잎새버섯 균사체 배양액으로부터 분리된 세포외 다당체(exopolysaccharide, GF-glucan)의 피부보습과 SLS에 의한 피부손상에 대한 자극완화 효과를 연구하였다. 사람을 이용한 피부수분 보유 효과 및 피부 수분 손실량을 평가한 결과, 피부의 수분함량을 유지하는 효과가 우수하였으며 표피 수분손실량 또한 전어서 피부 보습제로서 매우 우수하였다. GF-glucan을 함유한 화장품의 자극완화 효과를 평가하기 위하여 사람 피부에 $0.5\%$ SLS 첩포로 유발된 자극성 피부염의 항염증 효과를 평가한 결과, SLS에 의해 유발되는 자극정도가 피검자의 피부상태에 따라 다양하게 나타났으며, GF-glucan이 함유된 제품의 도포 부위에서 대조 부위에 비해 홍반이 유의하게 감소하였다. 또한 자극유발 후 피부에 대한 수분유지와 피부 수분 손실량을 감소시킴으로서 우수한 항염증 효과를 보였다. 결론적으로 잎새버섯의 균사체를 배양하여 생산한 배양액으로부터 분리한 세포외 다당체인 GF-glucan을 화장품에 응용하면 우수한 보습효과와 자극 완화 효과를 동시에 가지는 화장품을 개발 할 수 있다고 사료된다.
잎새버섯 균사체 배양액으로부터 분리된 세포외 다당체(exopolysaccharide, GF-glucan)의 피부보습과 SLS에 의한 피부손상에 대한 자극완화 효과를 연구하였다. 사람을 이용한 피부수분 보유 효과 및 피부 수분 손실량을 평가한 결과, 피부의 수분함량을 유지하는 효과가 우수하였으며 표피 수분손실량 또한 전어서 피부 보습제로서 매우 우수하였다. GF-glucan을 함유한 화장품의 자극완화 효과를 평가하기 위하여 사람 피부에 $0.5\%$ SLS 첩포로 유발된 자극성 피부염의 항염증 효과를 평가한 결과, SLS에 의해 유발되는 자극정도가 피검자의 피부상태에 따라 다양하게 나타났으며, GF-glucan이 함유된 제품의 도포 부위에서 대조 부위에 비해 홍반이 유의하게 감소하였다. 또한 자극유발 후 피부에 대한 수분유지와 피부 수분 손실량을 감소시킴으로서 우수한 항염증 효과를 보였다. 결론적으로 잎새버섯의 균사체를 배양하여 생산한 배양액으로부터 분리한 세포외 다당체인 GF-glucan을 화장품에 응용하면 우수한 보습효과와 자극 완화 효과를 동시에 가지는 화장품을 개발 할 수 있다고 사료된다.
We investigated the effects of skin hydration and anti-irritation of exopolysaceharide (GF-glucan) produced from submerged culture of Grifola frondosa. The moisturizing effects and trans-epidermal water loss (TEWL) of GF-glucan in cosmetic products (O/W emulsion) were clinically studied. GF-glucan s...
We investigated the effects of skin hydration and anti-irritation of exopolysaceharide (GF-glucan) produced from submerged culture of Grifola frondosa. The moisturizing effects and trans-epidermal water loss (TEWL) of GF-glucan in cosmetic products (O/W emulsion) were clinically studied. GF-glucan showed good skin hydration effects when compared with sodium hyaluronate which is a commonly using moisturizer. The skin protective effects of GF-glucan against sodium lauryl sulfate (SLS) were also found. Twice a day application of the CF-glucan to skin reduced local inflammation remarkably. Irritant reactions were assessed by various aspects of skin function, erythema (skin color reflectance), hydration (electrical capacitance) and TEWL. In the human skin test, 5-day treatment of the GF-glucan was found to reduce SLS-induced skin erythema and Improve bier regeneration. Taken all together, GF-glucan should be a very useful cosmetic ingredient, as a moisturizer, and a protecting agent for various skin irritations.
