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문제 정의
- 1973) 본 실험에서는 이 두 효소의 활성을 동시에 측정해 헛개나무의 알콜분해능에 대한 종합적인 설명이 가능하도록했다. 따라서 본 논문은 헛개나무 열매의 주요 기능의 하나인 알콜 분해 능의 촉진에 초점을 맞춰 강원도 양양산과 중국산과의 체내에서 알콜 분해능 및 간 기능 개선 등의 활성 차이를 비교해 식 품으로 사용 시 활용 자료로 제공하고자 한다.
- 하지만 이 acetaldehyde는 숙취의 주 원인 물질로 추가 대사 과정을 통해 분해되지 않고 혈액내 그대로 존재하면 결국은 숙취 현상이 심해지므로, 이 물질의 분해에 직접적인 역할을 하는 aldehyde dehydrogenase (ALDH)의 효소 활성도 반드시 측정되어야 헛개나무 추출물이 물질의 체내 알콜 분해 및 숙취해소 제거에 도움을 주는지를 정확히 알 수 있으므로 (Tottmar et al. 1973) 본 실험에서는 이 두 효소의 활성을 동시에 측정해 헛개나무의 알콜분해능에 대한 종합적인 설명이 가능하도록했다. 따라서 본 논문은 헛개나무 열매의 주요 기능의 하나인 알콜 분해 능의 촉진에 초점을 맞춰 강원도 양양산과 중국산과의 체내에서 알콜 분해능 및 간 기능 개선 등의 활성 차이를 비교해 식 품으로 사용 시 활용 자료로 제공하고자 한다.
제안 방법
- 1% CMC 10ml 에 현탁 된 시료를 각 쥐에 경구 투여했다. 30 분 후에 순수 ethanol을 증류수에 8 mg/ml 의 농도로 희석시켜 4g/Kg의 농도로 각 실험 군에 경구 투여하였다. Ethanol 이나 시료를 투여하지 않은 경우를 control로 하여 ethanol 만 투여한 군, 양양산헛개나무 조 추출액(D-CE) 및 분획물 (D-PE)과 ethanol을 투여 한 군, 중국산헛개 나무 조 추출물 (I-CE) 및 분획물(I-PE)과 ethanol을 투여한 군으로 하여 실험했다.
- 30 분 후에 순수 ethanol을 증류수에 8 mg/ml 의 농도로 희석시켜 4g/Kg의 농도로 각 실험 군에 경구 투여하였다. Ethanol 이나 시료를 투여하지 않은 경우를 control로 하여 ethanol 만 투여한 군, 양양산헛개나무 조 추출액(D-CE) 및 분획물 (D-PE)과 ethanol을 투여 한 군, 중국산헛개 나무 조 추출물 (I-CE) 및 분획물(I-PE)과 ethanol을 투여한 군으로 하여 실험했다. 각각의 실험 군을 ethanol 투여 직후, 1시간, 2 시간, 4시간 후에 안와 정맥으로부터 2ml 의 혈액을 채취했다.
- 각 추출물들의 알콜 분해 정도를 측정하기위해 두 가지 방법으로 실험했다. 한가지는 쥐를 이용한 혈중 알콜 농도의 감소 속도를 측정 했으며 다른 하나는 인간을 대상으로 호기혈중 알콜 농도의 양을 측정 했다.
- Ethanol 이나 시료를 투여하지 않은 경우를 control로 하여 ethanol 만 투여한 군, 양양산헛개나무 조 추출액(D-CE) 및 분획물 (D-PE)과 ethanol을 투여 한 군, 중국산헛개 나무 조 추출물 (I-CE) 및 분획물(I-PE)과 ethanol을 투여한 군으로 하여 실험했다. 각각의 실험 군을 ethanol 투여 직후, 1시간, 2 시간, 4시간 후에 안와 정맥으로부터 2ml 의 혈액을 채취했다. 채취된 혈액을 4P에서 3000rpm 으로 10 분간 원심 분리 를 통해 혈청을 분리해 ethanol 분석 kit (Sigma, USA)를 이용해 혈액 내 알콜 양을 측정했다.
