선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 그 외 당뇨환자를 대상으로 녹용의 항산화 관련 효능을 수행한 임상실험은 거의 보고된 바 없다. 따라서 본 연구에서는 당귀, 생강, 대추를 혼합하여 만든 녹용 추출물을 제 2형 당뇨병 환자에 게 3주 동안 매일 200 mL씩 섭 취하게 하는 중재연구를 수행한 후, 혈장 지질 양상과 conjugated diene(CD)으로 측정된 지질의 과산화물 및 항산화 비 '타민, 항산화 효소의 변화를 알아보았다.
제안 방법
- 위한 혈장 GOT와 GPT 농도를 분석하였다. -80℃ 냉동고에 보관된 혈장을 꺼내서 kit(인화제약) 효소반응을 통해 반응 시 킨 후에 Photometric Auto Analyzer를 이용하여 혈장 GOT(glutamic oxaloacetic transaminase)와 GPT(glutamic pyruvic transaminase)를 분석하였다. 혈장 total cholesterol, HDL-cholesterol 및 triglyceride 함량 수준은 kit(인화제 약) 효소반응을 통해 반응시 킨 후에 Photometric Auto Analyzer 를 이용하여 분석하였고, LDL-cholesterole Friedewald 등 (23)의 식을 이용하여 다음과 같이 계산하였다.
- 이를 이 용해 용혈된 적 혈구에 glutathione, glutathione reductase, NADPH를 첨가하고 37℃, 10분간 배 양한 뒤 t-butyl- hydroperoxide를 넣어 반응시 켰으며 이때 감소된 NADPH 농도를 340 nm에서 90초간 측정함으로써 GSH-Px의 항산화 정도를 측정하였다(29). Catalase의 활성은 용혈된 적혈구에 50 mM phosphate buff er (pH 7) 와 hydrogen peroxide 를첨가한 후 hydrogen peroxide의 감소량을 240 nm에서 30초간 측정하였다(30).
- 신장과 체중은 신장계(수동식신장겨], 삼화, Korea)와 체중계(디지털 체중계, CAS 150A, Korea)를 이용하여 소수점 첫 째자리 까지 측정하였으며 이로부터 체질량지수(BMI, body mass index, 체중(kg)/신장(n?))를 산출하였다. ^](sphygmomanometer, HICO, Japan)를 이용하여 대 상자들의 혈 압을 측정 하였으며 줄자를 이용하여 허리와 엉덩이둘레를 측정한 후 허리와 엉덩이 둘레비(WHR, Waist/Hip circumference ratio) 를 산출하였다.
- 1 면담법으로 실시하였다. 면담은 사전에 훈련받은 조사위들에 의해 실시되었으며, 대상자들의 분량을 회상하는데 ■도움을 주기 위해 food model 및 사진으로 보는 음식의 눈대 중량(22)을 제 시 하여 섭 취 한 모든 음식 의 종류와 섭 취 량이 , 가능한 정확하게 조사하도록 하였다. 조사 결과는 한국영 양학회 부설 영 양정 보센터 에서 제작한 CAN program 2.
- 식이 섭취 조사 : 식이섭취 조사는 녹용 추출물 섭취를 시작하기 전과 3주간의 섭 취 후에 24시간 회상법을 이용하여 1대 1 면담법으로 실시하였다. 면담은 사전에 훈련받은 조사위들에 의해 실시되었으며, 대상자들의 분량을 회상하는데 ■도움을 주기 위해 food model 및 사진으로 보는 음식의 눈대 중량(22)을 제 시 하여 섭 취 한 모든 음식 의 종류와 섭 취 량이 , 가능한 정확하게 조사하도록 하였다.
- 흡연여부, 영양제 복용 여부 등을 조사하였다. 신장과 체중은 신장계(수동식신장겨], 삼화, Korea)와 체중계(디지털 체중계, CAS 150A, Korea)를 이용하여 소수점 첫 째자리 까지 측정하였으며 이로부터 체질량지수(BMI, body mass index, 체중(kg)/신장(n?))를 산출하였다. ^](sphygmomanometer, HICO, Japan)를 이용하여 대 상자들의 혈 압을 측정 하였으며 줄자를 이용하여 허리와 엉덩이둘레를 측정한 후 허리와 엉덩이 둘레비(WHR, Waist/Hip circumference ratio) 를 산출하였다.
- 1(b)). 우리나라에서 수행되고 있는 지질과산화 관련 연구는 TBARS(thiobarbituric acid reactive substrances)/]- 대부분인데 본 연구에서는 산화 LDL정도를 알아보는 방법으로 지용성 부분의 과산화 첫 개시물인 CD(conjugated diene)를측정하였다. TBARS나 MDA 실험방법은 지질과산화를 유발시켜서 보는 간접적 인 방법 인데 비해 CD(conjugateddiene) 방법은 지질과산화를 유도하지 않고 본래 LDL에 존재하는지 질과 산화물의 수준을 볼 수 있는 보다 직접적 인 방법이다 (38).
