선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 따라서 본 연구에서는 진도개의 인공수정 기술의 개발을 위하여 기초자료를 얻고자 정액성상과 동결정액 제조시 정액활력과 생존율 및 운동성 등을 조사하였으며 정액채취량, 총정자수 및 정액의 활력과 생존율 등에 개체차이를 고려한 종견의 선 발이 활용할 수 있도록 본 연구를 수행하였다.
- 공시견은 총 4두로 백구, 황구 각 2두씩 생후 12~24개월령의 혈통관리된 종견이었으며 사육장의 견방당 1마리씩 단독사육을 원칙으로 사육 관 리하였다. 본 연구결과를 토대로 진도개의 선발은 진도군에서 사육되고 있는 진도개 순종 중에서 외 모심사규정에 의해 우수한 진도개를 선발하여 장차 인공수정 및 유전자원보존 등에 이용할 수 있는 종견으로 활용하기로 하였다.
- 본 연구는 진도개 동결정액 제조기술을 정립하기 위하여 진도개 정액성상과 동결 전후 정액의 활력과 생존율 및 CASAs를 이용한 운동성 등에 대하여 조사하였고, 백구와 황구간, 개체간의 정액성 상과 내동성을 비교, 조사하였다.
제안 방법
- 동결된 정액의 현미경검사는 주관적인 판단 및 평가가 수반되므로 보다 정확하고 객관적인 평가가 가능한 CASAs(Computer-assisted semen analysis : Hamilton)를 이용한 정액의 운동성을 조사하였다. 검사정액 10“1를 취하여 microcell slide에 넣고 현 미경검사를 하였으며, 조사항목은 MOT(운동정자 비율, %), PROG(전진운동정자비율, %), VAP(정자 의 초당 평균이동속도, “m/sec), VCL(정자의 초당 평균곡선이동속도, 〃m/sec), VSL(정자의 초당 평균직선이동속도, “m/sec), ALH(측두거리, “m)로 정액의 운동성을 종합적으로 조사 평가하였다.
- 정액채취와 동결정액 제조를 위해 공시되는 진도개는 전남 진도군 진도개보육관리소의 사육장에서 선발된 종견을 농협중앙회 젖소개량부의 사육장에서 물과 사료를 자유급식시키면서 사육하였다. 공시견은 총 4두로 백구, 황구 각 2두씩 생후 12~24개월령의 혈통관리된 종견이었으며 사육장의 견방당 1마리씩 단독사육을 원칙으로 사육 관 리하였다. 본 연구결과를 토대로 진도개의 선발은 진도군에서 사육되고 있는 진도개 순종 중에서 외 모심사규정에 의해 우수한 진도개를 선발하여 장차 인공수정 및 유전자원보존 등에 이용할 수 있는 종견으로 활용하기로 하였다.
- 또한 원정액의 활력과 생존율은 37℃로 조정한 가온판이 부착된 현미경하에서 검사하였다. 동결 전 정액검사는 냉장보존된 정액중 일부를, 동결후 정액검사는 동결된 정액을 융해하여 현미경하에서 활력과 생존율을 검사하였다.
- 동결된 정액의 현미경검사는 주관적인 판단 및 평가가 수반되므로 보다 정확하고 객관적인 평가가 가능한 CASAs(Computer-assisted semen analysis : Hamilton)를 이용한 정액의 운동성을 조사하였다. 검사정액 10“1를 취하여 microcell slide에 넣고 현 미경검사를 하였으며, 조사항목은 MOT(운동정자 비율, %), PROG(전진운동정자비율, %), VAP(정자 의 초당 평균이동속도, “m/sec), VCL(정자의 초당 평균곡선이동속도, 〃m/sec), VSL(정자의 초당 평균직선이동속도, “m/sec), ALH(측두거리, “m)로 정액의 운동성을 종합적으로 조사 평가하였다.
- 예비동결된 straw는 액체질소에 침지하여 동결 정액 제조를 완료하였고, goblet에 담아 LN? tank에 넣어 보존하였다. 동결정액의 융해는 37℃에서 20초간 실시하고 가온판이 부착된 현미경하에서 정액의 활력과 생존율을 검사하고 CASAs 검사로 정액의 운동성을 평가하여 인공수정에 이용 여부를 판단하였다.
