Ginger (Zingiber officinale Roscoe) has been used as a raw material in many traditional preparations since the ancient time. As a component of traditional health products, Ginger is known to be effective as appetite enhancer, anticold and anti-inflammation. This study was performed to investigate th...
Ginger (Zingiber officinale Roscoe) has been used as a raw material in many traditional preparations since the ancient time. As a component of traditional health products, Ginger is known to be effective as appetite enhancer, anticold and anti-inflammation. This study was performed to investigate the immunomodulative effects of Ginger in mouse, using in vitro and ex vivo experiments. In vitro experiment, the mice splenocytes proliferation and three kinds of cytokines (IL-1 $\beta$, IL-6, and TNF-$\alpha$) prodution by peritoneal macrophages cultured with ethanol and water extracts of Ginger were used to indicate the immunomodulative effect. In order to elucidate the immunomodulative effects of Ginger ex vivo, water extract of Ginger was orally administrated into mice, and isolated splencytes and macrophages were used as experimental model. Ex vivo experiment, six to seven week old mice were fed ad libitum on a chow diet, and water extract of finger was orally administrated every other day for four weeks at two different concentractions (50 and 500 mg/kg B.W./day). In vitro study, the splenocytes proliferation was increased when water extract was supplemented in the range of 50-500 $\mu$l/ml concentration. In case of cytokines production, IL-1 $\beta$, IL-6 and TNF-$\alpha$ released by activated peritoneal macrophages were augmented by the supplementation of water extract of the Ginger. Ex vivo experiment, the highest proliferation of splenocytes and production of cytokines by activated peritoneal macrophages were seen in the mice orally administrated at the concentration of 500 mg/kg B.W./day. In conclusion, this study suggests that Ginger extracts may enhance the immune function by regulating the splenocytes proliferation and enhancing the cytokine prodution capacity by activated macrophages in mice.
Ginger (Zingiber officinale Roscoe) has been used as a raw material in many traditional preparations since the ancient time. As a component of traditional health products, Ginger is known to be effective as appetite enhancer, anticold and anti-inflammation. This study was performed to investigate the immunomodulative effects of Ginger in mouse, using in vitro and ex vivo experiments. In vitro experiment, the mice splenocytes proliferation and three kinds of cytokines (IL-1 $\beta$, IL-6, and TNF-$\alpha$) prodution by peritoneal macrophages cultured with ethanol and water extracts of Ginger were used to indicate the immunomodulative effect. In order to elucidate the immunomodulative effects of Ginger ex vivo, water extract of Ginger was orally administrated into mice, and isolated splencytes and macrophages were used as experimental model. Ex vivo experiment, six to seven week old mice were fed ad libitum on a chow diet, and water extract of finger was orally administrated every other day for four weeks at two different concentractions (50 and 500 mg/kg B.W./day). In vitro study, the splenocytes proliferation was increased when water extract was supplemented in the range of 50-500 $\mu$l/ml concentration. In case of cytokines production, IL-1 $\beta$, IL-6 and TNF-$\alpha$ released by activated peritoneal macrophages were augmented by the supplementation of water extract of the Ginger. Ex vivo experiment, the highest proliferation of splenocytes and production of cytokines by activated peritoneal macrophages were seen in the mice orally administrated at the concentration of 500 mg/kg B.W./day. In conclusion, this study suggests that Ginger extracts may enhance the immune function by regulating the splenocytes proliferation and enhancing the cytokine prodution capacity by activated macrophages in mice.
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문제 정의
饲 최근 들어 생강의 oleresin, gingerol, shogaol fraction0] NK cell 용해를 활성화시켜 면역능 증진에 효과가 있다는 것으로 보고되고 있다.” 따 라서 본 연구에서는 면역증진능을 갖는 천연 식물소재로서 생강의 면역 증강효과 검색을 다음과 같은 단계로 검증하고자 하였다.
In vitro 실험에서는 생강의 물 추출물과 에탄올 추출물 첨가에 의한 마우스 비장세포 증식능과 활성 복강대식세포에서 분비되는 대표적인 사이토카인 (IL-18, IL-6, TNF-a) 생성량의 변화를 통해 생강의 면역활성 증진효과를 검증하고자 하였다. Ex vivo 실험에서는 생강을 물 추출하여 실험 동물에 4주간 직접 경구 투여함으로서 이들 시료가 마우스 생체내에서 면역능에 미치는 영향을 연구하고자 하였다.
