선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 부추의 항산화 효과에 관해서는 Kwak 등(11)과 Hwang 등(12)이 김해 부추 및 포항 부추에서 SOD 유사 활성을 측정한 바 있고 Lee 등(13, 14)은 장기 간의 부추섭 취 가 동물조직의 산화 및 노화를 확연히 억제하였고 자외선 조사 시 피부 노화를를 억제하는 효과를 확인한 바 있다. 따라서 본 연구에서는 부추 식이의 활성산소종 소거 효과를 규명하기 위하여 ICR 마우스에 부추를 장기 간 투여 하고 간 및 피부조직 에서 생성되는 활성산소종의 변화를 관찰하였다.
제안 방법
- 0 g 가량의 ICR 마우스 수컷을 실험동물센터(대전)에서 구입하여 실험 시작하기 전 시판 고 형사료를 먹이면서 7일 간 환경에 적응시킨 후 완전임의배치 'h (completly randomized design)의해 평균 체중이 유사 하도록 대조군, 부추 2% 첨 가식 이 군, 부추 5% 첨 가식 이 군의 세 그룹으로 나누어 한 그룹당 6마리씩 사육용 cage속에 넣 어 12개월간 식이를 급여한 후에 희생시켰다. 대조군에는 부 추가 첨가되지 않은 AIN-76 식이를 제공하였으며, 실험군은 AIN-76 식 이에 부추 분말을 2% 및 5% 첨가한 부추 첨 가식 이를 12개월 간 공급하였다. 대조군 및 실험군의 식이조성은 Table 1에 나타내었다.
- 부추식이의 활성산소종 소거 효과를 규명하기 위하여 ICR 마우스를 12개월간 사육하면서 2%, 5% 부추식 이를 투여 하고 간과 피 부조직 의 시 토솔, 마이크로솜 및 미 토콘드리 아를 분리하여 가령에 따른 활성산소종인 수퍼옥사이드 아니온, 과산화수소 및 hydroxy radical 함량을 측정하였다. 이들 활 성산소종들의 함량은 간에 피 부조직 의 2배 이상이 함유되어 있었고 가령에 따라 활성산소종의 함량은 증가하였다.
- 동결건조부추는 AOAC의 방법(15)에 따라 일반성분과 총 식이섬유함량을 분석하였으며 식이에 첨가시 단백질, 지질, 식이섬유량이 동일하도록 casein, com oil, cellulose의 양을 조정 하였다. 사육기 간동안 식 수로 지 하 수를 주 3회 공급하였고 식이는 매일 공급하였으며 체중증가 량은 매주 1회 측정하였다. 사육실의 온도는 20~25℃를 유 지하였으며 12시간 간격으로 조명을 점등 및 소등하였다.
- 이를 10, 000 rpm에서 15분간 원심분리하여 미토콘드리아 분획을 취하였으며, 분리된 상등액을 40, 000rpm에서 60분간 원심분리하여 시토솔 분획과 마이크로 솜 분획을 취하였다. 시토솔 분획은 수퍼옥사이드 아니온 함량 측정에 사용하였고, 마이크로 솜 분획은 과산화수소 함량 측정에 사용하였다.
- 사육실의 온도는 20~25℃를 유 지하였으며 12시간 간격으로 조명을 점등 및 소등하였다. 실험 동물의 희생 및 시료의 채취실험 동물을 한 마리씩 데시케이터에 넣어 드라이 아이스 로 마취 시켜 개복하였으며, 개복 후 EDTA를 10 mg씩 넣은 3mL용 주사기를 이용하여 심장에서 채혈하였고 피부는 털 을 전기 면도기로 깎은 다음 표피와 진피를 포함하는 조직을 데어내어 0.9% 생리 식염수로 씻어 털과 혈액 등을 제거하고 여과지로 염용액을 제거한 뒤 무게를 측정하고 -70℃ 냉동고에 보관하면서 실험하였다.
- 미 토콘드리 아 분획에서 의 hydroxyl radical 함량은 Choi 등(16)의 변형된 방법에 따라 측정하였다. 즉, 0.1 M potassium 인산 완충액 (pH 7.4), 10 mM NaNs, 7 mM deoxyribose, 5 mM ferrous ammonium sulfate, 0.54 M NaCl 33.3 pL를 취한 후 이 혼합액을 37℃에서 15분간 배양시킨 후 혼합액에 8.1% SDS 75 UL, 20% acetic acid 500 虬, 증류수 25 UL를 첨가하고 1.2% TBA 333 虬를 첨가하여 30분간 끓인 후 실온에서 식혀 3, 000 rpm에서 5분간 원심분리 시 키고 532 nm에서 흡광도를 측정하였다.
대상 데이터
- 본 연구에서 사용한 부추는 경남 김해시 대동면에서 5월에 수확한 3벌 부추로서 동결건조하고 분말화한 후, -70℃ 에서 보관하면서 실험에 사용하였다.