We investigated the effects of skin hydration and anti-irritation of exopolysaceharide (GF-glucan) produced from submerged culture of Grifola frondosa. The moisturizing effects and trans-epidermal water loss (TEWL) of GF-glucan in cosmetic products (O/W emulsion) were clinically studied. GF-glucan showed good skin hydration effects when compared with sodium hyaluronate which is a commonly using moisturizer. The skin protective effects of GF-glucan against sodium lauryl sulfate (SLS) were also found. Twice a day application of the CF-glucan to skin reduced local inflammation remarkably. Irritant reactions were assessed by various aspects of skin function, erythema (skin color reflectance), hydration (electrical capacitance) and TEWL. In the human skin test, 5-day treatment of the GF-glucan was found to reduce SLS-induced skin erythema and Improve bier regeneration. Taken all together, GF-glucan should be a very useful cosmetic ingredient, as a moisturizer, and a protecting agent for various skin irritations.
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문제 정의
본 연구는 생물공학적 기술을 이용하여 대량 생산된 잎새버섯 균사체 배양액으로부터 분리된 세포 외 다당체에 대한 피부 보습 효과와 자극 완화 효과를 연구하여 화장품에 응용하고자 하였다.
제안 방법
5% SLS 용액을 피부에 24 h 동안 첩포하여 자극을 유발한 후 GF-glucan 및 양성대 조군으로서 피 부자극 완화 효과가 알려져 있는 적설 초 추출물(G asiatica extract)을 함유한 O/W 에멀젼을 제조하고, 이를 SLS를 처리시켜 자극이 유발된 피검자의 상박부에 5일 동안 도포하고 아래와 같이 피부 홍반 및 장벽 회복 효과를 측정하였다. 0.5% SLS 인체첩포(human patch test)는 피검자의 양측상완 내측에 0.5% SLS 용액 (w/v in distilled water)을 filter paper disc 에 적셔 직경 11 mm large Finn chamber on scanpor tape (Epitest, Helsinki, Fin- land)에 24 h 부착하여 인위적으로 자극성 피부염을 유발하고 첩포를 제거하였다. 첩포제거 후 30 min, 24 h, 72 h(3일), 120 h(5일) 마다 실험 부위의 피부 반응 정도를 평가하였다[11, 12].
GF-glucan의 인체에 대한 피부 자극 완화 효과를 측정하기 위하여, 0.5% SLS 용액을 피부에 24 h 동안 첩포하여 자극을 유발한 후 GF-glucan 및 양성대 조군으로서 피 부자극 완화 효과가 알려져 있는 적설 초 추출물(G asiatica extract)을 함유한 O/W 에멀젼을 제조하고, 이를 SLS를 처리시켜 자극이 유발된 피검자의 상박부에 5일 동안 도포하고 아래와 같이 피부 홍반 및 장벽 회복 효과를 측정하였다. 0.
GF-glucan의 피부 수분 함량 유지 효과를 평가하기 위하여, 각각의 시료와 비교군인 히아론산을 직접 피부에도포하여 피부수분함량 변화를 측정하였으며, 또한 이들을 함유한 화장료의 피부 수분 함량 유지 효과를 평가하기 위하여 각각의 시료를 함유한 O/W 제형의 화장료를 제조하고 각각의 화장료를 피부에도포하여 피부 수분함 량 변화를 기온 20 ~ 22℃, 상대 습도 40 ~ 60%의 항온항습 조건에서 측정하였다. GF-glucan의 피부도 포 실험 결과, O/W 에멀젼에 첨가한 경우와 직접 피부에도포한 경우 모두에 있어서 전체적으로 우수한 피부 보습력을 나타내었다.
또한, 색차계를 이용하여 홍반 정도를 의미하는 a*값을 측정하였다. 대조부위 와 각 실험물질 도포 부위를 도포전, 도포1일 후, 도포 3일 후, 도포 5일 후에 각각 측정하였으며, 도포전과 비교하여 a*값 변화를 비교하였다. 자극 유발 후도포전 및 대조군과 비교하여 피부수분 함량과 경피 수분 손실량을 Comeometer와 Tewameter로 측정하여 피부장벽 기능 회복 정도를 평가하였다.
