결명자 에탄올추출물이 알코올 투여 흰쥐의 항산화물질 및 지질대사에 미치는 영향 Effect of the Ethanol Extract of Cassia tora L. on Antioxidative Compounds and Lipid metabolism in Hepatotoxicity of Rats-induced by Ethanol원문보기
결명자 에탄올추출물이 알코올을 투여한 흰쥐의 간손상에 미치는 영향을 알아보기 위해, 정상군, 결명자 에탄올추출물(200 mg/kg)투여군, 알코올 투여군(35% ethanol 10 mL/kg, b.w./day), 알코올 및 결명자 에탄올추출물(200 mg 및 400 mg/kg) 병합투여군 등 5군으로 나누어 6주간 사육후 체중증가율, 식이효율 및 혈액중 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤농도, 혈청중 ALT 및 AST활성, 간손상 억제 효과를 확인하기 위해 유리 기 해독계 효소인 SOD, catalase, GSH-Px등의 활성과 유리기 생성계 효소인 XO활성을 측정하고, 지질과산화물인 TBARS 및 GSH함량에 미치는 영향을 관찰하였다. 1) 각 분획구의 항산화력은 n-핵산>클로르포름>에틸아세테이트>물>메탄올 순이었다. 2) 결명자 에탄올추출물과 알코올을 병합투여하므로서 체중증가율은 알코올만을 투여한 군에 비하여 유의적인 변화는 아니었으나 증가되는 경향을 보였으며 식이효율은 정상군의 치에 근접하게 증가되었다. 3) 간 손상의 지표의 하나인 혈청 중 ALT 및 AST활성의 경우, 알코올 투여로 정상군에 비하여 유의적으로 증가되었으나 결명자 에탄올추출물을 병합투여하므로서 정상군보다 오히려 낮았다. 4) 알코올 투여로 총 콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤함량은 정상군에 비하여 많이 증가되었으나 결명자 에탄올추출물 병합투여로 투여량이 증가됨에 따라 더욱 우수한 감소효과를 나타내었다. 반면 HDL-콜레스테롤함량은 알코올 투여로 정상군에 비하여 유의적으로 감소되었으나 결명자 에탄올추출물 병합투여로 정상군의 농도에 근접하게 증가되었는데, 특히 결명자 에탄올추출물만을 투여한 군의 함량이 정상군보다 높았다. 5) 결명자 에탄을 추출물이 알코올 투여로 상승된 유리기 생성계효소인 XO활성은 알코올만을 투여한 군에 비하여 약 42%정도 현저하게 감소시켰으나, 유리기 해독계 효소인 SOD, catalase 및 GSH-Px 활성에는 유의한 영향을 미치지 못했다. 6) 알코올 투여로 증가된 간 중의 TBA반응성 산물량을 결명자 에탄올추출물이 유효하게 감소시켰으며, 특히 결명자 에탄올추출물만을 투여한 군의 간 TBA반응성 산물량이 정상군보다 오히려 낮았다. 7) 알코올 섭취로 간조직 중의 GSH함량이 정상군에 비하여 약 51%정도 감소되었으나 결명자 에탄올추출물투여로 정상군의 함량에 근접하도록 증가되었다. 이상의 실험 결과에서 결명자 에탄올추출물의 항산화작용은 주로 알코올투여로 증가된 유리기 생성계 효소인 XO활성 억제와 비효소적 항산화작용을 나타내는 GSH함량을 증가시키므로서 지질과 산화물에 대한 방어력이 증강되어 나타난 결과로 여겨지고, 또한 혈청 중 지질함량, ALT 및 AST의 활성을 유의성 있게 감소시켰음은 결명자 에탄올추출물이 알코올에 의한 지방 간 또는 손상된 간세포를 회복시키는 작용이 있는 것으로 추정된다.
