인간배아줄기세포를 이용한 유전자치료의 효능을 높이는 좋은 전략은 바이러스 벡터를 이용한 인간배아줄기세포의 형질전환이다. 다양한 바이러스 벡터들 중에서 렌티바이러스벡터는 많은 장점들 때문에 유전자 전달 시스템에 주로 사용된다. 렌티바이러스 벡터는 효율적으로 분열세포와 비분열세포 모두 감염이 가능하며 안정적인 유전자 발현을 보여준다. 바이러스의 ...
인간배아줄기세포를 이용한 유전자치료의 효능을 높이는 좋은 전략은 바이러스 벡터를 이용한 인간배아줄기세포의 형질전환이다. 다양한 바이러스 벡터들 중에서 렌티바이러스벡터는 많은 장점들 때문에 유전자 전달 시스템에 주로 사용된다. 렌티바이러스 벡터는 효율적으로 분열세포와 비분열세포 모두 감염이 가능하며 안정적인 유전자 발현을 보여준다. 바이러스의 프로모터는 유전자발현에 영향을 주기 때문에 적절한 프로모터를 선정하는 것은 세포 내 외부 유전자발현을 최적화하기 위해 중요하다. 세포종류에 따른 적절한 프로모터를 평가하기 위해 인간배아줄기세포를 포함한 다양한 세포주(HeLa, Jurkat, NIH3T3, NK92)에서 세가지 프로모터(CMV, EF1 alpha, PGK)를 실험하였다. 실제로 각 프로모터들은 다른 세포주에서 다른 GFP 발현을 보여주었다. 특히 인간배아줄기세포의 경우, 단기간동안 EF1α와 PGK 프로모터가 높은 GFP 발현을 나타냈으며, CMV 프로모터는 낮은 GFP 발현을 보여주었다. EF1α 프로모터를 가진 렌티바이러스 벡터는 PGK와 CMV 프로모터 보다 인간배아줄기세포에서 30일 동안 높고 안정적인 GFP 발현을 보였다. 이러한 결과들을 봤을 때, 인간배아줄기세포에서 단·장기간동안 가장 적합한 렌티바이러스 프로모터는 EF1α 프로모터이다.
인간배아줄기세포를 이용한 유전자치료의 효능을 높이는 좋은 전략은 바이러스 벡터를 이용한 인간배아줄기세포의 형질전환이다. 다양한 바이러스 벡터들 중에서 렌티바이러스 벡터는 많은 장점들 때문에 유전자 전달 시스템에 주로 사용된다. 렌티바이러스 벡터는 효율적으로 분열세포와 비분열세포 모두 감염이 가능하며 안정적인 유전자 발현을 보여준다. 바이러스의 프로모터는 유전자발현에 영향을 주기 때문에 적절한 프로모터를 선정하는 것은 세포 내 외부 유전자발현을 최적화하기 위해 중요하다. 세포종류에 따른 적절한 프로모터를 평가하기 위해 인간배아줄기세포를 포함한 다양한 세포주(HeLa, Jurkat, NIH3T3, NK92)에서 세가지 프로모터(CMV, EF1 alpha, PGK)를 실험하였다. 실제로 각 프로모터들은 다른 세포주에서 다른 GFP 발현을 보여주었다. 특히 인간배아줄기세포의 경우, 단기간동안 EF1α와 PGK 프로모터가 높은 GFP 발현을 나타냈으며, CMV 프로모터는 낮은 GFP 발현을 보여주었다. EF1α 프로모터를 가진 렌티바이러스 벡터는 PGK와 CMV 프로모터 보다 인간배아줄기세포에서 30일 동안 높고 안정적인 GFP 발현을 보였다. 이러한 결과들을 봤을 때, 인간배아줄기세포에서 단·장기간동안 가장 적합한 렌티바이러스 프로모터는 EF1α 프로모터이다.
Transforming human embryonic stem cells (hESCs) by viral vector system is well adopted strategy for enhancing the efficiency of hESCs based gene therapy. Among the various viral vectors, lentiviral vector is mainly used for gene delivery system due to many advantages. Lentiviral vector transduces ef...
Transforming human embryonic stem cells (hESCs) by viral vector system is well adopted strategy for enhancing the efficiency of hESCs based gene therapy. Among the various viral vectors, lentiviral vector is mainly used for gene delivery system due to many advantages. Lentiviral vector transduces efficiently dividing or non-dividing cells and has stable transgene expression. Since promoters affect level of gene expression, choosing proper promoter is important for optimizing exogenous gene expression in cells. Three different promoters (CMV, EF1 alpha and PGK) were tested in different cell types (HeLa, Jurkat, NIH3T3 and NK92) including hESCs for assessing proper promoter in each cell type. Indeed, each promoter showed different GFP expression in different cell types. Especially, in case of hESCs, the EF1α and PGK promoters drove high GFP expression, while CMV promoter induced very low level of GFP expression for the short term. The lentiviral vectors containing EF1α showed high-level of stable GFP expression in hESCs for 30 days after transduction. Therefore, these observations suggest that proper promoter in hESCs for both the short and long term is EF1α promoter.
Transforming human embryonic stem cells (hESCs) by viral vector system is well adopted strategy for enhancing the efficiency of hESCs based gene therapy. Among the various viral vectors, lentiviral vector is mainly used for gene delivery system due to many advantages. Lentiviral vector transduces efficiently dividing or non-dividing cells and has stable transgene expression. Since promoters affect level of gene expression, choosing proper promoter is important for optimizing exogenous gene expression in cells. Three different promoters (CMV, EF1 alpha and PGK) were tested in different cell types (HeLa, Jurkat, NIH3T3 and NK92) including hESCs for assessing proper promoter in each cell type. Indeed, each promoter showed different GFP expression in different cell types. Especially, in case of hESCs, the EF1α and PGK promoters drove high GFP expression, while CMV promoter induced very low level of GFP expression for the short term. The lentiviral vectors containing EF1α showed high-level of stable GFP expression in hESCs for 30 days after transduction. Therefore, these observations suggest that proper promoter in hESCs for both the short and long term is EF1α promoter.
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