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제안 방법
- 새삼 및 실새삼의 꽃이 달린 줄기 50 g 를 waring blander로 마쇄하고, 거즈를 두 겹으로 하여 압착하여 얻은 액을 3000rpm에서 20분간 원심분리한 후 상징액을 즙시료로 하였다. 건조시킨 새삼 및 실새삼의 꽃이 달린 줄기, 새삼의 씨앗(토사자), 원토사, 법제토사 및 실새삼의 씨앗 각각 50g에 대해 초순 수 500ml을 가해서 상온에서 24시간 추출하고, 여과 후 여액을 따로 두고, 같은 조작을 2회 반복하고 여액을 같이 모았다. 이것을 Rotary evaporator (Tokyo Rikakikai Co.
- 토사자의 미백 효과를 검토위하여 새삼의 tyrosinase 억제능을 간단히 검색한 연구3334)는 있으나 새삼과 실 새삼의 즙 씨앗 및 토사자팩제의 tyrosinase 활성 억제 효과에 대한 연구는 없다. 그러므로 저자 등은 새삼 및 실새삼의 줄기와 꽃, 씨앗 및 시판되고 있는 토사자팩제 2종을 시료로 하여 tyrosinase의 활성 억제 효과를 조사하였다.
- 8)를 사용하였다. 반응액을 37℃ water bath에서 10분간 반응시킨 후 ice bath내에서 효소의 반응을 정지시키고 2시간 이내에 spectrophotometer (Ultraspec 2000, Pharmacia Biotech)를 이용하여 475 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료는 새삼 및 실새삼의 즙과 새삼 및 실새삼의 줄기, 새삼 과 실 새삼의 씨앗, 원토사 및 법제토사의 물 추출물은 2mg/m/씩을 초순 수를 사용하여 serial dilution을 하였고, 각 ethanol 주출물은 2 mg/mg을 ethanol : 초순수(1;1)를 용매로 하여 serial dilution을 하였다.
- 새삼 및 실새삼의 꽃이 달린 줄기 50 g 를 waring blander로 마쇄하고, 거즈를 두 겹으로 하여 압착하여 얻은 액을 3000rpm에서 20분간 원심분리한 후 상징액을 즙시료로 하였다. 건조시킨 새삼 및 실새삼의 꽃이 달린 줄기, 새삼의 씨앗(토사자), 원토사, 법제토사 및 실새삼의 씨앗 각각 50g에 대해 초순 수 500ml을 가해서 상온에서 24시간 추출하고, 여과 후 여액을 따로 두고, 같은 조작을 2회 반복하고 여액을 같이 모았다.
- 새삼 및 실새삼의 미백효과를 규명하기 위하여 새삼 및 실새삼의 꽃이 달린 줄기, 시판하고 있는 토사자(새삼의 씨앗) 및 토사자팩 제 2종을 시료로 하여 mushroom tyrosinase 의 활성 억제 효과를 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
- 반응액을 37℃ water bath에서 10분간 반응시킨 후 ice bath내에서 효소의 반응을 정지시키고 2시간 이내에 spectrophotometer (Ultraspec 2000, Pharmacia Biotech)를 이용하여 475 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료는 새삼 및 실새삼의 즙과 새삼 및 실새삼의 줄기, 새삼 과 실 새삼의 씨앗, 원토사 및 법제토사의 물 추출물은 2mg/m/씩을 초순 수를 사용하여 serial dilution을 하였고, 각 ethanol 주출물은 2 mg/mg을 ethanol : 초순수(1;1)를 용매로 하여 serial dilution을 하였다. 시료 대신 시료와 동량의 용매 900 ul를 가하여 control로 하였고, tyrosinase 대신 buffer 900를 가하여 blank로 하였다.
- Kojic acid를 대조물질로 하였다. 저해율은 아래와 같이 계산하고, 효소의 활성을 50% 저해하는 농도를 내삽에 의하여 구하고, 이를 IC50 value로 하였다.
- )로 감압 농축하고 MaxiDry Lyo Speed Vac (Hetero lab equipment)으로 동결건조 하여 물 추출물로 하였다. 한편 시료 각각 50 g에 대해 ether 500ml을 가해서 가끔 흔들어주면서 상온에서 24시간 추출 후 여과하고 다시 ether 300 mZ로 같은 조작을 2회 더 반복하여 여액을 제거한 잔사에 absolute ethanol (Merk,Germany) 500 mF을 가해서 상온에서 24시간 추출하고 여과하고 ethanol 300ml로 같은 조작을 2회 더 반복하고 모든 여액을 합쳐서 감압 농축한 후 ethanol을 완전히 제거시킨 것을 ethanol 추출 물로 하였다.
대상 데이터
- 시료 대신 시료와 동량의 용매 900 ul를 가하여 control로 하였고, tyrosinase 대신 buffer 900를 가하여 blank로 하였다. Kojic acid를 대조물질로 하였다. 저해율은 아래와 같이 계산하고, 효소의 활성을 50% 저해하는 농도를 내삽에 의하여 구하고, 이를 IC50 value로 하였다.
- 새삼 (Cuscuta japonica Choisy) 및 실새 삼(C australis R.Be)은 경북 하양에서 채집하여 사용하였으며, 菟絲구는국내산을 대구에서 구입하고, 그 기원이 새삼의 씨앗임을 확인하였다.4)元菟絲 (토사자를 세척 후 건조하고 분말로 한 것)와 法製 菟絲 (토사자를 술에 담갔다가 건조하고 분말로 한 것)의 2종의 팩 제품 (H사 제품)은 그 원료가 새삼의 씨앗임을 확인하였다.
이론/모형
- Laskin”〉등의 방법으로 측정하였다. Dopa oxidase의 방법을 채택하였다. 1.
- Laskin”〉등의 방법으로 측정하였다. Dopa oxidase의 방법을 채택하였다.
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