본 연구는 PC방의 세균 오염 실태를 조사하기 위한 목적으로 2004년 7월${\~}$12월까지 서울시내에 있는 PC방(Internet Cafe)들 중에서 34곳을 표본으로 선정하여 연구를 수행하였다. 총 세균수를 측정한 결과, 키보드에서는 $9.0{\times}10^4$ CFU/ml, 마우스에서는 $2{\times}10$ CFU/ml, 그리고 화장실 손잡이에서는 $5{\times}10^3$ CFU/ml의 세균이 검출되었다. 이는 화장실 손잡이보다 키보드와 마우스에서 세균에 대한 오염정도가 더 심한 것을 의미한다. PC방에서 항생제에 대한 내성을 지닌 7개의 균주를 분리해 내었는데, 2개의 균주는 methicillin과 erythromycin에 대한 내성을 나타내었고, 5개의 균주는 gentamicin, ampicllin, cefotaxim, chloramphenicol에 대해서 내성을 나타내었다. 이들 균주들을 동정한 결과, 2 균주는 Staphylococcus aureus로 동정되었고, 4 균주는 Actinobacillus ureae로 동정되었으며. 나머지 1개의 균주는 Pasteurella multocida로 동정되었다. Pasteurella multocida와 Actinobacillus ureae는 잠재적인 병원균으로 이전에 Pasteurella ureae로 알려졌던 Actinobacillus ureae는 인간의 상부 호흡기에 드물게 공생하는 것으로 알려졌으며, Pasteurella multocida는 많은 가축의 비인두강 안에 존재하는 평범한 정상 균총을 구성하는 세균인 것으로 알려졌다. 항생제 내성에 대한 연구 결과 Staphylococcus aureus는 erythromycin과 methicillin의 혼합제에 대해서 $100\;{\mu}g/ml$ 이상의 높은 항생제 내성을 나타내었고, Pasteurella multocida와 Actinobacillus ureae는 gentamicin, ampicillin 에 대하여 $100\;{\mu}g/ml$ 이상의 높은 항생제 내성이 있음을 알 수 있었다.
본 연구는 PC방의 세균 오염 실태를 조사하기 위한 목적으로 2004년 7월${\~}$12월까지 서울시내에 있는 PC방(Internet Cafe)들 중에서 34곳을 표본으로 선정하여 연구를 수행하였다. 총 세균수를 측정한 결과, 키보드에서는 $9.0{\times}10^4$ CFU/ml, 마우스에서는 $2{\times}10$ CFU/ml, 그리고 화장실 손잡이에서는 $5{\times}10^3$ CFU/ml의 세균이 검출되었다. 이는 화장실 손잡이보다 키보드와 마우스에서 세균에 대한 오염정도가 더 심한 것을 의미한다. PC방에서 항생제에 대한 내성을 지닌 7개의 균주를 분리해 내었는데, 2개의 균주는 methicillin과 erythromycin에 대한 내성을 나타내었고, 5개의 균주는 gentamicin, ampicllin, cefotaxim, chloramphenicol에 대해서 내성을 나타내었다. 이들 균주들을 동정한 결과, 2 균주는 Staphylococcus aureus로 동정되었고, 4 균주는 Actinobacillus ureae로 동정되었으며. 나머지 1개의 균주는 Pasteurella multocida로 동정되었다. Pasteurella multocida와 Actinobacillus ureae는 잠재적인 병원균으로 이전에 Pasteurella ureae로 알려졌던 Actinobacillus ureae는 인간의 상부 호흡기에 드물게 공생하는 것으로 알려졌으며, Pasteurella multocida는 많은 가축의 비인두강 안에 존재하는 평범한 정상 균총을 구성하는 세균인 것으로 알려졌다. 항생제 내성에 대한 연구 결과 Staphylococcus aureus는 erythromycin과 methicillin의 혼합제에 대해서 $100\;{\mu}g/ml$ 이상의 높은 항생제 내성을 나타내었고, Pasteurella multocida와 Actinobacillus ureae는 gentamicin, ampicillin 에 대하여 $100\;{\mu}g/ml$ 이상의 높은 항생제 내성이 있음을 알 수 있었다.