In vitro 실험에서는 생강의 물 추출물과 에탄올 추출물 첨가에 의한 마우스 비장세포 증식능과 활성 복강대식세포에서 분비되는 대표적인 사이토카인 (IL-18, IL-6, TNF-a) 생성량의 변화를 통해 생강의 면역활성 증진효과를 검증하고자 하였다. Ex vivo 실험에서는 생강을 물 추출하여 실험 동물에 4주간 직접 경구 투여함으로서 이들 시료가 마우스 생체내에서 면역능에 미치는 영향을 연구하고자 하였다. 4주간 격일로 생강물 추출물을 경구투여한 마우스의 비 장세포 증식능, 활성 복강대식세포에서 분비되는 사이토카 인 (IL-1/9, IL-6, TNF-a)생성량의 변화를 측정하여 생강 추출물이 마우스 면역능에 미치는 영향을 연구하고자 하였다.
Ex vivo 실험에서는 생강을 물 추출하여 실험 동물에 4주간 직접 경구 투여함으로서 이들 시료가 마우스 생체내에서 면역능에 미치는 영향을 연구하고자 하였다. 4주간 격일로 생강물 추출물을 경구투여한 마우스의 비 장세포 증식능, 활성 복강대식세포에서 분비되는 사이토카 인 (IL-1/9, IL-6, TNF-a)생성량의 변화를 측정하여 생강 추출물이 마우스 면역능에 미치는 영향을 연구하고자 하였다.
In vitro 실험에서 생강 물 주출물이 비장세포 증식능과 복강 대식세포의 사이토카인 분비를 촉진하는 것으로 확인 되었다. 이러한 결과를 바탕으로 ex vivo 실험에서는 생강물 추출물의 경구투여가 마우스 비장세포 증식능, 복강대 식세포에서 분비하는 사이토카인 (IL-16, IL-6, TNF- a) 생성량에 어떠한 영향을 미치는지 관찰함으로써 생체 내 에서 생강 물 추출물의 면역활성효과를 검증하고자 하였다.
본 실험에서는 생강 열수 추출물의 경구투여가 마우스 비 장세포 증식능에 미치는 영향을 검색하기 위한 지표로 MTT assay를 이용하여 비장세포 증식능을 측정하였고, 이는 세포증식능 측정 도구로서 가장 적합한 3H-thymidine uptake 의 결과와 비교적 유사한 것으로 보고되고 있다.斤的 그 결과는 Fig.
제안 방법
1의 방법으로 제조하였다. 동결 건조 된 시료를 증류수 또는 에탄올로 환류 냉각시키면서 80°C 수욕상에서 3시간씩 3회 반복 추출한 후 감압농축하여 물 추출물과 에탄올 추출물을 얻었다.
본 연구에 사용된 동물은 7~주령된 암컷 Balb/c mouse 를 (주) 대한실험동물센터로부터 분양받아 고형 사료와 물을 자유로이 공급하면서 7~일 정도 실험 동물실에서 적응시 킨 후 체중이 15 g 내외인 마우스를 실험에 사용하였다. 실 험 동물실 온도는 22 土 2°C, 습도는 40~60%로 유지하였 고, 명암주기 (Light and dark cycle) 는 12시간 단위로 조절하였다.
In vitro 실험에서는 생강 에탄올 추출물 및 물 추출물을 세포배양액 (10% FBS-RPMI 1640; GIBCO) 에 용해시킨 다음 실험하고자 하는 농도가 되도록 희석하여 세포배 양시 첨가하였다.
마우스를 임의 배치법에 의해 대조군과 투여군으로 나누었으며, 실험 군마다 6마리씩 사용하였다. 대조군에는 생리 식염수를, 투여군에는 검액을 각각 50 mg/kg B.W./day과 500 mg/kg B.W.의 농도가 되도록 멸균 증류수로 희석하여 0.2 ml/day 씩 4주간 격일로 경구 투여하였다.
2)에 5분간 현탁시켜 적혈구를 제거하였다. 위의 세포는 다시 RPMI로 2회 원심 세척한 다음 10%-FBS RPMI 1640으로 5.0 x 106 cell/ml의 농도로 희석하여 96-well plate에 90 “1씩 분주한 후 세포 증식능 측정에 사용하였다.