- 간의 중요 해독 기전 중의 하나인 GST(Gultathion-S-Transferase)의 활성을 측정 하였다. Mohn (1981)의 방법 과 같이 조제 된 반응 시 약에 대조구로 추출물이 제외된 반응 액을 대조구로 하였으며, 각 추출물을 농도별로 첨가하여 37 ℃에서 5분간 반응시킨 다음 기질로서 l-chloro-2, 4-dinitrobenzene을 첨가한 후 다시 37 ℃에서 2분간 반응시켰다.
- 이 조시료의 추출 수율은 건조 시료에 대해 27% 로 측정되었다. 또한 이 추출물들을 diethyl ether와 증류수가 1 : 1 (v/ V)로 섞인 용매 1000 ml/] 동결 건조된 각 추출물을 5 g로 넣은 후 분획 깔대기에서 48시간 정치하는 방법으로 3회 반복해 얻어진 ether 층을 동결 건조를 통해 분획물 (partitioned extract, PE) 을 얻 었다. 분획 중 ether 층은 15%의 추출 수율을 갖고 있었으며 물층은 약 8 % 였으며 초기 활성 실험에서 물층에서는 그 효과가 거의 없어 이후 본 실험의 활성 측정에 사용되지 않았다.
- Mohn (1981)의 방법 과 같이 조제 된 반응 시 약에 대조구로 추출물이 제외된 반응 액을 대조구로 하였으며, 각 추출물을 농도별로 첨가하여 37 ℃에서 5분간 반응시킨 다음 기질로서 l-chloro-2, 4-dinitrobenzene을 첨가한 후 다시 37 ℃에서 2분간 반응시켰다. 반응 후 20% TCA를 가하여 반응을 종결시키고 원심분리 한 후 상등액을 340nm에서 흡광도를 측정한 뒤 다음과 같이 GST의 활성도를 계산하였다.
- 이후 같은 방법으로 매시 간 마다 호흡 측정 기 를 이 용해 알콜 양을 측정해 평 균치를 산출했다. 실험 군은 아무 것도 마시지 않고 실험한 대조군과 두 종의 헛개나무 조 추출물 및 분획물을 알콜과 섭취한 군으로 나눠 측정 했다.
- 복강 투여해 마취시켰다. 앞에서 추출 농축된 각 분말 5 g을 0.1% CMC 10ml 에 현탁 된 시료를 각 쥐에 경구 투여했다. 30 분 후에 순수 ethanol을 증류수에 8 mg/ml 의 농도로 희석시켜 4g/Kg의 농도로 각 실험 군에 경구 투여하였다.
- 우선 쥐를 이용한 실험에서는 무게가 300인 실험용 쥐(Spargue-Dawley, CD strain) 각 10 마리를 한 군으로 하여 1 일간 절식 후 실험 개시 30 분전에 300 mg/Kg 의 urethane 을 복강 투여해 마취시켰다. 앞에서 추출 농축된 각 분말 5 g을 0.
- 시료 섭취 후 1시간 동안 안정한 상태로 있다가 지난 실험과 동일한 술 3ml/Kg 마시게 했다. 이후 같은 방법으로 매시 간 마다 호흡 측정 기 를 이 용해 알콜 양을 측정해 평 균치를 산출했다. 실험 군은 아무 것도 마시지 않고 실험한 대조군과 두 종의 헛개나무 조 추출물 및 분획물을 알콜과 섭취한 군으로 나눠 측정 했다.
- 인간을 대상으로 하는 실험에서는 동일 인을 매일 시간별로 혈액 채취가 어려워 시판되는 호흡용 알콜 측정기(Alcon AL-2000, Korea)를 사용해 혈중 알콜 양을 측정했다. 사용된 기기의 정확도는 혈중 알콜 농도의 오차 범위는 혈액 채취를 통한 측정치와 비교해 ±0.