This study was performed to investigate the hygiene condition of PC room(internet cafe) in Seoul Korea. From July 2004 to December, 34 samples were collected, there's an average of $9.0{\times}10^4$ CFU/ml on keyboards, $2{\times}10$ CFU/ml on mouse and $5{\times}10^3$
This study was performed to investigate the hygiene condition of PC room(internet cafe) in Seoul Korea. From July 2004 to December, 34 samples were collected, there's an average of $9.0{\times}10^4$ CFU/ml on keyboards, $2{\times}10$ CFU/ml on mouse and $5{\times}10^3$ CFU/ml on door konbs toilets, suggesting that keyboards and mouse are more contaminated than toilet door knobs. Seven antimicrobial resistant strains were isolated from PC Rooms. Two isolates were resistant to methicillin and erythromycin, while five isolates were resistant to gentamicin, ampicllin, cefotaxim, and chloramphenicol. By identification, these strains were identified as Staphylococcus aureus (2 strains). Actinobacillus ureae (4 strains) and Pasteurella multocida (1 strain), respectively. Pasteurella multocida and Actinobacillus ureae are potentially pathogenic bacteria. Actinobacillus ureae, formerly, known as Pasteurella ureae, is an uncommon of the upper respiratory tract in humans. Pasteurella multocida is a part of the normal flora in the nasopharynx of many domestic animals. We concluded that Staphylococcus aureus is highly resistant to erythromycin and methicillin over $100\;{\mu}g/ml$, while Pasteurella multocida and Actinobacillus ureae is highly resistant to gentamicin, ampicillinover over $100\;{\mu}g/ml$.
This study was performed to investigate the hygiene condition of PC room(internet cafe) in Seoul Korea. From July 2004 to December, 34 samples were collected, there's an average of $9.0{\times}10^4$ CFU/ml on keyboards, $2{\times}10$ CFU/ml on mouse and $5{\times}10^3$ CFU/ml on door konbs toilets, suggesting that keyboards and mouse are more contaminated than toilet door knobs. Seven antimicrobial resistant strains were isolated from PC Rooms. Two isolates were resistant to methicillin and erythromycin, while five isolates were resistant to gentamicin, ampicllin, cefotaxim, and chloramphenicol. By identification, these strains were identified as Staphylococcus aureus (2 strains). Actinobacillus ureae (4 strains) and Pasteurella multocida (1 strain), respectively. Pasteurella multocida and Actinobacillus ureae are potentially pathogenic bacteria. Actinobacillus ureae, formerly, known as Pasteurella ureae, is an uncommon of the upper respiratory tract in humans. Pasteurella multocida is a part of the normal flora in the nasopharynx of many domestic animals. We concluded that Staphylococcus aureus is highly resistant to erythromycin and methicillin over $100\;{\mu}g/ml$, while Pasteurella multocida and Actinobacillus ureae is highly resistant to gentamicin, ampicillinover over $100\;{\mu}g/ml$.
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문제 정의
PC방을 한번 이용할 때 장시간 머무르는 경우가 많으므로 미생물에 대한 노출시간이 길어질 수밖에 없으며 요즘에는 PC방내에서의 음식섭취가 가능하기 때문에 각종 병원균에 노출 될 수밖에 없는 실정이다. 그러나 PC방의 위생상태 정도를 파악하기가 사실상 불가능하기 때문에 , 본 연구는 보편화된 PC방의 세균 오염 정도와 항생제의 내성정도를 파악하여 PC방의 위생 상태에 대한 인식을 돕기 위한 기초 자료를 제공하고자 PC방에서 사람의 손이 많이 닿는 부분인 마우스, 키보드, 화장실 손잡이의 총 세균수를 측정하였다. 또한 그 세균들의 항생제 내성정도와 세균의 동정을 통하여 시내에 소재하고 있는 PC방의 위생 상태를 조사하고 PC방의 환경파악을 위한 기초 자료를 제공함을 그 목적으로 하였다.
