Cordyceps militaris (CM) has been used as a tonics in the traditional medicine. To investigate the anti-diabetic principle of CM, activity guided fractionation was conducted. Hot water extract of CM was fractionated into 3 parts: above 100,000(A), $100,000{\sim}20,000(B)$, below 20,000(C)...
Cordyceps militaris (CM) has been used as a tonics in the traditional medicine. To investigate the anti-diabetic principle of CM, activity guided fractionation was conducted. Hot water extract of CM was fractionated into 3 parts: above 100,000(A), $100,000{\sim}20,000(B)$, below 20,000(C) in molecular weight using in membrane filter system. All fractions showed mild hypoglycemic activity in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats by oral administration (300 mg/kg). The fraction C which was most active among them was fractionated again into two parts, C-1 and C-2 by Sephadex LH 20 column chromatography. The fraction C-1 showed hypoglycemic activity but C-2 did not show activity compared with control in STZ mice. In glucose-fed hyperglycemic mice, fraction C, C-1 and C-2 also showed significant glucose lowering activity. Their decreasing rates of plasma glucose level after 1 hours administrations of fraction C, C-1 and C-2 were 24.5%, 29.3% and 22.0%, respectively (Tolbutamide: 48.4%). These results suggested that CM has both insulin like and insulin release promoting activity and could be developed as an antidiabetic agent.
Cordyceps militaris (CM) has been used as a tonics in the traditional medicine. To investigate the anti-diabetic principle of CM, activity guided fractionation was conducted. Hot water extract of CM was fractionated into 3 parts: above 100,000(A), $100,000{\sim}20,000(B)$, below 20,000(C) in molecular weight using in membrane filter system. All fractions showed mild hypoglycemic activity in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats by oral administration (300 mg/kg). The fraction C which was most active among them was fractionated again into two parts, C-1 and C-2 by Sephadex LH 20 column chromatography. The fraction C-1 showed hypoglycemic activity but C-2 did not show activity compared with control in STZ mice. In glucose-fed hyperglycemic mice, fraction C, C-1 and C-2 also showed significant glucose lowering activity. Their decreasing rates of plasma glucose level after 1 hours administrations of fraction C, C-1 and C-2 were 24.5%, 29.3% and 22.0%, respectively (Tolbutamide: 48.4%). These results suggested that CM has both insulin like and insulin release promoting activity and could be developed as an antidiabetic agent.
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문제 정의
본 연구자는 이러한 사시을 바탕으로 아직 연구되지 않은 큰 번데기 동충하초(Cordyceps militaris)의 혈당강하약효를 밝히기 위해서 STZ 및 과량의 glucose투여로 유발된 고혈당에 대해 각각 혈당강하 효과를 실험하였다.
제안 방법
C-1과 fr.C-2으로 분획하여 STZ에 의해 고혈당을 유발시킨 생쥐의 혈당강하 효과를 시험을 해보았다.
Glucose 과부하에 의한 고혈당에 미치는 효과 측정 -18시간 절식시킨 생쥐에 glucose(3g/kg)를 경구투여하여 대조군으로 하고 실험군은 glucose와 시료를같이 투여하여 1시간 후에 혈액을 꼬리정맥에서 채취하여 Blood Glucose Sensor를 이용하여 혈당치를 즉정하였다.
즉, 현미와 번데기를 혼합한 배지에서 재배하였고, 배지 부분을 제거한 자실체를 60℃ 에서 3일간 건조한 것을 시료로 사용하였다.
혈당치가 안정화된 쥐 6마리를 한 군으로하여 18시간 절식시킨 후 시료를 300mg/kg씩 경구투여하여 2시간과 6시간 후의 혈액을 꼬리정맥에서 채취하여 Blood Glucose Sensor를 이용하여 혈당치를 측정하였으며 또한 혈액을 하대정맥에서 채취하여 3000g에서 30분 원심분리하여 혈청을 분리한 후 glucose analysis kit를 이용흐}여혈당치를 측정하였다.
대상 데이터
STZ에 의해 유발된 고혈당에 미치는 효과 측정-당뇨를 유발시키기 위해 Streptozotocin(STZ, Sigma Chemical Co.)를 이용하였다. pH 4.
실험 재료 - 큰번데기 동충하초(Cordyceps militaris, 2kg)는 2001년 6월 초당농원에서 인공재배하는 것을 제공받아 사용하였다.
실험동물-실험동물로서 한림동물에서 계대 사육한 8주령된 수컷 Sprague-Dawrey계 흰쥐(220〜 250 g) 및순계 ICR계 수컷 생쥐(20〜25 g)을 사용하였으며 12시간/day and night cycle(22 ± 2℃)로 air conditioning을 유지한 동물실험실에서 적응시켰으며 고형 사료 및 식수를 공급하였다.
통계처리-모든 실험의 측정치는.student-t test로 처리하여 유의성 차를 검정하였으며 혈당치의 값은 시료투여전의 혈당치를 100으로 하여 상대적으로 나타내었다.
성능/효과
STZ에 의해 고혈당을 유발시킨 흰쥐에서 2시간, 6시간후의 혈당치를 측정한 결과 fi.A, B 및 C 모두 대조군에 비해 13.72%, 8.10%, 21.39%의 유의성 있는 혈당강하효과를 보였다(Table Ⅰ. 참조).
후속연구
이상과 같은 결과를 통해 볼 때, 큰 번 데기 동충하초의 수용 성 분획들은 STZ 및 glucose 과부하에 의해 유발된 당뇨에 모두 효과적인 것으로 나타났으며 이는큰 번데기동충하초의 수용성분 획에 insulin과 같은 (Ⅰ형 당뇨 관련) 그리고 insulin 분비를 촉진하는 (Ⅱ형 당뇨관련) 효능 물질이 함유되어 있는 것으로 판단되며 추후실험을 통해 그 유효성분을 밝혀낼 계획이다.
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