- )를 이용하여 측정하였고, 정액의 총정자수는 정액량과 정자농도를 곱하여 계산하였다. 또한 원정액의 활력과 생존율은 37℃로 조정한 가온판이 부착된 현미경하에서 검사하였다. 동결 전 정액검사는 냉장보존된 정액중 일부를, 동결후 정액검사는 동결된 정액을 융해하여 현미경하에서 활력과 생존율을 검사하였다.
- 원정액의 정자수(농도), 활력과 생존율 등을 조사하여 동결정액 제조의 가능 여부를 판단하여 동 결이 가능한 정 액을 Ext I 으로 희석하여 5℃ cold room에서 2시간 정도 방치하여 5℃ 까지 냉각시켜 같은 온도의 동량 Ext II를 약 1시간에 걸쳐 희석 평형을 유도하였다. 평형후 최종농도가 50xl06cells /ml 되게 조정후 0.
- 고 압력을 가하면서 음경을 인공질에 삽입하여 채취하였다. 이때 음경에 상처를 주지 않고 적당한 압력을 주면서 2차 fraction(sperm-rich faction)만을 인공질을 이용하여 채취하였고, 정상적인 정액만을 택하여 400xg로 약 5분간 원심분리하여 상층액은 버리고 37℃의 2 ml Ext I으로 희석하여 본 연구에 이용하였다.
- 정액량은 채취 직후 2차 분획을 인공질에 연결된 정액채취관의 눈금으로 직접 확인하였으며 정 자농도는 분광계 (Spectrophotometer: Spectronic 20, Milton Roy Co.)를 이용하여 측정하였고, 정액의 총정자수는 정액량과 정자농도를 곱하여 계산하였다. 또한 원정액의 활력과 생존율은 37℃로 조정한 가온판이 부착된 현미경하에서 검사하였다.
- 정액채취는 Fig. 1과 같이 1~2년생 진도개를 주 당 1~2회씩 마사지법과 인공질법을 병행 실시하였다. 정액채취 수캐는 정액채취대로 옮기고 10 ml tube-f- semen collection cone (AG-TEK, KANE Enterprises, S.
대상 데이터
- 정액채취와 동결정액 제조를 위해 공시되는 진도개는 전남 진도군 진도개보육관리소의 사육장에서 선발된 종견을 농협중앙회 젖소개량부의 사육장에서 물과 사료를 자유급식시키면서 사육하였다. 공시견은 총 4두로 백구, 황구 각 2두씩 생후 12~24개월령의 혈통관리된 종견이었으며 사육장의 견방당 1마리씩 단독사육을 원칙으로 사육 관 리하였다.
데이터처리
- 본 연구는 백구와 황구간, 그리고 각 개체별 채 취한 정액성상과 처리를 하면서 동결 전후의 정액 활력과 생존율, CASA 검사로 정액의 운동성을 조사한 평균 결과에 관하여 SAS package를 사용하여 Duncan test를 실시하였다.
성능/효과
- 1. 총 63회 정액채취 후 신선정액의 평균 정액 량 3.8 ml, 농도 145.6 X I0%讯, 총정 자수 396. 2x08/ml, 전진운동율 79.
- 2. 동결전 , 후 정자의 전진운동율과 생존율을 46 회 조사한 결과 동결전 73.5%와 82.3%를, 동 결후 51.1%와 64.9%를 나타내 동결과정이 전진운동율과 생존율에 영향이 있었으며, 역시 황구와 백구간에는 황구가, 개체간에는 황구 2호가 동결전후 전진운동율과 생존율에서 유의적인 차이가 인정되었다 (P<0.05).
- 4. 채취된 정액중 백구는 46%(13/28), 황구는 94% (33/35)가 동결정액 제조가 가능해 황구가 내 동성이 좋았으며, 전체적으로 73%(46/63) 동 결정액 제조가 가능하였다
- Glycerol 평형이 완료된 동결전 냉장정액의 활 력과 생존율은 원정액보다 다소 감소한 73.5%와82.3%였으며, 동결정액의 융해후 활력과 생존율은 51.1%와 64.9%로 기준이상의 양호한 결과를 보였다. 그리고 백구와 황구간의 비교 결과 동결전 냉 장정액의 활력과 생존율, 동결 융해후 활력과 생존 율은 백구가 70.
- 반면 백구와 황구간의 운동성은 유의적인 차이는 없었으나 황구가 다소 좋은 결과를 보였다. 개체간에는 황구의 2호가 가장 운동성이 좋은 것으로 나타났으며, MOT, PROG, VAPe 백구 4호 가 가장 낮았고, VCL, ALH는 황구 5호가 가장 운동성이 떨어지는 것으로 나타났으며, VSL(직선이 동속도)은 전 개체간 유의적인 차이가 인정되지 않았다.