- 실험 동물은 체중 19.5-21.0 g 가량의 ICR 마우스 수컷을 실험동물센터(대전)에서 구입하여 실험 시작하기 전 시판 고 형사료를 먹이면서 7일 간 환경에 적응시킨 후 완전임의배치 'h (completly randomized design)의해 평균 체중이 유사 하도록 대조군, 부추 2% 첨 가식 이 군, 부추 5% 첨 가식 이 군의 세 그룹으로 나누어 한 그룹당 6마리씩 사육용 cage속에 넣 어 12개월간 식이를 급여한 후에 희생시켰다. 대조군에는 부 추가 첨가되지 않은 AIN-76 식이를 제공하였으며, 실험군은 AIN-76 식 이에 부추 분말을 2% 및 5% 첨가한 부추 첨 가식 이를 12개월 간 공급하였다.
데이터처리
- 실험결과는 mean土SD로 표시하였고, SPSS program을 이용하여 one-way ANOVA로 처리한 뒤 유의차가 나타날 경우 Turkey test로 각 군 간의 유의성 을 사후 검정 하였다.
이론/모형
- Lowiy 등(17)의 방법에 의해 bovine serum albumin(BSA) 을 표준단백질로 사용하여 단백질량을 측정하였다.
- 대조군 및 실험군의 식이조성은 Table 1에 나타내었다. 동결건조부추는 AOAC의 방법(15)에 따라 일반성분과 총 식이섬유함량을 분석하였으며 식이에 첨가시 단백질, 지질, 식이섬유량이 동일하도록 casein, com oil, cellulose의 양을 조정 하였다. 사육기 간동안 식 수로 지 하 수를 주 3회 공급하였고 식이는 매일 공급하였으며 체중증가 량은 매주 1회 측정하였다.
- 마이크로 솜 분획에서의 과산화수소 함량은 Choi 등(16)의 변형된 방법에 따라 측정하였다. 즉, 400 mM potassium인 산완충액 (pH 7.
- 미 토콘드리 아 분획에서 의 hydroxyl radical 함량은 Choi 등(16)의 변형된 방법에 따라 측정하였다. 즉, 0.
- 시토솔 분획에서의 수퍼옥사이드 아니온 함량은 Choi 등(16)의 변형된 방법에 따라 측정하였다. 즉, 시료 300 UL를 취하고 0.
성능/효과
- 4에는 피부 마이크로솜 분획에서의 과산화수소 함량 을 나타내었다. 1개월령 마우스 피부조직 중의 과산화수소 함량은 간조직의 절반 가량 함유되어 있었고 가령과 더불어 증가하였으나 그 함량은 간조직보다는 크게 낮은 수준이었 다. 부추식이는 역시 피부조직의 과산화수소 증가를 억제하 였는데 2%보다는 5% 첨가식 이의 효과가 유의하게 높았다.
- 피부조직 중의 hydroxyl radical 생성량은 간조직의 절반 가량이었지만 간에서와 마 찬가지로 연령증가와 더불어 증가하여서 7개월째에는 1개월 보다 약간 증가하였으나 13개월째에는 급격히 증가하여 초 기값의 약 2배 가량의 값을 나타내었다. 2% 첨가 식 이군은 대조군보다 낮은 활성 산소량이 생성 되 었고 7개월과 13개월 에서 유사한 생성량을 나타내었다. 그러나 5% 첨가 식이군 은 연령 이 증가함에 따라 활성산소 생성 량이 급격히 감소하였다.
- 중의 수퍼옥사이드 아니 온 함량은 간조직 의 62% 정도로 나타났 고 가령에 따른 증가도 완만하여 13개월 째에는 간조직의 31% 정도로 낮았다. 2% 첨가 식이군에서는 시토솔의 수퍼옥 사이 드 아니온 함량을 대조군에 비해 7개월 에 30% 兀량 저 하시 켰으나 13개월에서는 60% 가량 저하시켜 부추의 섭취 기간이 늘어날수록 활성산소 억제효과가 커짐을 알 수 있었다. 이러한 경향은 5% 첨가 식이군에서 더욱 분명하여 시토 솔의 수퍼옥사이드 아니온 생성을 거의 억 제하였고 7개월보다 13개월에서 그 효과가 더욱 확실하였다.
- 2% 첨가 식이군의 경우 7개월까지는 수퍼옥사이드 아니온 함량이 약간 증가하였으나 그 이 후에는 소량 감소하 였고 대조군에 비해서는 유의적으로 낮은 값을 나타내었다. 5% 첨가 식이군은 연령이 증가하여도 거의 수퍼옥사이드 아 니온 값이 증가하지 않아 대조군과 2% 첨가 식 이군에 비해 현저히 낮은 함량을 나타내었다.
- 5에는 연령 증가에 따른 마우스의 간 미토콘드리아 분획 중의 hydroxyl radical 함량을 나타내었다. 대조군의 경우 연령 이 1개월에서 13개월로 증가함에 따라 hydroxyl radical 함량이 점차 증가하여서 마우스의 연령 증가와 더불어 활성산소가 간조직에 축적됨을 알 수 있었다. 이에 비해 부추 첨가 식이군에서는 hydroxyl radical 함량이 연령증가에도 불구하고 점차 감소하는 경향을 나타내 었고 2% 첨 가군보다 5% 첨가군에서 농도의존적으로 감소함을 알 수 있었다.