또한, GF-glucan의 피부 표면을 통한 수분의 증발량 감소 효과를 평가하기 위하여, 각각의 시료와 비교군인 히아론산을 직접 피부에도포하여 TEWL 변화를 측정하였다. 그 결과 GF-glucan의 경우, O/W 에멀젼에 첨가한 경우와 직접 피부에도포한 경우 모두에 있어서, 비교 군 인 히아론산에 비해 상대적으로 낮은 피부 수분 손실량을 가지는 것으로 나타나, GF-glucan이 매우 우수한 피부 수분 보호막을 형성하는 것을 확인하였다(Figure 2).
피부 자극 완화 효과는 Mexameter를 이용하여 홍반지 수(erythema index, EI)의 값을 2회씩 측정하였으며 측정한 시간대별 홍반지수의 평균값을 구하고, 도포전과 비교하여 홍반지수의 변화율을 계산하였다. 또한, 색차계를 이용하여 홍반 정도를 의미하는 a*값을 측정하였다. 대조부위 와 각 실험물질 도포 부위를 도포전, 도포1일 후, 도포 3일 후, 도포 5일 후에 각각 측정하였으며, 도포전과 비교하여 a*값 변화를 비교하였다.
피 부 수분함량 및 피부 수분 손실량은 Comeometer와 Tewameter TM 210을 이용하여 측정하였다. 시험 시작 30 min 전부터 항온항습 조건(20 ~ 22℃, 상대 습도 40 ~ 60%)의 실내에서 대기한 지원자의 상박부에 각각의 시료 2.0 mg/mL을 균일하게도포하고, 시료를 도포하지 않은 좌측 상박부를 대조군으로도 포직전 및 도포직전 및 도포직후에 피부 수분 함량 및 피부 수분 손실량을 측정하였다. 이후, 10 min, 30 min, 60 min, 120 min 경과 한 후 피부수분함량 및 피부 수분 손실량을 각각 측정하였다.
첩포제거 후 30 min, 24 h, 72 h(3일), 120 h(5일) 마다 실험 부위의 피부 반응 정도를 평가하였다[11, 12].시험물질 함유 에멀젼은 SLS 첩포를 제거하고 30 min 경과 후 피부상태를 측정한 뒤 시험물질을 각 부위에도포하였다. 시험물질은 공시료와 GF-읺ucan 그리고 0.
시험물질 함유 에멀젼은 SLS 첩포를 제거하고 30 min 경과 후 피부상태를 측정한 뒤 시험물질을 각 부위에도포하였다. 시험물질은 공시료와 GF-읺ucan 그리고 0.05% 적설 초 추출물을 함유한 O/W 에멀젼을 각 실험 부위에 5일간 1일 2회씩도포하였다. 실험 부위의 측정은 물질을 도포하기 전인 오전에 측정하였다.
0 mg/mL을 균일하게도포하고, 시료를 도포하지 않은 좌측 상박부를 대조군으로도 포직전 및 도포직전 및 도포직후에 피부 수분 함량 및 피부 수분 손실량을 측정하였다. 이후, 10 min, 30 min, 60 min, 120 min 경과 한 후 피부수분함량 및 피부 수분 손실량을 각각 측정하였다. 측정된 capacitance value는 0 ~ 120 사이의 arbitrary capacitance units (A.
대조부위 와 각 실험물질 도포 부위를 도포전, 도포1일 후, 도포 3일 후, 도포 5일 후에 각각 측정하였으며, 도포전과 비교하여 a*값 변화를 비교하였다. 자극 유발 후도포전 및 대조군과 비교하여 피부수분 함량과 경피 수분 손실량을 Comeometer와 Tewameter로 측정하여 피부장벽 기능 회복 정도를 평가하였다. 피부평가는 실내 온도 20 ~ 22℃, 상대 습도 40 ~ 60%의 항온항습 조건에서 측정하였다.
5% SLS 용액 (w/v in distilled water)을 filter paper disc 에 적셔 직경 11 mm large Finn chamber on scanpor tape (Epitest, Helsinki, Fin- land)에 24 h 부착하여 인위적으로 자극성 피부염을 유발하고 첩포를 제거하였다. 첩포제거 후 30 min, 24 h, 72 h(3일), 120 h(5일) 마다 실험 부위의 피부 반응 정도를 평가하였다[11, 12].시험물질 함유 에멀젼은 SLS 첩포를 제거하고 30 min 경과 후 피부상태를 측정한 뒤 시험물질을 각 부위에도포하였다.