- 각각의 실험 군을 ethanol 투여 직후, 1시간, 2 시간, 4시간 후에 안와 정맥으로부터 2ml 의 혈액을 채취했다. 채취된 혈액을 4P에서 3000rpm 으로 10 분간 원심 분리 를 통해 혈청을 분리해 ethanol 분석 kit (Sigma, USA)를 이용해 혈액 내 알콜 양을 측정했다. 마지막 채혈 후 즉시간을 적출 해 4P에서 5 배의 0.
- 실험했다. 첫날은 시판되는 양주(알콜농도 43o 제품) 을 3ml/Kg 의 양만을 섭취하게한 후 매 시간마다 호흡 측정기를 이용해 혈중 알콜 양을 재 평균치를 계산했다. 하루를 쉰 후 같은 시간에 동일한 40 명의 사람을 4 군으로 나누어 각 시료 50 g 을 100 m의 증류수에 용해 시 켜 1.
- 첫날은 시판되는 양주(알콜농도 43o 제품) 을 3ml/Kg 의 양만을 섭취하게한 후 매 시간마다 호흡 측정기를 이용해 혈중 알콜 양을 재 평균치를 계산했다. 하루를 쉰 후 같은 시간에 동일한 40 명의 사람을 4 군으로 나누어 각 시료 50 g 을 100 m의 증류수에 용해 시 켜 1. 5 ml/kg 의 양으로 음주 1 시 간 전에 마시게 했다.
대상 데이터
- 성인 남자 (연령 분포 19-30 tp 50 명을 각 5 군으로 나누어 (각 군단 10인 기준) 3 일에 걸쳐 실험했다. 첫날은 시판되는 양주(알콜농도 43o 제품) 을 3ml/Kg 의 양만을 섭취하게한 후 매 시간마다 호흡 측정기를 이용해 혈중 알콜 양을 재 평균치를 계산했다.
- 이런 현상이 사람의 호기 알콜 농도에서도 유사한 경향을 나타내는 지 를 확인하기 위해성인 남자 50 명을 대상으로 실험 한 한 결과가 Fig. 1 이다. 그림의 bar는 전체적으로 약 3- 5%의 범위에서 평균 오차를 갖고 있는 것으로 나타났으며 95% 신뢰 범위 내에서 서로 유의성이 있는 것으로 확인되었다 (그림의 복잡성으로 인해 표기하지 않았음).
데이터처리
- 각 실험 결과들은 실험 군에서 최대치와 최소치를 제외한 자료들의 평균을 계산했으며 각 평균치 간의 차이는 student t-test 에 의해 유의성을 검정했다.
성능/효과
- 비교해 ±0. 001% 의 오차를 나타내 매우 정확한 것으로 나타났다.
- 하지만 분획물의 경우는 그림 1 에서도 나타나듯이 양양산 추출물이 중국산보다 빠르게 감소 시키는 것을 알 수 있다. 6 시간 후 최종 알콜 농도는 유사하나 전체적인 분해 속도는 양양산이 높은 것으로 나타났으며 이는 쥐의 실험 결과와도 일치해 본 실험의 분획 방법으로는 양양산 헛개나무에 존재하는 유용 성 분의 용출 및 농축 정도가 중국산 헛개 나무 열매보다 많은 것이 아닌가 사료된다. 또는 중국산과 양양산의 내 존재하는 활성 물질의 성분이 달라 분획 시 용출 차이에 의한 알콜 분해 속도의 차이 라고 유추할 수도 있으나 이는 유용 활성 물질의 구조분석 등과 같은 보다 정확한 실험이 요구되는 사항이다.
- ADH 와 ALDH 의 활성 증진에 대한 영향을 비교한 결과 조 추출물의 경우 중국산이 양양산 보다 약간 높은 효과를 보였으나 분획물에서는 그리 큰 차이가 없거나 양양산이 다소 높은 경향을 보였다. 특이 한 것은 ADH 의 경우는 두 종의 분획물 모두 조추출물 경우 보다 50-60% 이상 활성 증진 효과가 두드러지게 나타났으나 ALDH 의 경우는 두 분획 물 모두활성 증진 이 조 추출물에 비해 10% 정도의 낮은 활성 증진 정도만 나타났다.
