본 연구는 그라비올라 잎 추출물의 안전성과 생리활성을 연구하여 기능성 화장품 소재 연구의 기초자료를 제공하고자 하였으며 다음과 같은 방법으로 실시하였다. 그라비올라 잎을 열수 추출하여 추출 온도에 따른 수율과 총 폴리페놀 함량, 플라보노이드 함량을 측정하였고 DPPH radical 소거능으로 ...
본 연구는 그라비올라 잎 추출물의 안전성과 생리활성을 연구하여 기능성 화장품 소재 연구의 기초자료를 제공하고자 하였으며 다음과 같은 방법으로 실시하였다. 그라비올라 잎을 열수 추출하여 추출 온도에 따른 수율과 총 폴리페놀 함량, 플라보노이드 함량을 측정하였고 DPPH radical 소거능으로 항산화 활성을 평가하고, 항균 활성과 그라비올라 잎 추출물 속 유리당, 유기산 및 구성 아미노산, 유리 아미노산 성분을 분석하였으며 MTT assay로 세포 생존율을 확인하였다. 그 결과 그라비올라 잎 300 g을 6시간 동안 60℃, 80℃ 및 98℃ 온도에서 열수 추출하여 각각 3.0%, 14.7%, 20.8%의 수율을 얻었다. 그라비올라 잎 추출물에서 폴리페놀 함량은 60℃에서 110.2±14.65 µg/mg, 80℃에서 215.6±2.81 µg/mg, 98℃에서 292.0±2.39 µg/mg이었고, 플라보노이드 함량은 60℃에서 163.8±4.63 µg/mg, 80℃에서 171.3±9.29 µg/mg, 98℃에서 161.0±7.85 µg/mg이었다. DPPH radical 소거능은 추출물 농도 중 3 mg/mL에서 가장 높았고, 이 농도의 60℃, 80℃, 98℃ 추출물의 radical 소거능은 각각 70.4%, 77.9%, 86.1% 이었다. 98℃ 추출물이 전반적으로 소거능이 가장 우수했다. 그라비올라 잎 추출물의 S. epidermidis, E. coli, S. aureus, S. mutans에 대한 항균 활성은 한천배지 확산법을 이용하여 확인하였다. 60℃, 80℃, 98℃ 온도별로 추출한 추출물을 1, 200, 500 mg/mL 추출물 농도 중 98℃ 추출물이 S. epidermidis 에서만 항균 활성이 나타났고, 200 mg/mL에서 13 mm, 500 mg/mL에서 20 mm 항균존을 확인하였으며, 그 외 균주와 추출물 농도에서는 항균력을 보이지 않았다. 98℃ 추출물의 농도에 따른 S. epidermidis의 생육을 저해하는데 필요한 최소 억제 농도는 15 ~ 100 mg/mL의 농도까지 균의 성장을 억제하지 못하였고 125 mg/mL부터 500ml/mL까지 균의 성장을 억제하였며 MIC (Minimum Inhibitory Concentration)은 125 mg/mL임을 확인할 수 있었다. HPLC에 의한 성분 분석 결과 유리당의 함량은 100 g당 fructose가 7,293.50 mg, 총 유기산 함량은 100 g당 citric acid는 11,466.11 mg, malic acid 4,193.21 mg, tartaric acid 715.27 mg이 다량 검출되었다. 총 구성 아미노산 함량이 100 g당 proline이 3,326.917 mg, 총 유리 아미노산의 함량은 1,533.868 mg로 총 39종 아미노산 분석 중 23종의 아미노산이 검출되었으며 citrulline 367.002 mg 가장 많았다. 인간 진피 섬유아세포 HDF cell과 구강 편평상피세포 KB cell에 대한 세포 독성은 그라비올라 잎 추출물을 처리하지 않은 세포를 100%로 하였을 때 추출물 농도 1 ~ 150 mg/mL에서 농도별 HDF 세포에서 세포 생존율이 95% ~ 202%의 범위로 측정되었고, KB 세포는 농도별 세포 생존율이 58% ~ 118%의 범위로 측정되었다. 본 연구결과 98℃ 열수 추출물은 S. epidermidis 에서 성장을 억제하는 우수한 항균 활성을 가지고 있었으며, 이는 천연물속 함유된 천연 항균 성분으로써 항생제 내성에 대한 문제점 해결 방안을 제공할 수 있으며, 그라비올라 잎 추출물이 가지고 있는 HDF 세포와 KB 세포에서의 우수한 세포 생존율과 항산화 활성에 대한 연구가 지속 보완된다면 향후 피부미용 기초 자료와 화장품 재료로써 좋은 기초 자료가 될 것으로 생각한다.