그러나 PC방의 위생상태 정도를 파악하기가 사실상 불가능하기 때문에 , 본 연구는 보편화된 PC방의 세균 오염 정도와 항생제의 내성정도를 파악하여 PC방의 위생 상태에 대한 인식을 돕기 위한 기초 자료를 제공하고자 PC방에서 사람의 손이 많이 닿는 부분인 마우스, 키보드, 화장실 손잡이의 총 세균수를 측정하였다. 또한 그 세균들의 항생제 내성정도와 세균의 동정을 통하여 시내에 소재하고 있는 PC방의 위생 상태를 조사하고 PC방의 환경파악을 위한 기초 자료를 제공함을 그 목적으로 하였다.
폐쇄된 공간에서의 공기 오염실태는 이미 보고 된 바가 있고(8), 또 식품과 식품을 간접적으로 오염 시킬 수 있는 재료에 관한 위생 상태에 관해서도 조사된 바가 있으나 보편화된 PC방의 오염도에 관한 연구 자료가 전무한 관계로 본 실험을 수행하게 되었다. 본 연구는 PC방의 위생 상태에 대한 기초 자료가 국내외에 거의 없는 실정으로 인해서 자료 비교와 위생 상태 파악에 어려움이 있었으나, 보편화된 PC방의 세균 오염 정도와 항생제의 내성 정도를 파악하여 PC방의 위생 상태에 대한 일반 대중의 인식을 돕기 위한 기초 자료를 제공할 목적으로, PC방에서 사람의 손이 많이 닿는 부분인 마우스, 키보드, 화장실 손잡이의 총 세균수와 그 세균들의 항생제 내성정도와 세균의 동정을 통하여 시내의 PC방의 위생 상태를 조사하고 PC방의 환경파악을 위한 기초 자료를 제공하기 위해서 수행하였다.
폐쇄된 공간에서의 공기 오염실태는 이미 보고 된 바가 있고(8), 또 식품과 식품을 간접적으로 오염 시킬 수 있는 재료에 관한 위생 상태에 관해서도 조사된 바가 있으나 보편화된 PC방의 오염도에 관한 연구 자료가 전무한 관계로 본 실험을 수행하게 되었다. 본 연구는 PC방의 위생 상태에 대한 기초 자료가 국내외에 거의 없는 실정으로 인해서 자료 비교와 위생 상태 파악에 어려움이 있었으나, 보편화된 PC방의 세균 오염 정도와 항생제의 내성 정도를 파악하여 PC방의 위생 상태에 대한 일반 대중의 인식을 돕기 위한 기초 자료를 제공할 목적으로, PC방에서 사람의 손이 많이 닿는 부분인 마우스, 키보드, 화장실 손잡이의 총 세균수와 그 세균들의 항생제 내성정도와 세균의 동정을 통하여 시내의 PC방의 위생 상태를 조사하고 PC방의 환경파악을 위한 기초 자료를 제공하기 위해서 수행하였다.
제안 방법
이중 1 ml를 취하여 연속 희석법으로 103배까지 희석시켰다. 101, 103배로 희석시킨 균액을 준비한 후, 각각의 희석 균액에서 0.1 ml를 분취하여, 멸균된 각각의 nutrient agar 배지(Difco, USA)에 도말하였다. 도말 후, 37℃로 유지된 배양기에서 24~48시간 호기 배양시킨 후 형성된 집락의 수를 구하기 위해서, nutrient agar 배지에서, 이미 보고된 방법과 같이 집락 수를 계산하였다(6, 10, 16, 25).
