선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
제안 방법
- lactate를 탄소원으로 사용하여 Vibrio sp. YE-1()1 을 배양한 결과, citrate 보다는 glucose를 5.0 g/L로 첨가해준 경우 가장 높은 균체 생장을 보여 glucose를 기본 탄소원으로 사용하기로 하였다. pH 변화에 따른 Vibrio sp.
- Vibrio sp. YE-101 균체 배양을 위한 탄소원의 영향을 살펴보기 위하여 기존 문헌치의 최적 배양 조건인 pH 8, 5 %(w/v) NaCl 및 27°C에서 48시간 배양 한 후 600 nm에서 optical density (O.D.)를 측정하였다. pH, NaCl 농도 및 배양온도는 5〜9, 1~9 %(w/v), 19〜35°C로 각각 조절한 후 O.
- sp. YE-101 를 회분 배양하고 TTX 생성을 측정하였다. Fig.
- 따라서 본 연구에서는 해양 미생물을 이용한 생물공학적 TTX 생산을 위한 기초를 마련하고자 국내에서 유통되고 있는 활어 상태의 복어 내장으로부터 신규로 분리한 ITX 생성능이 있는 Vibrio sp. YE-101 에 대하여 반응표면 분석법을 이용하여 배양 조건 최적화를 실시하여 보다 효율적인 TTX 생산을 시도하였다.
- Vibrio sp. YE-10L은복어 장내에서 분리된 해양 미생물이므로 NaCl 농도가 균체 생장에 미치는 영향도 조사하였다. YE-101 은 3.
- )를 측정하였다. pH, NaCl 농도 및 배양온도는 5〜9, 1~9 %(w/v), 19〜35°C로 각각 조절한 후 O.D.를 측정하여 그 영향을 분석하였다.
- 독립변수 중 F-ratio 값이 가장 적어 균체 배양에 가장 적은 영향을 주는 변수인 온도를 28.1 °C로 정하고, pH와 NaCl 농도에 따른 O.D. 값 변화를 살펴보기 위하여 contour plot 을 실시하였다. Fig.
- 배양 조건에 따른 균체 생장의 반응표면이 곡면으로 표현될 것으로 예상되어 2차 회귀모형을 사용하기로 하였으며, 반응 표면 분석을 위한 실험 계획법으로는 중심합성계획법을 사용하였다. 세 개의 요인변수인 NaCl 농도, pH, 배양 온도를 -2, -1, 0, 1, 2의 다섯 단계로 부호화하고 여섯 개의 축점을 포함하여 Table 1과 같은 실험 level을 결정하고 15가지 종류의 실험점을 구성하였다. 중심점은 (0, 0, 0), 축점은 (-a, 0, 0), (a, 0, 0), (0, -a, 0), (0, a, 0), (0, 0, -a), (0, 0, a)로 설정하였고, 8개의 요인 실험 점으로는 (-1, -1, -1), (-1, -1, 1), (-1, 1, -1), (-1, 1, 1), (1, -1, -1), (1, -1, 1), (1, 1, -1), (1, 1, 1)을 사용하였다.
- 1% 초산 용액으로 다시 세정하여 여액과 합쳐 약 50 ml를 만들었다. 이 용액을 증류수로 알맞게 희석하여ICR (Institute of Cancer Research)계 쥐(수컷, 18-20 g)의 복강에 1 ml를 주사하고 치사시간을 측정하여 MU(mouse unit) 단위로 독성치를 나타내었다. 1 MU는 주사한 후 30 분 이내에 치사시킬 수 있는 TTX 양을 의미한다.
- YE-1()1 의 배양 조건 최적화를 실시하였다. 주요 배양 조건인 pH, 온도, NaCl 농도에 대하여 중심합성계획법을 이용하여 실험점을 결정하였고, 각 조건에서 얻은 실험치를 quadratic least-square re- gression을 실시하여 최적 배양 조건을 결정하였다. 최적 pH, 온도, NaCl 농도는 각각 8.
- 중요 배양 조건인 NaCl 농도, pH, 배양 온도 등은 모두 요인변수로 서로 복합적인 상호 작용을 할 수 있으므로 이러한 배양 조건의 변화가 균체 생장에 미치는 영향을 반응표면 분석법을 이용하여 분석하고 최적 배양 조건을 결정하기로 하였다. 배양 조건에 따른 균체 생장의 반응표면이 곡면으로 표현될 것으로 예상되어 2차 회귀모형을 사용하기로 하였으며, 반응 표면 분석을 위한 실험 계획법으로는 중심합성계획법을 사용하였다.
대상 데이터
- TIX 생성능이 있는 해양 미생물 Vibrio sp. YE-1 이은 3% NaCl이 첨가 된 nutrient 한천 평판에서 계대배양했고, TTX 생산을 위한 액체 배양은 ORI 기본배지 (Proteose peptone 2 g, Phytone peptone 2 g, Yeast extract 1 g, Citric acid 0.88 g, NaCl 30 g, Distilled water 1 L, pH 8.0)를 사용하여 23°C에서 48 시간 진탕 배양하였다[8].
데이터처리
- 위에 제시되어 있는 각각의 실험점에서 3번의 반복 실험을 통해 얻은 결과를 산술 평균하여 실험 데이터를 구하였으며 (Table 2), SAS (Statistical Analysis System) 프로그램을 이용하여 반응표면 분석을 실시하였다. O.
이론/모형
- TTX 독성시험은 일본 후생성 표준법인 mouse bioassay 법을 이용하였다[6]. 파쇄한 미생물 균체에 0.
- 하였다. 배양 조건에 따른 균체 생장의 반응표면이 곡면으로 표현될 것으로 예상되어 2차 회귀모형을 사용하기로 하였으며, 반응 표면 분석을 위한 실험 계획법으로는 중심합성계획법을 사용하였다. 세 개의 요인변수인 NaCl 농도, pH, 배양 온도를 -2, -1, 0, 1, 2의 다섯 단계로 부호화하고 여섯 개의 축점을 포함하여 Table 1과 같은 실험 level을 결정하고 15가지 종류의 실험점을 구성하였다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.