- 결론적으로 진도개의 동결정액을 제조하기 위하여 정액성상 및 동결 전후 운동성을 조사한 결과 동결정액 제조와 생산체계의 구축이 가능하였으며, 황구와 백구간, 개체간의 정액성상과 동결 전후의 운동성에 차이가 인정되므로 정액성상과 내동성을 고려한 종견선발 체계가 필요하다고 사려되었다.
- 5% 수준이었다. 그 중 백구와 황구간 정액성상 비교 결과 백구는 4.9 ml, 58.3백 만/ml, 총정자수 199.6백만이었고, 황구는 2.9 ml,215.4백만/ml, 총정자수 553.5백만으로서 정액량은 백구가 많았으나 정자농도는 황구가 상당히 높아 총정자수 역시 황구가 유의적으로 높은 경향을 보 였다(PC0.05). 또한 현미경 검사에 의한 원정액의 활력과 생존율을 검사한 비교 결과에서도 백구는 77.
- 05). 그리고 개체간의 원정액 활력과 생존율 역시도 총정자수의 순과 일치하는 경향을 보여 2호, 5호, 4호, 6호순 이었고 2호의 활력과 생존율은 82.0%와 91.8%를 나타냈으며 개체간의 유의적인 차이가 인정되었다(P<0.05).
- 9%로 기준이상의 양호한 결과를 보였다. 그리고 백구와 황구간의 비교 결과 동결전 냉 장정액의 활력과 생존율, 동결 융해후 활력과 생존 율은 백구가 70.8%, 78.8%와 48.5%, 62.3%이고 황 구가 74.5%, 83.6%와 51.1%, 65.9%로 보다 우수한 것으로 나타났으며, 동결 융해후 생존율을 제외하고 유의적인 차이가 있었다(P<0.05). 그리고 백구 와 황구간의 비교 결과 동결전 냉장정액의 활력과 생존율, 동결 융해후 활력과 생존율은 백구가 70.
- 9%로 기준이상의 양호한 결과를 보였다. 그리고 백구와 황구간의 비교 결과 동결전 냉 장정액의 활력과 생존율, 동결 융해후 활력과 생존 율은 백구가 70.8%, 78.8%와 48.5%, 62.3%이고 황 구가 74.5%, 83.6%와 51.1%, 65.9%로 보다 우수한 것으로 나타났으며, 동결 융해후 생존율을 제외하고 유의적인 차이가 있었다(P<0.05). 그리고 백구 와 황구간의 비교 결과 동결전 냉장정액의 활력과 생존율, 동결 융해후 활력과 생존율은 백구가 70.
- 05). 또한 개체간의 활력과 생존 율을 비교한 결과 동결전 냉장보존 정액의 활력과 생존율은 2호가 75.0%와 84.0%로 가장 좋았으며 5호, 4호 6호 순이었고, 동결 융해후 활력과 생존 율도 역시 2호가 54.5%와 68.3%로 가장 좋았으며 6호, 5호, 4호순으로 차이가 인정되었다(PV0.05).
- 8%로 현미경 검사의 생존율, 활력검사 성적과 비교하였을 때 유사한 경향을 보였으나 CASAs검사의 결과가 다소 높게 나타났다. 또한 동결정액의 운동성을 평가한 초당 평 균이 동속도(VAP)는 75.3 /zm/sec, 곡선 이동 속도(VCL)은 90.0 “m/sec, 직진이동속도(VSL)은69.4 “m/sec 및 측두거리(두부 이동폭 : ALH)는 4.4 로서 동결 융해후 운동성이 양호한 결과를 나 타냈다. 반면 백구와 황구간의 운동성은 유의적인 차이는 없었으나 황구가 다소 좋은 결과를 보였다.
- 05). 또한 현미경 검사에 의한 원정액의 활력과 생존율을 검사한 비교 결과에서도 백구는 77.3%와 87.1%, 황구는 81.6%와 91.4%를 보여 황 구가 보다 우수한 것으로 나타났다(PV0.05). 한편 진도견 개체별 정액성상을 살펴 본 결과에서는 정액량의 경우 백구인 4호와 6호가 우수하였으나 정 자농도는 황구의 5호와 2호 순으로 좋았고, 종합한 총정자수는 황구인 2호가 가장 많았고, 5호, 백구 4호, 6호순으로 정액성상에 있어서 개체간의 유의 적인 차이가 인정되었다(PV0.