M1C 측정결과 높은 항생제 내성을 보이는 그람 양성균 2균주와 그람 음성균 5균주를 VITEK32(비오메리으)를 이용하여 동정하였다(5, 24).
1 ml를 분취하여, 멸균된 각각의 nutrient agar 배지(Difco, USA)에 도말하였다. 도말 후, 37℃로 유지된 배양기에서 24~48시간 호기 배양시킨 후 형성된 집락의 수를 구하기 위해서, nutrient agar 배지에서, 이미 보고된 방법과 같이 집락 수를 계산하였다(6, 10, 16, 25).
멸균 처리한 면봉을 증류수에 적셔서 제시한 키보드 등에 묻혀서 세균을 채취하였다(7). 이중 1 ml를 취하여 연속 희석법으로 103배까지 희석시켰다.
서울의 동대문구, 종로구, 성북구, 도봉구, 노원구, 중랑구, 성동구, 광진구 등의 17개구에서 각 구마다 2곳의 PC방을 표본으로 선정하여, 총 34장소의 키보드와 마우스, 화장실 손잡이에서 세균을 채취하여 saline에 103배까지 희석시킨 후, 101, 103배의 희석 균액에서 자란 균수를 세어 평균값을 구한 다음, 표를 작성하였다.
05 ml씩 도말하여 37℃에서 48시간 동안 배양시켰다. 집락이 생성되지 않는 배양접시에 첨가한 항생제의 농도를 MIC로 정하였다(13, 19).
대상 데이터
2004년 7~12월 서울의 동대문구, 종로구, 성북구, 도봉구, 노원구, 중랑구, 성동구, 광진구 등, 17개구의 PC방에서 한 지역구당 임의의 두 곳을 선택하여 총 34개의 PC방을 대상으로 멸균된 면봉을 이용하여 키보드와 마우스, 화장실 손잡이에서 시료를 채취하여 사용하였다.
9%의 멸균된 생리식염수를 사용하였다. MIC를 측정하기 위한 항생제로는 vancomycin (Eli Lilly Benelux, Brussels, Belgium), oxacillin (Sigma chemical Co., USA), erythromycin (Sigma chemical Co., USA), gentamicin (Dongshin, USA), ampicillin (Sigma chemical Co., USA), cefbtaxim (Whanin, Korea), ciprofloxacin (Ildong, Korea), chloramphenicol (Sinil, Korea)을 사용하였다.
최소 발육 저지 농도(MIC)의 측정(14, 17)은 고체배지 희석법으로 평판배지에 접종하여 실시하였다. 본 실험에서는 그람 양성균의 치료제로 쓰이는 항생제인 vancomycin, oxacillin, erythromycin과 그람 음성균에 대한 항생제로 쓰이는 gentamicin, ampicillin, cefbtaxim, ciprofloxacin, chloramphenicol을 사용하였다. 먼저, 각 항생제의 농도를 2배씩 단계적으로 희석시킨 후에, 각 항생제를 nutrient broth agar배지에 넣고 배양접시에 부어서 굳혔다.
총균수 즉정을 위해 이미 보고된 것처럼 배지는 nutrient agar (1, 3, 4, 8)를 사용하였다. 오염된 시료를 희석시키기 위한 희석수는 0.
총균수 측정법과 동일한 방법으로 하되, 그람 양성균을 분리하기 위한 배지로는 MSA (Mannitol Salt Agar, Difco, USA) 배지(20, 22)를 사용하였으며, 그람 음성균을 분리하기 위한 배지로는 EMB(Eosin Methylene Blue, Difco, USA)배지를 사용하였다.
이론/모형
PC방에서 회수한 그람 음성균과 그람 양성균주들에 대해 각각의 항생제를 사용하여, NCCLS (National Committee for Clinical Laboraioiy Standards, 1988)의 방법에 따라 고체배지 희석법으로 MIC (minimal inhibitory concentration: 최소 발육 저지 농도)를 측정하였다. 최소 발육 저지 농도(MIC)의 측정(14, 17)은 고체배지 희석법으로 평판배지에 접종하여 실시하였다.