- 56 nmol/mg protein 으로 증가하였다. 부추 첨가 식이군은 과산화수소 생성을 유 의하게 억 제하여서 연령이 증가하여도 그 함량이 증가하지 않고 오히려 약간 감소하는 경향을 나타내었으며 대조군에 비해서는 농도 의존적으로 과산화수소 생성을 억제하였다. Fig.
- 1개월령 마우스 피부조직 중의 과산화수소 함량은 간조직의 절반 가량 함유되어 있었고 가령과 더불어 증가하였으나 그 함량은 간조직보다는 크게 낮은 수준이었 다. 부추식이는 역시 피부조직의 과산화수소 증가를 억제하 였는데 2%보다는 5% 첨가식 이의 효과가 유의하게 높았다. 부추식 이의 활성산소소거 효과는 7개 월령 에서도 유의 하게 농도의존적 인 효과를 나타내었지만 13개월령 에서 그 효과가 더 분명하였다.
- 부추식이의 활성산소종 소거 효과를 규명하기 위하여 ICR 마우스를 12개월간 사육하면서 2%, 5% 부추식 이를 투여 하고 간과 피 부조직 의 시 토솔, 마이크로솜 및 미 토콘드리 아를 분리하여 가령에 따른 활성산소종인 수퍼옥사이드 아니온, 과산화수소 및 hydroxy radical 함량을 측정하였다. 이들 활 성산소종들의 함량은 간에 피 부조직 의 2배 이상이 함유되어 있었고 가령에 따라 활성산소종의 함량은 증가하였다. 항산 화효과가 큰 부추를 식이에 첨가시켰을 때 활성산소종들의 생성을 현저히 억제하였고 2%보다는 5% 부추 첨가식이군에서 농도의존적으로 유의한 활성산소종 감소효과가 얻어졌 다.
- 2% 첨가 식이군에서는 시토솔의 수퍼옥 사이 드 아니온 함량을 대조군에 비해 7개월 에 30% 兀량 저 하시 켰으나 13개월에서는 60% 가량 저하시켜 부추의 섭취 기간이 늘어날수록 활성산소 억제효과가 커짐을 알 수 있었다. 이러한 경향은 5% 첨가 식이군에서 더욱 분명하여 시토 솔의 수퍼옥사이드 아니온 생성을 거의 억 제하였고 7개월보다 13개월에서 그 효과가 더욱 확실하였다.
- 대조군의 경우 연령 이 1개월에서 13개월로 증가함에 따라 hydroxyl radical 함량이 점차 증가하여서 마우스의 연령 증가와 더불어 활성산소가 간조직에 축적됨을 알 수 있었다. 이에 비해 부추 첨가 식이군에서는 hydroxyl radical 함량이 연령증가에도 불구하고 점차 감소하는 경향을 나타내 었고 2% 첨 가군보다 5% 첨가군에서 농도의존적으로 감소함을 알 수 있었다. Fig.
- 1 개월된 동물 피부조직 .중의 수퍼옥사이드 아니 온 함량은 간조직 의 62% 정도로 나타났 고 가령에 따른 증가도 완만하여 13개월 째에는 간조직의 31% 정도로 낮았다. 2% 첨가 식이군에서는 시토솔의 수퍼옥 사이 드 아니온 함량을 대조군에 비해 7개월 에 30% 兀량 저 하시 켰으나 13개월에서는 60% 가량 저하시켜 부추의 섭취 기간이 늘어날수록 활성산소 억제효과가 커짐을 알 수 있었다.
- 6에는 피 부에서 분리한 미 토콘드리 아 분획 중의 hydroxyl radical 함량을 나타내었다. 피부조직 중의 hydroxyl radical 생성량은 간조직의 절반 가량이었지만 간에서와 마 찬가지로 연령증가와 더불어 증가하여서 7개월째에는 1개월 보다 약간 증가하였으나 13개월째에는 급격히 증가하여 초 기값의 약 2배 가량의 값을 나타내었다. 2% 첨가 식 이군은 대조군보다 낮은 활성 산소량이 생성 되 었고 7개월과 13개월 에서 유사한 생성량을 나타내었다.
- 이들 활 성산소종들의 함량은 간에 피 부조직 의 2배 이상이 함유되어 있었고 가령에 따라 활성산소종의 함량은 증가하였다. 항산 화효과가 큰 부추를 식이에 첨가시켰을 때 활성산소종들의 생성을 현저히 억제하였고 2%보다는 5% 부추 첨가식이군에서 농도의존적으로 유의한 활성산소종 감소효과가 얻어졌 다. 이는 부추에 다량 함유되어 있는 항산화 관련 물질들이 조직의 산화를 막고 활성산소종들을 처리하는 항산화효소계 활성을 높였기 때문으로 여겨진다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.