결명자 에탄올추출물이 알코올을 투여한 흰쥐의 간손상에 미치는 영향을 알아보기 위해, 정상군, 결명자 에탄올추출물(200 mg/kg)투여군, 알코올 투여군(35% ethanol 10 mL/kg, b.w./day), 알코올 및 결명자 에탄올추출물(200 mg 및 400 mg/kg) 병합투여군 등 5군으로 나누어 6주간 사육후 체중증가율, 식이효율 및 혈액중 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤농도, 혈청중 ALT 및 AST활성, 간손상 억제 효과를 확인하기 위해 유리 기 해독계 효소인 SOD, catalase, GSH-Px등의 활성과 유리기 생성계 효소인 XO활성을 측정하고, 지질과산화물인 TBARS 및 GSH함량에 미치는 영향을 관찰하였다. 1) 각 분획구의 항산화력은 n-핵산>클로르포름>에틸아세테이트>물>메탄올 순이었다. 2) 결명자 에탄올추출물과 알코올을 병합투여하므로서 체중증가율은 알코올만을 투여한 군에 비하여 유의적인 변화는 아니었으나 증가되는 경향을 보였으며 식이효율은 정상군의 치에 근접하게 증가되었다. 3) 간 손상의 지표의 하나인 혈청 중 ALT 및 AST활성의 경우, 알코올 투여로 정상군에 비하여 유의적으로 증가되었으나 결명자 에탄올추출물을 병합투여하므로서 정상군보다 오히려 낮았다. 4) 알코올 투여로 총 콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤함량은 정상군에 비하여 많이 증가되었으나 결명자 에탄올추출물 병합투여로 투여량이 증가됨에 따라 더욱 우수한 감소효과를 나타내었다. 반면 HDL-콜레스테롤함량은 알코올 투여로 정상군에 비하여 유의적으로 감소되었으나 결명자 에탄올추출물 병합투여로 정상군의 농도에 근접하게 증가되었는데, 특히 결명자 에탄올추출물만을 투여한 군의 함량이 정상군보다 높았다. 5) 결명자 에탄을 추출물이 알코올 투여로 상승된 유리기 생성계효소인 XO활성은 알코올만을 투여한 군에 비하여 약 42%정도 현저하게 감소시켰으나, 유리기 해독계 효소인 SOD, catalase 및 GSH-Px 활성에는 유의한 영향을 미치지 못했다. 6) 알코올 투여로 증가된 간 중의 TBA반응성 산물량을 결명자 에탄올추출물이 유효하게 감소시켰으며, 특히 결명자 에탄올추출물만을 투여한 군의 간 TBA반응성 산물량이 정상군보다 오히려 낮았다. 7) 알코올 섭취로 간조직 중의 GSH함량이 정상군에 비하여 약 51%정도 감소되었으나 결명자 에탄올추출물투여로 정상군의 함량에 근접하도록 증가되었다. 이상의 실험 결과에서 결명자 에탄올추출물의 항산화작용은 주로 알코올투여로 증가된 유리기 생성계 효소인 XO활성 억제와 비효소적 항산화작용을 나타내는 GSH함량을 증가시키므로서 지질과 산화물에 대한 방어력이 증강되어 나타난 결과로 여겨지고, 또한 혈청 중 지질함량, ALT 및 AST의 활성을 유의성 있게 감소시켰음은 결명자 에탄올추출물이 알코올에 의한 지방 간 또는 손상된 간세포를 회복시키는 작용이 있는 것으로 추정된다.
This study was done to investigate the effects of ethanol extract of Cassia semen (Cassia tora L.) on the activities of hepatic oxygen free radicals metabolizing enzymes and blood lipid profile in rats of hepatotoxicity induced by ethanol. Sprague-Dawley male rats weighing 100~160 g were divides int...
This study was done to investigate the effects of ethanol extract of Cassia semen (Cassia tora L.) on the activities of hepatic oxygen free radicals metabolizing enzymes and blood lipid profile in rats of hepatotoxicity induced by ethanol. Sprague-Dawley male rats weighing 100~160 g were divides into 5 groups; control grouts (CON), Cassia semen ethanol extracts (200 mg/kg) treated group (CEL), ethanol (10 mL/kg, 35%) treated group (ETH), Cassia semen ethanol extracts (200 mg/kg) and ethanol treated group (CE1 ) and Cassia semen ethanol extracts (400 mg/kg ) and ethanol treated group (CE2), respectively. Compared with ETH, the growth rate of CE1 and CE2 were to be increased tendency, and in blood levels of total cholesterol, LDL-cholesterol and the activities of alanine aminotranferase and asparate aminotranferase elevated by ethanol were significantly decreased (p<0.05). It was observed that the activities of superoxide dismutase, catalase, xanthine oxidase and glutathione peroxidase of rat liver increased by ethanol, were more decreased by the treatment of Cassia semen ethanol extract than the only ethanol-treated group. The content of glutathione depleted by ethanol treatment was increased in CE1 and CE2. TBA-reactants of liver increased by ethanol were decreased in CE1 and CE2, compared with ethanol-treated group. These results suggested that ethanol extract of Cassia semen may influence upon the ability of oxygen free radical detoxication and lowering of blood lipid level on ethanol-induced hepatotoxicity in rat.