생강물 추출물을 경구투여한 마우스의 복강내 대식세 포를 추출하여 배양시킨 다음 배양 상층액으로부터 분비되는 사이토카인 (IL-16, IL-6, TNF-a) 분비량을 각각 측정하였다. 비부착성 세포를 제거하고 부착성 세포만을 얻은 후, 10%-FBS RPMI 1640 900 “1와 대식세포를 활성 화시키는 mitogen인 LPS와 배지를 100 “1 가한 후 37°C, 5% COz incubator (Sanyo) 에서 48시간 배양하였다.
생강물 추출물을 경구투여한 마우스의 복강내 대식세 포를 추출하여 배양시킨 다음 배양 상층액으로부터 분비되는 사이토카인 (IL-16, IL-6, TNF-a) 분비량을 각각 측정하였다. 비부착성 세포를 제거하고 부착성 세포만을 얻은 후, 10%-FBS RPMI 1640 900 “1와 대식세포를 활성 화시키는 mitogen인 LPS와 배지를 100 “1 가한 후 37°C, 5% COz incubator (Sanyo) 에서 48시간 배양하였다. 배 양 상층액을 분리하여 배양액에 축적된 IL-18, IL-6, TNF- a 의 양을 ELISA 사이토카인 kit (R & D system, USA)를 이용하여 측정하였다.
비부착성 세포를 제거하고 부착성 세포만을 얻은 후, 10%-FBS RPMI 1640 900 “1와 대식세포를 활성 화시키는 mitogen인 LPS와 배지를 100 “1 가한 후 37°C, 5% COz incubator (Sanyo) 에서 48시간 배양하였다. 배 양 상층액을 분리하여 배양액에 축적된 IL-18, IL-6, TNF- a 의 양을 ELISA 사이토카인 kit (R & D system, USA)를 이용하여 측정하였다.
생강 추출물을 10, 50, 100, 250, 500, 1000 “g/ml의 농도로 첨가하여 배양하였고 음의 대조군 (negative cont- rol)으로는 생강 추출물 대신 배양액(10% FBS-RPMI 1640)을 첨가하고 양의 대조군 (positive control) 으로는 Con A (5 LPS (15 첨가하여 배양하였다. Con A는 T세포를 LPS는 B세포를 선택적으로 증가시키고 이들의 mitogen effect는 농도 의존적이어서 본 실험에서는 선행연구"에서 가장 높은 증식능을 보였던 농도인 5 “g/ml (Con A) 와 15 "g/ml (LPS) 를 첨가하였 다.
생강 추출물을 10, 50, 100, 250, 500, 1000 “g/ml의 농도로 첨가하여 배양하였고 음의 대조군 (negative cont- rol)으로는 생강 추출물 대신 배양액(10% FBS-RPMI 1640)을 첨가하고 양의 대조군 (positive control) 으로는 Con A (5 LPS (15 첨가하여 배양하였다. Con A는 T세포를 LPS는 B세포를 선택적으로 증가시키고 이들의 mitogen effect는 농도 의존적이어서 본 실험에서는 선행연구"에서 가장 높은 증식능을 보였던 농도인 5 “g/ml (Con A) 와 15 "g/ml (LPS) 를 첨가하였 다. 비장세포 증식능은 배양액 10% FBS-RPMI 1640을 넣은 대조군의 흡광도를 1로 하여 비교하였다.
Con A는 T세포를 LPS는 B세포를 선택적으로 증가시키고 이들의 mitogen effect는 농도 의존적이어서 본 실험에서는 선행연구"에서 가장 높은 증식능을 보였던 농도인 5 “g/ml (Con A) 와 15 "g/ml (LPS) 를 첨가하였 다. 비장세포 증식능은 배양액 10% FBS-RPMI 1640을 넣은 대조군의 흡광도를 1로 하여 비교하였다.
