 분화억제 효과 Effects of Vitamin U (s-methylmethionine sulfonium chloride) on Depression in Differentiation of 3T3-L1 Pre-adipocyte Cell Line원문보기
배경: S-methylmetionine sulfonium chloride 는 소화기계통의 항궤양성 인자로, 위액분비 억제작용 및 궤양조직의 재생 촉진작용이 있는 지용성 인자로 비타민 U 로 불려왔다. 비타민 U 는 양배추, 브로콜리, 김 등에 풍부하게 존재하는 영양소로 아직 정확한 생리학적 기능에 대해서는 아직 잘 알려져 있지 않다. 그러나 궤양억제 능력, 항염증작용, 혈중 지질의 개선효과, 항우울 효과, 스트레스에 대한 ...
배경: S-methylmetionine sulfonium chloride 는 소화기계통의 항궤양성 인자로, 위액분비 억제작용 및 궤양조직의 재생 촉진작용이 있는 지용성 인자로 비타민 U 로 불려왔다. 비타민 U 는 양배추, 브로콜리, 김 등에 풍부하게 존재하는 영양소로 아직 정확한 생리학적 기능에 대해서는 아직 잘 알려져 있지 않다. 그러나 궤양억제 능력, 항염증작용, 혈중 지질의 개선효과, 항우울 효과, 스트레스에 대한 세포막 손상억제 기능 등에 대하여 연구되어 왔다. 최근 양배추가 체중 조절에 도움이 되는 식품으로 알려지고 있으나 이의 항비만 효과에 대하여는 잘 알려져 있지 않다. 목적: 본 연구의 목적은 비타민 U 의 항비만 효과의 기전을 밝히기 위하여 3T3-L1 Pre-adipocyte 세포에서 비타민 U (s-methylmethionine sulfonium chloride)의 분화억제 효과를 관찰하였다. 방법: Preadipoicyte 3T3L1 cell line 을 배양하고 분화시켜 dexamethason, IBMX, insulin, indomethacin 의 inducing media와 각각 다른 농도의 비타민 U에 첨가하였다. 각각의 군에 대하여 oil red O 염색을 통한 triglyceride, Glycerol-3-phosphate dehydrogenase (G3PDH)의 활성도 변화, Western blot을 이용한 AMPK (AMP-activated protein kinase)의 발현, 역전사 효소(reverse transcriptase) PCR을 통한 지방세포 특이 표지자(adipocyte-specific markers)인 PPAR-γ, C/EBP-α, ADD-1, adipsin, FAS, LPL 와 apoptosis-related 신호인 Bcl-2, Bax의 변화 양상에 대하여 관찰하였다. 결과: 1) 비타민 U의 지방세포 분화 억제 작용을 확인하기 위해 시행한 oil red O 염색을 통한 triglyceride, G3PDH의 활성도는 비타민 U의 농도가 높아짐에 따라 점차 감소되는 양상을 보였다. 2) 비타민 U의 지방세포 분화 억제 작용의 기전을 알기 위한 3T3-L1 지방세포에서 PPAR-γ, C/EBP-α, ADD-1, adipsin, FAS 및 LPL 의 분석에서 C/EBP-α, ADD-1과 adipsin의 mRNA가 감소하는 양상을 보였으며, PPAR-γ은 매우 감소하는 양상을 보였다. 그러나 LPL과 FAS의 발현 억제는 명확히 관찰되지 않았다. 3) AMPK phosphorylation은 비타민 U의 농도에 비례하여 증가하는 양상을 보였다. 4) 비타민 U가 포함된 배지에서 bcl-2의 감소와 Bax의 증가가 나타났으나 비타민 U의 농도에 따른 차이는 통계적으로 유의하지 않았다. 결론: 본 연구의 결과에서 비타민 U의 지방세포 분화의 억제 작용은 지방세포 형성 인자(adipogenic factor) 의 활동성을 낮추고 AMPK 활성도를 높이는 데 기인하는 것으로 생각된다.