- 또한 헛개나무 추출물을 섭취해 알콜 분해의 limiting step 은 초기 단계 로서 생 체 로 유입되는 알콜의 1차 분해가 이루어지면 그 다음은 상대적으로 빨리 분해되므로 헛개나무열매 추출물을 알콜과 섭 취 시 기존의 알콜 섭취 속도보다 좀더 느리게 섭취하면 보다 많은 양의 알콜을 섭취해도 부담이 적게 될 수 도 있을 것으로 유추된다. ALDH 활성 증진의 경우는 중국산이 약 1% 의 높은 활성 증진 정도는 보였으나 전체적으로 두 종간의 활성 증진정도는 비슷한 것으로 나타났다. 또 Table 2의 ADH 경우 분획 물이 조추출물의 경우 보다 30% 이상 증진된 것과 비교하면 Table 3의 ALDH 의 경우는 두 종 모두 분획물의 경우 조추출물의 활성보다 그리 높게 증진되지 않는 것 으로 나타났다.
- 강원 양양산과 중국산 헛개 나무 열매와의 활성 차이를 비교하기 위해 쥐 와사람을 대상으로 생체 내 알콜 분해 속도에 대한 동력 학적 분석을 실시한 결과 양양산이 중국산에 비해 1-2 % 로 극히 적게 나마 빠른 알콜 분해 속도를 보였으며 분획물 에서도 이와 유사한 경향을 보였다. 하지만 이 정도의 차이가 두 품종 간 알콜 분해 속도에 차이가 있다고 주장하기에는 유의성이 적어 일반적으로 두 생산지의 차이 에 따른 알콜 분해 속도의 차이는 극히 미미한 것으로 나타났다.
- 1 이다. 그림의 bar는 전체적으로 약 3- 5%의 범위에서 평균 오차를 갖고 있는 것으로 나타났으며 95% 신뢰 범위 내에서 서로 유의성이 있는 것으로 확인되었다 (그림의 복잡성으로 인해 표기하지 않았음). 그림 1의 알콜 만 섭취한 경우 섭취 후 15 분 이내 측정한알콜 농도가 0.
- 182 % 로서 매우 빠르게 혈 액 속으로 흡수되는 것을 알 수 있다. 다른 네 가지 주줄물들을 섭취한 경우도 초기 알콜 농도는 알콜만 섭취한 경우와 유사한 것으로 나타나 이 추출물들이 혈액 내 알콜과 반응해 직접분해 또는 분해 효소를 활성화하는데는 약간의 시간이 소요되는 것을 알 수 있다. 알콜만 섭취한 경우는 6 시간이 지나서야 혈중 알콜양이 0.
- 하지만 이 정도의 차이가 두 품종 간 알콜 분해 속도에 차이가 있다고 주장하기에는 유의성이 적어 일반적으로 두 생산지의 차이 에 따른 알콜 분해 속도의 차이는 극히 미미한 것으로 나타났다. 두 추출물 모두 알콜만 섭취했을 경우보다 1-2 시간 정도 빠르게알콜을 분해 했으며 유용 성 분이 농축된 분획물의 경우 조 추출물보다 1-2 시간 정도 빨라 분획물을 섭취한 경우 알콜만 섭취한 경우보다 약 2 배 정도 빠른 혈중 알콜 분해 속도를 보였다.
- 하지만 전체적으로 두 품종 다 120-300% 의 효소 활성 증진에 기여하는 것으로 나타났다. 따라서 양양산과 중국산 헛개나무 열매 추출물들의 활성 차이는 통계학적으로약간의 유위성 있는 차이(약 3-5%)는 있지만 그 차이가 극히 미미해 우리가 당초 예상했던 것과 같은 현격한 차이는 없는 것으로 나타나두 산지 에서 생 산된 지 구자 나무 열 매를 이용해 식품으로 사용 시 그 효용 가치는 공히 두 경우 다 높을 것으로 사료된다.
