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문제 정의
- 본 연구는 복령 균사체의 기 능성 식 품첨 가물로서 이 용하기 위한 기초자료로 복령균사체 및 복령을 배양한 쌀의 항산화성을 검토하고 육가공품에서 문제시되는 아질산염에 대한 소거작용을 검토하였다.
제안 방법
- 4 mL를 가한 후 vortex하여 실온에서 15분간 방치 후 520 nm 에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 Griess reagent 대신 증류수를 가하여 측정하였으며, 아질 산염 소거능은 100-[(시료첨가구의 흡광도/무첨가구의 흡광도) >< 100]으로 나타내었다.
- 가열 후 찬물에서 식힌 후 2,000xg의 속도로 15분간 원심분리시켰다. 상등액의 흡광도를 분광광도계(Hitachi UV-2001)로 531 nm에서 측정하였고, 공시료는 시료 대신에 증류수를 가하여 같은 방법으로 측정하였다. TBARS값은 L 반응혼합물에 대해서 mg malondialdehyde (MDA)로 표시하였다.
- 시 료는 복령균사체와 복령 쌀에 각각 100배의 증류수와 에탄올을 첨가하여 상온에서 10, 000rpm으로 균질화하였다. 균질액은 다시 10, 000 rpm에서 10분간 원심분리한 후 그 상등액을 시료로 사용하였으며, BHA(buthyl hydroxy anisole)는 복령균사체와 쌀의 농도와 같은 1% 용액으로 제조하여 사용하였다.
- 종결시키는 것으로 알려져 있다(11, 12). 이에 복령 균사체 와 복령 쌀의 항산화효능을 알아보고자 복령균사체와 복령쌀을 열수와 에탄올로 추출하여 fish oil에 대한 지방산화도를 측정 하였다(Fig. 1). 저 장기 간이 경 과함에 따라 TBARS의 값은 증가하였으며, 대조구에 비하여 복령균사체 및 복령 쌀 첨 가구가 낮은 TBARS값을 나타내었다.
- 전자공여능은 Blois(8)의 방법을 변형 하여 측정하였다. 각시료 2 mL에 2X 10 4 M DPPH 1.
대상 데이터
- Chemical Co.(St. Louis, MO)에서 구입하였고, 2- thiobarbituric acid(TBA)는 Eastern Organic Chemicals (Roochester, NY)에서 구입하였다.
- 실험에 사용한 균주는 경상북도 경주에서 채집한 복령 (Poria cocos)을 재료로 배 양한 뒤 분리 하여 보존 중인 균주 중 가장 생육이 우수한 균주를 선별하여 PDA(potato dextrose agaC에서 25UC, 7일간 배양하였다. 복령쌀의 제조를 위 해서는 쌀에 1.
데이터처리
- 통계처리는 각각의 시료에 대해 평균、표준오차로 나타내 었으며 , 각 군에 따른 유의 차 검 증은 분 산분석을 한 후 Duncan's multiple range test에 따라 분석하였다.
이론/모형
- SOD 유사활성 측정은 Marklund와 Marklund의 방법(9)에 따라 각 시료 0.2 m也에 pH 8.5로 보정 한 tris-HCl buffer(50 mM tris [hydroxymethyl] amino-methane + 10 mM EDTA) 3 mL와 7.2 mM pyrogallol 0.2 mL를 가하고 25℃ 에서 10분간 방치 후 1 N HC1 1 mL로 반응을 정 지 시 킨 후 420 nm에서 흡광도를 측정하여 100-[(시료첨가구의 흡광도/무첨가구의흡광도) X 100]으로 나타내었다.
- Thiobarbituric acid reactive substances(TBARS)는 Bu-ege와 Aust의 방법(7)에 따라 측정하였다. Oil emulsione 사용하기 전에 만들고 pH 6.
- 아질산염 소거작용 측정은 Kato 등(10)의 방법으로 ImM NaNOa 용액 2 mL에 각 시료 1 mL를 가하고, 0.1 N HCl(pH 1.2), 0.2 M 구연산 완충액(pH 3.0, pH 6.0)으로 각각 pH 1.2, 3.0, 6.0으로 보정한 다음 반응용액의 부피를 10 mL로 하였다. 이 용액을 37℃에서 1 시간 반응시 킨 후 각 반응액 1 mL를 취 하여 2% 초산용액 2 mL와 30% 초산용액으로 용해한 Griess reagent。% sulfanilic acid : 1% naphthylamine=l : 1) 0.
