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문제 정의
- , 1996, 1999). 따라서 본 논문에서는 Balb/c 마우스를 실험동물로 사용하여 pirimiphos-methyl과 methidathion을 4주간 반복투여한 후 세포성 면역능 및 체액성 면역능과 관련한 면역독성지표들에 대한 평가 연구를 통해 이들 유기인계 농약에 대한 면역학적 안전성을 평가함은 물론 piirimiphos-methyl 및 methidathion의 면역독성 기전의 이해에도 기여하고자 하였다.
- , 1992). 따라서 유기인계 농약의 노출에 의한 면역독성을 평가하고자, 유기인계 농약을 실험동물로 마우스를 사용하여 OECD 가이드라인에 맞춰 반복투여 후 면역독성을 평가하고 그 독성 기작을 이해하고자 하였다.
제안 방법
- , 1975). 72시간 배양 후에 20μl의 MTS/PMS를 각 well에 추가하여 3시간 배양한 후 ELISA reader (Molecular Devices Co, Sunnyvale, USA)를 이용하여 490 nm에서 흡광도를 측정함으로서 비장세포의 증식능에 미치는 영향을 평가하였다.
- 마우스가 유기인계 농약에 장기간 노출될 경우, 비장 T 세포의 증식능에 영향을 받는지 평가하기 위해 유기인계 농약에 4주간 노출된 마우스로 부터 비장을 적출하여 비장세포를 준비한 다음 체외에서 T 세포의 증식을 유도하기 위해 concanavalin A(ConA)를 처리하였다. ConA 처리 후 증식능의 변화는 MTS 환원 산물의 흡광도 측정을 통하여 평가하였다. 증식능 변화측정 결과 pirimiphos-methyl 투여 마우스들로부터 분리한 비장 T 세포들은 대조군 비장 T 세포와 비교하여 모든 투여용량에서 유의한 증식능 감소가 관찰되었으며 감소 정도는 10, 60, 120 ㎎/㎏ 투여군에 대하여 각각 37%, 32% 그리고 47% 감소로 나타났다(Fig.
- 2)로 적혈구를 제거하였다. Incomplete RPMI 1640 (100μg/ml streptomycin, 100IU/ml penicillin 및 2 mM L-glutamine) 배지로 1회 세척한 후 complete RPMI-1640(lncomplete RPMI 1640 및 10% heat-inactivated fetal bovine serum)로 2회 세척하였다. 마지막으로 complete RPMI-1640 배지에 lymphocyte를 부유시킨 후 세포수를 측정하였다.
- Methidathion과 pirimiphos-methyl를 4주간 경구 투여 후 마우스로부터 비장을 취하고, anti-CD3, anti-CD4 그리고 anti-CD8 항체를 사용하여 비장세포를 3색 염색한 후 flow cytometry를 활용하여 비장 T 세포 아군들의 상대적 분포비 변화를 분석하였다. 분석 결과, pirimiphos- methyl 고용량 투여군에서 CD3-/CD4+/CD8+ T 세포 아군이 유의성 있게 감소된 것을 제외하고 기타 모든 T 세포 아군에서 유의한 분포비 변화를 관찰할 수 없었다.
- Pirimiphos-methyl 또는 methidathion을 corn oil에 용해시키고, LD50의 1/10, 1/100용량 및 중간용량을 선택기준으로 하여 pirimiphos-methyle 10 ㎎/㎏, 60 ㎎/㎏, 120 ㎎/㎏ 그리고 methidathion의 경우는 0.5 ㎎/㎏, 2.5 ㎎/㎏, 5.0 ㎎/㎏의 용량으로 각각 0. ml씩 4주간(주 6일) 마우스에 경구 투여하였고, 용매 대조군에는 cornoil로 동일하게 투여하였다.
