다시마(Laminaria japonica)는 우리나라 해역에서 생산되는 대표적인 갈조류로 칼슘, 칼륨, 요오드, 아연 등 신체의 생리대사에 관여하는 주요 무기질이 풍부하게 함유되어 있으며, uronic acid로 구성된 alginic acid, 황산기를 함유하는 fucoidan 및 laminaran과 같은 식이섬유도 함유되어 있다. 다시마로부터 추출된 푸코이단의 항 간독성 효과를 확인하고자 흰쥐의 복강 내에 다시마 푸코이단 추출물을 14일간 투여하고 15일째 되는 날에 $CCl_4$를 투여한 후에 혈액 및 간 조직에서의 효소 활성의 변동을 통해 간독성에 대한 효과를 관찰하였다. GOT의 경우 정상군에 비해 대조군에서 $CCl_4$의 간 장애 유발로 인해 효소 level이 약 3.8배 증가하였고 시료군인 LFC군과 대조군을 비교하였을 때 40% 감소하여 다시마 푸코이단 추출물의 효과를 확인할 수 있었다 역시 GPT level에 있어서도 $CCl_4$를 투여한 대조군이 정상군에 대해 약 11.5배정도 증가하여 간 장애 유발이 확인되었고 LFC군이 대조군에 비해 64%로 감소하는 것으로 나타나 다시마 푸코이단 추출물의 효소 level 감소 효과를 확인할 수 있었다. 간 조직에서의 SOD 활성정도는 대조군에서 정상군에 비해서 약 1.79배 정도로 낮게 나타났고 LFC군은 대조군에 비해 114%의 상승효과를 보였다. 또한 CAT의 활성도는 대조군에서 정상군에 비해 약 1.59배 감소를 보였으며 LFC군은 대조군보다 36.1% 높게 나타났다. GPx활성도의 경우 대조군은 정상군에 비해 약 2.5배의 감소율을 보였으며 LFC군은 대조군에 비해서 55.9%의 증가율을 보였다. 이러한 결과는 다시마 푸코이단 추출물이 간독성에서 효소 조절 효능을 가지므로 기능성 식품소재로 활용될 수 있음을 보여 주었다.
다시마(Laminaria japonica)는 우리나라 해역에서 생산되는 대표적인 갈조류로 칼슘, 칼륨, 요오드, 아연 등 신체의 생리대사에 관여하는 주요 무기질이 풍부하게 함유되어 있으며, uronic acid로 구성된 alginic acid, 황산기를 함유하는 fucoidan 및 laminaran과 같은 식이섬유도 함유되어 있다. 다시마로부터 추출된 푸코이단의 항 간독성 효과를 확인하고자 흰쥐의 복강 내에 다시마 푸코이단 추출물을 14일간 투여하고 15일째 되는 날에 $CCl_4$를 투여한 후에 혈액 및 간 조직에서의 효소 활성의 변동을 통해 간독성에 대한 효과를 관찰하였다. GOT의 경우 정상군에 비해 대조군에서 $CCl_4$의 간 장애 유발로 인해 효소 level이 약 3.8배 증가하였고 시료군인 LFC군과 대조군을 비교하였을 때 40% 감소하여 다시마 푸코이단 추출물의 효과를 확인할 수 있었다 역시 GPT level에 있어서도 $CCl_4$를 투여한 대조군이 정상군에 대해 약 11.5배정도 증가하여 간 장애 유발이 확인되었고 LFC군이 대조군에 비해 64%로 감소하는 것으로 나타나 다시마 푸코이단 추출물의 효소 level 감소 효과를 확인할 수 있었다. 간 조직에서의 SOD 활성정도는 대조군에서 정상군에 비해서 약 1.79배 정도로 낮게 나타났고 LFC군은 대조군에 비해 114%의 상승효과를 보였다. 또한 CAT의 활성도는 대조군에서 정상군에 비해 약 1.59배 감소를 보였으며 LFC군은 대조군보다 36.1% 높게 나타났다. GPx활성도의 경우 대조군은 정상군에 비해 약 2.5배의 감소율을 보였으며 LFC군은 대조군에 비해서 55.9%의 증가율을 보였다. 이러한 결과는 다시마 푸코이단 추출물이 간독성에서 효소 조절 효능을 가지므로 기능성 식품소재로 활용될 수 있음을 보여 주었다.
The purpose of this study was to investigated the effects of Laminaria japonica fucoidan extract (LJFE) through the enzymatic regulation against the hepatotoxicity-inducing carbon tetrachloride $(CCl_4)$ in LJFE and $CCl_4-treated$ rats. LJFE of 100mg/kg concentration was intra...