- Ascorbic acid는 copper-sulfate로 처리 하면 dehydroascorbic acid로 산화된 뒤 diketogluconic acid로 가수분해된다. 이 를 2, 4-dinitrophenylhydrazine으로 처리 하면 안정 한 적 갈색 물의 osazone이 형성되는데 이것을520nm에서 측정하여 혈장 vitamin C 농도를 분석하였다.
- 하여 3주일간 수행되었다. 이들에게는 반재 분량에해당되는 녹용 37.5 g에 당귀 25 g, 생강 10 g, 대추 65 g을흑합하여 만든 녹용 혼합음료를 2002년 7월 9일부터 2002년 7월 29일까지 하루 200 mL씩 20일 동안 매일 섭취하도록 하였다. 당뇨환자군의 평균 당뇨병 력은 4년이 었으며, 이 중 다섯 명이 당뇨약을 평균 4년 3개월 동안 섭취하고 있었다.
- 이때 산화된 gluta- thionee glutathione reductase와 NADPH의 존재 하에 다시 glutathione으로 환원되고 NADPH는 NADP로 산화된다. 이를 이 용해 용혈된 적 혈구에 glutathione, glutathione reductase, NADPH를 첨가하고 37℃, 10분간 배 양한 뒤 t-butyl- hydroperoxide를 넣어 반응시 켰으며 이때 감소된 NADPH 농도를 340 nm에서 90초간 측정함으로써 GSH-Px의 항산화 정도를 측정하였다(29). Catalase의 활성은 용혈된 적혈구에 50 mM phosphate buff er (pH 7) 와 hydrogen peroxide 를첨가한 후 hydrogen peroxide의 감소량을 240 nm에서 30초간 측정하였다(30).
- 일반사항조사, 혈압 측정 및 신체계측 조사 : 대상자의 일반적 인 사항은 설문지를 사용하여 조사하였으며, 나이, 성별, 흡연여부, 영양제 복용 여부 등을 조사하였다. 신장과 체중은 신장계(수동식신장겨], 삼화, Korea)와 체중계(디지털 체중계, CAS 150A, Korea)를 이용하여 소수점 첫 째자리 까지 측정하였으며 이로부터 체질량지수(BMI, body mass index, 체중(kg)/신장(n?))를 산출하였다.
- 혈장의 TRAP 수준은 trolox의 calibration curve를 이용하여 계산하였으며 TEAC (Trolox equivalent antioxidant capacity, mM)로 표현하였다. 적 혈구 항산화 효소활성 측정 : 적 혈구내 superoxide dis- mutase(SOD), glutathione peroxidase(GSH-Px), catalase 등의 항산화효소의 분석 은 UV/VIS spectrometer에 의해 측정하였다「SOD는 적혈구 현탁액을 증류수로 용혈시킨 후 ethanol과 chloroform을 가하고 이를 3000 rpm/min, 2분간 원심 분리하였다. 그 상층액을 여러 농도로 나누어 37℃에서 10분간 배 양한 후 20 UL의 pyrogallol을 첨가한 후 320 nm 에서 180초간 측정하였다.
- 면담은 사전에 훈련받은 조사위들에 의해 실시되었으며, 대상자들의 분량을 회상하는데 ■도움을 주기 위해 food model 및 사진으로 보는 음식의 눈대 중량(22)을 제 시 하여 섭 취 한 모든 음식 의 종류와 섭 취 량이 , 가능한 정확하게 조사하도록 하였다. 조사 결과는 한국영 양학회 부설 영 양정 보센터 에서 제작한 CAN program 2.0 version 을 이용하여 1일 영양소 섭취량으로 환산하였다. 체혈 : 녹용 추출물 섭취 전과 섭취 후 2번에 걸쳐서 채혈하였다.
- 0 version 을 이용하여 1일 영양소 섭취량으로 환산하였다. 체혈 : 녹용 추출물 섭취 전과 섭취 후 2번에 걸쳐서 채혈하였다. 공복에 실험 대상자로부터 채혈한 혈액은 10 mL heparinated sterile tube(Vacutainer Becton Dickinson Co.
- 혈장 GOT, GPT 및 지질 농도 측정 : 간 기능 정도를 보기 위한 혈장 GOT와 GPT 농도를 분석하였다. -80℃ 냉동고에 보관된 혈장을 꺼내서 kit(인화제약) 효소반응을 통해 반응 시 킨 후에 Photometric Auto Analyzer를 이용하여 혈장 GOT(glutamic oxaloacetic transaminase)와 GPT(glutamic pyruvic transaminase)를 분석하였다.