95 MHz, very hydrated medium)에서 작동된다고 알려져 있다. 피 부 수분함량 및 피부 수분 손실량은 Comeometer와 Tewameter TM 210을 이용하여 측정하였다. 시험 시작 30 min 전부터 항온항습 조건(20 ~ 22℃, 상대 습도 40 ~ 60%)의 실내에서 대기한 지원자의 상박부에 각각의 시료 2.
실험 부위의 측정은 물질을 도포하기 전인 오전에 측정하였다. 피부 자극 완화 효과는 Mexameter를 이용하여 홍반지 수(erythema index, EI)의 값을 2회씩 측정하였으며 측정한 시간대별 홍반지수의 평균값을 구하고, 도포전과 비교하여 홍반지수의 변화율을 계산하였다. 또한, 색차계를 이용하여 홍반 정도를 의미하는 a*값을 측정하였다.
실험에 사용한 적설 초 추출물(Centella asiatica extract) 은 중국 북경대학의과대학으로부터 제공받았으며 히아 론산(sodium hyaluronate)은 시판 중인 바이오랜드(korea) 사시료를 사용하였고, sodium lauryl sulfate (SLS)는 Sigma (St Louis, MO, USA)사의 제품을 사용하였다. 피부의 수분 함량 측정에는 피부 수분량 측정기 (Comeometer CM 825, Courage-Khazaka Electronic, Cologne, Germany) 를, 피부 수분 손실량(trans-epidermal water loss, TEWL) 측정에는 피부 수분 손실량 측정기 (Tewameter TM 210, Courage-Khazaka Electronic, Cologne, Germany)# 사용하였으며, 피부 자극 완화 효과 평가에는 피부 홍반 측정기 (Mexameter MX16, Courage-Khazaka Electronic, Cologne, Germany)와 색차계 (Spectrophotometer CM2002, Minolta, Osaka, Japan)를 이용하여 측정하였다.
대상 데이터
본 실험에 사용한 잎새버섯다당체는 5 L 발효조를 통해 제조한 잎새버섯(G frondosa) 균주의 세포 외 다당체를 실험에 이용하였다. 발효 배양액은 메쉬와 원심분리기를 사용하여 균사체를 제거하고, 분리된 상등액은 4배량의 95% 에탄올을 가한 다음 4℃에서 24 h 침전시켰다.
실험에 사용한 적설 초 추출물(Centella asiatica extract) 은 중국 북경대학의과대학으로부터 제공받았으며 히아 론산(sodium hyaluronate)은 시판 중인 바이오랜드(korea) 사시료를 사용하였고, sodium lauryl sulfate (SLS)는 Sigma (St Louis, MO, USA)사의 제품을 사용하였다. 피부의 수분 함량 측정에는 피부 수분량 측정기 (Comeometer CM 825, Courage-Khazaka Electronic, Cologne, Germany) 를, 피부 수분 손실량(trans-epidermal water loss, TEWL) 측정에는 피부 수분 손실량 측정기 (Tewameter TM 210, Courage-Khazaka Electronic, Cologne, Germany)# 사용하였으며, 피부 자극 완화 효과 평가에는 피부 홍반 측정기 (Mexameter MX16, Courage-Khazaka Electronic, Cologne, Germany)와 색차계 (Spectrophotometer CM2002, Minolta, Osaka, Japan)를 이용하여 측정하였다.
연구 대상은 과거에 알레르기성 질환이나 아토피 피부염 등 질환의 병력이 없는 건강한 성인 남녀 10명을 대상으로 하였다. 검사 전 최소 일주일 동안 경구부 신피질 호르몬제나 항히스타민제, 항염제를 복용하지 않았으며, 검사 부위에 국소부 신피질 호르몬제를 바르지 않았다.
