청미래덩굴(Smilax china L.)의 잎과 뿌리는 항균, 해독, 이뇨 등의 효능이 있는 것으로 보고되어 생활 속에서도 다양하게 이용되고 있다. 본 연구에서는 청미래덩굴 잎과 뿌리 부분의 열수, 에탄올, 초임계 등 다양한 추출법을 이용하여 추출하고 이들의 추출물로 미백 효과를 조사하여 미백 화장품 소재로써의 가능성을 제시하고자 하였다. 추출물의 Thin Layer Chromatography (TLC) 분석 결과 초임계 추출물은 비교적 극성이 낮은 물질들의 함량이 높은 경향을 보이며 열수 추출물은 극성이 높은 물질들의 함량이 높은 것을 확인하였다. 유효성분인 diosgenin은 ...
청미래덩굴(Smilax china L.)의 잎과 뿌리는 항균, 해독, 이뇨 등의 효능이 있는 것으로 보고되어 생활 속에서도 다양하게 이용되고 있다. 본 연구에서는 청미래덩굴 잎과 뿌리 부분의 열수, 에탄올, 초임계 등 다양한 추출법을 이용하여 추출하고 이들의 추출물로 미백 효과를 조사하여 미백 화장품 소재로써의 가능성을 제시하고자 하였다. 추출물의 Thin Layer Chromatography (TLC) 분석 결과 초임계 추출물은 비교적 극성이 낮은 물질들의 함량이 높은 경향을 보이며 열수 추출물은 극성이 높은 물질들의 함량이 높은 것을 확인하였다. 유효성분인 diosgenin은 TLC 분석에서 에탄올 잎 추출물, 초임계 잎과 뿌리 추출물 모두에서 확인되었으며 Rf값은 0.169로 나타났다. In vitro 실험에서 MTT assay를 이용한 세포독성 측정 결과 100 mg/mL 농도에서 초임계 뿌리 추출물을 제외한 모든 추출물이 80% 이상의 세포 생존율을 나타냈다. DPPH radical 소거 활성 측정 결과 모든 추출물에서 농도 의존적으로 DPPH radical 소거 활성을 보였다. L-3,4-dihydroxyphenylalanine (DOPA)를 이용한 tyrosinase 활성 저해율을 측정한 결과 초임계 잎과 뿌리의 추출물은 열수 추출물이나 에탄올 추출물보다 우수한 저해율을 보여주었다. 멜라닌 생성 저해 실험 결과에서도 청미래덩굴 잎과 뿌리의 추출물은 효과적인 멜라닌 생성 저해 효과를 보였다. 청미래덩굴의 구성 성분인 diosgenin도 농도 의존적으로 멜라닌 생성을 저해하였다. Wnt pathway와 관련된 β-catenin 활성 저해 실험 결과에서 청미래덩굴 초임계 잎과 뿌리 추출물은 효과적으로 β-catenin 활성을 저해하는 것으로 나타났으며, 청미래덩굴의 주요 성분인 diosgenin도 β-catenin 활성을 농도 의존적으로 감소시키는 것으로 나타났다. 또한 초임계 잎 추출물은 B16F10 melanoma cell에서 농도 의존적으로 Microphthalmia-associated transcription factor (MITF)와 tyrosinase 단백질의 발현을 억제하였다. 이것은 초임계 잎 추출물이 MITF, tyrosinase 단백질의 발현을 억제함으로써 멜라닌 생성경로로 알려져 있는 멜라닌세포 자극호르몬(α-MSH)과 관련된 cAMP-dependent pathway와 Wnt/β-catenin pathway에 영향을 미치는 것을 의미한다. 이상과 같은 in vitro 실험 결과를 바탕으로 멜라닌 생성 저해 효과를 보일 것으로 추정되는 초임계 잎 추출물 화장품을 이용한 임상 실험을 실시하였다. 임상 실험을 분석한 결과 청미래덩굴 초임계 잎 추출물을 함유한 화장품의 사용으로 피부 멜라닌 지수, 홍반 지수 그리고 명도 지수의 통계적으로 유의한 변화를 확인하였다. 결론적으로 본 연구에서는 청미래덩굴 초임계 잎 추출물을 미백 화장품 등의 기능성 유효소재로 활용할 수 있다는 것을 시사한다.
