본 연구는 인플루엔자 백신에 대한 규제과학의 관점에서 수행되었다. 단일방사면역확산 (SRID) 방법은 인플루엔자 바이러스의 표면항원인 헤마글루티닌 (HA) 함량을 측정하는 표준 시험방법이다. SRID 방법은 일관성 있는 백신 제조 및 품질관리 측면에서 시험자의 숙련도가 매우 중요하다. 이 연구의 첫 번째 부분에서는 인플루엔자 백신의 함량 시험법에 대하여 국내 제조사들과 국가 실험실 (NCL) 간의 숙련도 평가를 진행하였다. SRID 시험에 대한 숙련도 평가에는 NCL을 포함하여 8개의 실험실이 참여하였으며, SRID 시험 전반에 대한 숙련도 시험 결과는 모든 실험실에서 만족이었다. 반면, 타 실험실에서 제조한 다른 유형의 ...
본 연구는 인플루엔자 백신에 대한 규제과학의 관점에서 수행되었다. 단일방사면역확산 (SRID) 방법은 인플루엔자 바이러스의 표면항원인 헤마글루티닌 (HA) 함량을 측정하는 표준 시험방법이다. SRID 방법은 일관성 있는 백신 제조 및 품질관리 측면에서 시험자의 숙련도가 매우 중요하다. 이 연구의 첫 번째 부분에서는 인플루엔자 백신의 함량 시험법에 대하여 국내 제조사들과 국가 실험실 (NCL) 간의 숙련도 평가를 진행하였다. SRID 시험에 대한 숙련도 평가에는 NCL을 포함하여 8개의 실험실이 참여하였으며, SRID 시험 전반에 대한 숙련도 시험 결과는 모든 실험실에서 만족이었다. 반면, 타 실험실에서 제조한 다른 유형의 아가로스 겔 플레이트를 측정한 시험에서는 몇 개의 불만족 결과가 있었다. 이러한 결과를 종합하여 볼 때, 시험에 참여한 실험실들의 SRID 시험 숙련도가 인플루엔자 백신 품질관리에 적합하다는 것과, 백신 품질관리 강화를 위한 규제의 측면에서 시험방법 변경 시 검증 보고서를 자세히 검토할 필요가 있음을 증명하였다. 백신과 같은 생물학적제제의 시험에는 적절한 표준물질의 사용이 필수적이나, 인플루엔자 백신의 HA 함량시험을 위한 표준물질은 WHO에서 제공하는 국제 표준품만을 사용하고 있다. 유정란 배양 방식으로 생산되는 국제표준품은 생산 및 분양에 소요되는 기간이 길어 갑작스러운 인플루엔자 대유행 상황에서 신속한 백신 개발에 장애요인이 되고 있다. 이 연구의 두 번째 부분에서는 SRID 시험에 필요한 표준물질을 재조합 항원을 생산하여 대체할 수 있는 지 시험해보았다. 전통적 방법인 유정란 생산 방식이 아닌 유전자 재조합 방법인 baculovirus expression system (BEVS)을 이용하여 HA 단백질을 생산하였다. 재조합 HA (rHA) 항원을 대체 표준품으로 사용하여 실제 백신의 HA 함량시험을 측정하기 위한 SRID 시험에 적용해보았다. 그 결과 인플루엔자 백신의 HA 함량을 구할 수 있었으며, 이는 rHA 단백질이 대체 표준품으로 활용될 수 있음을 의미한다. rHA의 사용은 표준품 생산에 필요한 시간을 단축시켜 인플루엔자 대유행과 같은 긴급 상황에서 백신의 적기 도입을 촉진할 수 있을 것이다. 본 연구를 통해 얻은 실험 결과들은 국내 인플루엔자 백신의 관리에 유용하게 활용될 수 있을 것이다.
본 연구는 인플루엔자 백신에 대한 규제과학의 관점에서 수행되었다. 단일방사면역확산 (SRID) 방법은 인플루엔자 바이러스의 표면항원인 헤마글루티닌 (HA) 함량을 측정하는 표준 시험방법이다. SRID 방법은 일관성 있는 백신 제조 및 품질관리 측면에서 시험자의 숙련도가 매우 중요하다. 이 연구의 첫 번째 부분에서는 인플루엔자 백신의 함량 시험법에 대하여 국내 제조사들과 국가 실험실 (NCL) 간의 숙련도 평가를 진행하였다. SRID 시험에 대한 숙련도 평가에는 NCL을 포함하여 8개의 실험실이 참여하였으며, SRID 시험 전반에 대한 숙련도 시험 결과는 모든 실험실에서 만족이었다. 반면, 타 실험실에서 제조한 다른 유형의 아가로스 겔 플레이트를 측정한 시험에서는 몇 개의 불만족 결과가 있었다. 이러한 결과를 종합하여 볼 때, 시험에 참여한 실험실들의 SRID 시험 숙련도가 인플루엔자 백신 품질관리에 적합하다는 것과, 백신 품질관리 강화를 위한 규제의 측면에서 시험방법 변경 시 검증 보고서를 자세히 검토할 필요가 있음을 증명하였다. 백신과 같은 생물학적제제의 시험에는 적절한 표준물질의 사용이 필수적이나, 인플루엔자 백신의 HA 함량시험을 위한 표준물질은 WHO에서 제공하는 국제 표준품만을 사용하고 있다. 유정란 배양 방식으로 생산되는 국제표준품은 생산 및 분양에 소요되는 기간이 길어 갑작스러운 인플루엔자 대유행 상황에서 신속한 백신 개발에 장애요인이 되고 있다. 이 연구의 두 번째 부분에서는 SRID 시험에 필요한 표준물질을 재조합 항원을 생산하여 대체할 수 있는 지 시험해보았다. 전통적 방법인 유정란 생산 방식이 아닌 유전자 재조합 방법인 baculovirus expression system (BEVS)을 이용하여 HA 단백질을 생산하였다. 재조합 HA (rHA) 항원을 대체 표준품으로 사용하여 실제 백신의 HA 함량시험을 측정하기 위한 SRID 시험에 적용해보았다. 그 결과 인플루엔자 백신의 HA 함량을 구할 수 있었으며, 이는 rHA 단백질이 대체 표준품으로 활용될 수 있음을 의미한다. rHA의 사용은 표준품 생산에 필요한 시간을 단축시켜 인플루엔자 대유행과 같은 긴급 상황에서 백신의 적기 도입을 촉진할 수 있을 것이다. 본 연구를 통해 얻은 실험 결과들은 국내 인플루엔자 백신의 관리에 유용하게 활용될 수 있을 것이다.