본 연구는 그라비올라 잎 추출물의 안전성과 생리활성을 연구하여 기능성 화장품 소재 연구의 기초자료를 제공하고자 하였으며 다음과 같은 방법으로 실시하였다. 그라비올라 잎을 열수 추출하여 추출 온도에 따른 수율과 총 폴리페놀 함량, 플라보노이드 함량을 측정하였고 DPPH radical 소거능으로 항산화 활성을 평가하고, 항균 활성과 그라비올라 잎 추출물 속 유리당, 유기산 및 구성 아미노산, 유리 아미노산 성분을 분석하였으며 MTT assay로 세포 생존율을 확인하였다. 그 결과 그라비올라 잎 300 g을 6시간 동안 60℃, 80℃ 및 98℃ 온도에서 열수 추출하여 각각 3.0%, 14.7%, 20.8%의 수율을 얻었다. 그라비올라 잎 추출물에서 폴리페놀 함량은 60℃에서 110.2±14.65 µg/mg, 80℃에서 215.6±2.81 µg/mg, 98℃에서 292.0±2.39 µg/mg이었고, 플라보노이드 함량은 60℃에서 163.8±4.63 µg/mg, 80℃에서 171.3±9.29 µg/mg, 98℃에서 161.0±7.85 µg/mg이었다. DPPH radical 소거능은 추출물 농도 중 3 mg/mL에서 가장 높았고, 이 농도의 60℃, 80℃, 98℃ 추출물의 radical 소거능은 각각 70.4%, 77.9%, 86.1% 이었다. 98℃ 추출물이 전반적으로 소거능이 가장 우수했다. 그라비올라 잎 추출물의 S. epidermidis, E. coli, S. aureus, S. mutans에 대한 항균 활성은 한천배지 확산법을 이용하여 확인하였다. 60℃, 80℃, 98℃ 온도별로 추출한 추출물을 1, 200, 500 mg/mL 추출물 농도 중 98℃ 추출물이 S. epidermidis 에서만 항균 활성이 나타났고, 200 mg/mL에서 13 mm, 500 mg/mL에서 20 mm 항균존을 확인하였으며, 그 외 균주와 추출물 농도에서는 항균력을 보이지 않았다. 98℃ 추출물의 농도에 따른 S. epidermidis의 생육을 저해하는데 필요한 최소 억제 농도는 15 ~ 100 mg/mL의 농도까지 균의 성장을 억제하지 못하였고 125 mg/mL부터 500ml/mL까지 균의 성장을 억제하였며 MIC (Minimum Inhibitory Concentration)은 125 mg/mL임을 확인할 수 있었다. HPLC에 의한 성분 분석 결과 유리당의 함량은 100 g당 fructose가 7,293.50 mg, 총 유기산 함량은 100 g당 citric acid는 11,466.11 mg, malic acid 4,193.21 mg, tartaric acid 715.27 mg이 다량 검출되었다. 총 구성 아미노산 함량이 100 g당 proline이 3,326.917 mg, 총 유리 아미노산의 함량은 1,533.868 mg로 총 39종 아미노산 분석 중 23종의 아미노산이 검출되었으며 citrulline 367.002 mg 가장 많았다. 인간 진피 섬유아세포 HDF cell과 구강 편평상피세포 KB cell에 대한 세포 독성은 그라비올라 잎 추출물을 처리하지 않은 세포를 100%로 하였을 때 추출물 농도 1 ~ 150 mg/mL에서 농도별 HDF 세포에서 세포 생존율이 95% ~ 202%의 범위로 측정되었고, KB 세포는 농도별 세포 생존율이 58% ~ 118%의 범위로 측정되었다. 본 연구결과 98℃ 열수 추출물은 S. epidermidis 에서 성장을 억제하는 우수한 항균 활성을 가지고 있었으며, 이는 천연물속 함유된 천연 항균 성분으로써 항생제 내성에 대한 문제점 해결 방안을 제공할 수 있으며, 그라비올라 잎 추출물이 가지고 있는 HDF 세포와 KB 세포에서의 우수한 세포 생존율과 항산화 활성에 대한 연구가 지속 보완된다면 향후 피부미용 기초 자료와 화장품 재료로써 좋은 기초 자료가 될 것으로 생각한다.
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