Leuconostoc citreum GR1의 발효조건 최적 및 안정화에 관한 연구 The study on the optimization of fermentation and stabilization conditions of Leuconostoc citreum GR1원문보기
종균용 김치를 제조를 하기 위해서는 종균이 대량배양 되어야 한다. 대량배양을 하기 위해서는 최적 배지조성의 개발이 중요하다. 유산균의 새로운 배지를 개발하기 위한 기본적인 요소는 배추추출액, 탄소원, 질소원, 미네랄 성분이다. 최적배지 조성은 배추추출액 잎 30%, maltose 2%, yeast extract 0.25%, 2X salt stock(sodium acetate 2%, disodium phosphate 0.8%, sodium citrate 0.8%, ammonium sulfate 0.8%)으로 나타났다. 새롭게 개발된 배지의 이름은 MFL로 명명하였다. Leuconostoc citreum GR1을 30℃에서 24시간 배양하면 ...
종균용 김치를 제조를 하기 위해서는 종균이 대량배양 되어야 한다. 대량배양을 하기 위해서는 최적 배지조성의 개발이 중요하다. 유산균의 새로운 배지를 개발하기 위한 기본적인 요소는 배추추출액, 탄소원, 질소원, 미네랄 성분이다. 최적배지 조성은 배추추출액 잎 30%, maltose 2%, yeast extract 0.25%, 2X salt stock(sodium acetate 2%, disodium phosphate 0.8%, sodium citrate 0.8%, ammonium sulfate 0.8%)으로 나타났다. 새롭게 개발된 배지의 이름은 MFL로 명명하였다. Leuconostoc citreum GR1을 30℃에서 24시간 배양하면 MRS 배지에서는 3.41×109 CFU/mL MFL 배지에서는 7.49×109 CFU/mL의 생균수를 보였다. MFL 배지에서 배양하면 MRS배지에서 배양했을 때 보다 2.14배 더 높은 성장을 보였다. 또한 최적화 배지의 Scale-up을 위해 5 L 발효조를 이용하여 2 L의 조업부피로 Leuconostoc citreum GR1을 배양하였다. 교반속도는 50 RPM에서 높은 생균수 8.60×109 CFU/mL를 나타내었다. 배지의 pH 조절은 pH-stat mode로 작동되었다. 균체 성장의 가장 최적의 pH는 NaOH 용액을 이용한 6.8로 결정하였다. 이러한 조건으로 20시간 배양 후 1.14×109 CFU/mL의 cell 성장을 하였다. Inducer는 Leuconostoc citreum GR1의 항균 활동의 활성을 위해 첨가되었다. Inducer는 10,000~11,000 psi에서 microfluidizer를 이용하여 35회 파쇄 된 Lactobacillus planatrum 464의 whole cell을 이용하였다. Bacillus subtilis에 대하여 유도된 Leuconostoc citreum GR1의 항균 활성은 유도되지 않은 Leuconostoc citreum GR1의 항균 활성 보다 16.7배 더 높았다. 또한 cell 성장도 0.1%로 inducer를 첨가하였을 때 1.1배 더 증가하였다. Cell은 농축시켰고 균체의 안정을 위해 안정제를 첨가하였다. 안정제로 MFL배지를 선택하였고 0℃, 4 ℃에서 저장하였다. 이러한 조건으로 cell은 4주 동안 약 90%의 생존율을 유지할 수 있었다.
종균용 김치를 제조를 하기 위해서는 종균이 대량배양 되어야 한다. 대량배양을 하기 위해서는 최적 배지조성의 개발이 중요하다. 유산균의 새로운 배지를 개발하기 위한 기본적인 요소는 배추추출액, 탄소원, 질소원, 미네랄 성분이다. 최적배지 조성은 배추추출액 잎 30%, maltose 2%, yeast extract 0.25%, 2X salt stock(sodium acetate 2%, disodium phosphate 0.8%, sodium citrate 0.8%, ammonium sulfate 0.8%)으로 나타났다. 새롭게 개발된 배지의 이름은 MFL로 명명하였다. Leuconostoc citreum GR1을 30℃에서 24시간 배양하면 MRS 배지에서는 3.41×109 CFU/mL MFL 배지에서는 7.49×109 CFU/mL의 생균수를 보였다. MFL 배지에서 배양하면 MRS배지에서 배양했을 때 보다 2.14배 더 높은 성장을 보였다. 또한 최적화 배지의 Scale-up을 위해 5 L 발효조를 이용하여 2 L의 조업부피로 Leuconostoc citreum GR1을 배양하였다. 교반속도는 50 RPM에서 높은 생균수 8.60×109 CFU/mL를 나타내었다. 배지의 pH 조절은 pH-stat mode로 작동되었다. 균체 성장의 가장 최적의 pH는 NaOH 용액을 이용한 6.8로 결정하였다. 이러한 조건으로 20시간 배양 후 1.14×109 CFU/mL의 cell 성장을 하였다. Inducer는 Leuconostoc citreum GR1의 항균 활동의 활성을 위해 첨가되었다. Inducer는 10,000~11,000 psi에서 microfluidizer를 이용하여 35회 파쇄 된 Lactobacillus planatrum 464의 whole cell을 이용하였다. Bacillus subtilis에 대하여 유도된 Leuconostoc citreum GR1의 항균 활성은 유도되지 않은 Leuconostoc citreum GR1의 항균 활성 보다 16.7배 더 높았다. 또한 cell 성장도 0.1%로 inducer를 첨가하였을 때 1.1배 더 증가하였다. Cell은 농축시켰고 균체의 안정을 위해 안정제를 첨가하였다. 안정제로 MFL배지를 선택하였고 0℃, 4 ℃에서 저장하였다. 이러한 조건으로 cell은 4주 동안 약 90%의 생존율을 유지할 수 있었다.