발효 배양액은 메쉬와 원심분리기를 사용하여 균사체를 제거하고, 분리된 상등액은 4배량의 95% 에탄올을 가한 다음 4℃에서 24 h 침전시켰다. 침전물을 원심분리하여 동결건조한 후 crude한 잎새버섯의 세포 외 다당체(GF-glucan)를 얻어 실험에 사용하였다.
데이터처리
모든 실험 결과는 평균 土 표준편차로 표기하였고, 통계적 유의성은 Student's t-test로 하였으며, p 값이 0.05 미만일 때 통계적으로 유의하다고 판단하였다.
이론/모형
피부의 수분 함량은 피부 표면의 수분 함량을 피부 정전 부하용량계즉법 (skin capacitance measurement)으로 즉정하는 장비인 피부 수분량 측정기(Comeometer CM 825)를 이용하여 측정하였다. Comeometer의 측정 원리는 측 정전극(surface 0.
성능/효과
0.5% SLS용액으로 피부 자극 유발 후 피검 부위를 색차계를 이용하여 자극에 의한 홍반의 정도를 나타내는 피부 색도(skin chromaticity) a* (green to red) 값을 측정한 결과, 자극에 의한 피부 홍반지수가 크게 상승하는 것을 확인할 수 있었다(Figure 4).자극을 유발시킨-후 시료를 첨가하지 않은 공시료에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해, GF-glucan을 첨가한 에멀젼을 도포한 부위는 Mexameter를 이용하여 측정한 홍반지수 측정 결과와 유사하게, 도포 3일 경과 후부터 유의적으로 자극에 의한 피부색도의 변화를 감소시켜주는 효과를 보였다.
0.5% SLS용액을 피부에 24 h 동안 첩포하여 자극이 유발된 피검 부위를 Mexameter를 이용하여 홍반량을 측정한 결과, 홍반지수가 크게 상승하는 것을 확인할 수 있 었다(Figure 3).이 피검 부위에 각각의 시료를 첨가한 O/W 에멀젼 제형의 화장료를 도포하며, 시간 경과에 따른 홍반지수 변화를 관찰한 결과, 자극 유발 후 시료를 첨가하지 않은 공시료 에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해, GF-읺ucan을 첨가한 에멀젼을 도포한 부위는 도포 3일 경과 후부터 유의적으로 홍반을 감소시켜주는 현상을 보였다.
GF-glucan의 피부도 포 실험 결과, O/W 에멀젼에 첨가한 경우와 직접 피부에도포한 경우 모두에 있어서 전체적으로 우수한 피부 보습력을 나타내었다. GF-Glucane 측정 후 120 min이 경과하여도 비교군인 히아론산에 비해 우수한 피부수분함량을 가지는 것으로 나타났다(Figure 1).
GF-glucan의 피부 수분 함량 유지 효과를 평가하기 위하여, 각각의 시료와 비교군인 히아론산을 직접 피부에도포하여 피부수분함량 변화를 측정하였으며, 또한 이들을 함유한 화장료의 피부 수분 함량 유지 효과를 평가하기 위하여 각각의 시료를 함유한 O/W 제형의 화장료를 제조하고 각각의 화장료를 피부에도포하여 피부 수분함 량 변화를 기온 20 ~ 22℃, 상대 습도 40 ~ 60%의 항온항습 조건에서 측정하였다. GF-glucan의 피부도 포 실험 결과, O/W 에멀젼에 첨가한 경우와 직접 피부에도포한 경우 모두에 있어서 전체적으로 우수한 피부 보습력을 나타내었다. GF-Glucane 측정 후 120 min이 경과하여도 비교군인 히아론산에 비해 우수한 피부수분함량을 가지는 것으로 나타났다(Figure 1).
결론적으로 GF-glucan의 피부 자극 완화 효과는 염증 유발 경로 중 사이토카 인류 및 효소를 직접적으로 저해하거나 발현을 억제하는 것이 아니라, 자극으로 유발된 피부의 지속적인 보습력을 유지하고 수분 손실을 최소화하여 피부조직의 회복력을 높임으로써 자극이나 손상된 피부를 보호할 수 있는 매우 우수한 보습제 및 자극 완화 소재로 생각된다.