- 막대 그래프에 유의성 및 평균치를 표기할 경우 그림의 복합성 때문에 생략했으며 실제 나타낸 그래프가 평균값으로 전체적으로 5-7% 내외의 오차를 갖고 있으며 95% 오차 범위 내에서 상호 유의성을 갖고 있는 것으로 나타났다. 따라서 헛개나무 열매가 종에 관계없이 알콜 분해 효소 활성 촉진과 간의 존재하는 해 독 효소인 GST 효소 활성을 증진시켜 숙취 해소에 긍정적인 영향을 미칠 것으로 예상된다. 이 경우도 앞의 결과들과 마찬가지로 중국산 및 양양산 두 추출물의 분획 물들이 조 추출물보다 높은 활성 증진 효과를 보이고 있으며 전체적으로 중국산 분획물이 최대 300% 정도의 높은 활성 증진 정도를 보이고 있고 국내산 분획물의 경우 최대 250% 의 활성 증진 정도를 나타냈다.
- 또한 두 품종의 분획물이 조 추출물을 섭취했을 때 낮출 수 있는 동일 알콜 농도로 낮추는데 쥐의 경우와 마찬가지로 조 추출물보다 약 1-2 시간 정도 빨리 도달하는 것을 알 수 있다. 따라서 헛개나무가 품종에 관계없이 혈중 알콜 농도를 낮추는 효과가 있으며 분획 물의 경우 이 속도가 빨라지는 것이 확인되었다. 본 실험과 같이 서로 다른 곳에서 생산된 헛개나무 열매 추출물들의 혈중 알콜 분해 속도의 비교를 통한 동력학적인 임상 자료는 매우 드문 것으로 본 결과가 헛개나무 열매의 알콜 분해 촉진에 따른 숙취제거 음료나 식 품으로의 개 발에 활용될 가치는 매우 높을 것으로 예견된다.
- 하지만 분획물의 경우는 양양산의 경우가중국산보다 약 1% 정도 높은 것으로 나타나 결국은 두 품종간 활성 차이는 거의 없는 것으로 평가되었다. 또한 ADH 효소 활성의 경우조 추출물보다 분획 물에서 약 30% 이상 높게 활성 증진이 되어 결국은 효소 활성 증진이 혈중 알콜 농도 감소로 나타나는 것으로 예측할수 있을 것이다. 하지만 숙취의 주 원인 물질인 acetaldehyde는 상기 ADH의 효소 작용에의해 생성되는 부산물로서 헛개나무 열매 추출물들이 단순히 ADH 효소만 활성화되면 혈중 알콜 농도는 빠르게 감소 시 킬 수는 있으나간이나 혈액 에 남아있는 acetaldehyde는 계속 축적이되 더 심한숙취를 일으킬 수 있는 가능성 이 있다.
- 따라서 이 경우는 두 산지별 성분의 차이 보다는 생산지 차이 따른 과피의 두께나 건조 시간 및 건조 방법 등의 차이로 인해 같은 추출 방법을 이 용했을지 라도 동일 유용성분의 용출 및 농축의 차이에 기인된 것이 보다 가능한 해석일 것이다. 또한 두 품종의 분획물이 조 추출물을 섭취했을 때 낮출 수 있는 동일 알콜 농도로 낮추는데 쥐의 경우와 마찬가지로 조 추출물보다 약 1-2 시간 정도 빨리 도달하는 것을 알 수 있다. 따라서 헛개나무가 품종에 관계없이 혈중 알콜 농도를 낮추는 효과가 있으며 분획 물의 경우 이 속도가 빨라지는 것이 확인되었다.