This study was done to investigate the effects of ethanol extract of Cassia semen (Cassia tora L.) on the activities of hepatic oxygen free radicals metabolizing enzymes and blood lipid profile in rats of hepatotoxicity induced by ethanol. Sprague-Dawley male rats weighing 100~160 g were divides into 5 groups; control grouts (CON), Cassia semen ethanol extracts (200 mg/kg) treated group (CEL), ethanol (10 mL/kg, 35%) treated group (ETH), Cassia semen ethanol extracts (200 mg/kg) and ethanol treated group (CE1 ) and Cassia semen ethanol extracts (400 mg/kg ) and ethanol treated group (CE2), respectively. Compared with ETH, the growth rate of CE1 and CE2 were to be increased tendency, and in blood levels of total cholesterol, LDL-cholesterol and the activities of alanine aminotranferase and asparate aminotranferase elevated by ethanol were significantly decreased (p<0.05). It was observed that the activities of superoxide dismutase, catalase, xanthine oxidase and glutathione peroxidase of rat liver increased by ethanol, were more decreased by the treatment of Cassia semen ethanol extract than the only ethanol-treated group. The content of glutathione depleted by ethanol treatment was increased in CE1 and CE2. TBA-reactants of liver increased by ethanol were decreased in CE1 and CE2, compared with ethanol-treated group. These results suggested that ethanol extract of Cassia semen may influence upon the ability of oxygen free radical detoxication and lowering of blood lipid level on ethanol-induced hepatotoxicity in rat.
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문제 정의
이러한 각종 free radical들을 효과적으로 제거하기 위 해서는 여러 항산화 효소 및 항산화물질들의 존재가 필요하다. 본 논문에서는 결명자가 에 탄올에 의한 간의 산화적 세포손상에 작용하는 oxygen free radical대사오} 혈액중의 지질대사에 영향을 검토하기 위하여 흰쥐를6주간 사육 후 체중증가율, 식이 효율, 혈액중의 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 LDL 콜레스테롤 농도, 혈청중의 alanine aminotransferase(ALT)와 as- parate aminotransferase(AST) 활성을 측정 하는 한편, oxygen free radical 대사기전을 검토하기 위하여 해독계 항산화 효소인 superoxide dismutase(SOD), catalase, glutathione peroxi- dase(GSH- Px) 활성과 생성 계 효소인 xanthine oxidase(XO) 활성, 지질과산화물인 thiobarbituric acid(TBA)-reactants 및 glutathione(GSH)함량을 측정하여 상호비교 관찰하였다.
제안 방법
알코올 투여는 Fujji 등(20)의 방법 에 준하여 35% 에탄올을 10 mL/kg, bw/day의 수준으로, 결명자 에탄올 추출물 투여는 체중 kg 당 200 mg 및 400 mg이 함유되도록 생리식염수에 용해시켜 1일 1회 6주간 경구 투여하였다. 실험기 간중 동물의 상태를 관찰하면서 1주일에 3회 체중과 사료 섭취를 측정하였고, 실험동물은 처치 전 16시간 동안 절식시킨 후 diethyl ether 마취하에 경동맥으로부터 혈액을 채취하였으며, 간은 적출하여 0.9% 생리식염수로 남아 있는 혈액 및 기타부착물질을 제거하고 여지로 수분을 제거한 후 -70"C의 deep freezer에 보관하면서 효소 활성 측정에 사용하였다.
Anti oxidant index(AI)는 각 분획별 추출물을 첨가한 실험 구의 유도 기간을 대조구의 유도기간으로 나눈 값으로 구하였다. Rancimat의 측정조건은 시료 유지 3.0 g을 reaction vessel 에 취 하고, 증류수 70 mL을 measuring vessel 에 넣은 후, air flow rate 20 L/hr, 반응온도 에서 산화 안정 성을 비교하였다. 모든 측정 치는 3회 반복 시험하여 얻은 값의 평균치로 표시하였다(18, 19).
농축하여 얻은 농축물을 n-핵산으로 분획하여 핵산 분획을 얻고, 수층을 클로로포름으로 분획하여 클로로포름분획를 얻은 후, 수층을 다시 에 틸아세테이트, 부타놀 및 증류수순으로 분획 하여 각 분획 물을 얻었다. 각 분획 물을 45°C 수욕 상에서 rotary vacuum evaporator를 이 용하여 용매를 완전히 제거 하고 각 분획 별 추출물의 일정 량을 취 하여 soybean oil에 첨 가하여 600 ppm농도가 되도록 조제한 후 Rancimat 676(Metrohm, Swiss)를 이용하여 추출물을 첨가하지 않는 유지를 대조구로 하여 항산화력을 상호비교하였다. Anti oxidant index(AI)는 각 분획별 추출물을 첨가한 실험 구의 유도 기간을 대조구의 유도기간으로 나눈 값으로 구하였다.
결명자 에탄올추출물이 알코올을 투여한 흰쥐의 간 손상에 미치는 영향을 알아보기 위해, 정상군, 결명자 에탄올추출물 (200 mg/kg)투여 군, 알코올 투여 군(35% ethanol 10 mL/kg, b.w./day), 알코올 및 결명자 에탄올추출물(200 mg 및 400 mg/kg) 병 합투여 군 등 5군으로 나누어 6주간 사육후 체중증가율, 식이효율 및 혈액중 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤농도, 혈청중 ALT 및 AST활성, 간 손상억제 효과를 확인하기 위 해 유리 기 해독계 효소인 SOD, cata lase, GSH-Px 등의 활성과 유리기 생성 계 효소인 XO활성을측정하고, 지질과산화물인 TBARS 및 GSH함량에 미치는 영향을 관찰하였다. 1) 각 분획구의 항산화력은 n-핵산>클로르포름>에틸아세테이트>물>메탄올 순이었다.