- 0 ㎎/㎏의 용량으로 각각 0. ml씩 4주간(주 6일) 마우스에 경구 투여하였고, 용매 대조군에는 cornoil로 동일하게 투여하였다. 투여 종료 후 마우스는 CO2를 흡입시켜 치사시킨 후 면역능 측정시험을 실시하였다.
- 두 시점의 체중차이를 계산하였다. 또한 비장 및 흉선의 중량비는 각 장기를 적출하여 무게를 측정하고 실험일(투여 후 29일째}의 체중에 대한 백분율(%)로 상대 중량을 산출하였다.
- 마우스 비장세포의 증식능을 평가하기 위해 96 well flat-bottomed plate의 각 well에 배양액 100μl에 비장 세포(1×106 cells/ml)와 Con A(5μg/ml) 또는 LPS(50 μg/ml)를 처리하여 37℃, 5% CO2 조건 하에서 72시간 배양하여 증식을 유도하였다(Niks et al., 1990; Melchers et al., 1975). 72시간 배양 후에 20μl의 MTS/PMS를 각 well에 추가하여 3시간 배양한 후 ELISA reader (Molecular Devices Co, Sunnyvale, USA)를 이용하여 490 nm에서 흡광도를 측정함으로서 비장세포의 증식능에 미치는 영향을 평가하였다.
- 따라서 T 세포의 증식능은 그 기능 수행에 있어 매우 중요하며 이에 대한 영향은 면역독성의 중요 지표로 사용될 수 있다(Luster et al, 1988). 마우스가 유기인계 농약에 장기간 노출될 경우, 비장 T 세포의 증식능에 영향을 받는지 평가하기 위해 유기인계 농약에 4주간 노출된 마우스로 부터 비장을 적출하여 비장세포를 준비한 다음 체외에서 T 세포의 증식을 유도하기 위해 concanavalin A(ConA)를 처리하였다. ConA 처리 후 증식능의 변화는 MTS 환원 산물의 흡광도 측정을 통하여 평가하였다.
- 마우스를 CO2를 이용하여 치사시킨 후 비장과 흉선을 무균적으로 적출하여 stainless steel mesh(# 100)에서 압착하여 세포를 분리시켰으며, RBC lysing buffer(0.15 M NH4CI, 1.0 mM KHCO3 및 0.1 mM Na2EDTA; pH 7.2)로 적혈구를 제거하였다. Incomplete RPMI 1640 (100μg/ml streptomycin, 100IU/ml penicillin 및 2 mM L-glutamine) 배지로 1회 세척한 후 complete RPMI-1640(lncomplete RPMI 1640 및 10% heat-inactivated fetal bovine serum)로 2회 세척하였다.
- 비장 및 흉선세포 부유액에서 T세포와 B세포아군들의 분포비를 flow cytometry로 분석하였다. 마우스의 비장 및 흉선세포 부유액을 PBS로 2회 세척한 후, 1×106 세 포에 대하여 T 세포아군의 구분을 위해서는 Fluorescein isothiocyanate(FITC)-conjugated hamster anti-mouse CDS, Cy-Chrome-conjugated rat anti-mouse CD4, 그리고 Phycoerythrin(PE) conjugated rat anti-mouse CD8 등의 항체를 사용하였고, B 세포의 구분을 위해서는 Cy-Chrome-conjugated rat anti-mouse B220 항체를 사용하여 4℃ 차광하에서 30분간 염색하였다. 염색된 세포는 PBS로 세척한 후 0.
- Incomplete RPMI 1640 (100μg/ml streptomycin, 100IU/ml penicillin 및 2 mM L-glutamine) 배지로 1회 세척한 후 complete RPMI-1640(lncomplete RPMI 1640 및 10% heat-inactivated fetal bovine serum)로 2회 세척하였다. 마지막으로 complete RPMI-1640 배지에 lymphocyte를 부유시킨 후 세포수를 측정하였다.