- 이는 헛개나무가 ADH 활성 증진에 의한 알콜 분해도 촉진시키지만 ALDH 의 활성을 좀더 증진 시 켜 빠르게 acetaldehyde를 acetic acid 로 분해시켜 숙취해소에 상당한 도움을 주는 것이 밝혀 진 것이다. 또한 헛개나무 추출물을 섭취해 알콜 분해의 limiting step 은 초기 단계 로서 생 체 로 유입되는 알콜의 1차 분해가 이루어지면 그 다음은 상대적으로 빨리 분해되므로 헛개나무열매 추출물을 알콜과 섭 취 시 기존의 알콜 섭취 속도보다 좀더 느리게 섭취하면 보다 많은 양의 알콜을 섭취해도 부담이 적게 될 수 도 있을 것으로 유추된다. ALDH 활성 증진의 경우는 중국산이 약 1% 의 높은 활성 증진 정도는 보였으나 전체적으로 두 종간의 활성 증진정도는 비슷한 것으로 나타났다.
- 전체적으로 알콜만 섭취한 경우에 비해 헛개나무 열매 추출물을 동시에 섭 취 한 경우 ADH와 ALDH 효소의 활성이 약 30-60% 이상 증가하는 것이 확인되었으며 두 효소위 활성 촉진 정도가 공히 28-29% 정도를 유지 해 ADH 와 ALDH의 활성이 생체 내에서 균형을 이루고 있음이 입증되었다. 또한 헛개나무추출물들은 ADH 보다는 ALDH 효소의 활성 에 보다 영향을 미 치는 것으로 나타나 숙취 원인 물질인 acetaldehyde의 제거에 효과적 일 것이 라는 평가가 가능하다. 이와 함께 간의 해독 작용 촉진 정도를 비교한 결과 중국산 헛개나무 추출물이 양양산 보다 상대적으로 좋은 것으로 나타났다.
- 2 로서 네 가지 경우 다 투여 농도가 증가할수록 GST 의 활성 증진에 효과가 있는 것으로 나타났다. 막대 그래프에 유의성 및 평균치를 표기할 경우 그림의 복합성 때문에 생략했으며 실제 나타낸 그래프가 평균값으로 전체적으로 5-7% 내외의 오차를 갖고 있으며 95% 오차 범위 내에서 상호 유의성을 갖고 있는 것으로 나타났다. 따라서 헛개나무 열매가 종에 관계없이 알콜 분해 효소 활성 촉진과 간의 존재하는 해 독 효소인 GST 효소 활성을 증진시켜 숙취 해소에 긍정적인 영향을 미칠 것으로 예상된다.
- 따라서 헛개나무 열매가 종에 관계없이 알콜 분해 효소 활성 촉진과 간의 존재하는 해 독 효소인 GST 효소 활성을 증진시켜 숙취 해소에 긍정적인 영향을 미칠 것으로 예상된다. 이 경우도 앞의 결과들과 마찬가지로 중국산 및 양양산 두 추출물의 분획 물들이 조 추출물보다 높은 활성 증진 효과를 보이고 있으며 전체적으로 중국산 분획물이 최대 300% 정도의 높은 활성 증진 정도를 보이고 있고 국내산 분획물의 경우 최대 250% 의 활성 증진 정도를 나타냈다. 하지 만 총체적으로 조 추출물의 경우는 두 종 모두 투여 농도가 증가할수록 효소 활성 증진 정도가증가하고 있으나 분획 물의 경우는 양양산 분획물의 경우는 최대 투여 농도까지 활성 증진을 보였으나 중국산의 경우는 0.
- 04% 로 유지되어 두 경우 다 control 에 비해 2시간 이상 빠른 알콜 분해 속도를 나타내는 것으로 확인되었다. 이는 쥐의 경우 중국산이 양양산보다 약간 빠른 분해 속도를 보인 반면 사람의 경 우 양양산 조 추출물이 중국산 보다 빨라 상반된 경우처럼 보이나 이 두 경우 0.011-0.010% 사이로 오차가 적어 결론적으로는 두 품종의 조 추출물간의 알콜 분해 속도의 차이는 없는 것으로 나타났다. 하지만 분획물의 경우는 그림 1 에서도 나타나듯이 양양산 추출물이 중국산보다 빠르게 감소 시키는 것을 알 수 있다.