This study was performed from the perspective of regulatory science for influenza virus vaccine. The single radial immunodiffusion (SRID) assay has been used as a standard method to measure the content of hemagglutinin (HA), a surface antigen of influenza virus, and the proficiency of SRID assay is ...
This study was performed from the perspective of regulatory science for influenza virus vaccine. The single radial immunodiffusion (SRID) assay has been used as a standard method to measure the content of hemagglutinin (HA), a surface antigen of influenza virus, and the proficiency of SRID assay is essential in terms of consistent vaccine manufacturing and quality control (QC). In the first part of this study, the proficiency was evaluated for content test method of the influenza vaccine between domestic manufacturers and National control laboratory (NCL). SRID assays were performed by eight laboratories participated in this study including NCL, and the proficiency of the assay was tested. The proficiency of all laboratories yielded satisfactory results in overall SRID assays. In contrast, there were some unsatisfactory results in measuring with different types of agarose gel plates produced by other laboratories. Overall, these findings demonstrated that the proficiency of SRID assay in the tested laboratories is acceptable for quality control of influenza vaccines and that detailed review on the validation reports regarding the test methods will be helpful for better control. Because appropriate reference standard materials are pivotal for the testing of biological products such as vaccines, the international standards provided by World Health Organization (WHO) are only used for the reference material for HA content testing of influenza vaccine. It may slow the emergency deployment of vaccines, so alternatives are needed. In the second part of this study, it was tested whether reference materials for SRID assay could be replaced by recombinant protein antigen. HA proteins were produced using baculovirus expression system (BEVS) as a recombinant DNA technology rather than a traditional egg-based production process. The recombinant HA (rHA) protein was applied to the measurement of actual HA content of vaccine as an alternative reference antigen for SRID assay. The result showed that the content of HA in influenza vaccines can be successfully quantified, suggesting the potential of the rHA protein as an alternative reference material. The use of rHA may reduce the time required to produce reference materials and facilitate timely introduction of vaccines during emergencies such as the influenza pandemic situation. Taken together, these results may contribute to the efficacious management of the influenza vaccines in Korea.
This study was performed from the perspective of regulatory science for influenza virus vaccine. The single radial immunodiffusion (SRID) assay has been used as a standard method to measure the content of hemagglutinin (HA), a surface antigen of influenza virus, and the proficiency of SRID assay is essential in terms of consistent vaccine manufacturing and quality control (QC). In the first part of this study, the proficiency was evaluated for content test method of the influenza vaccine between domestic manufacturers and National control laboratory (NCL). SRID assays were performed by eight laboratories participated in this study including NCL, and the proficiency of the assay was tested. The proficiency of all laboratories yielded satisfactory results in overall SRID assays. In contrast, there were some unsatisfactory results in measuring with different types of agarose gel plates produced by other laboratories. Overall, these findings demonstrated that the proficiency of SRID assay in the tested laboratories is acceptable for quality control of influenza vaccines and that detailed review on the validation reports regarding the test methods will be helpful for better control. Because appropriate reference standard materials are pivotal for the testing of biological products such as vaccines, the international standards provided by World Health Organization (WHO) are only used for the reference material for HA content testing of influenza vaccine. It may slow the emergency deployment of vaccines, so alternatives are needed. In the second part of this study, it was tested whether reference materials for SRID assay could be replaced by recombinant protein antigen. HA proteins were produced using baculovirus expression system (BEVS) as a recombinant DNA technology rather than a traditional egg-based production process. The recombinant HA (rHA) protein was applied to the measurement of actual HA content of vaccine as an alternative reference antigen for SRID assay. The result showed that the content of HA in influenza vaccines can be successfully quantified, suggesting the potential of the rHA protein as an alternative reference material. The use of rHA may reduce the time required to produce reference materials and facilitate timely introduction of vaccines during emergencies such as the influenza pandemic situation. Taken together, these results may contribute to the efficacious management of the influenza vaccines in Korea.
주제어
#influenza vaccine quality control HA content SRID assay proficiency influenza pandemic alternative reference material recombinant HA
학위논문 정보
저자
최예진
학위수여기관
충북대학교
학위구분
국내박사
학과
생화학과 생화학및분자생물학전공
지도교수
이영희
발행연도
2018
총페이지
x,94 p.
키워드
influenza vaccine quality control HA content SRID assay proficiency influenza pandemic alternative reference material recombinant HA
AI-Helper
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.