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문제 정의
- 이에 본 연구에서는 대나무 줄기의 기능성 식품소재 또는 식품첨가물로서의 가능성을 검토하고자 대나무 줄기를 에탄올로 추출하여 항산화효과와 아질산염 소거능을 조사하였다.
제안 방법
- 4 mL)를 가한 다음 혼합하여 실온에서 15분간 방치한 후 520nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 Griess reagent 대신 증류수를 가하여 측정하였으며, 아질산염 소거능은 100-[(시료첨가구의 흡광도/무첨가구의 흡광도)×100] 으로 나타내었다.
- 따라서 SOD와 유사한 활성을 가지면서 SOD의 단점을 보완할 수 있는 SOD 유사 활성 물질을 찾는 연구가 활발히 진행되고 있다. 따라서 왕대나무 줄기 에탄올 추출물의 superoxide(O2-) 산화억제작용을 알아보기 위해 superoxide와 반응하여 갈변물질을 나타내는 pyrogallol 자동산화반응을 측정하여 SOD 유사활성을 측정 하였다(29). Fig.
- 아질산나트륨 용액 에 왕대나무줄기 에탄올추출물 0.2 mg/mL 을 첨가하고 pH 조건을 각각 pH 1.2, pH 3.0, pH 6.0으로 조정하여 아질산염에 대한 소거율을 측정하였다. 이들 pH 범위는 인체내 위에서의 pH 변화를 고려하였으며, 각 pH 조건하(pH 1.
- 왕대나무 줄기 에탄올추출물의 지질과산화와 관련한 항산화효과를 검토하기 위하여 linoleic acid에 추출물을 12.5, 25, 50 ㎍/mL 농도로 각각 첨가하여 40oC에서 6일동안 TBA값의 변화를 흡광도(532 nm)로 측정하였다(Fig. 3). 그 결과, 대조구는 4일과 6일 후 0.
- 0으로 보정한 다음 반응용액의 부피를 10mL로 하였다. 이 용액을 37℃에서 1시간 반응시키고 각 반응액 (1mL)을 취하여 2% 초산용액(2 mL)과 30% 초산용액으로 용해한 Griess reagent(1% sulfanilic acid: 1% naphthylamine = 1 : 1, 0.4 mL)를 가한 다음 혼합하여 실온에서 15분간 방치한 후 520nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 Griess reagent 대신 증류수를 가하여 측정하였으며, 아질산염 소거능은 100-[(시료첨가구의 흡광도/무첨가구의 흡광도)×100] 으로 나타내었다.
- 3mM DPPH 용액을 첨가하여 실온에서 30분간 방치 한 후 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능은 시료를 첨가하지 않은 대조군의 흡광도를 50% 감소시키는데 필요한 시료의 양을 RC50으로 하여 나타내었다.
- 측정하였다. 즉, 1mM NaNO2용액 (2mL)에 시료(1mL)를 가하고 0.1 N HCl(pH 1.2), 0.2 M 구연산 완충액 (pH 3.0, 6.0)으로 각각 pH 1.2, 3.0, 6.0으로 보정한 다음 반응용액의 부피를 10mL로 하였다. 이 용액을 37℃에서 1시간 반응시키고 각 반응액 (1mL)을 취하여 2% 초산용액(2 mL)과 30% 초산용액으로 용해한 Griess reagent(1% sulfanilic acid: 1% naphthylamine = 1 : 1, 0.
대상 데이터
- )로서 전남 담양에서 2003년 3월에 줄기를 채취하여 음건한 후 사용하였다. a, a'-diphenyl-picrylhydrazyl (DPPH), pyrogallol, linoleic acid, trichloroacetic acid(TCA), 2- thiobarbituric acid(TBA), sodium nitrite, sulfanilic acid 그리고 a-naphthylaminee Sigma(USA) 에서 구입하였으며, 기타 시약은 분석용 등급이상의 시약을 사용하였다.
- 그런 다음, 에탄올 추출액은 여과지(Whatman, No. 2)로 여과하고 감압농축한 후 진공 동결건조하였으며, 얻어진 대나무줄기 에탄올추출물 (35.59g, 4.56%)은 본 실험시료로 사용되었다.
- 본 실험에 사용한 대나무는 3년산 왕대나무(Phyllostachys bambusoides S. et Z.)로서 전남 담양에서 2003년 3월에 줄기를 채취하여 음건한 후 사용하였다. a, a'-diphenyl-picrylhydrazyl (DPPH), pyrogallol, linoleic acid, trichloroacetic acid(TCA), 2- thiobarbituric acid(TBA), sodium nitrite, sulfanilic acid 그리고 a-naphthylaminee Sigma(USA) 에서 구입하였으며, 기타 시약은 분석용 등급이상의 시약을 사용하였다.
