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문제 정의
- 따라서 본 연구에서는 50°C 에서 4시간, 80°C 에서 40분, 100°C에서 15분 동안 증류수를 사용하여 주줄하였다. 본 연구의 목적은 물과 에탄올을 사용하여 각각 추출 온도와 시간을 변화시키면서 녹차로부터 카테킨 화합물의 회수하여 최적 추출조건을 실험적으로 구하는 것이다. 녹차 잎을 추출하기 위해서는 순수한 물을 사용하였으며 추출한 시료에 포함된 카테킨 화합물을 회수하기 위하여 에틸 아세테이트와클로로포름을 순차적으로 사용하여 분배를 실시하였다.
제안 방법
- 24 g이 채워진 컬럼(300XM90 mm)에 에틸아세테이트층을 주입하여 얻은 결과이다. 이동상 조건은("% 아세트산이 포함된 물/아세토나이트릴/에틸아세테이트(87/10/3, 부피비)이고 20 以를 주입하여 분석하였다.
- 본 연구의 목적은 물과 에탄올을 사용하여 각각 추출 온도와 시간을 변화시키면서 녹차로부터 카테킨 화합물의 회수하여 최적 추출조건을 실험적으로 구하는 것이다. 녹차 잎을 추출하기 위해서는 순수한 물을 사용하였으며 추출한 시료에 포함된 카테킨 화합물을 회수하기 위하여 에틸 아세테이트와클로로포름을 순차적으로 사용하여 분배를 실시하였다. 추출과 분배에 의한 회수율을 비교하기 위해서 분석용 액체 크로마토그래피를 사용하였으며 정지상으로 크기가 15 〃이인 Cis 충전물이 채워진 컬럼(300X3.
- 녹차잎 3 g을 잘게 분쇄하여 용매 60 mL에 각각의 조업온도와 침적시간에 따라 교반기에서 교반하여 추출하였다. 용매로는 순수한 물과 에탄올을 사용하였고 추출 온도는 순수한 물이 50, 80, KXTC이고 각각 4시간, 40분, 15분 동안 교반 하여 추출하였고, 에탄올은 40°C에서 2시간 동안 교반 하여 추출하였다.
- 물로 추출하는 경우 40〜50°C에서 장시간추출을 하여도 epimerisation이 잘 일어나지 않지만 KXTC 에서는 20분 이상 추출하게 되면 epimerisation이 많이 일어나게 된다. 따라서 본 연구에서는 50°C 에서 4시간, 80°C 에서 40분, 100°C에서 15분 동안 증류수를 사용하여 주줄하였다. 본 연구의 목적은 물과 에탄올을 사용하여 각각 추출 온도와 시간을 변화시키면서 녹차로부터 카테킨 화합물의 회수하여 최적 추출조건을 실험적으로 구하는 것이다.
- 순수한 물과 에탄올을 사용하여 추출한 녹차 추출물 중에는 많은 성분들이 포함이 되어 있다. 따라서 추출과정 후 추출물 안에 포함되어있는 카테킨 화합물을 얻기 위하여 같은 부피의 클로로포름과 에틸아세테이트를 각기 이용하여 분배하였다. 클로로포름과의 분배는 주로 카페인을 제거하기 위하여 실시하였고 그밖에 약간의 불순물이 같이 제거된다.
- 카테킨 화합물을 포함하고 있다. 본 연구에서는 녹차로부터 카테킨 화합물을 회수하기 위하여 용매 추출과 분배 방법을 사용하였으며 추출 시 용매, 시간과 온도에 따른 회수율을 비교하여 최적 추출 조건을 조사하였다. 실험 결과로부터 얻은 최적 추출 조건은 물 80°C 에서 40분 동안 추출한 후 카페인을 제거하기 위하여 클로로포름으로 분배를 실시하고 다시 에틸아세테이트로 분배를 실시하는 것이다.
- 본 연구에서는 녹차로부터 카테킨 화합물을 회수하기 위하여 용매 추출과 분배 방법을 사용하였으며 추출 시 용매, 시간과 온도에 따른 회수율을 비교하여 최적 추출 조건을 조사하였다. 실험 결과로부터 얻은 최적 추출 조건은 물 80°C 에서 40분 동안 추출한 후 카페인을 제거하기 위하여 클로로포름으로 분배를 실시하고 다시 에틸아세테이트로 분배를 실시하는 것이다. 에틸아세테이트 층에는 EGC, EC EGCG, ECG와 같은 카테킨 화합물이 분배되어 있다.
- 용매로는 순수한 물과 에탄올을 사용하였고 추출 온도는 순수한 물이 50, 80, KXTC이고 각각 4시간, 40분, 15분 동안 교반 하여 추출하였고, 에탄올은 40°C에서 2시간 동안 교반 하여 추출하였다. 에탄올인 경우에는 클로로포름과 섞이기 때문에 이를 회전식 증발기로 농축시킨 후에 순수한 물을 첨가하여 60 mL를 만들었다.
- 01%가 각각 포함되어 있다(14). 추출과정에서 물인 경우에는 온도 50, 80, lOOC에서 각각 2시간, 40분, 15분의 시간으로 추출을 실시하였으며 에탄올인 경우에는 40℃에서 2시간 동안 추출을 실시하였다. 순수한 물과 에탄올을 사용하여 추출한 녹차 추출물 중에는 많은 성분들이 포함이 되어 있다.
- 추출한 시료를 농축하기 위해 회전식 증발기(BtJCHI Rotavapor R-200, Switzerland)를 사용하였다. 분석용 컬럼(300x3.