최소 발육 저지 농도(MIC)의 측정(14, 17)은 고체배지 희석법으로 평판배지에 접종하여 실시하였다. 본 실험에서는 그람 양성균의 치료제로 쓰이는 항생제인 vancomycin, oxacillin, erythromycin과 그람 음성균에 대한 항생제로 쓰이는 gentamicin, ampicillin, cefbtaxim, ciprofloxacin, chloramphenicol을 사용하였다.
성능/효과
또한 그람 음성균의 5균주는 Gram Negative Identification Card(GNI+)에 의한 분석 결과, oxidase에 음성으로 나타났다. 1번(000001)균주는 Actinobacillus ureae 99%와 Vibrio alginolyticus 1%미만으로 동정되었고, 2번(000003)균주는 Actino-bacillus ureae 94%와 Presumptive Acinetobacter Iwoffii/Junii 2%로 동정되었다. 4번(000010)균주는 Actinobacillus ureae 99%와 Pasteurella haemolytica/trahalosi 1%미만으로 동정되었으며, 5번(000011)균주는 Actinobacillus ureae 99%와 Pasteurella haemolytica/trahalosi 1%미만으로 동정되었다.
34곳의 PC방에서의 키보드, 마우스, 화장실 손잡이의 총 세균수를 측정하여 평균을 계산한 결과, 키보드에서는 9.0 × 104 CFU/ ml, 마우스에서는 2 × 104 CFU/ml의 세균이 검출된 반면에, 화장실 손잡이에서는 5 × 103 CFU/ml의 세균이 검출되었다. 이러한 결과는, 화장실 손잡이보다는 키보드와 마우스에서 세균에 의한 오염정도가 더 심하다는 사실을 보여주고 있으며, PC방의 청결하지 못한 키보드와 마우스가 세균이 서식하기에 좋은 배양기와 같은 역할을 수행하고 있음을 시사하고 있다.
34곳의 PC방에서의 키보드, 마우스, 화장실 손잡이의 총세균수를 측정한 결과, 키보드에서는 9.0 × 104 CFU/ml, 마우스에는 2 × 104 CFU/ml의 세균이 검출되었고, 화장실 손잡이에서는 5 × 103 CFU/ml의 세균이 검출되었다. 즉, PC방에서 많은 세균이 측정됨에 따라 PC방의 청결하지 못한 키보드와 마우스가 세균이 살기에 적당한 배양기와 같은 역할을 할 수도 있다는 추측을 불러일으키게 되었다.
Gram Postive Identification Card (GPI)에 의한 분석 결과, 그람 양성균의 1번(00002), 2번(00007) 균주는 catalase와 coagulase에 양성반응을 나타내어 Staphylococcus aureus로 동정되었다. 또한, 그람 음성균의 5균주는 Gram Negative Identification Card(GNI+)에 의한 분석 결과, oxidase에 음성으로 나타났으며 1번(00001), 2번(00003), 4번(00010), 5번(00011)균주는 Actinobacillus nreae로 동정되었으며, 3번(00004)균주는 Pasteurella multocida로 동정되 었다.
동정하였다(5). Gram Postive Identification Card(GPI)에 의한 분석 결과, 그람 양성균 중 1번(000002), 2번(000007) 균주는 catalase와 coagulase에 대한 효소 활성에서 양성을 나타내어 Staphylococcus aureus 99%와 S. intermedius 1%의 결과를 나타내어, 최종적으로 S. aureus로 동정되었다. 또한 그람 음성균의 5균주는 Gram Negative Identification Card(GNI+)에 의한 분석 결과, oxidase에 음성으로 나타났다.