The purpose of this study was to investigated the effects of Laminaria japonica fucoidan extract (LJFE) through the enzymatic regulation against the hepatotoxicity-inducing carbon tetrachloride $(CCl_4)$ in LJFE and $CCl_4-treated$ rats. LJFE of 100mg/kg concentration was intraperitoneally administered into rats at dose of 1.5m11kg for 14 days. On the day 15, 3.3ml/kg of $CCl_4$ dissolved in olive oil (1:1) was injected 12 hours before anesthetization. We examined the levels of glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT) in serum of rats, superoxide dismutase(SOD) in mitochondrial fraction, and catalase(CAT), glutathione peroxidase(GPx) in liver homogenate. $CCl_4-treatment$ markedly increased the levels of GOT and GPT, and significantly decreased those of SOD, CAT and GPx. But LIFE pretreatment decreased the levels of GOT and GPT, by 40% and 64%, respectively and increased those of SOD, CAT and GPx, by 114%, 36.1% and 55.9%, respectively These results showed the LIFE had the enzymatic regulatory effects against the hepatotoxicity-inducing $CCl_4$ in the preventive way.
The purpose of this study was to investigated the effects of Laminaria japonica fucoidan extract (LJFE) through the enzymatic regulation against the hepatotoxicity-inducing carbon tetrachloride $(CCl_4)$ in LJFE and $CCl_4-treated$ rats. LJFE of 100mg/kg concentration was intraperitoneally administered into rats at dose of 1.5m11kg for 14 days. On the day 15, 3.3ml/kg of $CCl_4$ dissolved in olive oil (1:1) was injected 12 hours before anesthetization. We examined the levels of glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT) in serum of rats, superoxide dismutase(SOD) in mitochondrial fraction, and catalase(CAT), glutathione peroxidase(GPx) in liver homogenate. $CCl_4-treatment$ markedly increased the levels of GOT and GPT, and significantly decreased those of SOD, CAT and GPx. But LIFE pretreatment decreased the levels of GOT and GPT, by 40% and 64%, respectively and increased those of SOD, CAT and GPx, by 114%, 36.1% and 55.9%, respectively These results showed the LIFE had the enzymatic regulatory effects against the hepatotoxicity-inducing $CCl_4$ in the preventive way.
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문제 정의
본 연구는 국내 해역에서 생산되는 대표적인 갈조류인 다시마에서 추출한푸코이 단 추출물이 간독성에 대하여 활성을 가지는지를 간 독성 지표와.항산화효소 활성지표를 통해 밝히고자 하였다.
간 독성 지표와.항산화효소 활성지표를 통해 밝히고자 하였다.
제안 방법
Aebi의 방법 μ]을 이용하여 phosphate buffer (0.05 M pH 7.0) 1.9 ml에 sample (homogenate와 mitochondrial fraction 을 800 xg에서 20 min 원심분리한 상등액 100 μ1를 buffer로 10, 20, 40, 80배 희석) 0.1 ml와 과산화수소 용액 1 ml를 혼합하여 240 nM에서 90 sec 동안 흡광도 감소를 측정 하였다.
3 /kg의 용량을 복강 내로 투여하여 간 독성을 유발시켰다. CCL를 투여하고 절식 시킨 뒤 12시간 후에 ether로 마취하고 희생시켜서 혈액을 채취하고 간을 적출하여 실험하였다.
다시마로부터 추출된 푸코이단의 항 간독성 효과를 확인하고자 횐쥐의복강 내에 다시마 푸코이단 추출물을 14일간 투여하고 15일째 되는 날에 CCL를 투여한 후에 혈액 및 간 조직에서의 효소 활성의 변동을 통해 간독성에 대한 효과를 관찰하였다.
시료 투여 기간 종료 후 실험동물을 ether 마취 하에서 심장에서 채 혈하여 실온에서 30분 간 방치 한 후 3000 rpm, 4℃에서 10분간 centrifuge하여 혈청을 분리하여 실험에 사용할 용량을 각각 분주하여 -70℃ deep freezer에 보관하여 실험에 사용하였고, 간은 4엽을 전부 적출하여 0.9% 생리 식염수로 세척 여지로 흡착한 후 -70℃ deep freezer에 보관하여 실험에 사용하였다.
실험동물은 cage에 각각 분리시키고 고형사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 하였다. 실험 동안 동물들은 22±1℃의 온도와 60+5% 상대습도로 유지시켰고총 21마리의 흰쥐를 7마리씩 3군으로 나누었다(Table 1.). 정상군(NOR group)과 대조군(CON; CCh-treated group)은 0.
7일 동안 적응시켰다. 실험동물은 cage에 각각 분리시키고 고형사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 하였다. 실험 동안 동물들은 22±1℃의 온도와 60+5% 상대습도로 유지시켰고총 21마리의 흰쥐를 7마리씩 3군으로 나누었다(Table 1.
). 정상군(NOR group)과 대조군(CON; CCh-treated group)은 0.9% saline을, 시료군(LFC; Laminaria jcipottica fucoidan ex tract and CCU-treated group)은 다시마 푸코이단 추출물 (100 mg/kg)을 1.5 ml/kg씩 복강 내에 14일간 매 일 투여하고 15일 째 되는 날에 대조군과 시료군에서 실험동물의 간 손상을 유도하기 위해 CCk를 olive oil에 1:1 비율로 용해시켜 3.3 /kg의 용량을 복강 내로 투여하여 간 독성을 유발시켰다. CCL를 투여하고 절식 시킨 뒤 12시간 후에 ether로 마취하고 희생시켜서 혈액을 채취하고 간을 적출하여 실험하였다.