농축하여 얻은 농축물을 n-핵산으로 분획하여 핵산 분획을 얻고, 수층을 클로로포름으로 분획하여 클로로포름분획를 얻은 후, 수층을 다시 에 틸아세테이트, 부타놀 및 증류수순으로 분획 하여 각 분획 물을 얻었다. 각 분획 물을 45°C 수욕 상에서 rotary vacuum evaporator를 이 용하여 용매를 완전히 제거 하고 각 분획 별 추출물의 일정 량을 취 하여 soybean oil에 첨 가하여 600 ppm농도가 되도록 조제한 후 Rancimat 676(Metrohm, Swiss)를 이용하여 추출물을 첨가하지 않는 유지를 대조구로 하여 항산화력을 상호비교하였다.
1). 알코올 투여는 Fujji 등(20)의 방법 에 준하여 35% 에탄올을 10 mL/kg, bw/day의 수준으로, 결명자 에탄올 추출물 투여는 체중 kg 당 200 mg 및 400 mg이 함유되도록 생리식염수에 용해시켜 1일 1회 6주간 경구 투여하였다. 실험기 간중 동물의 상태를 관찰하면서 1주일에 3회 체중과 사료 섭취를 측정하였고, 실험동물은 처치 전 16시간 동안 절식시킨 후 diethyl ether 마취하에 경동맥으로부터 혈액을 채취하였으며, 간은 적출하여 0.
5)를가하여 빙 냉 하에 서 ultra turax homogenizer(10, 000 x g, 2분) 로 마쇄하였다. 이 마쇄액의 일부는 thiobarbitUBic acid(TBA)- reactants함량 측정에 사용하고, 나머지는 4°C에서 600xg로 10분간 원심 분리 하여 핵 및 미마쇄 부분을 제거한 후 15, 000 xg에서 20분간 원심 분리하여 얻은 상징액은 SOD, catalase, XO 및 GSH-Px 활성측정의 효소원으로 사용하였고, 경동맥에서 혈액을 채취하여 전혈중의 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤 함량을 측정하였으며, 혈액을 원심분리하여 얻은 혈청을 ALT 및 AST활성 측정에 사용하였다.
조선대학교 실험 동물 센타에서 Sprague-Dawley계 웅성 흰쥐 체중 120〜 160 g) 를 1 주 일간 고형 배합사료(삼양사료)로 적응시킨 후, 난괴법에 의하여 군당 6마리씩 정상군(CON), 결명자 에탄올 추출물을 체중 kg당 200 mg/kg 투여한 군<CEL), 알코올 투여군(ETH), 알코올과 결명자 에탄올 추출물을 체중 kg당 200 mg/kg 투여한 군(CE1) 및 알코올과 결명자 에탄올 추출물을 체중 kg당 400 mg/kg 투여한 군(CE2) 등 5군으로 하였다(Table 1). 알코올 투여는 Fujji 등(20)의 방법 에 준하여 35% 에탄올을 10 mL/kg, bw/day의 수준으로, 결명자 에탄올 추출물 투여는 체중 kg 당 200 mg 및 400 mg이 함유되도록 생리식염수에 용해시켜 1일 1회 6주간 경구 투여하였다.
대상 데이터
결명자(Cassia semen)는 1999년 12월 전라북도 순창에서 재배된 것을 구입하여 분쇄후 적당량의 에탄올을 가하고 65°C에서 환류 냉각기를 부착하여 12시간씩 2회 추출. 여과한 후 45°C 수욕상에 서 rotary vacuum evaporator# 이 용하여 용매를 완전 제거하고 농축한 후 -70"C에 냉동 보관하여 실험 시료로 사용하였다.
데이터처리
실험 결과는 SPSS Package를 이용하여 실험군당 평균 ± 표준오차로 표시하였으며, 통계적 유의성 검정은 일원 배치 분산분석 (one way analysis of variance)-&- 한 후 p<0.05 수준에서 Tukey(T) test를 이용하여 상호 검정하였다.
이론/모형
간조직 중의 XO활성은 Downey 등(21)의 방법 , SOD 활성은 Crapo 등(22)의 방법, catalase활성은 Aebi(23)의 방법, GSH Px 활성 은 Flohe 등(24)의 방법 으로 측정 하였다. 혈액 중 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤 함량 측정은 Cholestech LDX(Cholestech Corporation, 1共8를이용하였으며, 혈 청중 ALT 및 AST활성 은 Reitman Frankel 방법 (25)에 의 하여 조제된 아산제약 kit를 사용하여 측정하였다.