청미래덩굴(Smilax china L.)의 잎과 뿌리는 항균, 해독, 이뇨 등의 효능이 있는 것으로 보고되어 생활 속에서도 다양하게 이용되고 있다. 본 연구에서는 청미래덩굴 잎과 뿌리 부분의 열수, 에탄올, 초임계 등 다양한 추출법을 이용하여 추출하고 이들의 추출물로 미백 효과를 조사하여 미백 화장품 소재로써의 가능성을 제시하고자 하였다. 추출물의 Thin Layer Chromatography (TLC) 분석 결과 초임계 추출물은 비교적 극성이 낮은 물질들의 함량이 높은 경향을 보이며 열수 추출물은 극성이 높은 물질들의 함량이 높은 것을 확인하였다. 유효성분인 diosgenin은 TLC 분석에서 에탄올 잎 추출물, 초임계 잎과 뿌리 추출물 모두에서 확인되었으며 Rf값은 0.169로 나타났다. In vitro 실험에서 MTT assay를 이용한 세포독성 측정 결과 100 mg/mL 농도에서 초임계 뿌리 추출물을 제외한 모든 추출물이 80% 이상의 세포 생존율을 나타냈다. DPPH radical 소거 활성 측정 결과 모든 추출물에서 농도 의존적으로 DPPH radical 소거 활성을 보였다. L-3,4-dihydroxyphenylalanine (DOPA)를 이용한 tyrosinase 활성 저해율을 측정한 결과 초임계 잎과 뿌리의 추출물은 열수 추출물이나 에탄올 추출물보다 우수한 저해율을 보여주었다. 멜라닌 생성 저해 실험 결과에서도 청미래덩굴 잎과 뿌리의 추출물은 효과적인 멜라닌 생성 저해 효과를 보였다. 청미래덩굴의 구성 성분인 diosgenin도 농도 의존적으로 멜라닌 생성을 저해하였다. Wnt pathway와 관련된 β-catenin 활성 저해 실험 결과에서 청미래덩굴 초임계 잎과 뿌리 추출물은 효과적으로 β-catenin 활성을 저해하는 것으로 나타났으며, 청미래덩굴의 주요 성분인 diosgenin도 β-catenin 활성을 농도 의존적으로 감소시키는 것으로 나타났다. 또한 초임계 잎 추출물은 B16F10 melanoma cell에서 농도 의존적으로 Microphthalmia-associated transcription factor (MITF)와 tyrosinase 단백질의 발현을 억제하였다. 이것은 초임계 잎 추출물이 MITF, tyrosinase 단백질의 발현을 억제함으로써 멜라닌 생성경로로 알려져 있는 멜라닌세포 자극호르몬(α-MSH)과 관련된 cAMP-dependent pathway와 Wnt/β-catenin pathway에 영향을 미치는 것을 의미한다. 이상과 같은 in vitro 실험 결과를 바탕으로 멜라닌 생성 저해 효과를 보일 것으로 추정되는 초임계 잎 추출물 화장품을 이용한 임상 실험을 실시하였다. 임상 실험을 분석한 결과 청미래덩굴 초임계 잎 추출물을 함유한 화장품의 사용으로 피부 멜라닌 지수, 홍반 지수 그리고 명도 지수의 통계적으로 유의한 변화를 확인하였다. 결론적으로 본 연구에서는 청미래덩굴 초임계 잎 추출물을 미백 화장품 등의 기능성 유효소재로 활용할 수 있다는 것을 시사한다.
Leaves and roots of Smilax china L. reported it's antibacterial effect, detoxification, diuresis and other useful effects are used in various ways in life. The purpose of this study was to research the biological and physiological activity of the extracts of Smilax china L. are extracted with variou...