성능/효과
- 9%의 높은 활성을 나타내었다. SOD 유사활성 은 모든 처리 구에서 25% 미 만의 낮은 활성을 나타 내었으며, BHA에서는 SOD 유사활성이 나타나지 않았다. 아 질산염의 소거작용은 열수추출보다는 에탄올 추출물에서 높게 나타났다.
- 저 장기 간이 경 과함에 따라 TBARS의 값은 증가하였으며, 대조구에 비하여 복령균사체 및 복령 쌀 첨 가구가 낮은 TBARS값을 나타내었다. 또한 복령 균사체 및 복령쌀의 첨 가구는 열수 추출물에 비하여 에탄올 추출물이 저장기간 동안 낮은 TBARS값을 나타내었으며, 복령 균사체 가 복령 쌀에 비하여 낮은 TBARS값을 나타내었다. 복령 균사체 및 복령쌀 추출물은 합성항산화제인 BHA보다는 약간 높은 TBARS값을 나타내었으나, 저장 24시 간째 BHA 첨가구 0.
- 5에서 와 같이 pH가 감소할수록 아질산염 소거 작용은 증가하였으며, Kim 등(14)이 보고한 식물체 추출물의 아질산염 소거작용은 에탄올 추출보다는 열수 추출물의 아질산염 소거작용이 우수하다는 결과와는 상반되게 에탄올 추출물의 아질산염 소거 작용이 높게 나타났다. 또한 복령 쌀보다는 복령 균사체의 아질산염 소거작용이 우수하였으며, pH 3.0에서의 균사체 에탄올 추출물은 59.1%의 소거능을 나타내 Lee 등(21)의 diethylether로 추출한 양송이(4.7%)와 표고버섯(3.5%) 추출물의 아질산염 소거능보다는 우수하였으며 , 영지버섯추출물의 68.3%보다는 낮은 소거능을 나타내었다.
- 4는 복령 균사체 와 복령 쌀의 SOD 유사활성을 측정한 것으로 모든 처리 구에서 25% 미 만의 낮은 활성을 나타내었으며, BHA에서는 SOD 유사활성이 나타나지 않았다. 또한 전자공여 능과는 반대로 복령균사체에 비하여 복령쌀에서의 SOD 유사활성이 높게 나타났다. 이는 쌀자체의 SOD 유사활성이 있기 때문이라 사료되며, 복령쌀의 열수추출물의 SOD 유사활성 능은 Hong 등(19)이 보고한 무즙의 SOD 유사 활성도 24%와 유사한 값을 나타내었다.
- 또한 복령 균사체 및 복령쌀의 첨 가구는 열수 추출물에 비하여 에탄올 추출물이 저장기간 동안 낮은 TBARS값을 나타내었으며, 복령 균사체 가 복령 쌀에 비하여 낮은 TBARS값을 나타내었다. 복령 균사체 및 복령쌀 추출물은 합성항산화제인 BHA보다는 약간 높은 TBARS값을 나타내었으나, 저장 24시 간째 BHA 첨가구 0.22 MDAppm에 비하여 복령 균사체의 열수와 에탄올 추출물이 각각 0.43 MDA ppm, 0.33 MDA ppm을 나타내어 BHA 첨가구와 유사한 값을 나타내었다. Jung 등(13)이 느타리버섯 균사체추출물이 BHA보다 항산화성이 우수하다는 보고에서는 균사체 추출물의 농도를 BHA의 농도보다 15배 가 높은 농도에서 측정한 결과이 며 본 실험 에 사용된 복령 균사체는 BHA와 같은 농도에서 실험한 결과이므로 본 실험에 사용된 복령 균사체는 합성 항산화제 인 BHA와 유사한 값을 나타내어 천연 항산화제로서의 활용이 기대된다.
- 아 질산염의 소거작용은 열수추출보다는 에탄올 추출물에서 높게 나타났다. 복령 균사체 에탄올 추출물이 가장 높은 아질산 염 소거능을 나타내었다.
- 복령 균사체의 항산화성 및 아질산염 소거작용을 알아보 고자 복령균사체와 복령쌀을 열수와 에탄올로 추출하여 fish oil에 대한 지방산화도를 측정한 결과 대조구에 비하여 복령균사체 및 복령쌀 첨가구가 낮은 TBARS값을 나타내었다. 복령균사체 및 복령쌀 추출물은 합성항산화제인 BHA보다 는 약간 높은 TBARS값을 나타내 었으나, 저장 24시 간째 BHA 첨가구 0.