대식세포는 세균이나 이물질을 탐식, 제거하는 과정에서 여러 가지 사이토카인을 분비하여 면역현상을 조절하며, 염 증반응과 조혈기구 등에도 관여하고 있다.切 LPS (lipopol- ysaccharide) 와 IFN—7 (interferon- r) 등에 의해 활성화 된 대식세포는 암세포에 대한 세포 독성작용을 나타내게 되는 데, 활성화된 대식세포에 의해 분비된 사이토카인 (TNF-a, IL-1, IL-6, IL-8, IL-12), hydrogen peroxide (H2O2), nitric oxide (NO) 등이 암세포에 대한 세포독성을 나타내는 물질로 제시되어 왔다尸> 특히 IL-1, IL-6, TNF-a, IFN-, 는 활성화된 대식세포로부터 생성되는 대표적인 사이토카인으로 알려져 있다尸 본 실험에서는 선행연구들에 서 실시한 세포독성이 나타나지 않는 농도 중 10 “g/ml와 100 “g/ml의 농도에서 사이토카인 분비량을 측정하였다.
대식세포는 사이토카인을 분비하여 면역능을 조절하는데, 외부 항원에 대한 면역반응은 여러 면역세포의 상호작용에 달려있으며 이러한 세포간의 협력은 사이토카인이라는 단백질이 중재하므로 중재자의 생성과 분비는 중요한 의미를 가지게 된다/® 사이토카인은 항원과 기타 외부에서 오는 여러 가지 자극에 대하여 한 개체의 세포와 조직들이 유기적으로 작용하도록 도와줄 뿐만 아니라 조혈작용, 면역반 응, 일반적 염증과정 등을 조절한다고 밝혀져 여러 가지 병리적인 현상과 밀접한 관련이 있는 것으로 알려졌다.財> 영양과 관련하여 많이 보고된 IL-1 B, IL-6, TNF- a, IFN- 7는 활성화된 대식세포로부터 생성되는 주요 사이토카인 으로 특히 여러 종류의 알러지 반응과 자가면역 질환의 발병 과 진행에 있어 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다球" 본 실험에서는 생강물 추출물을 50 mg/kg B.W./day와 500 mg/kg B.W./day의 농도로 경구투여한 마우스로부터 복강대식세포를 분리해 낸 다음 활성화된 대식세포가 생성해 낸 IL-1/3, IL-6, TNF-a의 분비량을 측정하였고 각 군별 양의 대조군으로는 LPS (15 mg/ml)로 자극한 대식세포로부터 분비된 사이토카인을 측정함으로서 대식세포의 활성화에 대한 지표로 삼았다
4주간 격일로 50 mg/kg B.W./day와 500 mg/kg B.W./ day의 농도로 생강 추출물을 마우스에게 직접 경구 투여한 후 비장세포 증식능과 활성 복강 대식세포에서 분비하는 사이토카인 분비능을 측정하였다. 그 결과 생강 추출물은 50 mg/kg B.
대상 데이터
본 연구에 사용된 동물은 7~주령된 암컷 Balb/c mouse 를 (주) 대한실험동물센터로부터 분양받아 고형 사료와 물을 자유로이 공급하면서 7~일 정도 실험 동물실에서 적응시 킨 후 체중이 15 g 내외인 마우스를 실험에 사용하였다. 실 험 동물실 온도는 22 土 2°C, 습도는 40~60%로 유지하였 고, 명암주기 (Light and dark cycle) 는 12시간 단위로 조절하였다.
본 연구에 사용된 배지는 RPMI medium 1640의 GIBCO BRL (Grand Island, NY, USA) 제품을 사용하였고, fetal bovine serum (FBS), lipopolysaccharide (LPS), con- canavalin A (ConA), thioglycollate, sodium bicarbonate, ammonium chloride, TRIZMA'%ase, TRIZMA‘%ydro-sulfide), 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl) -2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) 등의 시약은 Sigma Chemi cal Co. (St. Louis, MO, USA) 제품을 사용하였다
Ex vivo 실험에서는 생강물 추출물을 멸균 증류수로 용해시킨 후 적정 농도로 희석하여 사용하였다. 마우스를 임의 배치법에 의해 대조군과 투여군으로 나누었으며, 실험 군마다 6마리씩 사용하였다. 대조군에는 생리 식염수를, 투여군에는 검액을 각각 50 mg/kg B.
데이터처리
모든 실험결과의 자료는 SAS (Statistic Analysis System) 통계 프로그램을 이용하여 평균 및 표준편차를 구하였다. 각 군간의 평균치의 차이는 분산분석 (Analysis of Variance, AN0VA) 및 Duncan's multiple range test를 사용하여 a =0.