- 8% 로 거의 비슷한 활성 증진을 보였으며 이는 두 효소의 활성이생체 내에서 균형을 이루며 반응해 알콜을 분해하는 것을 알 수 있다. 이에 비해 헛개나무추출물들을 섭취한 경우는 ADH 보다는 ALDH의 효소 활성 증진 정도가 10% 이상 높아지는 것을 확인했다. 이는 헛개나무가 ADH 활성 증진에 의한 알콜 분해도 촉진시키지만 ALDH 의 활성을 좀더 증진 시 켜 빠르게 acetaldehyde를 acetic acid 로 분해시켜 숙취해소에 상당한 도움을 주는 것이 밝혀 진 것이다.
- 또한 헛개나무추출물들은 ADH 보다는 ALDH 효소의 활성 에 보다 영향을 미 치는 것으로 나타나 숙취 원인 물질인 acetaldehyde의 제거에 효과적 일 것이 라는 평가가 가능하다. 이와 함께 간의 해독 작용 촉진 정도를 비교한 결과 중국산 헛개나무 추출물이 양양산 보다 상대적으로 좋은 것으로 나타났다. 0.
- 이와 함께 산지별 헛개 나무 열매 추출물들의 간에서의 해독 작용 증진 정도를 비교한 결과가 Fig. 2 로서 네 가지 경우 다 투여 농도가 증가할수록 GST 의 활성 증진에 효과가 있는 것으로 나타났다. 막대 그래프에 유의성 및 평균치를 표기할 경우 그림의 복합성 때문에 생략했으며 실제 나타낸 그래프가 평균값으로 전체적으로 5-7% 내외의 오차를 갖고 있으며 95% 오차 범위 내에서 상호 유의성을 갖고 있는 것으로 나타났다.
- 특이 한 것은 ADH 의 경우는 두 종의 분획물 모두 조추출물 경우 보다 50-60% 이상 활성 증진 효과가 두드러지게 나타났으나 ALDH 의 경우는 두 분획 물 모두활성 증진 이 조 추출물에 비해 10% 정도의 낮은 활성 증진 정도만 나타났다. 전체적으로 알콜만 섭취한 경우에 비해 헛개나무 열매 추출물을 동시에 섭 취 한 경우 ADH와 ALDH 효소의 활성이 약 30-60% 이상 증가하는 것이 확인되었으며 두 효소위 활성 촉진 정도가 공히 28-29% 정도를 유지 해 ADH 와 ALDH의 활성이 생체 내에서 균형을 이루고 있음이 입증되었다. 또한 헛개나무추출물들은 ADH 보다는 ALDH 효소의 활성 에 보다 영향을 미 치는 것으로 나타나 숙취 원인 물질인 acetaldehyde의 제거에 효과적 일 것이 라는 평가가 가능하다.
- 측정한 결과가 Table 2 이다. 추출물을 섭취하지 않고 알콜만 섭취한 경우 간에 존재하는 ADH 효소의 활성은 알콜 섭취 후 1시간 안에 약 28% 정도만 증진되는 것으로 나타났으나 헛개 나무 추출물을 섭취한 경우 36-42% 정도 상승했다. 효소 활성의 경우는 혈중 알콜 감소의 경 향과는 달리 중국산 조 추출물이 양양산에 비해 6-7 % 높은 것으로 측정되었다.
- 경향을 보였다. 특이 한 것은 ADH 의 경우는 두 종의 분획물 모두 조추출물 경우 보다 50-60% 이상 활성 증진 효과가 두드러지게 나타났으나 ALDH 의 경우는 두 분획 물 모두활성 증진 이 조 추출물에 비해 10% 정도의 낮은 활성 증진 정도만 나타났다. 전체적으로 알콜만 섭취한 경우에 비해 헛개나무 열매 추출물을 동시에 섭 취 한 경우 ADH와 ALDH 효소의 활성이 약 30-60% 이상 증가하는 것이 확인되었으며 두 효소위 활성 촉진 정도가 공히 28-29% 정도를 유지 해 ADH 와 ALDH의 활성이 생체 내에서 균형을 이루고 있음이 입증되었다.