- 혈장 a -tocopherol, / -tocopherol 및 carotenoids는 eth- an이로 PDP 혈장의 단백질을 제거 하고 n~hexane으로 지 방을 추출한 후 rotary evaporator로 hexane을 증발시 키 고, mobile phase(metanol: dichloromethane = 85: 15)에 녹여 HPLC 로 측정하였다(26). HPLC 분석조건은 Table 1과 같다.
- Sample을 6분 동안 30℃에서 배양한 후 UV/VIS spectrometer로 740 nm의 파장에서 absorbance를 측정하였다. 혈장의 TRAP 수준은 trolox의 calibration curve를 이용하여 계산하였으며 TEAC (Trolox equivalent antioxidant capacity, mM)로 표현하였다. 적 혈구 항산화 효소활성 측정 : 적 혈구내 superoxide dis- mutase(SOD), glutathione peroxidase(GSH-Px), catalase 등의 항산화효소의 분석 은 UV/VIS spectrometer에 의해 측정하였다「SOD는 적혈구 현탁액을 증류수로 용혈시킨 후 ethanol과 chloroform을 가하고 이를 3000 rpm/min, 2분간 원심 분리하였다.
대상 데이터
- 당뇨환자군의 평균 당뇨병 력은 4년이 었으며, 이 중 다섯 명이 당뇨약을 평균 4년 3개월 동안 섭취하고 있었다. 개인적인 사정으로 2차 채혈에 응하지 못한 한 명을 제외한 10명이 끝까지 연구를 수행하였다.
- 본 연구는 대전시에 거주하는 제2형 당뇨환자(NIDDM) 중본실험에 자발적으로 참여한성인 남녀 11명을 당뇨 환자군으로 하여 3주일간 수행되었다. 이들에게는 반재 분량에해당되는 녹용 37.
데이터처리
- 0)를 사용하여 처리하였다. 녹용 추출물 섭취 결과에서는 각 항목에 따라 백분율과 평균치 士 평균오차(SE)를 구하였고 녹용 추출물 전후의 비교는 paired t-test를 통해 유의 성을 검증하였다.
이론/모형
- 혈장 CD 수준은 Markku 등(24)의 방법에 따라 분석 하였다. 혈장(1 mg/mL EDTA)을 trisoduim citrate buffer(pH 5.
- -80℃ 냉동고에 보관된 혈장을 꺼내서 kit(인화제약) 효소반응을 통해 반응 시 킨 후에 Photometric Auto Analyzer를 이용하여 혈장 GOT(glutamic oxaloacetic transaminase)와 GPT(glutamic pyruvic transaminase)를 분석하였다. 혈장 total cholesterol, HDL-cholesterol 및 triglyceride 함량 수준은 kit(인화제 약) 효소반응을 통해 반응시 킨 후에 Photometric Auto Analyzer 를 이용하여 분석하였고, LDL-cholesterole Friedewald 등 (23)의 식을 이용하여 다음과 같이 계산하였다.
- 혈장 비 다민 C, a -tocopherol 맟, r -tocopherol 농도측정 : 대 상자들의 혈장 vitamin C 농도는 2, 4-dinitrophen- ylhydrazine method(25)를 이용하여 UV/VIS spectrometer 로 분석하였다. 혈장을 0.
성능/효과
- 녹용 추출물의 섭취가 당뇨환자의 혈장 내 LDL의 산화 정도에 미치는 영향을 지용성 부분의 과산화 첫 개시물인 conjugated diene(CD) 방법으로 살펴 본 결과, 당뇨환자군의 평균 CD 수준은 녹용 추출물 섭 취 전 53.78+1.75 Umol/I同서섭 취 후 5L03±1.301imol/L로 유의적인 감소를 보였다(Fig. 1(b)).
- 당뇨환자군의 지 질 수준을 살펴 본 결과, 녹용 추출물 섭 취전인 baseline 시점 에서 3주 동안의 녹용추출물 섭 취 후의 지질 수준을 섭취 전과 비교해보면 총 콜레스테롤, LDL-콜레스테롤 및 HDL-콜레스테롤 수준은 녹용추출물 섭 취 전후에 변화가 나타나지 않았으나 혈장 중성지방의 평균수준은 녹용 섭취 후에 다소 낮아지는 경향을 보였으나 통계적 유의성에 이르지는 못했다(Table 4, Fig. 1(a)). 당뇨환자의 지질 수준에 관한 여러 선행연구를 보면 당뇨환자가 대조군보다 total cholesterol과 LDL cholesterol이 높다고 보고(31)된 것이 있는가 하면 당뇨환자군과 대조군 간에 차이가 나타나지 않았다는 결과(32)도 있다.