- 따라서 비장 B 세포의 정상적 증식능은 체액성 면역반응을 일으키는데 중요한 요소이다. 비장 T 세포와 유사하게 비장 B 세포 또한 lipopolysaccharide(LPS)를 사용하여 시험 관내에서 인위적으로 증식을 유도하여 pirimiphos-methyl와 meth- idathion에 반복 노출에 따른 마우스의 비장 B 세포 증식능을 측정하였다. 측정 결과 두 유기인계 농약의 모든 투여군에서 약간의 증식능 감소 경향을 관찰할 수는 있었지만 대조군과 비교하여 유의적 변화가 관찰되지는 않았다(Fig.
- 비장 및 흉선세포 부유액에서 T세포와 B세포아군들의 분포비를 flow cytometry로 분석하였다. 마우스의 비장 및 흉선세포 부유액을 PBS로 2회 세척한 후, 1×106 세 포에 대하여 T 세포아군의 구분을 위해서는 Fluorescein isothiocyanate(FITC)-conjugated hamster anti-mouse CDS, Cy-Chrome-conjugated rat anti-mouse CD4, 그리고 Phycoerythrin(PE) conjugated rat anti-mouse CD8 등의 항체를 사용하였고, B 세포의 구분을 위해서는 Cy-Chrome-conjugated rat anti-mouse B220 항체를 사용하여 4℃ 차광하에서 30분간 염색하였다.
- 비장의 경우와 마찬가지로, methidathion과 pirimiphos- methyl 투여 후 마우스로부터 흉선을 취하고, anti-CD3, anti-CD4, 그리고 anti-CD8 항체를 사용하여 흉선세포를 3색 염색한 후 flow cytometry를 활용하여 흉선 T 세포 아군들의 상대적 분포비 변화를 분석하였다. 이는 유기인계 농약이 흉선에서 T 세포의 분화 및 발생과정에 미치는 영향을 평가하기 위한 것으로 분석 결과, 모든 T 세포 아군들의 상대적 분포비는 대조군과 비교하여 투여군들에서 의미 있는 차이를 보이지는 않았다(Table 4).
- 시험물질 투여전과 투여 후 29일째 마우스의 체중을 측정하여 두 시점의 체중차이를 계산하였다. 또한 비장 및 흉선의 중량비는 각 장기를 적출하여 무게를 측정하고 실험일(투여 후 29일째}의 체중에 대한 백분율(%)로 상대 중량을 산출하였다.
- 마우스의 비장 및 흉선세포 부유액을 PBS로 2회 세척한 후, 1×106 세 포에 대하여 T 세포아군의 구분을 위해서는 Fluorescein isothiocyanate(FITC)-conjugated hamster anti-mouse CDS, Cy-Chrome-conjugated rat anti-mouse CD4, 그리고 Phycoerythrin(PE) conjugated rat anti-mouse CD8 등의 항체를 사용하였고, B 세포의 구분을 위해서는 Cy-Chrome-conjugated rat anti-mouse B220 항체를 사용하여 4℃ 차광하에서 30분간 염색하였다. 염색된 세포는 PBS로 세척한 후 0.5% paraformaldehyde로 고정한 다음 flow cytometer를 이용하여 분석하였다.
- ,1988). 유기인계 농약 투여에 의한 비장 B 세포 증식능의 변화를 측정하기 위해 마우스로부터 비장을 적출하여 준비한 비장세포에 B 세포 mitogen인 lipopolysaccharide(LPS)를 처리하였다. LPS 처리 후 비장 B 세포의 증식능 정도는 MTS법을 사용하여 측정하였다.
- 유기인계 농약에의 노출이 마우스의 항체형성능에 미치는 영향을 평가하기 위해 실험 4일 전(농약 투여 후 25일째)에 면양적혈구(SRBC)를 복강으로 주사한 후 비장을 적출하여 anti-SRBC IgM 생산-비장세포수를 PFC 계수법으로 측정하였다. 측정 결과 pirimiphos-methy에의 노출은 마우스 항체형성능을 용량의존적으로 감소시켰으며 methidathion 투여군 또한 2.
