본 연구는 일반명 곤드레로 알려진 고려엉겅퀴(Cirsium setidens Nakai)의 지상부로부터 항산화 활성 물질을 분리, 정제 및 동정하기 위하여 수행되었다. 건조된 고려엉겅퀴 지상부를 80% MeOH로 추출하고 여과하여 40℃에서 감압 농축 하였다. 감압 건고된 Methanol 추출물은 hexane, ...
본 연구는 일반명 곤드레로 알려진 고려엉겅퀴(Cirsium setidens Nakai)의 지상부로부터 항산화 활성 물질을 분리, 정제 및 동정하기 위하여 수행되었다. 건조된 고려엉겅퀴 지상부를 80% MeOH로 추출하고 여과하여 40℃에서 감압 농축 하였다. 감압 건고된 Methanol 추출물은 hexane, ethyl acetate, n-butanol을 사용, 극성을 순차적으로 증가시켜 추출하였다. 항산화 활성이 높았던 ethyl acetate 분획물을 대상으로 CH2Cl2-MeOH(5 : 1)을 용출 용매로 하여 순차적으로 용매의 극성을 높여가며 Silica open column chromatography를 적용하였고, 6개의 분획을 획득하였다. 그 중 DPPH free radical 소거능을 지표로 항산화 활성을 평가한 결과, 활성이 나타난 C1-1 그리고 C1-2 분획을 합하여 2차 silica gel open column chromatography를 실시하였다. 용출 용매는 Toluene-Acetone (3 : 1)로 시작하여 순차적으로 극성을 높여가며 용출하였다. 획득한 6개의 분획층 중 항산화 활성이 높은 C2-2 ∼ C2-4 분획을 합하여 3차 silica gel open column chromatography를 실시하였고 용출 용매는 CHCl3-MeOH (10 : 1)로 시작하여 순차적으로 극성을 높여가며 용출하여 11개의 분획층을 획득하였다. 항산화 활성 지표 결과 C3-3 ∼ C3-7의 분획을 합하여 4차 preparation thin layer chromatography를 실시하였고 용출용매는 CHCl3-MeOH (10 : 1)이였다. 이 중 C4-4와 C4-7을 GPC로 정제하여 최종 분획 C4-4-1, C4-4-2 및 C4-7-3 분획이 분리되었다. 최종적으로 획득한 3개의 분획에 대하여 항산화 활성을 평가하기 위해 농도별로 DPPH free radical 소거능, ABTS free radical 소거능, SOD-like activity를 측정한 결과 C4-4-1 분획이 높은 활성을 나타내었다. C4-4-1 분획의 DPPH free racal 소거능은 5㎍/mL의 농도에서 94.33% 이었고 ABTS free radical 소거능은 25㎍/mL의 농도에서 98.17% 이었으며 SOD-like activity는 25㎍/mL의 농도에서 70.47%의 활성을 나타내었다. C4-4-1 분획은 Gas chromatogram 상에서 여러 peak로 검출되었으며 EI-MS Spectrum 분석결과 benzeneacetamide, homovanillyl -alcohol, loliolide, dihydroxysryngenine, 및 2-butenedioic acid 으로 동정되었다. C4-4-2 분획은 4-vinyl-2-methoxy-phenol과 2-[3-Hydroxy-4-methoxyph -enyl]-semicarbazide로 동정되었다. C4-7-3 분획은 4-vinylphenol로 동정되었다. 이밖에 2-methoxy-4-vinylphenol 과 benzeneacetic acid등 페놀성 물질들이 동정되었다. 또한 ORAC assay 값이 30.3 μM TE/g F.W.로 이는 녹황색 채소에 함유하고 있는 ORAC 수치보다 높은 것으로 나타났다.