모든 실험결과의 자료는 SAS (Statistic Analysis System) 통계 프로그램을 이용하여 평균 및 표준편차를 구하였다. 각 군간의 평균치의 차이는 분산분석 (Analysis of Variance, AN0VA) 및 Duncan's multiple range test를 사용하여 a =0.05 수준에서 유의성을 검정하였다.
이론/모형
마우스 비장세포의 분리는 Mishell 등a의 방법에 의해 실행하였다. 경추 탈골법으로 희생시킨 마우스의 비장을 무균적으로 적출하여 RPMI 1640 용액으로 씻은 다음 멸균 유리봉으로 가볍게 분쇄하여 세포를 유리시켰다.
성능/효과
생강물 추출물과 에탄올 추출물의 첨가가 비장세포 증 식능에 미치는 영향에 대한 검색 결과는 Table 1과 같다. Con A와 LPS를 첨가하여 배양한 경우 생강 추출물을 첨가하지 않은 대조군에 비해 세포 증식능이 1.70 ± 0.60, 1.33 ± 0.14로 상승하였다 생강물 추출물을 첨가하여 배양한 경우 농도 50, 100, 250, 500, 1000 “g/ml에서 각각 1.22 ± 0.55, 1.13 ± 0.09, 1.15 ± 0.05, 2.00 ± 0.05, 1.43 ± 0.10로 에탄올 추출물을 첨가하여 배양한 경우 농 도 250, 500, 1000 “g/ml에서 각각 1.15 ± 0.11, 1.47 ± 0.03, 1.06 ± 0.01 로 비장세포 증식이 높은 경향을 보 였다. 이는 고들빼기 물 추출물에서 100, 250, 500 “g/ml 농도에서 유의적인 증식능을 나타낸연구와 유사한 결과라 할 수 있다 이 등의 연구에서도 솔잎의 계통별 추출 물 중 물 주출물을 첨가하여 배양한 경우 5-500 “g/ml의 모든 농도에서 비장세포 증식을 촉진하는 것으로 나타 났으며 맨드라미 분획 추출물에 의한 비장세포 증식능 효과를 관찰한 결과 역시 물층에서 대조군에 비해 가장 높은 증식을 보인 것으로 확인⑵되었다.
13 pg/ml로 높은 IL-1 6 생성량을 보였다. 생강 추출물 첨가에 의한 결과를 살펴 보면, 에탄올 추출물 첨가시 LPS를 첨가한 군에 비해 다소 낮은 양의 IL-16가 분비되었으나, 물 추출물 100 zzg/ml 를 첨가한 경우 134.67 ± 2.00 pg/ml로 대조군에 비해 유의적으로 높은 생성량을 보였고 10 〃g/ml의 농도에서는 44.81 ± 1.00 pg/ml로 유의적으로 감소하는 경향을 보였다. 윤 등'"은 한국산 겨우살이 추출물의 면역활성을 측정 한 결과 100 “g/ml에서 IL-16 의 생성량이 가장 높았다고 보고하였으며, 고들빼기나 톳 물 추출물의me 면역 활 성 검색에서도 같은 농도 수준에서 면역활성이 나타났다.
윤 등'"은 한국산 겨우살이 추출물의 면역활성을 측정 한 결과 100 “g/ml에서 IL-16 의 생성량이 가장 높았다고 보고하였으며, 고들빼기나 톳 물 추출물의me 면역 활 성 검색에서도 같은 농도 수준에서 면역활성이 나타났다. 본 실험 결과 생강의 물 추출물 100 〃g/ml에서 대조군에 비해 높은 생성량을 보여 생강물 추출물의 첨가가 마우스 복강 대식세포 활성에 영향을 줄 수 있는 가능성을 제시 하였다.
복강 대식세포 배양액의 IL-6 생성량은 Table 3에 제시하였다. 추출물을 첨가하지 않은 대조군은 66.32 ± 7.14 pg/ml의 IL-6를 생성하였고, mitogen인 LPS (15 mg/ml) 를 첨가한 경우에는 612.62 ± 13.33 pg/ml의 IL-6를 생성하여 대조군에 비해 대식세포에 의한 IL-6 분비능이 상승된 것으로 나타났다. 물 추출물의 경우 10 〃g/ml를 첨가했을 때 242.
