L-arginine으로 코팅된 이산화규소 나노물질(SiO220[R], SiO2100[R])의 입자 크기는 투과전자현미경(TEM)으로 확인하였다. TEM 영상으로부터 500 개의 입자를 무작위로 추출하여 평균입자크기를 측정한 결과, L-Arginine으로 코 팅하기 전과 후의 이산화규소 나노물질의 크기 변화는 약 2nm로 확인되었 다. 표면 전하(zeta potential) 분석을 통하여 평균 전하값이 서로 유사한 것 으로 확인되었기 때문에 크기에 따른 이산화규소나노물질의 ...
L-arginine으로 코팅된 이산화규소 나노물질(SiO220[R], SiO2100[R])의 입자 크기는 투과전자현미경(TEM)으로 확인하였다. TEM 영상으로부터 500 개의 입자를 무작위로 추출하여 평균입자크기를 측정한 결과, L-Arginine으로 코 팅하기 전과 후의 이산화규소 나노물질의 크기 변화는 약 2nm로 확인되었 다. 표면 전하(zeta potential) 분석을 통하여 평균 전하값이 서로 유사한 것 으로 확인되었기 때문에 크기에 따른 이산화규소나노물질의 유전독성을 판단 하기 위한 시험물질로 적합하다고 사료되었다. 유전자 수준에서의 돌연변이 유발 여부를 판단하기 위하여 histidine 요구성 균주인 Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535 및 TA1537 균주와 tryptophan 요구성 균주인 Escherichia coli WP2uvrA 균주를 이용하여 복귀돌연변이시험을 실시하였다. 복귀돌연변이시험 결과, 용매대조군에 비해 이산화규소 나노물질 처리군의 복귀돌연변이 콜로니 수의 증가는 나타 나지 않았다. 따라서 L-arginine으로 코팅된 이산화규소 나노물질(SiO220[R], SiO 100[R])은 염기쌍 치환(base pair substitution)과 해독틀 돌연변이에 영향을 미치지 않는 것으로 판단된다. 염색체의 수적이상 및 구조적이상 유발여부를 판단하기 위해 CHL/IU (Cricetulus griseus, hamster, Chinese)세포주를 이용하여 염색체이상시험을 수행하였다. 염색체 이상시험 결과, 염색체이상을 가진 세포의 출현빈도는 용매 대조군에 비해 증가하지 않았다. 따라서 L-arginine으로 코팅된 이산화규소 나노물질(SiO220[R], SiO 100[R]는 염색체이상을 유발하지 않는 것으로 판단된다.) 설치류(마우스, 쥐) 골수세포에서 소핵을 갖는 다염성 적혈구(MNPCE)의 유발여부을 판단하기 위하여 소핵시험을 수행하였다. 소핵시험 결과, 이산화규소나노물질 투여군에서 다염성적혈구 중 소핵을 갖는 다염성 적혈구(MNPCE)의 출현빈도는 용매 대조군과 비교하여 볼 때 증가하는 경향을 나 타내지 않았으며 통계적인 유의성도 보이지 않았다. 또한 전체 적혈구 중 다 염성 적혈구의 비율 [PCE/(PCE+NCE)]도 음성 대조군과 비교했을 때 통계학 적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다. 따라서 L-arginine으로 코팅된 이산화규소 나노물질(SiO 20[R], SiO 100[R])은 단기간 및 장기간 생체 내 노출 시 적혈구의 분화과정에서 소핵을 유발시키지 않는 것으로 판단된다. 이러한 결과를 종합해 볼 때 이산화규소 나노물질은 유전독성을 일으키지 않는 것으로 판단된다. 본 연구의 모든 실험과정은 GLP 시험기관 내에서 OECD test guideline에 따라 수행되었으며 이는 이산화규소 나노물질의 유 전 독성 유발 여부에 대한 신뢰할 수 있는 시험자료가 될 것으로 사료된다.