데이터처리
- 통계처리는 각각의 시료에 대해 Student's t-test를 사용하여 mean土S.D.로 계산하였으며, p-value를 구하여 유의성을 검증하였다.
이론/모형
- Marklund와 Marklund의 방법(29)에 따라 각 농도별 시료(0.2 mL)에 pH 8.5로 보정한 Tris-HCl bufier(50 mM tris[hydroxym- ethyl]amino-methane containing 10 mM EDTA, 3mL)와 7.2mM pyrogallol(0.2mL)를 가하고 25℃에서 10분간 방치하였으며, 1N HCl(1mL)로 반응을 정지시킨 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다. SOD 유사활성은 100-[(시료첨가구의 흡광도/무첨가구의 흡광도)×100]으로 나타내었다.
- 아질산염 소거능(nitrite scavenging ability)은 Kato 등(20)의 방법으로 측정하였다. 즉, 1mM NaNO2용액 (2mL)에 시료(1mL)를 가하고 0.
- 전자공여능(electron donating ability)은 Blosis 방법(28)에 의한 DPPH free radical 소거법에 의해 측정되었다. 즉, 시료는 메탄올에 녹여 준비하고 0.
성능/효과
- Fig. 2(a)는 왕대나무줄기 에탄올 추출물의 SOD 유사활성을 측정한 것으로 0.23, 0.46 그리고 0.92 mg/mL 첨가시 각각 17.96%, 30.41% 그리고 43.88%의 활성도를 나타냈으며, 비교물질인 ascorbic acid는 0.184 mg/mL에서 76.06%의 SOD 유사활성을 보임으로써(Fig. 2(b)) 왕대나무 줄기 에탄올 추출물의 우수한 항산화력이 관찰되었다.
- 06%의 SOD 유사활성을 보임으로써(Fig. 2(b)) 왕대나무 줄기 에탄올 추출물의 우수한 항산화력이 관찰되었다. 또한 김 등(36)이 측정한 복령균사체와 복령쌀보다 대나무줄기 에탄올 추출물의 SOD 유사활성이 높게 나타나는 것을 관찰할 수 있었다.
- 3). 그 결과, 대조구는 4일과 6일 후 0.531, 0.554로 TBA값이 측정되었고 추출물 50 ㎍/mL을 첨가했을때에는 0.134, 0.23로 TBA값이 나타나 대조구에 비해 추출물 첨가구의 TBA수치가 긱각 74.76%, 58.48% 감소되 었다(Fig. 3(a)).
- 75 ㎍/mL)은 열수추출물(M 1mg/mL)보다 전자공여능이 우수하다는 것을 보여주는 결과로 생각된다. 그리고 표준물질로 사용된 β-carotene과 BHA의 RC50이 각각 18.02 ㎍/ mL, 18.48 ㎍/mL(data not shown)으로 나타나 왕대나무 줄기 에탄올 추출물은 효과적인 전자공여능을 보이는 것으로 관찰되었다.
- 3(a)). 또한 표준물질로 25 ㎍/mL BHA를 첨가하여 TBA값을 측정한 결과, 대조구에 비해 4일과 6일 후 각각의 TBA 값이 76.04%, 80.21% 감소함을 알 수 있었다(Fig. 3(b)).
- 이러한 산성화 (acidification)과정 때문에 니트로화반응은 주로 생체내 산성위 (acidic stomach)에서 발생한다(40, 41). 연구결과에 의하면, 아질산염 소거능이 인체의 위내 pH 조건과 비슷한 pH 1.2에서 가장 우수한 것으로 측정되어 왕대나무 줄기 에탄올 추출물은 생체 내에서도 효과적인 아질산염 소거작용을 통해 nitrosamine 생성을 억제할 것으로 생각된다.
- 효과가 관찰되었다(31). 왕대나무줄기 에탄올추출물의 DPPH free radical 소거능을 시료를 첨가하지 않은 대조군의 흡광도를 50% 감소시키는데 필요한 시료량(RC50)으로 측정한 결과 116.75 ㎍/mL으로 나타났다(Fig. 1). 최근 김 등(32)은 왕대나무를 열수추출하여 혼합물의 농도가 0.
- 9%로 지질과산화 생성 억제 효과를 나타낸다고 보고하였다. 위의 연구결과로 왕대나무 줄기 에탄올추출물은 지질과산화와 관련된 항산화 효과가 우수한 것으로 관찰되었다.
- 0으로 조정하여 아질산염에 대한 소거율을 측정하였다. 이들 pH 범위는 인체내 위에서의 pH 변화를 고려하였으며, 각 pH 조건하(pH 1.2, pH 3.0, pH 6.0)에서 아질산염 소거능은 각각 43.02%, 35.46%, 9.86%으로 나타나 pH 의존적인 아질산염 소거능을 보였다(Fig. 4). 이와 유사한 결과로 Kang 등(38)은 각종 phenol성 화합물의 농도를 0.
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