MIC를 측정한 결과, 조사한 항생제에 대해서 높은 내성을 보이는 그람 양성균 2균주와 그람 음성균 5균주를 동정하였다(5). Gram Postive Identification Card(GPI)에 의한 분석 결과, 그람 양성균 중 1번(000002), 2번(000007) 균주는 catalase와 coagulase에 대한 효소 활성에서 양성을 나타내어 Staphylococcus aureus 99%와 S.
PC방에서 회수한 균들에 대해서 MIC 측정(14, 17)을 통한 항생제 내성여부를 조사한 결과에서는 그람 양성인 두 균 모두, 폐렴과 패혈증 등에 효과가 가장 좋은 항생 물질인 erythromycin에 대해서 100 ㎍/ml의 농도에서도 성장하여 높은 항생제 내성을 나타내었다. 그람 음성 균주들은 gentamicin과 ampicillin에 대해서 모두 100 ㎍/ml이상의 높은 농도에서 항생제 내성을 나타내었으며, cefotaxim과 chloramphenicol에 대해서도 높은 항생제 내성을 나타내었다.
그람 음성 균주들은 gentamicin과 ampicillin에 대해서 모두 100 ㎍/ml이상의 높은 농도에서 항생제 내성을 나타내었으며, cefotaxim과 chloramphenicol에 대해서도 높은 항생제 내성을 나타내었다. 그 중, 3번(00004)균주는 cefbtaxim과 chloramphenicol의 두 항생제에 대해서 높은 저항성을 나타내었다.
2, 3). 그람 양성균인 1(00002), 2(00007)균은 erythro-mycin에 대해서 100 ㎍/ml의 농도에서도 성장할 수 있는 비교적 높은 항생제 내성을 나타내었으며, 1(00002)균은 oxacillin (methicillin)에 대해서 100 ㎍/ml이상의 높은 농도에서도 항생제 내성을 나타내었다.
그람 음성 균주들은 gentamicin과 ampicillin에 대해서 모두 100 ㎍/ml이상의 높은 농도에서 항생제 내성을 나타내었으며, cefotaxim과 chloramphenicol에 대해서도 높은 항생제 내성을 나타내었다. 그 중, 3번(00004)균주는 cefbtaxim과 chloramphenicol의 두 항생제에 대해서 높은 저항성을 나타내었다.
그람 음성균인 1(00001), 2(00003), 3(00004), 4(00010), 5(00011)균주들은 gentamicin과 ampicillin에 대해서 모두 100 ㎍/ml이상의 높은 농도에서 항생제 내성을 나타내었고, cefotaxim과 chloramphenicol에 대해서도 역시 높은 항생제 내성을 나타내었다. 그 중에서도 3(00004)균주는 cefotaxim과 chloramphenicol에 대해서 높은 항생제 저항성을 나타내었다.
aureus로 동정되었다. 또한 그람 음성균의 5균주는 Gram Negative Identification Card(GNI+)에 의한 분석 결과, oxidase에 음성으로 나타났다. 1번(000001)균주는 Actinobacillus ureae 99%와 Vibrio alginolyticus 1%미만으로 동정되었고, 2번(000003)균주는 Actino-bacillus ureae 94%와 Presumptive Acinetobacter Iwoffii/Junii 2%로 동정되었다.
또한, 그람 음성균의 5균주는 Gram Negative Identification Card(GNI+)에 의한 분석 결과, oxidase에 음성으로 나타났으며 1번(00001), 2번(00003), 4번(00010), 5번(00011)균주는 Actinobacillus nreae로 동정되었으며, 3번(00004)균주는 Pasteurella multocida로 동정되 었다.
총 34곳의 PC방에 대한 총세균수의 분포를 살펴보면, 키보드의 경우 중랑구의 한 PC방을 제외한 나머지 장소에서는 1.0 × 104 CFU/ml 이하의 분포를 나타내었으며, 단지 중랑구B의 PC방에서는 3.0 × 106 CFU/ml로 조사한 구역들 중에서 가장 많은 수의 세균이 관찰되었다. 마우스의 경우, 중랑구B 지역에서 3.
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