L-arginine으로 코팅된 이산화규소 나노물질(SiO220[R], SiO2100[R])의 입자 크기는 투과전자현미경(TEM)으로 확인하였다. TEM 영상으로부터 500 개의 입자를 무작위로 추출하여 평균입자크기를 측정한 결과, L-Arginine으로 코 팅하기 전과 후의 이산화규소 나노물질의 크기 변화는 약 2nm로 확인되었 다. 표면 전하(zeta potential) 분석을 통하여 평균 전하값이 서로 유사한 것 으로 확인되었기 때문에 크기에 따른 이산화규소나노물질의 유전독성을 판단 하기 위한 시험물질로 적합하다고 사료되었다. 유전자 수준에서의 돌연변이 유발 여부를 판단하기 위하여 histidine 요구성 균주인 Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535 및 TA1537 균주와 tryptophan 요구성 균주인 Escherichia coli WP2uvrA 균주를 이용하여 복귀돌연변이시험을 실시하였다. 복귀돌연변이시험 결과, 용매대조군에 비해 이산화규소 나노물질 처리군의 복귀돌연변이 콜로니 수의 증가는 나타 나지 않았다. 따라서 L-arginine으로 코팅된 이산화규소 나노물질(SiO220[R], SiO 100[R])은 염기쌍 치환(base pair substitution)과 해독틀 돌연변이에 영향을 미치지 않는 것으로 판단된다. 염색체의 수적이상 및 구조적이상 유발여부를 판단하기 위해 CHL/IU (Cricetulus griseus, hamster, Chinese)세포주를 이용하여 염색체이상시험을 수행하였다. 염색체 이상시험 결과, 염색체이상을 가진 세포의 출현빈도는 용매 대조군에 비해 증가하지 않았다. 따라서 L-arginine으로 코팅된 이산화규소 나노물질(SiO220[R], SiO 100[R]는 염색체이상을 유발하지 않는 것으로 판단된다.) 설치류(마우스, 쥐) 골수세포에서 소핵을 갖는 다염성 적혈구(MNPCE)의 유발여부을 판단하기 위하여 소핵시험을 수행하였다. 소핵시험 결과, 이산화규소나노물질 투여군에서 다염성적혈구 중 소핵을 갖는 다염성 적혈구(MNPCE)의 출현빈도는 용매 대조군과 비교하여 볼 때 증가하는 경향을 나 타내지 않았으며 통계적인 유의성도 보이지 않았다. 또한 전체 적혈구 중 다 염성 적혈구의 비율 [PCE/(PCE+NCE)]도 음성 대조군과 비교했을 때 통계학 적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다. 따라서 L-arginine으로 코팅된 이산화규소 나노물질(SiO 20[R], SiO 100[R])은 단기간 및 장기간 생체 내 노출 시 적혈구의 분화과정에서 소핵을 유발시키지 않는 것으로 판단된다. 이러한 결과를 종합해 볼 때 이산화규소 나노물질은 유전독성을 일으키지 않는 것으로 판단된다. 본 연구의 모든 실험과정은 GLP 시험기관 내에서 OECD test guideline에 따라 수행되었으며 이는 이산화규소 나노물질의 유 전 독성 유발 여부에 대한 신뢰할 수 있는 시험자료가 될 것으로 사료된다.
The field of nanotechnology has been growing rapidly in various industries over the last decade. Nanoparticles (NPs) refer to compounds or particles with ranging between 1 and 100 nanometers. Products made from NPs are already commercially used in the fields of biology, biotechnology, and medicine, ...