또한, GF-glucan의 피부 표면을 통한 수분의 증발량 감소 효과를 평가하기 위하여, 각각의 시료와 비교군인 히아론산을 직접 피부에도포하여 TEWL 변화를 측정하였다. 그 결과 GF-glucan의 경우, O/W 에멀젼에 첨가한 경우와 직접 피부에도포한 경우 모두에 있어서, 비교 군 인 히아론산에 비해 상대적으로 낮은 피부 수분 손실량을 가지는 것으로 나타나, GF-glucan이 매우 우수한 피부 수분 보호막을 형성하는 것을 확인하였다(Figure 2).
하지만, 적설 초 추출물(C asiatica extract)을 첨가한 에멀젼을 도포한 피검 부위는 placebo와 큰 차이를 나타내지 않았다. 따라서 SLS에 의해 표피장벽의 손상으로 염증이유도되는 자극성 피부염에 GF-glucan을 함유한 화장료를 사용할 경우, 외부 자극에 의한 홍반 생성을 효과적으로 억제시킬 수 있는 것으로 확인되었다. 하지만, GF-glucane hyaluronidase 저해활성평가에서는 약한 저해활성을 가지는 것으로 나 타났다(data was not shown).
자극을 유발시킨-후 시료를 첨가하지 않은 공시료에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해, GF-glucan을 첨가한 에멀젼을 도포한 부위는 Mexameter를 이용하여 측정한 홍반지수 측정 결과와 유사하게, 도포 3일 경과 후부터 유의적으로 자극에 의한 피부색도의 변화를 감소시켜주는 효과를 보였다. 또한 Mexameter를 이용하여 측정한 홍반지수 측정 결과와 유사하게 적설초 추출물을 첨가한 에멀젼을 도포한 피검 부위는 3일 경과까지는 placebo와 큰 차이를 나타내지 않았으며, 5일 경과 후에는 미세한 차이를 나타내어, 자극에 의한 피부염증 억제 효과는 다소 약한 것으로 확인되었다. 즉, 실제 피부에서 GF-glucane 피부 표면의 보습능력의 개선뿐만 아니라 피부염증에 의한 홍반 형성을 완화할 수 있음을 나타내주고 있다.
이 피검 부위에 각각의 시료를 첨가한 O/W 에멀젼 제형의 화장료를 도포하고, 도포 직후와 시간 경과에 따른 피부 수분 손실량 변화를 조사한 결과, 자극 유발 후 시료를 첨가하지 않은 공시료에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해, GF-읺ucan을 함유한 에멀젼을 도포한 부위는 도포 3일 경과 후부터 유의적으로 자극에 의한 피부 수분 손실량이 감소하였다(Figure 6). 또한 적설초 추출물을 첨가한 에멀젼을 도포한 부위의 피 부 수분손실량도 도포 3일 경과 후부터 유의적으로 피부 수분 손실량이 감소하였다. 이러한 결과는 자극을 유발하지 않은 피부에 대한 피부 손실량 변화 측정 결과와 유사한 것으로 GF-glucan이 자극으로 인해 손상된 피부에 우수한 수분 보호피막을 형성하여 피부장벽 기능을 효과적으로 회복할 수 있기 때문인 것으로 판단된다.
피검 부위에 각각의 시료를 첨가한 OAV 에멀젼 제형의 화장료를 도포하고, 도포 직후와 시간 경과에 따른 피부 수분 함량 변화를 조사한 결과는 자극 유발 후 시료를 첨가하지 않은 공시료에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해 GF-glucan이 함유된 에멀젼을 도포한 부위는 도포 5일 경과 후유의적으로 자극에 의한 피부 수분 함량 저하를 개선시켜주는 효과를 보였다(Figure 5). 또한 홍반지수 측정 결과 및 피부 색 변화 측정 결과와 유사하게 적설초 추 출물을 첨가한 에멀젼을 도포한 피검 부위는 5일 경과 후까지 placebo와 미세한 차이를 나타내어, 자극에 의한 피 부 수분함량 저하를 개선하는 효과는 다소 약한 것으로 확인되었다. 즉, GF-glucan을 첨가한 에멀젼을 도포 시 피부 손상으로 건조해진 피부에 수분을 지속적으로 공급하여 피부 수분의 항상성을 유지시켜주는 역할을 하는 것으로 생각된다.