- 또한 복령 균사체 및 복령쌀의 첨 가구는 열수 추출물에 비하여 에탄올 추출물이 저장기간 동안 낮은 TBARS값을 나타내었으며, 복령 균사체 가 복령 쌀에 비하여 낮은 TBARS값을 나타내었다. 복령 균사체 및 복령쌀 추출물은 합성항산화제인 BHA보다는 약간 높은 TBARS값을 나타내었으나, 저장 24시 간째 BHA 첨가구 0.22 MDAppm에 비하여 복령 균사체의 열수와 에탄올 추출물이 각각 0.43 MDA ppm, 0.33 MDA ppm을 나타내어 BHA 첨가구와 유사한 값을 나타내었다. Jung 등(13)이 느타리버섯 균사체추출물이 BHA보다 항산화성이 우수하다는 보고에서는 균사체 추출물의 농도를 BHA의 농도보다 15배 가 높은 농도에서 측정한 결과이 며 본 실험 에 사용된 복령 균사체는 BHA와 같은 농도에서 실험한 결과이므로 본 실험에 사용된 복령 균사체는 합성 항산화제 인 BHA와 유사한 값을 나타내어 천연 항산화제로서의 활용이 기대된다.
- 33 MDA ppm을 나타내 어 BHA 첨가구와 유사한 값을 나타내었다. 복령균사체 및 쌀의 Fe2； Cu2* 대한 금속이 온 봉쇄 작용은 복령 쌀보다는 복 령균사체에서 높은 활성이 나타났다. 전자공여능은 복령쌀 에서는 25% 미만인 반면 복령균사체에서는 열수와 에탄올 추출물에서 각각 76.
- 복령균사체와 복령쌀의 전자공여능은 Fig. 3과 같이 추출 방법에 관계없이 복령쌀에서는 25% 미만의 전자공여능을 나타낸 반면 균사체에서는 열수와 에탄올 추출물에서 각각 76.8, 79.9%의 높은 활성을 나타내었다. 합성 항산화제 인 BHA 와의 비교에서는 복령균사체가 다소 낮은 활성을 나타내었으나, 동일 농도에서 Jung과 Noh(15)가 보고한 herb 추줄물중 rosemary 추출물보다는 높은 활성을 나타내 었으며, sage와 유사한 값을 나타내었다.
- 1). 저 장기 간이 경 과함에 따라 TBARS의 값은 증가하였으며, 대조구에 비하여 복령균사체 및 복령 쌀 첨 가구가 낮은 TBARS값을 나타내었다. 또한 복령 균사체 및 복령쌀의 첨 가구는 열수 추출물에 비하여 에탄올 추출물이 저장기간 동안 낮은 TBARS값을 나타내었으며, 복령 균사체 가 복령 쌀에 비하여 낮은 TBARS값을 나타내었다.
- 복령균사체 및 쌀의 Fe2； Cu2* 대한 금속이 온 봉쇄 작용은 복령 쌀보다는 복 령균사체에서 높은 활성이 나타났다. 전자공여능은 복령쌀 에서는 25% 미만인 반면 복령균사체에서는 열수와 에탄올 추출물에서 각각 76.8, 79.9%의 높은 활성을 나타내었다. SOD 유사활성 은 모든 처리 구에서 25% 미 만의 낮은 활성을 나타 내었으며, BHA에서는 SOD 유사활성이 나타나지 않았다.
- 지방산화 촉진인자인 Fe2*, Cu*이온에 대한 복령 균사체 및 쌀의 금속이온 봉쇄작용은 Fig. 2와 같이 Fe>에 대한 금속이온 봉쇄작용은 복령쌀보다는 균사체에서 높은 활성을 나타내었으며, Cif 이온에 대한 금속이온 봉쇄작용은 모든처 리 구에서 20% 정도의 다소 낮은 활성을 나타내었다. 복령 균사체의 금속이온 봉쇄작용은 합성항산화제인 BHA보다는 낮은 활성을 나타내었으나, Kim 등(14)이 보고한 마늘의 Fe2+ 봉쇄작용과 유사한 값을 나타내었다.
후속연구
- 33 MDA ppm을 나타내어 BHA 첨가구와 유사한 값을 나타내었다. Jung 등(13)이 느타리버섯 균사체추출물이 BHA보다 항산화성이 우수하다는 보고에서는 균사체 추출물의 농도를 BHA의 농도보다 15배 가 높은 농도에서 측정한 결과이 며 본 실험 에 사용된 복령 균사체는 BHA와 같은 농도에서 실험한 결과이므로 본 실험에 사용된 복령 균사체는 합성 항산화제 인 BHA와 유사한 값을 나타내어 천연 항산화제로서의 활용이 기대된다.
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