실험동물은 체중 170〜 180 g 내외의 암컷 흰쥐(Sprague- Dawley 계 생후 7주)를 대구 효창 사이 언스로부터 제공받았고 7일 동안 적응시켰다. 실험동물은 cage에 각각 분리시키고 고형사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 하였다.
2 mM cytochrome C 150 μ1를 넣은 혼합액에 sample 8 μ1를 넣고, xanthine oxidase 원액 10 μ1를 넣은 후 Elisa를 이용하여 550 nM에서의 흡광도 변화를 2 min 동안 측정하였다. 효소의 활성도는 표준액으로 Sigma사의 superoxide dismutase stand- ard를 사용하여 측정하였다.
데이터처리
본 실험에 대한 모든 실험 결과는 평균치와 표준편차로 나타내었고, 통계적 유의성은 SPSS를 이용한 ANOVA로 검정하였다.
이론/모형
Beauchamp와 Fridovich의 방법 [4]에 따라 0.2 M K-phos- phate buffer (pH 7.4) 를 672 pl, 1 mM xanthine 100 pl, 1% sodium deoxychlorate 30 pl, 1.5 mM KCN 30 pl, 0.2 mM cytochrome C 150 μ1를 넣은 혼합액에 sample 8 μ1를 넣고, xanthine oxidase 원액 10 μ1를 넣은 후 Elisa를 이용하여 550 nM에서의 흡광도 변화를 2 min 동안 측정하였다. 효소의 활성도는 표준액으로 Sigma사의 superoxide dismutase stand- ard를 사용하여 측정하였다.
단백질의 정량은 Lowry 등의 방법[19]에 의해서 750 nM 에서 흡광도를 측정 하고 표준 단백 시 료를 bovine serum al bumin (BSA)으로 정량하였다.
성능/효과
GOT의 경우 정상군에 비해 대조군에서 CCh의 간 장애유발로 인해 효소 level이 약 3.8배 증가하였고 시료군인 LFC군과 대조군을 비교 하였을 때 40% 감소하여 다시마 푸코이단 추출물의 효과를 확인할 수 있었다. 역시 GPT level 에 있어서도 CCL를 투여한 대조군이 정상군에 대해 약 11.
1% 높게 나타났다. GPx 활성도의 경우 대조군은 정상군에 비해 약 25배의 감소율을 보였으며 LFC군은 대조군에 비해서 55.9%의 증가율을 보였다.
Table 2와 같이 GOT의 경우 정상군에 비해 대조군에서 CC14의 간 장애 유발로 인해 효소 levelO] 약 3.8배 증가하였고 시료군인 LFC군과 대조군을 비교 하였을 때 40% 감소하여 다시마 푸코이단 추출물의 효과를 확인할 수 있었다. 역시 GPT level에 있어서도 CCZ를 투여한 대조군이 정상군에 대해 약 11.
Table 3과 같이 간 조직에서의 SOD 활성정도는 대조군에서 정상군에 비해서 약 L79배 정도로 낮게 나타났고 LFC군은 대조군에 비해 114%의 상승효과를 보였다. 또한 CAT의 활성도는 대조군에서 정상군에 비해 약 1.
대조군에 비해 114%의 상승효과를 보였다. 또한 CAT의 활성도는 대조군에서 정상군에 비해 약 1.59배 감소를 보였으며 LFC군은 대조군보다 36.1% 높게 나타났다. GPx 활성도의 경우 대조군은 정상군에 비해 약 2.
8배 증가하였고 시료군인 LFC군과 대조군을 비교 하였을 때 40% 감소하여 다시마 푸코이단 추출물의 효과를 확인할 수 있었다. 역시 GPT level 에 있어서도 CCL를 투여한 대조군이 정상군에 대해 약 11.5 배정도 증가하여 간 장애 유발이 확인되었고 LFC군이 대조군에 비해 64%로 감소하는 것으로 나타나 다시마 푸코이단추출물의 효소 lev이 감소 효과를 확인할 수 있었다. 간 조직에서의 SOD 활성정도는 대조군에서 정상군에 비해서 약 L79배 정도로 낮게 나타났고 LFC군은 대조군에 비해 114% 의 상승효과를 보였다.
8배 증가하였고 시료군인 LFC군과 대조군을 비교 하였을 때 40% 감소하여 다시마 푸코이단 추출물의 효과를 확인할 수 있었다. 역시 GPT level에 있어서도 CCZ를 투여한 대조군이 정상군에 대해 약 11.5배정도 증가하여 간 장애 유발이 확인되었고 LFC 군이 대조군에 비해 64%로 감소하는 것으로 나타나 다시마푸코이단 추출물의 효소 level 감소 효과를 확인할 수 있었다.
후속연구
이러한 결과는 다시마 푸코이단 추출물이 간독성에서 효소 조절 효능을 가지므로 기능성 식품소재로 활용될 수 있음을 보여 주었다.
참고문헌 (31)
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