혈액 중 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤 함량 측정은 Cholestech LDX(Cholestech Corporation, 1共8를이용하였으며, 혈 청중 ALT 및 AST활성 은 Reitman Frankel 방법 (25)에 의 하여 조제된 아산제약 kit를 사용하여 측정하였다. 과산화지 질 함량은 malondialdehyde량을 thiobarbituric acid로 비 색 정 량하는 Buege오} Aust의 방법 (26), glutathione 함량은 Tietze의 방법(27)으로 측정하였다.
단백질의 정 량은 Lowry 등의 방법(28)에 준하여 bovine se rum albuminfSigma Fr.v)을 표준품으로 하여 측정 하였다.
혈액 중 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤 함량 측정은 Cholestech LDX(Cholestech Corporation, 1共8를이용하였으며, 혈 청중 ALT 및 AST활성 은 Reitman Frankel 방법 (25)에 의 하여 조제된 아산제약 kit를 사용하여 측정하였다. 과산화지 질 함량은 malondialdehyde량을 thiobarbituric acid로 비 색 정 량하는 Buege오} Aust의 방법 (26), glutathione 함량은 Tietze의 방법(27)으로 측정하였다.
성능/효과
/day), 알코올 및 결명자 에탄올추출물(200 mg 및 400 mg/kg) 병 합투여 군 등 5군으로 나누어 6주간 사육후 체중증가율, 식이효율 및 혈액중 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤농도, 혈청중 ALT 및 AST활성, 간 손상억제 효과를 확인하기 위 해 유리 기 해독계 효소인 SOD, cata lase, GSH-Px 등의 활성과 유리기 생성 계 효소인 XO활성을측정하고, 지질과산화물인 TBARS 및 GSH함량에 미치는 영향을 관찰하였다. 1) 각 분획구의 항산화력은 n-핵산>클로르포름>에틸아세테이트>물>메탄올 순이었다. 2) 결명자에 탄올추출물과 알코올을 병 합투여 하므로서 체 중 증가율은 알코올만을 투여한 군에 비 하여 유의 적 인 변화는 아니 었으나 증가되는 경 향을 보였으며 식이효율은 정상군의 치 에 근접하게 증가되었다.
1) 각 분획구의 항산화력은 n-핵산>클로르포름>에틸아세테이트>물>메탄올 순이었다. 2) 결명자에 탄올추출물과 알코올을 병 합투여 하므로서 체 중 증가율은 알코올만을 투여한 군에 비 하여 유의 적 인 변화는 아니 었으나 증가되는 경 향을 보였으며 식이효율은 정상군의 치 에 근접하게 증가되었다. 3) 간 손상의 지표의 하나인 혈청 중 ALT 및 AST활성 의 경 우, 알코올 투여 로 정 상군에 비 하여 유의 적으로 증가되 었으나 결명자 에 탄올추출물을 병 합투여 하므로서 정 상군보다 오히 려 낮았다.
해독작용을 나타내는지를 알아보기 위하여。2-, -OH, H2O2 등 oxygen free radical을 소거 하여 항산화작용을 나타내는 효소인 SOD, catalase의 활성을 측정한 결과, 결명자 에탄올 추출물이 알코올투여로 상승된 catalase의 활성을 ETH 에 비하여 유의하게 저하시 켰으나 SOD활성은 감소시키지 못했으며, 또한 알코올 섭취에 따른 산소유리기에서 유래한 간 조직 손상에 대한 보호작용이 큰 것으로 알려진 GSH-Px 활성은 본 실험에서는 일관성있는 변화를 나타내지 않았다. 유리기 생성계 효소인 세포질내의 X0는 내외인성 핵 산성 물질 대 사에 관여 하는 효소로 알코올 투여 시 활성 이 상승되고 이로 인하여。2-의 생성이 증가되어 간조직에 산화적 손상을 유발시키는 것으로 보고(37)되고 있는더〕, 본 실험에서 결명자 에탄올추출물이 알코올 투여로 상승된 X0활성을 약 42%정도 감소시켰는데 이는 결명자 에탄올추출물이 알코올에 의한 산화적 손상을 줄일 수 있을 것으로 여겨진다.