In order to settle starter kimchi manufacturing process, starter should be cultured in large-scale. For the large-scale cultivation, it is important to develop optimal medium compositions. The base materials for a newly developed medium of lactic acid bacteria is composed of Chinese cabbage extracts...
In order to settle starter kimchi manufacturing process, starter should be cultured in large-scale. For the large-scale cultivation, it is important to develop optimal medium compositions. The base materials for a newly developed medium of lactic acid bacteria is composed of Chinese cabbage extracts, carbon, nitrogen and minerals. The Optimal composition of medium was 30% leaf(Chinese cabbage extracts), 2% maltose, 0.25% yeast extract and 2X salt stock(2% sodium acetate, 0.8% disodium phosphate, 0.8% sodium citrate, 0.8% ammonium sulfate). The newly developed medium was named MFL(Medium for lactic acid bacteria). After culture for 24hr at 30℃, CFU/ml of Leuconostoc citreum GR1 in MRS and MFL was 3.41×109 and 7.49×109, respectively. CFU/ml of MFL medium exhibited 2.14 times higher than that of MRS medium. For scale-up of optimized medium, cell growth of Leuconostoc citreum GR1 was tested in 2 L working volume using 5 L jar fermentor at 30℃. At 50 RPM of stirring velocity, viable cell counts was 8.60×109 CFU/mL. The medium’s pH was controlled in pH-stat mode. The most proper pH in cell growth control was determined to 6.8 using NaOH solution. Under those conditions, Cell was grown up to 1.14×109 CFU/ml after 20hr of cultivation. Inducer was added for activation of antimicrobial activity of Leuconostoc citreum GR1. Inducer was whole cell of Lactobacillus planatrum 464 which was disrupted by 35 cycles of microfluidizer at 10,000~11,000 psi. Anti-bacterial activity of induced Leuconostoc citreum GR1 against Bacillus subtilis was 16.7 times higher than that of non-induced Leuconostoc citreum GR1. Also cell growth was increased 1.1 times in the presence of 0.1% of inducer solution. Cell was concentrated. And it was added stabilizer for stability of the biomass. MFL medium was added as a stabilizer. and those were stored at 0 ℃, 4 ℃. Under those conditions, cell could survive in the ratio of about 90% for 4 weeks.
In order to settle starter kimchi manufacturing process, starter should be cultured in large-scale. For the large-scale cultivation, it is important to develop optimal medium compositions. The base materials for a newly developed medium of lactic acid bacteria is composed of Chinese cabbage extracts, carbon, nitrogen and minerals. The Optimal composition of medium was 30% leaf(Chinese cabbage extracts), 2% maltose, 0.25% yeast extract and 2X salt stock(2% sodium acetate, 0.8% disodium phosphate, 0.8% sodium citrate, 0.8% ammonium sulfate). The newly developed medium was named MFL(Medium for lactic acid bacteria). After culture for 24hr at 30℃, CFU/ml of Leuconostoc citreum GR1 in MRS and MFL was 3.41×109 and 7.49×109, respectively. CFU/ml of MFL medium exhibited 2.14 times higher than that of MRS medium. For scale-up of optimized medium, cell growth of Leuconostoc citreum GR1 was tested in 2 L working volume using 5 L jar fermentor at 30℃. At 50 RPM of stirring velocity, viable cell counts was 8.60×109 CFU/mL. The medium’s pH was controlled in pH-stat mode. The most proper pH in cell growth control was determined to 6.8 using NaOH solution. Under those conditions, Cell was grown up to 1.14×109 CFU/ml after 20hr of cultivation. Inducer was added for activation of antimicrobial activity of Leuconostoc citreum GR1. Inducer was whole cell of Lactobacillus planatrum 464 which was disrupted by 35 cycles of microfluidizer at 10,000~11,000 psi. Anti-bacterial activity of induced Leuconostoc citreum GR1 against Bacillus subtilis was 16.7 times higher than that of non-induced Leuconostoc citreum GR1. Also cell growth was increased 1.1 times in the presence of 0.1% of inducer solution. Cell was concentrated. And it was added stabilizer for stability of the biomass. MFL medium was added as a stabilizer. and those were stored at 0 ℃, 4 ℃. Under those conditions, cell could survive in the ratio of about 90% for 4 weeks.
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