배경: S-methylmetionine sulfonium chloride 는 소화기계통의 항궤양성 인자로, 위액분비 억제작용 및 궤양조직의 재생 촉진작용이 있는 지용성 인자로 비타민 U 로 불려왔다. 비타민 U 는 양배추, 브로콜리, 김 등에 풍부하게 존재하는 영양소로 아직 정확한 생리학적 기능에 대해서는 아직 잘 알려져 있지 않다. 그러나 궤양억제 능력, 항염증작용, 혈중 지질의 개선효과, 항우울 효과, 스트레스에 대한 세포막 손상억제 기능 등에 대하여 연구되어 왔다. 최근 양배추가 체중 조절에 도움이 되는 식품으로 알려지고 있으나 이의 항비만 효과에 대하여는 잘 알려져 있지 않다. 목적: 본 연구의 목적은 비타민 U 의 항비만 효과의 기전을 밝히기 위하여 3T3-L1 Pre-adipocyte 세포에서 비타민 U (s-methylmethionine sulfonium chloride)의 분화억제 효과를 관찰하였다. 방법: Preadipoicyte 3T3L1 cell line 을 배양하고 분화시켜 dexamethason, IBMX, insulin, indomethacin 의 inducing media와 각각 다른 농도의 비타민 U에 첨가하였다. 각각의 군에 대하여 oil red O 염색을 통한 triglyceride, Glycerol-3-phosphate dehydrogenase (G3PDH)의 활성도 변화, Western blot을 이용한 AMPK (AMP-activated protein kinase)의 발현, 역전사 효소(reverse transcriptase) PCR을 통한 지방세포 특이 표지자(adipocyte-specific markers)인 PPAR-γ, C/EBP-α, ADD-1, adipsin, FAS, LPL 와 apoptosis-related 신호인 Bcl-2, Bax의 변화 양상에 대하여 관찰하였다. 결과: 1) 비타민 U의 지방세포 분화 억제 작용을 확인하기 위해 시행한 oil red O 염색을 통한 triglyceride, G3PDH의 활성도는 비타민 U의 농도가 높아짐에 따라 점차 감소되는 양상을 보였다. 2) 비타민 U의 지방세포 분화 억제 작용의 기전을 알기 위한 3T3-L1 지방세포에서 PPAR-γ, C/EBP-α, ADD-1, adipsin, FAS 및 LPL 의 분석에서 C/EBP-α, ADD-1과 adipsin의 mRNA가 감소하는 양상을 보였으며, PPAR-γ은 매우 감소하는 양상을 보였다. 그러나 LPL과 FAS의 발현 억제는 명확히 관찰되지 않았다. 3) AMPK phosphorylation은 비타민 U의 농도에 비례하여 증가하는 양상을 보였다. 4) 비타민 U가 포함된 배지에서 bcl-2의 감소와 Bax의 증가가 나타났으나 비타민 U의 농도에 따른 차이는 통계적으로 유의하지 않았다. 결론: 본 연구의 결과에서 비타민 U의 지방세포 분화의 억제 작용은 지방세포 형성 인자(adipogenic factor) 의 활동성을 낮추고 AMPK 활성도를 높이는 데 기인하는 것으로 생각된다.
Background: S-methylmetionine sulfonium chloride was originally called vitamin U because of its usefulness against ulceration of the digestive system. Vitamin U is ubiquitous in the tissues of flowering plants, especially raw cabbage, but its precise function remains unknown. Recently, the raw cabba...
Background: S-methylmetionine sulfonium chloride was originally called vitamin U because of its usefulness against ulceration of the digestive system. Vitamin U is ubiquitous in the tissues of flowering plants, especially raw cabbage, but its precise function remains unknown. Recently, the raw cabbage is used for losing weight in general people, but the mechanism of anti-obesity effect of it is uncertain. Objectives: This study was designed to reveal the anti-obesity effect and the mechanism of vitamin U by the evaluation of the effects of vitamin U on the depression in differentiation of 3T3-L1 Pre-adipocyte Cell lines Methods: Preadipoicyte cell line 3T3L1 was cultured with overconfluency. And it was followed by addition of inducing media (dexamethason, IBMX, insulin, indomethacin) and Vit U with different concentration. Follow-up evaluations were done for the changes of triglyceride, G3PDH (glycerol-3-phosphate dehydrogenase), AMPK (AMP-activated protein kinase), adipocyte-specific markers (PPAR-γ, C/EBP-α, ADD-1, adipsin, FAS, LPL) and apoptosis-related signals (Bcl-2, Bax). Results: The levels in TG, C/EBP-α, PPAR-γ, adipsin, ADD-1 and GPDH activity were decreased gradually according as increase of Vit U concentration. In contrast, significantly increased activity of AMPK was observed. The decrement of bcl-2 and increment of Bax were observed in media with vitamin U, but it showed no statistical differences according as increase of vitamin U concentration, respectively. Conclusions: This study suggests that vitamin U inhibits adipocyte differentiation via downregulation of adipogenic factors and upregulation of AMPK activity. Apoptosis- inducing effects of Vitamin U are not confirmed by this study.
Background: S-methylmetionine sulfonium chloride was originally called vitamin U because of its usefulness against ulceration of the digestive system. Vitamin U is ubiquitous in the tissues of flowering plants, especially raw cabbage, but its precise function remains unknown. Recently, the raw cabbage is used for losing weight in general people, but the mechanism of anti-obesity effect of it is uncertain. Objectives: This study was designed to reveal the anti-obesity effect and the mechanism of vitamin U by the evaluation of the effects of vitamin U on the depression in differentiation of 3T3-L1 Pre-adipocyte Cell lines Methods: Preadipoicyte cell line 3T3L1 was cultured with overconfluency. And it was followed by addition of inducing media (dexamethason, IBMX, insulin, indomethacin) and Vit U with different concentration. Follow-up evaluations were done for the changes of triglyceride, G3PDH (glycerol-3-phosphate dehydrogenase), AMPK (AMP-activated protein kinase), adipocyte-specific markers (PPAR-γ, C/EBP-α, ADD-1, adipsin, FAS, LPL) and apoptosis-related signals (Bcl-2, Bax). Results: The levels in TG, C/EBP-α, PPAR-γ, adipsin, ADD-1 and GPDH activity were decreased gradually according as increase of Vit U concentration. In contrast, significantly increased activity of AMPK was observed. The decrement of bcl-2 and increment of Bax were observed in media with vitamin U, but it showed no statistical differences according as increase of vitamin U concentration, respectively. Conclusions: This study suggests that vitamin U inhibits adipocyte differentiation via downregulation of adipogenic factors and upregulation of AMPK activity. Apoptosis- inducing effects of Vitamin U are not confirmed by this study.
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