결명자 에탄올추출물이 유리기 해독계의 효소활성을 조절하여 해독작용을 나타내는지를 알아보기 위하여。2-, -OH, H2O2 등 oxygen free radical을 소거 하여 항산화작용을 나타내는 효소인 SOD, catalase의 활성을 측정한 결과, 결명자 에탄올 추출물이 알코올투여로 상승된 catalase의 활성을 ETH 에 비하여 유의하게 저하시 켰으나 SOD활성은 감소시키지 못했으며, 또한 알코올 섭취에 따른 산소유리기에서 유래한 간 조직 손상에 대한 보호작용이 큰 것으로 알려진 GSH-Px 활성은 본 실험에서는 일관성있는 변화를 나타내지 않았다. 유리기 생성계 효소인 세포질내의 X0는 내외인성 핵 산성 물질 대 사에 관여 하는 효소로 알코올 투여 시 활성 이 상승되고 이로 인하여。2-의 생성이 증가되어 간조직에 산화적 손상을 유발시키는 것으로 보고(37)되고 있는더〕, 본 실험에서 결명자 에탄올추출물이 알코올 투여로 상승된 X0활성을 약 42%정도 감소시켰는데 이는 결명자 에탄올추출물이 알코올에 의한 산화적 손상을 줄일 수 있을 것으로 여겨진다.
2) 결명자에 탄올추출물과 알코올을 병 합투여 하므로서 체 중 증가율은 알코올만을 투여한 군에 비 하여 유의 적 인 변화는 아니 었으나 증가되는 경 향을 보였으며 식이효율은 정상군의 치 에 근접하게 증가되었다. 3) 간 손상의 지표의 하나인 혈청 중 ALT 및 AST활성 의 경 우, 알코올 투여 로 정 상군에 비 하여 유의 적으로 증가되 었으나 결명자 에 탄올추출물을 병 합투여 하므로서 정 상군보다 오히 려 낮았다. 4) 알코올 투여 로 총 콜 레 스테롤 및 LDL-콜레스테롤함량은 정상군에 비 하여 많이 증가되었으나 결명자 에탄올추출물 병합투여로 투여량이 증가됨에따라 더욱 우수한 감소효과를 나타내었다.
3) 간 손상의 지표의 하나인 혈청 중 ALT 및 AST활성 의 경 우, 알코올 투여 로 정 상군에 비 하여 유의 적으로 증가되 었으나 결명자 에 탄올추출물을 병 합투여 하므로서 정 상군보다 오히 려 낮았다. 4) 알코올 투여 로 총 콜 레 스테롤 및 LDL-콜레스테롤함량은 정상군에 비 하여 많이 증가되었으나 결명자 에탄올추출물 병합투여로 투여량이 증가됨에따라 더욱 우수한 감소효과를 나타내었다. 반면 HDL-콜레스테롤 함량은 알코올 투여로 정상군에 비하여 유의적으로감소되었으나 결명자 에탄올추출물 병합투여로 정상군의 농도에 근접하게 증가되었는데, 특히 결명자 에탄올 추출물만을 투여한 군의 함량이 정상군보다 높았다.
반면 HDL-콜레스테롤 함량은 알코올 투여로 정상군에 비하여 유의적으로감소되었으나 결명자 에탄올추출물 병합투여로 정상군의 농도에 근접하게 증가되었는데, 특히 결명자 에탄올 추출물만을 투여한 군의 함량이 정상군보다 높았다. 5) 결명자 에탄올 추출물이 알코올 투여로 상승된 유리기 생성 계효소인 XO활성은 알코올만을 투여 한 군에 비 하여 약 42%정도 현저 하게 감소 시 켰으나, 유리 기 해독계 효소인 SOD, catalase 및 GSH- Px 활성 에는 유의 한 영 향을 미 치 지 못했다. 6) 알코올 투여로증가된 간 중의 TBA반응성 산물량을 결명자 에탄올 추출물이 유효하게 감소시켰으며, 특히 결명자 에탄올 추출물만을 투여 한 군의 간 TBA 반응성 산물량이 정상군보다 오히 려낮았다.
5) 결명자 에탄올 추출물이 알코올 투여로 상승된 유리기 생성 계효소인 XO활성은 알코올만을 투여 한 군에 비 하여 약 42%정도 현저 하게 감소 시 켰으나, 유리 기 해독계 효소인 SOD, catalase 및 GSH- Px 활성 에는 유의 한 영 향을 미 치 지 못했다. 6) 알코올 투여로증가된 간 중의 TBA반응성 산물량을 결명자 에탄올 추출물이 유효하게 감소시켰으며, 특히 결명자 에탄올 추출물만을 투여 한 군의 간 TBA 반응성 산물량이 정상군보다 오히 려낮았다. 7) 알코올 섭 취로 간조직 중의 GSH함량이 정상군에 비하여 약 51%정도 감소되었으나 결명자 에탄올 추출물투여로 정상군의 함량에 근접하도록 증가되었다.