The field of nanotechnology has been growing rapidly in various industries over the last decade. Nanoparticles (NPs) refer to compounds or particles with ranging between 1 and 100 nanometers. Products made from NPs are already commercially used in the fields of biology, biotechnology, and medicine, including use in drug delivery, tissue engineering, tumor destruction, and biosensing. However, nanoparticles may be hazardous to human health because of their unusual physicochemical properties, eg, small size, high surface to volume ratio, chemical composition, crystallinity, electronic properties, surface structure reactivity and functional groups, inorganic or organic coatings, solubility, shape, and aggregation behavior. Several nanotoxicology reports have proposed that nanoparticle causes a dose-dependent cytotoxicity in Cell lines. However, results of some studies were shown the opposite result. Nanoparticle related studies reported that differences were generated by the size and surface charge of the specific nanoparticles. In the present study, four genotoxicity tests were conducted with well characterized L-Arginine-coated SiO2 nanoparticles 20 nm(SiO 20[R]) and 100 nm (SiO2100[R]) in size, each having a negative and positive surface charge. The genotoxicity of SiO2 was evaluated using two types of well L-Arginine-coated characterized SiO2. Four end point genotoxicity tests, ie, the bacterial mutation assay, in vitro chromosomal aberration test, micronucleus test using mouse and micronucleus test using rat (Repeated dose 90-day) were conducted following the test guidelines of the Organization for Economic Cooperation and Development (OECD) with application of Good Laboratory Practice. No statistically significant differences were found in the bacterial mutation assay, in vitro chromosomal aberration test, in vivo micronucleus test and in vivo micronucleus test using rat (Repeated dose 90-day), when tested for induction of genotoxicity in both two types of L-Arginine coated SiO2 nanoparticles. These results suggest that SiO2 nanoparticles coated with L-Arginine, in particular SiO220[R] and SiO2100[R], are not genotoxic in both in vitro and in vivo systems under OECD test guidelines. Further, the results were generated in accordance with OECD test guidelines, and Good Laboratory Practice application; it can be accepted as reliable information regarding SiO2-induced genotoxicity. Key words : Genotoxicity test, Organization for Economic Cooperation and Development test guideline, Good Laboratory Practice, SiO2
The field of nanotechnology has been growing rapidly in various industries over the last decade. Nanoparticles (NPs) refer to compounds or particles with ranging between 1 and 100 nanometers. Products made from NPs are already commercially used in the fields of biology, biotechnology, and medicine, including use in drug delivery, tissue engineering, tumor destruction, and biosensing. However, nanoparticles may be hazardous to human health because of their unusual physicochemical properties, eg, small size, high surface to volume ratio, chemical composition, crystallinity, electronic properties, surface structure reactivity and functional groups, inorganic or organic coatings, solubility, shape, and aggregation behavior. Several nanotoxicology reports have proposed that nanoparticle causes a dose-dependent cytotoxicity in Cell lines. However, results of some studies were shown the opposite result. Nanoparticle related studies reported that differences were generated by the size and surface charge of the specific nanoparticles. In the present study, four genotoxicity tests were conducted with well characterized L-Arginine-coated SiO2 nanoparticles 20 nm(SiO 20[R]) and 100 nm (SiO2100[R]) in size, each having a negative and positive surface charge. The genotoxicity of SiO2 was evaluated using two types of well L-Arginine-coated characterized SiO2. Four end point genotoxicity tests, ie, the bacterial mutation assay, in vitro chromosomal aberration test, micronucleus test using mouse and micronucleus test using rat (Repeated dose 90-day) were conducted following the test guidelines of the Organization for Economic Cooperation and Development (OECD) with application of Good Laboratory Practice. No statistically significant differences were found in the bacterial mutation assay, in vitro chromosomal aberration test, in vivo micronucleus test and in vivo micronucleus test using rat (Repeated dose 90-day), when tested for induction of genotoxicity in both two types of L-Arginine coated SiO2 nanoparticles. These results suggest that SiO2 nanoparticles coated with L-Arginine, in particular SiO220[R] and SiO2100[R], are not genotoxic in both in vitro and in vivo systems under OECD test guidelines. Further, the results were generated in accordance with OECD test guidelines, and Good Laboratory Practice application; it can be accepted as reliable information regarding SiO2-induced genotoxicity. Key words : Genotoxicity test, Organization for Economic Cooperation and Development test guideline, Good Laboratory Practice, SiO2
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