본 연구는 일반명 곤드레로 알려진 고려엉겅퀴(Cirsium setidens Nakai)의 지상부로부터 항산화 활성 물질을 분리, 정제 및 동정하기 위하여 수행되었다. 건조된 고려엉겅퀴 지상부를 80% MeOH로 추출하고 여과하여 40℃에서 감압 농축 하였다. 감압 건고된 Methanol 추출물은 hexane, ethyl acetate, n-butanol을 사용, 극성을 순차적으로 증가시켜 추출하였다. 항산화 활성이 높았던 ethyl acetate 분획물을 대상으로 CH2Cl2-MeOH(5 : 1)을 용출 용매로 하여 순차적으로 용매의 극성을 높여가며 Silica open column chromatography를 적용하였고, 6개의 분획을 획득하였다. 그 중 DPPH free radical 소거능을 지표로 항산화 활성을 평가한 결과, 활성이 나타난 C1-1 그리고 C1-2 분획을 합하여 2차 silica gel open column chromatography를 실시하였다. 용출 용매는 Toluene-Acetone (3 : 1)로 시작하여 순차적으로 극성을 높여가며 용출하였다. 획득한 6개의 분획층 중 항산화 활성이 높은 C2-2 ∼ C2-4 분획을 합하여 3차 silica gel open column chromatography를 실시하였고 용출 용매는 CHCl3-MeOH (10 : 1)로 시작하여 순차적으로 극성을 높여가며 용출하여 11개의 분획층을 획득하였다. 항산화 활성 지표 결과 C3-3 ∼ C3-7의 분획을 합하여 4차 preparation thin layer chromatography를 실시하였고 용출용매는 CHCl3-MeOH (10 : 1)이였다. 이 중 C4-4와 C4-7을 GPC로 정제하여 최종 분획 C4-4-1, C4-4-2 및 C4-7-3 분획이 분리되었다. 최종적으로 획득한 3개의 분획에 대하여 항산화 활성을 평가하기 위해 농도별로 DPPH free radical 소거능, ABTS free radical 소거능, SOD-like activity를 측정한 결과 C4-4-1 분획이 높은 활성을 나타내었다. C4-4-1 분획의 DPPH free racal 소거능은 5㎍/mL의 농도에서 94.33% 이었고 ABTS free radical 소거능은 25㎍/mL의 농도에서 98.17% 이었으며 SOD-like activity는 25㎍/mL의 농도에서 70.47%의 활성을 나타내었다. C4-4-1 분획은 Gas chromatogram 상에서 여러 peak로 검출되었으며 EI-MS Spectrum 분석결과 benzeneacetamide, homovanillyl -alcohol, loliolide, dihydroxysryngenine, 및 2-butenedioic acid 으로 동정되었다. C4-4-2 분획은 4-vinyl-2-methoxy-phenol과 2-[3-Hydroxy-4-methoxyph -enyl]-semicarbazide로 동정되었다. C4-7-3 분획은 4-vinylphenol로 동정되었다. 이밖에 2-methoxy-4-vinylphenol 과 benzeneacetic acid등 페놀성 물질들이 동정되었다. 또한 ORAC assay 값이 30.3 μM TE/g F.W.로 이는 녹황색 채소에 함유하고 있는 ORAC 수치보다 높은 것으로 나타났다.
Cirsium setidens Nakai is a wild herb whose stem and leaves have been widely used in Korea as a food and treat hematemesis, hematuria, hepatitis, and hypertension. However, the antioxdant properties of C. setidens have not been studied. Thus, in this study, we isolated and identified the active subs...
Cirsium setidens Nakai is a wild herb whose stem and leaves have been widely used in Korea as a food and treat hematemesis, hematuria, hepatitis, and hypertension. However, the antioxdant properties of C. setidens have not been studied. Thus, in this study, we isolated and identified the active substances from the stem and leaf of C. setidens and evaluated its antioxdant activity. C. setidens stem and leaf samples that were air-dried in the shadows were crushed and macerated with 80% methanol for 7 days and then filtered. The filtrate was combined and then concentrated at 40℃ in vacuo. The extracts were fractionated to hexane, ethyl acetate, n-butanol, and water fractions of increasing polarity. The ethyl acetate extracts were purified with silica gel column chromatography, PLC, and GPC. The active fraction, The C4-4-1, C4-4-2, and C4-7-3, displayed DPPH free radical scavenging activity of 79.41%, 94.33%, and 80.49% at 5㎍/ml, respectively. The ABTS radical activities of the active fractions were 98%, 79%, and 69% at 25㎍/ml, respectively. The SOD-like activities of the active fractions were 70%, 48%, and 60% at 25㎍/ml, respectively. The ORAC value of C. setidens was 30.3μM TE/g F.W. The total phenolic contents of C. setidens was 76.06mg/g F.W. Various antioxidant substances were identified with GC-MS analysis. The phenolic compounds were identified as 4-vinlyphenol, loliolide, and 2-methoxy-4-vinlyphenol. The other phenolic compounds were identified as benzeneacetamide, homovanillyl alcohol, dihydroxysyringenin, 2-butenedioic acid, benzeneacetic acid and 4-vinly-2-methoxy-phenol.
Cirsium setidens Nakai is a wild herb whose stem and leaves have been widely used in Korea as a food and treat hematemesis, hematuria, hepatitis, and hypertension. However, the antioxdant properties of C. setidens have not been studied. Thus, in this study, we isolated and identified the active substances from the stem and leaf of C. setidens and evaluated its antioxdant activity. C. setidens stem and leaf samples that were air-dried in the shadows were crushed and macerated with 80% methanol for 7 days and then filtered. The filtrate was combined and then concentrated at 40℃ in vacuo. The extracts were fractionated to hexane, ethyl acetate, n-butanol, and water fractions of increasing polarity. The ethyl acetate extracts were purified with silica gel column chromatography, PLC, and GPC. The active fraction, The C4-4-1, C4-4-2, and C4-7-3, displayed DPPH free radical scavenging activity of 79.41%, 94.33%, and 80.49% at 5㎍/ml, respectively. The ABTS radical activities of the active fractions were 98%, 79%, and 69% at 25㎍/ml, respectively. The SOD-like activities of the active fractions were 70%, 48%, and 60% at 25㎍/ml, respectively. The ORAC value of C. setidens was 30.3μM TE/g F.W. The total phenolic contents of C. setidens was 76.06mg/g F.W. Various antioxidant substances were identified with GC-MS analysis. The phenolic compounds were identified as 4-vinlyphenol, loliolide, and 2-methoxy-4-vinlyphenol. The other phenolic compounds were identified as benzeneacetamide, homovanillyl alcohol, dihydroxysyringenin, 2-butenedioic acid, benzeneacetic acid and 4-vinly-2-methoxy-phenol.
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