- 유기인계 농약이 면역기능에 미치는 영향을 보다 실제적으로 평가하기 위해 항원으로 면양적혈구(SRBC)를 사용하여 유기인계 농약에 장기간 노출된 마우스의 항체 형성능을 측정하였다. 측정 결과 pirimiphos-methyl과 methidathion에의 노출은 마우스에 의한 anti-SRBC 항체 형성을 감소시키는 것으로 나타났다(Fig.
- ml씩 4주간(주 6일) 마우스에 경구 투여하였고, 용매 대조군에는 cornoil로 동일하게 투여하였다. 투여 종료 후 마우스는 CO2를 흡입시켜 치사시킨 후 면역능 측정시험을 실시하였다. 각 군당 8~10마리의 마우스를 사용하였다.
대상 데이터
- 투여 종료 후 마우스는 CO2를 흡입시켜 치사시킨 후 면역능 측정시험을 실시하였다. 각 군당 8~10마리의 마우스를 사용하였다.
- 본 실험에 사용한 시험물질은 Pirimiphos-methyl(ChemService, West Chester, USA)과 Methidathion(ChemService, West Chester, USA)이며 용매는 Cornoil(Sigma Chem. Co. St. Louis, MO, USA)을 사용하였다. 또한 면역세포 분포비 분석을 위해 사용한 염색항체 들은 BD Pharmingen Inc.
- 본 연구를 위해 pirimiphos-methyl 및 methidathion 을 각각 LDm의 1/10 이하~1/100 이상의 용량으로 4주간 경구 투여하였으며, 실험 결과의 통계적 유의성을 확보하기 위해 실험군당 8마리 이상의 Balb/c 마우스를 사용하였다. 투여기간 동안 농약 투여군은 대조군과 유사한 체중 증가를 보였으며, 유기인계 농약 투여로 인한 외관상의 병리적 증상은 관찰되지 않았다.
- 실험동물은 4-5주령의 수컷 Balb/c 마우스를 (주)샘타코에서 구입하여 1주간의 순화기를 거쳐 사용하였으며 온도 23 ± 2℃, 습도 55 ± 10%, 12시간의 명암 주기하에서 계속 사육하였고, 물과 사료는 자유롭게 섭취하도록 하였다.
- (San Diego, CA, USA) 제품을 사용하였다. 항체생성능 측정을 위해서는 Agar(Difco Lab. Detroit, Ml, USA), DEAE dextran(Pharmacia, Uppsala, Sweden), Guinea pig complement(Sigma Chem. Co. St. Louis, MO, USA) 및 Sheep red blood cell (국립독성연구원)을 사용하였다. 3-(4,5-dimethylthiazol-2- yl )-5-(3-carboxy-ethoxyphenyl )-2-(4-sulfophenyl )-2Htetrazolium; MTS) (Promega, Medison, Wl, USA), RPMI 1640 media(Gibco Lab.
데이터처리
- 본 실험에서 얻은 측정치는 통계프로그램인 SigmaStat(SPSS Inc. Chicago, USA)의 one-way analysis of variance(ANOVA)를 적용하여 통계처리 하였고, 각 군간의 비교는 Dunnett's and Duncan's test를 사용하여 유의수준 p<0.05로 대조군과 용량군 사이에 통계학적 유의성을 검정하였다.
이론/모형
- 유기인계 농약 투여에 의한 비장 B 세포 증식능의 변화를 측정하기 위해 마우스로부터 비장을 적출하여 준비한 비장세포에 B 세포 mitogen인 lipopolysaccharide(LPS)를 처리하였다. LPS 처리 후 비장 B 세포의 증식능 정도는 MTS법을 사용하여 측정하였다. 측정 결과 pirimiphos-methyl 및 methidathion 투여군 모두에서 유의성은 없지만 methidathion 투여군에서는 농도 의존적인 경향을 보였다(Fig.