6) 알코올 투여로증가된 간 중의 TBA반응성 산물량을 결명자 에탄올 추출물이 유효하게 감소시켰으며, 특히 결명자 에탄올 추출물만을 투여 한 군의 간 TBA 반응성 산물량이 정상군보다 오히 려낮았다. 7) 알코올 섭 취로 간조직 중의 GSH함량이 정상군에 비하여 약 51%정도 감소되었으나 결명자 에탄올 추출물투여로 정상군의 함량에 근접하도록 증가되었다. 이상의 실험 결과에서 결명자 에탄올추출물의 항산화작용은 주로 알코올투여로 증가된 유리기 생성계 효소인 XO활성억제와 비효소적 항산화 작용을 나타내는 GSH함량을 증가시키므로서 지질과산화물에 대한 방어력이 증강되어 나타난 결과로 여겨지고, 또한 혈청중 지질함량, ALT 및 AST의 활성을 유의성 있게 감소시켰음은 결명자 에탄올추출물이 알코올에 의한 지방간 또는 손상된 간세포를 회복시키는 작용이 있는 것으로 추정된다.
결과는 Table 2와 같다. Table 2에서 보면 n-핵산 분획 이 Al L65로 가장 우수한 항산화력 을 나타냈으며 다음으로 클로로포름, 부타놀, 에틸아세테이트, 물 및 메탄올 순으로 결명자에 함유된 항산화성 물질은 주로 n-핵산과 클로르포름층에 많이 이행됐음을 알 수 있었다.
이 결과는 알코올의 분해 산물인 acetaldehyde가 세포질내의 XO와 작용하여 부산물로 생성된 Qr의 양이 증가되어 세포막의 불포화지방산과 결합하여 지질과산화물 생성이 증가된 것으로 여겨진다. 결명자에 탄올추출물은 알코올에 의 해 증가된 간 TBA 반응성 물질함량을 유의하게 감소시켰는데 이는 결명자 에탄올 추출물 이간에서 알코올에 의해 유도되는 지질과산화물량 증가를 유효하게 억제할 수 있을 것으로 사료된다. 특히 결명자 에탄올출물만을 투여 한 군(CEL)의 간 TBA 반응성 산물량이 CON 보다 오히려 낮게 나타났음은 결명자 에탄올추출물을 계속섭취하므로서 과다한 지질과산화작용으로 인한 노화 등 만성 질환을 예방할 수 있을 것으로 기대되어지며 이러한 작용은 결명자 에탄올추출물에 함유되어있는 물질이 체내의 항산화 작용에 직 접 혹은 간접 적으로 관여 하는 것으로 추측되어 지 지 만 본 실험 만으로는 명 확한 기 전은 알 수 없고 앞으로 이 에 대한 체계적 인 연구가 요구되어진다.
이 결과는 알코올 섭취시 체중 및 식이섭 취 량이 감소되었다는 Lieber(29)와 Shaw 등(30)의 보고와 일치하며, 이러한 현상은 알코올 독성에 의한 소화율의 감소와 영양소의 흡수율저하 및 높은 열량 공급으로 인한 식사량의 감소에 의한 것이라고 하였다. 본 실험에서 6주간 체중증가율이 결명자 에탄올추출물과 알코올 병합투여로 에탄올만을 투여 한 군에 비 하여 증가되 는 경 향을 보였고, 식 이 효율이 정상군에 근접하게 상승되었음은 흰쥐에서 결명자 에탄올 추출물이 알코올 투여로 감소된 체중 및 식 이 량에 영 향을 미 쳐 나타난 결과로 생각된다.
알코올 투여로 총 콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤 농도는 CON 에 비 하여 각각 약 54%, 35%의 유의 한 증가를 보였으나(p< 0.05) CE1 및 CE2는 CON에 비 하여 27%, 23%의 감소를 나타냈다. 반면 HDL-콜레스테롤 농도는 ETH가 CON에 비 하여 약 28%의 유의적 인 감소를 나타내었으나 결명자 에탄올 추출물 병합투여로 정상군의 치로 회복되었다.
그리고 CE2는 ETH에 비 하여 유의하게 감소를 나타내었다. 이 결과는 알코올의 분해 산물인 acetaldehyde가 세포질내의 XO와 작용하여 부산물로 생성된 Qr의 양이 증가되어 세포막의 불포화지방산과 결합하여 지질과산화물 생성이 증가된 것으로 여겨진다. 결명자에 탄올추출물은 알코올에 의 해 증가된 간 TBA 반응성 물질함량을 유의하게 감소시켰는데 이는 결명자 에탄올 추출물 이간에서 알코올에 의해 유도되는 지질과산화물량 증가를 유효하게 억제할 수 있을 것으로 사료된다.
7) 알코올 섭 취로 간조직 중의 GSH함량이 정상군에 비하여 약 51%정도 감소되었으나 결명자 에탄올 추출물투여로 정상군의 함량에 근접하도록 증가되었다. 이상의 실험 결과에서 결명자 에탄올추출물의 항산화작용은 주로 알코올투여로 증가된 유리기 생성계 효소인 XO활성억제와 비효소적 항산화 작용을 나타내는 GSH함량을 증가시키므로서 지질과산화물에 대한 방어력이 증강되어 나타난 결과로 여겨지고, 또한 혈청중 지질함량, ALT 및 AST의 활성을 유의성 있게 감소시켰음은 결명자 에탄올추출물이 알코올에 의한 지방간 또는 손상된 간세포를 회복시키는 작용이 있는 것으로 추정된다.