- 동결 . 융해정자의 보다 객관적인 평가를 위하여 CASA system을 이용한 총 44회 평가한 결과, 생존율 65.6%, 전진운동율 54.8%, VAP 75.3 “m/sec, VCL 90.0 /zm/sec, VSL 69.4 “m /sec 및 ALH 4.4 “m로 동결 융해 정액의 운 동성은 양호하였고, 황구와 백구간의 운동성에는 유의적인 차이가 없었으나, 개체간에는 역시 황구 2호가 운동성이 우수하여 유의적인 차이가 인정되었다 (P<0.05).
- 한편 앞서 정액채취 및 원정액 성상검사후 동결 처리가 가능한 경우는 백구와 황구간, 개체간에 비교한 결과에서도 백구는 28회 채취후 13회 동결정 액이 제조되어 46%였고, 황구는 35회 채취하여 33 회가 동결정액 제조가 94% 가능하여 동결정액 제조를 위한 내동성에서도 백구보다는 황구가 우수한 것으로 판단되었다. 전체적으로는 63회 채취하여 46회 동결정액을 제조하여 73%정도가 가능하였고, 제조된 동결정액은 활력과 생존율이 상당히 양호하므로 동결정액 제조기술이 정립되었다고 사려되었다.
- 정액성상을 조사한 결과 평균 정액량은 3.8 ml, 정 자농도는 ml당 145.6백 만, 총정 자수는 392.2백 만 정도 였으며, 원정액의 활력과 생존율은 현미경 검 사결과 79.7%와 89.5% 수준이었다. 그 중 백구와 황구간 정액성상 비교 결과 백구는 4.
- 한편 앞서 정액채취 및 원정액 성상검사후 동결 처리가 가능한 경우는 백구와 황구간, 개체간에 비교한 결과에서도 백구는 28회 채취후 13회 동결정 액이 제조되어 46%였고, 황구는 35회 채취하여 33 회가 동결정액 제조가 94% 가능하여 동결정액 제조를 위한 내동성에서도 백구보다는 황구가 우수한 것으로 판단되었다. 전체적으로는 63회 채취하여 46회 동결정액을 제조하여 73%정도가 가능하였고, 제조된 동결정액은 활력과 생존율이 상당히 양호하므로 동결정액 제조기술이 정립되었다고 사려되었다.
- 05). 한편 진도견 개체별 정액성상을 살펴 본 결과에서는 정액량의 경우 백구인 4호와 6호가 우수하였으나 정 자농도는 황구의 5호와 2호 순으로 좋았고, 종합한 총정자수는 황구인 2호가 가장 많았고, 5호, 백구 4호, 6호순으로 정액성상에 있어서 개체간의 유의 적인 차이가 인정되었다(PV0.05). 그리고 개체간의 원정액 활력과 생존율 역시도 총정자수의 순과 일치하는 경향을 보여 2호, 5호, 4호, 6호순 이었고 2호의 활력과 생존율은 82.
- 현미경검사시 동결 융해후 활력과 생존율은 51.1 %와 64.9%였고 CASAs검사에 의한 움직이는 생 존정자의 비율(MOT)은 65.6%였으며, 왕성한 전진 운동정자의 비율(PROG, 활력)은 54.8%로 현미경 검사의 생존율, 활력검사 성적과 비교하였을 때 유사한 경향을 보였으나 CASAs검사의 결과가 다소 높게 나타났다. 또한 동결정액의 운동성을 평가한 초당 평 균이 동속도(VAP)는 75.
- 5 % 였다. 황구와 백구간에는 황구가, 개체간 에는 황구 2호가 정자농도, 총정자수, 전진운 동정자율 및 생존율 등의 정액성상에서 유의적으로 우수하였다(P<0.05).
후속연구
- 또한 진도개의 동결정액 제조를 위한 정액성상의 특성 조 사 및 동결정액 제조기술은 더욱 미흡한 상태이다. 일반적으로 동결정액의 제조를 위해서는 우선적으 로 그 품종의 정액특성과 성상 등에 관하여 조사하여야 하며 이러한 자료를 기초로 동결정액 희석액, 정자의 농도 및 동결방법 등이 결정될 수 있을 것이다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.