- SRBC에 대한 비장의 항체형성세포 측정은 Luster 들(1988)의 방법에 따라 수행하였다. 비장을 적출하여 세포를 유출시킨 후, EBSS로 1,500 rpm에서 10분간 3회 세척한 후, EBSS 5 ml에 비장세포를 부유시킨 후 얼음에 보관하여 사용했다.
성능/효과
- 체중 외에 거시적 면역독성 지표로서 면역관련 장기인 비장 및 흉선의 상대적 중량을 측정한 결과, methidathion의 경구투여는 마우스의 비장 및 흉선의 상대적 중량과 세포수 등에 유의한 변화를 초래하지 않았다(Table 1). Pirimiphos-methyl 의 경우도 methidathion과 마찬가지로 마우스의 흉선의 상대적 중량 및 흉선 세포수에는 유의한 영향을 미치지 않았으나 고용량(120㎎/㎏) 투여시에는 비장의 상대 적중량 및 세포수가 통계적으로 의미 있게 감소되는 것이 관찰되었다(Table 2). Pirimiphos-methyl 고용량 투여시 나타난 비장의 상대적 중량 감소는 비장구성 총세포수 감소에 일부 기인한 것으로 사료된다.
- 2). methidathion투여 마우스들로부터 분리한 비장 T 세포들 또한 대조군 비장 T 세포와 비교하여 모든 투여군에서 증식능이 감소하는 경향(최대 약 23%)을 보였으나 통계적 유의성은 없었다(Fig. 2).
- 따라서 T 세포 증식능의 이상은 궁극적으로 부적절한 면역반응 유발로 연결되게 된다. pirimiphos- methyl와 methidathion에 장기간 노출된 마우스로부터 비장을 적출하고 비장세포에 Con A를 처리하여 비장 T 세포를 활성화시켜 증식능을 조사한 결과 pirimiphos- methyl 투여군에서는 모든 용량에서 비장 T 세포 증식능의 감소가 나타났으며 120 ㎎/㎏ 투여 마우스로부터 분리한 비장 T 세포는 대조군 비장세포에 비해 약 50%에 가까운 증식능 감소를 보여주었다(Fig. 2). 그러나 methidathion 투여 마우스의 비장 T 세포에서는 통계적 유의성을 보이지는 않았지만 증식능 감소 경향을 나타내었다 (Fig.
- 따라서 pirimiphos-methyl 고용량 투여군에서 나타난 비장의 상대적 중량 및 비장세포수 감소는 pirimiphos-methyl 투여가 특정 비장 구성 세포군에 특이적으로 영향을 미친 결과가 아니라 비장세포 전체에 비특이적으로 미친 독성의 결과로 사료된다(Table 3). 다른 한편, B 세포-특이적 염색항체(anti-mouse B220/CD45R)를 사용하여 비장내 B 세포아군의 상대적 분포비 변화를 flow cytometry를 사용하여 분석한 결과, 두 물질 모두 대조군과 비교하여 투여군에서 유의한 변화를 관찰할 수 없었다(Table 3).
- 2%)을 차지함으로 이것의 분포비 감소가 pirimiphos-methyl 고용량 투여군에서 나타난 비장의 상대적 중량 및 비장세포수 감소를 설명해 줄 것으로 사료되지는 않는다. 따라서 pirimiphos-methyl 고용량 투여군에서 나타난 비장의 상대적 중량 및 비장세포수 감소는 pirimiphos-methyl 투여가 특정 비장 구성 세포군에 특이적으로 영향을 미친 결과가 아니라 비장세포 전체에 비특이적으로 미친 독성의 결과로 사료된다(Table 3). 다른 한편, B 세포-특이적 염색항체(anti-mouse B220/CD45R)를 사용하여 비장내 B 세포아군의 상대적 분포비 변화를 flow cytometry를 사용하여 분석한 결과, 두 물질 모두 대조군과 비교하여 투여군에서 유의한 변화를 관찰할 수 없었다(Table 3).