즉, 실제 피부에서 GF-glucane 피부 표면의 보습능력의 개선뿐만 아니라 피부염증에 의한 홍반 형성을 완화할 수 있음을 나타내주고 있다. 또한, 염증에 의한 홍반량 평가에서 동일한 원리의 Mexameter를 이용한 평가보다 색차계를 이용한 평가 결과에서 더 큰 유의차를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
잎새버섯이 생산하는 세포 외 다당체(GF-glucan)는 보습력이 우수하였으며, GF-glucan 을 함유한 O/W 화장품 제형에서 피부 수분량과 경피수 분 손실량을 실험한 결과 우수한 보습효과를 나타내었다. 사람 피부에 0.5% SLS로 자극을 유발한 후 GF-glucan 을 함유한 제품에서 피부 홍반 완화 효과와 피부 장벽 회복효과가 우수하게 나타났다. 따라서 잎새버섯이 생산하는 세포 외 다당체인 GF-glucane 피부에 우수한 보습효과를 유지하면서도 외부자극 물질에 의해서 발생할 수 있는 피부 손상에 대하여 자극완화 소재로 효과적으로 적용될 수 있을 것으로 사료된다.
피부 자극 유발 후 피검부위의 피부 수분손실량을 Tewameter를 이용하여 측정한 결과, 자극이 유발된 피검 부위는 피부 수분 손실량이 급격히 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이 피검 부위에 각각의 시료를 첨가한 O/W 에멀젼 제형의 화장료를 도포하고, 도포 직후와 시간 경과에 따른 피부 수분 손실량 변화를 조사한 결과, 자극 유발 후 시료를 첨가하지 않은 공시료에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해, GF-읺ucan을 함유한 에멀젼을 도포한 부위는 도포 3일 경과 후부터 유의적으로 자극에 의한 피부 수분 손실량이 감소하였다(Figure 6). 또한 적설초 추출물을 첨가한 에멀젼을 도포한 부위의 피 부 수분손실량도 도포 3일 경과 후부터 유의적으로 피부 수분 손실량이 감소하였다.
5% SLS용액을 피부에 24 h 동안 첩포하여 자극이 유발된 피검 부위를 Mexameter를 이용하여 홍반량을 측정한 결과, 홍반지수가 크게 상승하는 것을 확인할 수 있 었다(Figure 3).이 피검 부위에 각각의 시료를 첨가한 O/W 에멀젼 제형의 화장료를 도포하며, 시간 경과에 따른 홍반지수 변화를 관찰한 결과, 자극 유발 후 시료를 첨가하지 않은 공시료 에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해, GF-읺ucan을 첨가한 에멀젼을 도포한 부위는 도포 3일 경과 후부터 유의적으로 홍반을 감소시켜주는 현상을 보였다. 하지만, 적설 초 추출물(C asiatica extract)을 첨가한 에멀젼을 도포한 피검 부위는 placebo와 큰 차이를 나타내지 않았다.
하지만, GF-glucane hyaluronidase 저해활성평가에서는 약한 저해활성을 가지는 것으로 나 타났다(data was not shown). 이와 같은 결과로 보아 GF~ glucane 알레르기 반응 모델인 passive cutaneous anaphylaxis (PCA) 반응 경로가 아닌, 다른 경로를 통해 자극완화 효과를 가지는 것으로 생각된다.
화장품은 피부에 일상적으로 사용되는 것으로 다양한 주위 환경 인자와 스트레스로 인해 피부의 이상 반응을 초래할 수 있으므로 우수한 보습력과 자극 완화 제품에 대한 필요성이 증가하고 있다. 잎새버섯이 생산하는 세포 외 다당체(GF-glucan)는 보습력이 우수하였으며, GF-glucan 을 함유한 O/W 화장품 제형에서 피부 수분량과 경피수 분 손실량을 실험한 결과 우수한 보습효과를 나타내었다. 사람 피부에 0.