05), CEl 및 CE2는 ETH와 비교하여 볼 때 증가율은 다소 상승되 었으나통계적인 유의성은 없었으며, 투여량에 따른 변화도 보이지 않았다. 일일 평균 식 이 섭 취 량은 ETH가 CON에 비하여 유의성 있게 김소되 었으나(p<0.05) CE1 및 CE2는 ETH에 비하여 높은 증가를 나타냈으며 , 투여 량이 증가할수록 식 이 효율은 더욱 높았다(Table 3). 이 결과는 알코올 섭취시 체중 및 식이섭 취 량이 감소되었다는 Lieber(29)와 Shaw 등(30)의 보고와 일치하며, 이러한 현상은 알코올 독성에 의한 소화율의 감소와 영양소의 흡수율저하 및 높은 열량 공급으로 인한 식사량의 감소에 의한 것이라고 하였다.
05) CE1 및 CE2는 ETH에 비하여 약 20%정도 감소되 었다. 한편 AST활성은 ETH가 CON에 비 하여 약 39% 정도 증가되 었고(p<0.05), CE1 및 CE2는 ETH에 비하여 유의 한 결과는 아니 었으나 약 24%정도 감소되었다. 따라서 알코올투여로 증가된 ALT & AST활성이 결명자 에탄올 추출물을 병합투여하여 이들 효소의 활성이 감소되었음과 Table 7에서 TBARS함량이 감소된 결과와 관련지 어 볼 때 결명자 에탄올 추출물이 간기능에 영향을 미치는 것으로 생각되나 단정할 수는 없고 앞으로 조직의 병리학적 소견 등이 뒷받침되어야 될 것으로 사료된다.
후속연구
본 실험 에서 알코올 투여로 혈중 총 콜레스테롤 및 LDL- 콜레스테롤 농도가 정상군에 비하여 높은 증가를 나타냈는데, 이 결과는 알코올을 만성적으로 섭취시킨 쥐를 이용한 실험에서 혈청 중성지질과 총 콜레스테롤량이 정상쥐에 비하여 유의적으로 증가되었다는 Baraona와 Lieber(31)의 보고와 일치하였다. 따라서 본실험 결과는 결명자 에탄올 추출물이 총 콜레스테롤양과 고콜레스테롤혈증의 중요한 요인이며, 심장 순환기 질환의 발생과 밀접 한 관계(32, 33)가 있는 LDL- 콜레스테롤 치를 낮추고 혈관벽에 콜레스테롤 축적을 방지하여 동맥경화증 등 심장 순환기 질환의 발생과는 역상관 관계가 있다고 보고(34-36)된 HDL-콜레스테롤 치를 상승시키므로서 동맥경화지수를 낮추어 동맥경화 및 혈관장애를 개선시키는 효과가 있음을 시사해주고 있으나 이에 대한 정확한 기작은 계속 연구 검토해야할 것으로 생각된다.
05), CE1 및 CE2는 ETH에 비하여 유의 한 결과는 아니 었으나 약 24%정도 감소되었다. 따라서 알코올투여로 증가된 ALT & AST활성이 결명자 에탄올 추출물을 병합투여하여 이들 효소의 활성이 감소되었음과 Table 7에서 TBARS함량이 감소된 결과와 관련지 어 볼 때 결명자 에탄올 추출물이 간기능에 영향을 미치는 것으로 생각되나 단정할 수는 없고 앞으로 조직의 병리학적 소견 등이 뒷받침되어야 될 것으로 사료된다.
결명자에 탄올추출물은 알코올에 의 해 증가된 간 TBA 반응성 물질함량을 유의하게 감소시켰는데 이는 결명자 에탄올 추출물 이간에서 알코올에 의해 유도되는 지질과산화물량 증가를 유효하게 억제할 수 있을 것으로 사료된다. 특히 결명자 에탄올출물만을 투여 한 군(CEL)의 간 TBA 반응성 산물량이 CON 보다 오히려 낮게 나타났음은 결명자 에탄올추출물을 계속섭취하므로서 과다한 지질과산화작용으로 인한 노화 등 만성 질환을 예방할 수 있을 것으로 기대되어지며 이러한 작용은 결명자 에탄올추출물에 함유되어있는 물질이 체내의 항산화 작용에 직 접 혹은 간접 적으로 관여 하는 것으로 추측되어 지 지 만 본 실험 만으로는 명 확한 기 전은 알 수 없고 앞으로 이 에 대한 체계적 인 연구가 요구되어진다.
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