- 분포비 변화를 분석하였다. 분석 결과, pirimiphos- methyl 고용량 투여군에서 CD3-/CD4+/CD8+ T 세포 아군이 유의성 있게 감소된 것을 제외하고 기타 모든 T 세포 아군에서 유의한 분포비 변화를 관찰할 수 없었다. 한편 CD3-/CD4+/CD8+ T 세포아군은 비장세포 중 적은 비중(0.
- 2). 이러한 결과는 특히 pirimiphos-methyl의 투여가 마우스 비장 세포아군 들의 구성 분포비 등에 대한 변화는 탐지되니 않았으나, T 세포의 증식 활성능에는 이상을 초래하고 있는 것으로 보아 pirimiphos-methyl의 투여가 비장 T 세포의 사멸을 유도한 결과라고 사료된다.
- 4). 이러한 결과로 보아 pirimiphos-methyl과 methidathion과 같은 유기인계 농약에 장기간 노출되었을 경우 항체 형성과 같은 체액성 면역반응이 억제된 결과이다.
- 이상의 결과를 종합해 볼 때, methidathion과 pirimiphos-methyl에 장기간 노출될 경우, Balb/c 마우스의 면역기능 저하가 유발될 가능성이 우려되며 이와 같은 면역기능에 대한 영향은 고용량의 pirimiphos-methyl에 노출 되었을 경우 특히 두드러질 것으로 예상된다. 이는 methidathionCfoxicity class WHO 1b; EPA 1)이 pirimiphosmethylCFbxicity 이ass WHO 3; EPA 3) 보다 강한 일반 독성 및 유전독성 등을 보임에도 불구하고, 면역계에 미치는 영향에 있어서는 pirimiphos-methyl이 methidathion 보다 큰 것은 대사배출 속도가 보다 신속한 methidathion (Gallo, 1991H 비해 체내에서 축적하여 체내 스트레스가 발생하여 해소되지 못하며, piriimipho-methyl의 단백질합성을 저해(Marinovich et al.
- 저용량 및 중용량의 pirimiphos-methyl 투여시에도 methidathior과 마찬가지로 마우스의 체중, 비장 및 흉선의 상대적 중량 및 세포수에는 유의한 영향을 미치지 않았으나, 고용량(120 ㎎/㎏)군에서는 비장의 상대적 증량 및 세포수가 통계적으로 유의성 있게 감소되었다(Table 1, 2).
- ConA 처리 후 증식능의 변화는 MTS 환원 산물의 흡광도 측정을 통하여 평가하였다. 증식능 변화측정 결과 pirimiphos-methyl 투여 마우스들로부터 분리한 비장 T 세포들은 대조군 비장 T 세포와 비교하여 모든 투여용량에서 유의한 증식능 감소가 관찰되었으며 감소 정도는 10, 60, 120 ㎎/㎏ 투여군에 대하여 각각 37%, 32% 그리고 47% 감소로 나타났다(Fig. 2). methidathion투여 마우스들로부터 분리한 비장 T 세포들 또한 대조군 비장 T 세포와 비교하여 모든 투여군에서 증식능이 감소하는 경향(최대 약 23%)을 보였으나 통계적 유의성은 없었다(Fig.
- 투여기간 동안 농약 투여군은 대조군과 유사한 체중 증가를 보였으며, 유기인계 농약 투여로 인한 외관상의 병리적 증상은 관찰되지 않았다. 체중 외에 거시적 면역독성 지표로서 면역관련 장기인 비장 및 흉선의 상대적 중량을 측정한 결과, methidathion의 경구투여는 마우스의 비장 및 흉선의 상대적 중량과 세포수 등에 유의한 변화를 초래하지 않았다(Table 1). Pirimiphos-methyl 의 경우도 methidathion과 마찬가지로 마우스의 흉선의 상대적 중량 및 흉선 세포수에는 유의한 영향을 미치지 않았으나 고용량(120㎎/㎏) 투여시에는 비장의 상대 적중량 및 세포수가 통계적으로 의미 있게 감소되는 것이 관찰되었다(Table 2).