- 이 경우도 앞의 결과들과 마찬가지로 중국산 및 양양산 두 추출물의 분획 물들이 조 추출물보다 높은 활성 증진 효과를 보이고 있으며 전체적으로 중국산 분획물이 최대 300% 정도의 높은 활성 증진 정도를 보이고 있고 국내산 분획물의 경우 최대 250% 의 활성 증진 정도를 나타냈다. 하지 만 총체적으로 조 추출물의 경우는 두 종 모두 투여 농도가 증가할수록 효소 활성 증진 정도가증가하고 있으나 분획 물의 경우는 양양산 분획물의 경우는 최대 투여 농도까지 활성 증진을 보였으나 중국산의 경우는 0.6 (g/L) 투여농도에서 최대 활성 증진을 보인 후 투여 농도가 증가 될수록 감소하는 경향을 보이고 있다. 이는 중국산 분획물 내 존재하는 특정 성분이 GST 효소에 competitive inhibition 의 형 태 로 활성 저해에 기인한 것인지는 확인하기 어려우나과량을 투여 시 어떤 경로로든 영향을 받는 것은 확실하다.
- 6 g/L 이상의 농도에서는 효소 활성이 어느 정도 저해되는 현상을 보여 헛개나무 추출물이 간 해독 작용에 관여하는 효소와 competitive inhibition 관계에 있을 수 있다는 추론을 할 수 있다. 하지만 두 종 모두 조 추출물과 분획 물의 경우 120-300% 이상의 GST 효소 활성 증진 효과를 보여 생산지에 관계없이 간기능 활성이 중요한 역할을 하고 있음이 입증되었다.
- 이는 중국산 분획물 내 존재하는 특정 성분이 GST 효소에 competitive inhibition 의 형 태 로 활성 저해에 기인한 것인지는 확인하기 어려우나과량을 투여 시 어떤 경로로든 영향을 받는 것은 확실하다. 하지만 전체적으로 두 품종 다 120-300% 의 효소 활성 증진에 기여하는 것으로 나타났다. 따라서 양양산과 중국산 헛개나무 열매 추출물들의 활성 차이는 통계학적으로약간의 유위성 있는 차이(약 3-5%)는 있지만 그 차이가 극히 미미해 우리가 당초 예상했던 것과 같은 현격한 차이는 없는 것으로 나타나두 산지 에서 생 산된 지 구자 나무 열 매를 이용해 식품으로 사용 시 그 효용 가치는 공히 두 경우 다 높을 것으로 사료된다.
- 추출물을 섭취하지 않고 알콜만 섭취한 경우 간에 존재하는 ADH 효소의 활성은 알콜 섭취 후 1시간 안에 약 28% 정도만 증진되는 것으로 나타났으나 헛개 나무 추출물을 섭취한 경우 36-42% 정도 상승했다. 효소 활성의 경우는 혈중 알콜 감소의 경 향과는 달리 중국산 조 추출물이 양양산에 비해 6-7 % 높은 것으로 측정되었다. 하지만 분획물의 경우는 양양산의 경우가중국산보다 약 1% 정도 높은 것으로 나타나 결국은 두 품종간 활성 차이는 거의 없는 것으로 평가되었다.
후속연구
- 따라서 헛개나무가 품종에 관계없이 혈중 알콜 농도를 낮추는 효과가 있으며 분획 물의 경우 이 속도가 빨라지는 것이 확인되었다. 본 실험과 같이 서로 다른 곳에서 생산된 헛개나무 열매 추출물들의 혈중 알콜 분해 속도의 비교를 통한 동력학적인 임상 자료는 매우 드문 것으로 본 결과가 헛개나무 열매의 알콜 분해 촉진에 따른 숙취제거 음료나 식 품으로의 개 발에 활용될 가치는 매우 높을 것으로 예견된다.
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