Leaves and roots of Smilax china L. reported it's antibacterial effect, detoxification, diuresis and other useful effects are used in various ways in life. The purpose of this study was to research the biological and physiological activity of the extracts of Smilax china L. are extracted with various solvents like distilled water (CWL from leaves and CWR from roots), ethanol (CEL from leaves and CER from roots) and supercritical fluid (CSL from leaves and CSR from roots). In thin layer chromatography (TLC) analyses of these extracts, the supercritical extract showed to contain relatively low polarity material, and the distilled water extract showed to contain relatively high polarity material. Diosgenin was detected from ethanol extract of leaves of Smilax china L., and supercritical extracts of leaves and roots of Smilax china L. Rf value of diosgenin from Smilax china L. was found to be 0.169. All these extracts showed lower or no cytotoxicity at a concentration below 100 μg/mL in B16F10 mouse melanoma cells, and showed potential DPPH radical scavenging activity. For whitening effects, mushroom tyrosinase inhibition effect of CSL and CSR from Smilax china L. showed more than 40% at over 20 μg/mL. CSL showed a melanogenesis inhibitory effect in a dose-dependent manner for α-MSH and Wnt3a treated melanoma cells, within the concentration of 100 μg/ml. CSR of 20 μg/ml concentration showed the highest inhibitory effect of melanogenesis. Both CSL and CSR inhibited the β-catenin activity of SW480 (human colon cancer cell) in a dose-dependent manner. In the CSL treated B16F10 mouse melanoma cells, the expression of MITF and tyrosinase protein was decreased in a concentration-dependent manner. CSL seems to inhibit the melanogenesis in B16F10 cells by inhibiting the expression of MITF through the α-MSH/melanocortin 1 receptor (MC1R) signaling pathway. The result of in vivo test with cosmetic including 0.05% CSL confirmed significant changes in skin melanin index, redness index, and lightness index. In conclusion, this study suggest that SCL could be utilized as a effective whitening ingredient. From these results, supercritical extract from leaves of Smilax china L. may be used as a cosmetic ingredient in the production of skin-whitening cosmetics.
Leaves and roots of Smilax china L. reported it's antibacterial effect, detoxification, diuresis and other useful effects are used in various ways in life. The purpose of this study was to research the biological and physiological activity of the extracts of Smilax china L. are extracted with various solvents like distilled water (CWL from leaves and CWR from roots), ethanol (CEL from leaves and CER from roots) and supercritical fluid (CSL from leaves and CSR from roots). In thin layer chromatography (TLC) analyses of these extracts, the supercritical extract showed to contain relatively low polarity material, and the distilled water extract showed to contain relatively high polarity material. Diosgenin was detected from ethanol extract of leaves of Smilax china L., and supercritical extracts of leaves and roots of Smilax china L. Rf value of diosgenin from Smilax china L. was found to be 0.169. All these extracts showed lower or no cytotoxicity at a concentration below 100 μg/mL in B16F10 mouse melanoma cells, and showed potential DPPH radical scavenging activity. For whitening effects, mushroom tyrosinase inhibition effect of CSL and CSR from Smilax china L. showed more than 40% at over 20 μg/mL. CSL showed a melanogenesis inhibitory effect in a dose-dependent manner for α-MSH and Wnt3a treated melanoma cells, within the concentration of 100 μg/ml. CSR of 20 μg/ml concentration showed the highest inhibitory effect of melanogenesis. Both CSL and CSR inhibited the β-catenin activity of SW480 (human colon cancer cell) in a dose-dependent manner. In the CSL treated B16F10 mouse melanoma cells, the expression of MITF and tyrosinase protein was decreased in a concentration-dependent manner. CSL seems to inhibit the melanogenesis in B16F10 cells by inhibiting the expression of MITF through the α-MSH/melanocortin 1 receptor (MC1R) signaling pathway. The result of in vivo test with cosmetic including 0.05% CSL confirmed significant changes in skin melanin index, redness index, and lightness index. In conclusion, this study suggest that SCL could be utilized as a effective whitening ingredient. From these results, supercritical extract from leaves of Smilax china L. may be used as a cosmetic ingredient in the production of skin-whitening cosmetics.
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