- LPS 처리 후 비장 B 세포의 증식능 정도는 MTS법을 사용하여 측정하였다. 측정 결과 pirimiphos-methyl 및 methidathion 투여군 모두에서 유의성은 없지만 methidathion 투여군에서는 농도 의존적인 경향을 보였다(Fig. 3).
- 측정하였다. 측정 결과 pirimiphos-methyl과 methidathion에의 노출은 마우스에 의한 anti-SRBC 항체 형성을 감소시키는 것으로 나타났다(Fig. 4). 이는 두유기인계 농약이 비장세포의 사멸, 비장 T 세포 증식능 등에 미치는 영향이 체액성 면역반웅과 같은 실제적 면역반응에 대한 영향으로 나타남을 보여주는 것으로 pirimiphos-methyl 및 methidathion에 의한 실질적 면역독성의 한 예를 제시하는 것으로 사료된다.
- 측정하였다. 측정 결과 pirimiphos-methy에의 노출은 마우스 항체형성능을 용량의존적으로 감소시켰으며 methidathion 투여군 또한 2.5 및 5.0 ㎎/㎏ 용량에서 유의하게 항체형성능이 감소하는 것으로 나타났다(Fig. 4). 이러한 결과로 보아 pirimiphos-methyl과 methidathion과 같은 유기인계 농약에 장기간 노출되었을 경우 항체 형성과 같은 체액성 면역반응이 억제된 결과이다.
- 비장 T 세포와 유사하게 비장 B 세포 또한 lipopolysaccharide(LPS)를 사용하여 시험 관내에서 인위적으로 증식을 유도하여 pirimiphos-methyl와 meth- idathion에 반복 노출에 따른 마우스의 비장 B 세포 증식능을 측정하였다. 측정 결과 두 유기인계 농약의 모든 투여군에서 약간의 증식능 감소 경향을 관찰할 수는 있었지만 대조군과 비교하여 유의적 변화가 관찰되지는 않았다(Fig. 3). 이러한 결과는 적어도 pirimiphos-methyl에의 노출은 마우스의 비장세포 중 B 세포 보다는 T 세포에 보다 유독한 결과를 유래하는 것으로 사료된다.
- 투여기간 동안 농약 투여군은 대조군과 유사한 체중 증가를 보였으며, 유기인계 농약 투여로 인한 외관상의 병리적 증상은 관찰되지 않았다. 체중 외에 거시적 면역독성 지표로서 면역관련 장기인 비장 및 흉선의 상대적 중량을 측정한 결과, methidathion의 경구투여는 마우스의 비장 및 흉선의 상대적 중량과 세포수 등에 유의한 변화를 초래하지 않았다(Table 1).
- Pirimiphos-methyl 고용량 투여시 나타난 비장의 상대적 중량 감소는 비장구성 총세포수 감소에 일부 기인한 것으로 사료된다. 한편 flow cytometry를 사용하여 비장세포에서 B 세포 및 다양한 T 세포아군들 (subsets)을 구별하여 그 분포비를 분석한 결과에 따르면 대조군과 비교하여 pirimiphos-methyl 및 methidathion 투여군 비장세포에서 뚜렷한 분포비 차이를 보이는 세포 아군들은 관찰되지는 않았다(Table 3). 이러한 결과는 pirimiphos-methyl 또는 그 대사산물이 비장세포의 사멸을 유도하거나 촉진시키지만 그와 같은 영향이 특정 비장 세포 아군들에 미치는 것이 아니라 전체 비장세포에 대한 비특이적 영향에 의한 결과로 사료된다.
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