55 pg/ml로 대조군보다 낮은 IL-6 생성량을 보였다. 속단에 탄올 추출물의 IL-6 생성을 관찰한 실험에서도 1, 10, 100 “g/ml의 농도에서 대조군과 유사하거나 오히려 낮은 생성을 나타내어 속단 에탄올 추출물에 의한 영향을 기대하기 어려웠고, 솔잎 부탄올 추출물 첨가 역시 IL-6 생성분 비를 자극하지 못하는 것으로 나타났으며이n 메밀1의 에 탄올 추출물 첨가 실험에서도 유사한 결과를 보였다.
본 실험 결과물 추출물 10 “g/ml와 100 “g/ml 농도에서 대조군보다 높은 IL-6 생성량을 보였고 특히 100 “g/ml의 농도에서는 B세포의 면역반응을 활성화시키는 mitogen 인 LPS (15 높은 IL-6 생성량을 보여 생강 열수 추출물이 B세포 mitogen의 역할을 할 수 있거나, B 세포 면역반응을 활성화시킬 것으로 기대 된다.
11 pg/ ml의 분비능을 보였다. 에탄올 추출물의 경우 대조군에 비해 낮은 분비능을 보였으나, 물 추출물의 경우 10 zzg/ml 와 100 “g/ml의 농도에서 각각 160.12 土 4.40 pg/ml와 270.34 ± 7.03 pg/ml로 대조군에 비해 높은 TNF-a 생 성능을 보였다.
톳", 물 추출물의 연구에서도 10 “g/ml와 100 “g/ml의 농도에서 대조군에 비해 유의적으로 높은 증가를 보였으며, 돌미나리의 실험에서도 100 pg/ml의 농도 유의적 으로 높은 분비능을 나타내었다.
본 실험 결과 생강 물 추출물은 10 “g/ml와 100 ;g/ml 농도에서 TNF-a 생성이 대조군에 비해 유의적으로 높은 것을 확인할 수 있었다. 따라서 생강물 추출물이 마우스 복강 대식세포의 TNF- a 분비를 촉진하는데 영향을 미치는 것으로 사료된다.
본 실험 결과 생강 물 추출물은 10 “g/ml와 100 ;g/ml 농도에서 TNF-a 생성이 대조군에 비해 유의적으로 높은 것을 확인할 수 있었다. 따라서 생강물 추출물이 마우스 복강 대식세포의 TNF- a 분비를 촉진하는데 영향을 미치는 것으로 사료된다.
In vitro 실험에서 생강 물 주출물이 비장세포 증식능과 복강 대식세포의 사이토카인 분비를 촉진하는 것으로 확인 되었다. 이러한 결과를 바탕으로 ex vivo 실험에서는 생강물 추출물의 경구투여가 마우스 비장세포 증식능, 복강대 식세포에서 분비하는 사이토카인 (IL-16, IL-6, TNF- a) 생성량에 어떠한 영향을 미치는지 관찰함으로써 생체 내 에서 생강 물 추출물의 면역활성효과를 검증하고자 하였다.
93으로 유의적으로 높은 증식능을 나타냈다. 체액성 면역과 관련이 있는 B세포를 선택적으로 증식시키는 mitogen인 LPS 첨가시 50 mg/kg B.W./day와 500 mg/kg B.W./day 투여군에서 대조군 보다 높은 증식능을 보였으나 유의적인 차이는 보이지 않았다
IL-1 은 TH cell에 의한 IL-2, IL-4, IFN- 了등의 생성을 유도시키고 B 림프구가 pre B 림프구로부터 성숙하는 단계와 항원자극에 의해 증식하는 단계에 직접 또는 TH cell을 경유 하여 작용함으로써 이들의 분화 및 증식을 촉진시킨다.方" 따라서 본 실험의 생강 추출물을 경구투여한 마우스의 대식세포에서 IL-16 분비량이 대조군에 비해 유의적으로 증 가되어 생강 추출물이 마우스의 복강대식세포를 활성화하여 1L-1B 생성을 촉진시킴으로서 면역증강효과가 있을 것으로 사료된다.
/day 농도군에서 높은 생성량 을 보인 결과와 유사하다. 속단 에탄올 추출물을 경구 투여하여 IL-6 분비량을 측정한 결과에서도 500 mg/kg B.W./day 농도군에서 최고치를 보인 것으로 나타났다.的 본 실험의 LPS 처리시 생강물 추출물 500 mg/kg B.