- Figure 3은 물, 에탄올의 추출 용매와 온도, 시간에 따른 카테킨 화합물의 회수율을 비교하기 위하여 분석용 액체 크로마토그래피에서 카테킨 화합물이 포함된 추출물을 분석한 결과이다 EGC와 EC에 대한 회수율은 용매, 온도와 시간에 따라 거의 같은 회수율을 보였다. 하지만 EGCG 에 대한 회수율은 순수한 물을 이용하여 80과 에서 추출하였을 때가 다른 경우보다 더 많은 카테킨 화합물을 회수하였다. itxrc로 추출한 경우에는 카테킨 화합물 이외에 다른 성분들이 분석되었다.
대상 데이터
- 녹차로부터 카테킨 화합물을 추출하기 위하여 물과 에탄올을 이용하였다. 녹차 안에 포함된 카페인의 함량은 2.
- 리된 에틸아세테이트층에는 카테킨 화합물이 분배되어 있고 용매, 주줄 온도와 시간에 따른 회수율을 비교하기 위하여 분석용 액체 크로마토그래피를 이용하였다. 정지상으로 크기가 15 皿인 Cis 충전물 2.
- 본 실험에 사용된 녹차는 전라남도 보성에서 재배된 차를구입하여 사용하였으며, 표준시료 물질인 에피갈로카테 킨 (epigallocatechin; EGC), 에피카테킨(epicatechin; EC), 에피갈로카테킨 갈레이트(epigallocatechin gallate; EGCG)와 에피카테킨 갈레이트(epicatechin gallate; EGC)는 Sigma에서 구입하였으며, HPLC Grade의 메탄올, 에탄올, 아세토나이트릴, 에틸 아세테이트, 클로로포름은 덕산화학에서 구입하였고, 물은 2차 증류한 증류수를 사용하였다.
- )인 역상 정지상을 채워 사용하였다. 분석용 HPLC는 Waters사의 600S, 515 펌프 (multisolvent delivery system), 486 UV-visible tunable wavelength absorbance, Rheodyne 주입기(20 sample loop)를 사용하였고, 데이터 저장 시스템은 Chromate(ver. 3.0 Interface Eng.)를 사용하였다.
- Switzerland)를 사용하였다. 분석용 컬럼(300x3.90 mtn) 은 충전물의 크기가 15 呻 (YMC Co.)인 역상 정지상을 채워 사용하였다. 분석용 HPLC는 Waters사의 600S, 515 펌프 (multisolvent delivery system), 486 UV-visible tunable wavelength absorbance, Rheodyne 주입기(20 sample loop)를 사용하였고, 데이터 저장 시스템은 Chromate(ver.
- 액체 크로마토그래피를 이용하였다. 정지상으로 크기가 15 皿인 Cis 충전물 2.24 g이 채워진 컬럼(300 X 3.90 mm) 을 사용하였고 시료의 주입량은 20 卩L이고 이동상으로는 0.1% 아세트 산이 포함된 물, 아세토나이트릴, 에틸아세테이트을 사용하였다. 이동상의 유속은 1.
- 녹차 잎을 추출하기 위해서는 순수한 물을 사용하였으며 추출한 시료에 포함된 카테킨 화합물을 회수하기 위하여 에틸 아세테이트와클로로포름을 순차적으로 사용하여 분배를 실시하였다. 추출과 분배에 의한 회수율을 비교하기 위해서 분석용 액체 크로마토그래피를 사용하였으며 정지상으로 크기가 15 〃이인 Cis 충전물이 채워진 컬럼(300X3.90 mm), 이동상으로는 물, 아세토 나이트릴과 에틸 아세테이트를 사용하였다.
성능/효과
- 또한 녹차 추출물을 이용하여 물과 에탄올에 대한 용해도를 비교한 연구가 발표되었다(12). 이 연구 결과에서 녹차 추출물의 용해도는 물보다는 에탄올에서 더 좋은 용해도를 나타내지만 순수한 녹차 잎으로부터 카테킨 화합물을 추출하는 경우에는 에탄올보다 물이 더 효율이 좋음을 본 연구에서 확인하였다. 카테킨 화합물은 추출 및 정제공정동안 많은 화학적 변화를 일으키게 된다.
후속연구
- 에틸아세테이트 층에는 EGC, EC EGCG, ECG와 같은 카테킨 화합물이 분배되어 있다. 더 나아가서는 제조용 액체 크로마토그래피를 이용하여 항암 및 항산화 효과가 가장 좋은 EGCG를 얻을 수 있을 것이다.
- 그러므로 항산화제는 피부 변형 속도를 감소시키는 효과를 가져온다. 따라서 앞으로의 화장품 산업에서 카테킨 화합물의 항산화 효과가 상당한 주목을 받을 것으로 기대된다.
- 이러한 방법은 초임계를 이용하여 추출한 경우보다 더 많은 양의 카테킨 화합물을 얻을 수 있는 방법이다(15). 또한 증류수를 이용한 추출과 용매 분배만으로 녹차에 포함된 유용성분을 비교적 간단히 회수할 수 있는 경제적인 방법으로 이용될 수 있다.
- Figure 4는 녹차로부터 EGCG를 얻기 위하여 필요한 공정들에 대한 개요도를 나타낸 것이다. 본 연구에서 얻은 실험 결과를 제조용 액체 크로마토그래피에 응용한다면 순수한 EGCG를 얻을 수 있을 것이다. 이는 현재 국내특허 출원 중이다<16).
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