5% SLS용액으로 피부 자극 유발 후 피검 부위를 색차계를 이용하여 자극에 의한 홍반의 정도를 나타내는 피부 색도(skin chromaticity) a* (green to red) 값을 측정한 결과, 자극에 의한 피부 홍반지수가 크게 상승하는 것을 확인할 수 있었다(Figure 4).자극을 유발시킨-후 시료를 첨가하지 않은 공시료에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해, GF-glucan을 첨가한 에멀젼을 도포한 부위는 Mexameter를 이용하여 측정한 홍반지수 측정 결과와 유사하게, 도포 3일 경과 후부터 유의적으로 자극에 의한 피부색도의 변화를 감소시켜주는 효과를 보였다. 또한 Mexameter를 이용하여 측정한 홍반지수 측정 결과와 유사하게 적설초 추출물을 첨가한 에멀젼을 도포한 피검 부위는 3일 경과까지는 placebo와 큰 차이를 나타내지 않았으며, 5일 경과 후에는 미세한 차이를 나타내어, 자극에 의한 피부염증 억제 효과는 다소 약한 것으로 확인되었다.
피부 자극 유발 후 피검 부위의 피부 수분 함량을 Comeo- meter를 이용하여 측정한 결과, 피부 수분 함량이 급격히 낮아지는 것을 확인할 수 있었다. 피검 부위에 각각의 시료를 첨가한 OAV 에멀젼 제형의 화장료를 도포하고, 도포 직후와 시간 경과에 따른 피부 수분 함량 변화를 조사한 결과는 자극 유발 후 시료를 첨가하지 않은 공시료에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해 GF-glucan이 함유된 에멀젼을 도포한 부위는 도포 5일 경과 후유의적으로 자극에 의한 피부 수분 함량 저하를 개선시켜주는 효과를 보였다(Figure 5). 또한 홍반지수 측정 결과 및 피부 색 변화 측정 결과와 유사하게 적설초 추 출물을 첨가한 에멀젼을 도포한 피검 부위는 5일 경과 후까지 placebo와 미세한 차이를 나타내어, 자극에 의한 피 부 수분함량 저하를 개선하는 효과는 다소 약한 것으로 확인되었다.
피부 자극 유발 후 피검 부위의 피부 수분 함량을 Comeo- meter를 이용하여 측정한 결과, 피부 수분 함량이 급격히 낮아지는 것을 확인할 수 있었다. 피검 부위에 각각의 시료를 첨가한 OAV 에멀젼 제형의 화장료를 도포하고, 도포 직후와 시간 경과에 따른 피부 수분 함량 변화를 조사한 결과는 자극 유발 후 시료를 첨가하지 않은 공시료에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해 GF-glucan이 함유된 에멀젼을 도포한 부위는 도포 5일 경과 후유의적으로 자극에 의한 피부 수분 함량 저하를 개선시켜주는 효과를 보였다(Figure 5).
피부 자극 유발 후 피검부위의 피부 수분손실량을 Tewameter를 이용하여 측정한 결과, 자극이 유발된 피검 부위는 피부 수분 손실량이 급격히 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이 피검 부위에 각각의 시료를 첨가한 O/W 에멀젼 제형의 화장료를 도포하고, 도포 직후와 시간 경과에 따른 피부 수분 손실량 변화를 조사한 결과, 자극 유발 후 시료를 첨가하지 않은 공시료에멀젼(placebo)을 도포한 부위와 무도포 부위에 비해, GF-읺ucan을 함유한 에멀젼을 도포한 부위는 도포 3일 경과 후부터 유의적으로 자극에 의한 피부 수분 손실량이 감소하였다(Figure 6).
후속연구
5% SLS로 자극을 유발한 후 GF-glucan 을 함유한 제품에서 피부 홍반 완화 효과와 피부 장벽 회복효과가 우수하게 나타났다. 따라서 잎새버섯이 생산하는 세포 외 다당체인 GF-glucane 피부에 우수한 보습효과를 유지하면서도 외부자극 물질에 의해서 발생할 수 있는 피부 손상에 대하여 자극완화 소재로 효과적으로 적용될 수 있을 것으로 사료된다.
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