우황이 대식세포를 활성화시켜 TNF-a 분비에 어떠한 영향을 미치는지 알아보기 위하여 우황을 10 mg/kg/day 씩 단기와 장기로 나누어 매일 경구 주사한 결과 7일 투여 시 단독실험군은 TNF- a 의 유도가 낮았으나 (0.01 U/ml) LPS와 INF-7로 활성화시킨 대식세포의 TNF-a분비 량은 대조군 (6.69 U/ml) 에 비해 크게 증가하였다⑫ 본 실험 결과 생강물 추출물을 경구투여한 경우 500 mg/kg B.W./day 투여한 군에서 대조군보다 유의적으로 높은 수 준의 TNF-a가 분비되었다. 이는 생강물 추출물의 면역 활성 성분이 복강 대식세포의 활성화에 작용하기 때문인 것으로 사료된다.
생강의 물 추출물 및 에탄올 추출물에 대한 in vitro 실험으로 비장세포 증식능을 검색한 결과, 물 추출물과 에탄올 추출물 모두에서 50-500 “1/ml의 농도를 첨가했을 때 비장세포 증식능을 촉진하는 효과가 있는 것으로 나타났고, 특히 500 “1/ml 가장 높은 증식능을 보였고, 10 “l/ml이 하의 저농도와 1000 zzl/ml 이상의 고농도 첨가시 세포증 식이 억제되는 것으로 확인되었다. 복강세포내의 사이토카 인 분비량을 측정한 결과, 물 추출물에서 높은 생성능을 나타내었으며, 각 시료 추출물의 농도 500 zzl/ml 첨가가 IL-16, IL-6, 그리고 TNF-a의 분비를 촉진시키는 것으로 확인되었다.
생강의 물 추출물 및 에탄올 추출물에 대한 in vitro 실험으로 비장세포 증식능을 검색한 결과, 물 추출물과 에탄올 추출물 모두에서 50-500 “1/ml의 농도를 첨가했을 때 비장세포 증식능을 촉진하는 효과가 있는 것으로 나타났고, 특히 500 “1/ml 가장 높은 증식능을 보였고, 10 “l/ml이 하의 저농도와 1000 zzl/ml 이상의 고농도 첨가시 세포증 식이 억제되는 것으로 확인되었다. 복강세포내의 사이토카 인 분비량을 측정한 결과, 물 추출물에서 높은 생성능을 나타내었으며, 각 시료 추출물의 농도 500 zzl/ml 첨가가 IL-16, IL-6, 그리고 TNF-a의 분비를 촉진시키는 것으로 확인되었다. In vitro 실험을 근거로 실시된 ex vivo 실험은 다음과 같다.
/ day의 농도로 생강 추출물을 마우스에게 직접 경구 투여한 후 비장세포 증식능과 활성 복강 대식세포에서 분비하는 사이토카인 분비능을 측정하였다. 그 결과 생강 추출물은 50 mg/kg B.W./day과 500 mg/kg B.W./day 모두에서 비장 세포 증식을 촉진하는 것으로 보였으며, 500 mg/kg B.W./ day에서 비장세포의 최대 증식능을 보였다. 활성화된 복강 대식세포에 의한 사이토카인 분비량을 측정한 결과 IL-1 8, IL—6, 그리고 TNF-a 모두 50 mg/kg B.
/ day에서 비장세포의 최대 증식능을 보였다. 활성화된 복강 대식세포에 의한 사이토카인 분비량을 측정한 결과 IL-1 8, IL—6, 그리고 TNF-a 모두 50 mg/kg B.W./day과 500 mg/kg B.W./day 농도에서 증가하는 경향을 보였다. 이상의 결과에 의하면, 생강물 추출물 및 에탄올 추출 물은 비장세포 증식능과 복강 대식세포에 의한 사이토카인 분비능을 상승시킴으로서 면역 기관의 주요 기능을 증진시 키는 것으로 사료된다.
/day 농도에서 증가하는 경향을 보였다. 이상의 결과에 의하면, 생강물 추출물 및 에탄올 추출 물은 비장세포 증식능과 복강 대식세포에 의한 사이토카인 분비능을 상승시킴으로서 면역 기관의 주요 기능을 증진시 키는 것으로 사료된다.
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