- 병 환자에게 매식사 30분전에 guargum5g을 섭취시킨 결과, 혈당량과 total-lipide TG가 유의하게 감소하였으며 HDL-가lolesterol이 유의적인 증가를 보였다. 당뇨환자에게 중재 연구를 한 논문들을 살펴보면, Park과 Yoon(34)은 Aloe vera Linne 정제를 복용한 지 1주일만에 당뇨환자의 triglyceride 수치가 유의하게 감소한다고 하였으며, 제 2형 당뇨 환자에게 각각 비 타민 E(900 mg/day)와 비 타민 C(1000 mg/day)를장기간 투여한 두 개의 선행연구에서는 tri이yceride과 total cholesterol 그리고 LDL cholesterol 수준이 유의중}■게 감소하였다(35, 36).
- 본 연구대상자들의 혈장 GOT와 GPT 수준은 모두 정상범위에 속하였다. 본 연구 결과, 녹용추출물 섭취 후 당뇨환자군에서 혈장 CD 수준이 감소한 것과 당뇨환자군에서 중성지방의 감소 경향이 나타났을 뿐 그 외 대상자의 지질 수준 및 항산화 영양 상태의 변화는 볼 수 없었다. 이는 다음과 같은 본 연구의 제한점에 기인하였을 가능성을 생각해 볼 수 있다.
- 본 연구결과 녹용섭 취 후 당뇨환자의 혈장 CD 값이 감소하였으므로(Fig. 1), 이런 결과가 당뇨환자의 항산화 상태의 개선과 관련이 있을 것으로 기대하였으나 항산화 상태의 향상이 나타나지 않은 것으로 보아 CD 감소효과는 항산화와는 다른 기전에 의한 것으로 추측된다. 당뇨환자의 체내 항산화비타민 수준을 살펴본 선행연구를 보면, Oranje 등(8)의 연구에서 콜레스테롤을 낮추는 약물을 복용한 당뇨병 환자들의 혈장 CD 값은 개선효과를 보인 반면, 혈장 a -tocopherol 수치가 오히려 감소하였다고 보고하여 본 연구결과와 일치하고 있음을 알 수 있다.
- 녹용추출물 섭취 전과 후 혈장 GOT와 GPT 수준에 변화가 없었다. 본 연구대상자들의 혈장 GOT와 GPT 수준은 모두 정상범위에 속하였다. 본 연구 결과, 녹용추출물 섭취 후 당뇨환자군에서 혈장 CD 수준이 감소한 것과 당뇨환자군에서 중성지방의 감소 경향이 나타났을 뿐 그 외 대상자의 지질 수준 및 항산화 영양 상태의 변화는 볼 수 없었다.
- 실험 시작하기 전과 후에 환자군의 영 양소섭 취 량은 차이를 보이지 않았다. 본 연구를 수행하는 3주 동안 모든 대상자에게 실험 시작 전의 일상적인 식이 패턴을 유지 하게 지도하여 이들의 항산화 비 타민 섭 취 량에도 차이를 보이지 않았다.
- 추출물 섭 취 후에 혈장 항산화 비타민 농도, 총항산화능인 TRAP 수준 및 항산화 효소 활성 도의 변화가 나타나지 않았다. 본 연구결과 녹용섭 취 후 당뇨환자의 혈장 CD 값이 감소하였으므로(Fig.
후속연구
- 즉, 실험대상자 수가 너무 적어 통계의 power가 낮아질 수 있었을 것이며, 녹용추출물의 섭취 기간이 3주로 너무 짧았거나 혹은 녹용 추출물의 함유량이 너무 낮았기 때문일 수도 있을 것이다. 본 연구에서 산화스트레스 영향을 받는 당뇨병 환자의 LDL 산화 정도가 개선된 것은 당뇨환자의 합병증 예방과 당뇨 치료에 긍정적인 영향을 줄 수 있을 것으로 보이나, 그 외의 항산화 영 양상태 및 지 질 양상에 대한 녹용 추출물의 개선 효과를 얻기 위해서는 앞으로 더 많은 환자와 대조군을 대상으로 좀 더 장기적이고 체계적인 중재 연구가 실시되어야 하리라고 생각된다.
- 또 Bonina 등(16)은 phenolic compound와 비 타민 C가 풍부한 붉은 오렌지 추줄물을 당뇨환자에게 투여한 결과 지질산화 개선효과가 나타났다. 최근 우리나라에서도 건강기능식품에 대한 관심이 증대하고 있으므로 앞으로 당뇨환자의 LDL 산화 정도를 개선하는 영 양중재 연구 및 건강기능식품에 관한 연구가 보다 폭넓고 다양하게 이루어질 것으로 기대된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.