[논문]강활 에틸아세테이트 분획에 의한 PG 분해, iNOS, <tex>$PGE_2$</tex>, 활성 억제 및 진통효과

김시나; 이현지; 이은정; 남경숙; 김희석; 황성완; 황성연

[국내논문] 강활 에틸아세테이트 분획에 의한 PG 분해, iNOS, $PGE_2$, 활성 억제 및 진통효과
Analgesic Activity and Inhibitory Effect of PG Degradation, iNOS and $PGE_2$ by Ethyl Acetate Fraction of Angelica Koreana Radix 원문보기

약학회지 = Yakhak hoeji, v.50 no.2, 2006년, pp.99 - 104

김시나 ((주) KMSI 부설 한국의과학연구소) , 이현지 ((주) KMSI 부설 한국의과학연구소) , 이은정 ((주) KMSI 부설 한국의과학연구소) , 남경숙 ((주) KMSI 부설 한국의과학연구소) , 김희석 ((주) KMSI 부설 한국의과학연구소) , 황성완 ((주) KMSI 부설 한국의과학연구소) , 황성연 ((주) KMSI 부설 한국의과학연구소)

Abstract ▼ AI-Helper

Prostaglandins biosynthesis and nitric oxide production have been implicated in the process of inflammation. In this study we investigated on the effects of ethyl acetate extract of Angelica Koreana Radix (EAKR) on the activities of prostaglandin $E_2\;(PGE_2)$, proteoglycan (PG) degradation and nitric oxide synthase (NO) in inflammation cytokines-activated rabbit articular chondrocytes. EAKR exhibited inhibitory activities on NO production and $PGE_2$ production as $73.08\%\;and\;89.49\%$, respectively at $20{\mu}g/ml$ and inhibited the degradation of PG in a concentration-dependent manner Zelatin zymography analysis demonstrated that EAKR significantly inhibited MMP-2, 9 expression in chondrocytes. In vivo, EAKR was shown to have inhibitory effects on acetic acid-induced pain. This study suggests that modulation of $PGE_2$, NO, PG degradation and MMP-2, 9 by EARK may be important in the prevention of inflammation and osteroarthritis.

Keyword

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

그밖에도 구미강활탕의 주요 구성 한약재인 강활에 대한 해열, 진통, 진경작용 등이 보고되어 있기는 하나, 거의 대부분의 논문은 동물에서의 효능검색에 머물러 있고 작용기전에 대한 연구가미흡하여 본 논문에서는 진통효능과 함께 항염증 및 관절 조직 분해효소에 미치는 영향을 in vitro와 in vivo에서 확인함으로서 골관절염 치료 후보제로서의 가능성을 확인하고자 하였다.26-28) Primary culture를 통해서 토끼 무릎으로부터 관절조직을 분리해내고 관절조직세포를 이용하여 실험을 진행하였다.

제안 방법

지난 수십 년 동안 퇴행성 관절염의 제어를 위해 많은 연구와 노력이 있어왔지만 아직 그 병리적인 원인이나 치료방법이 개발되지 않고 있다.10,11) 따라서, 본 연구에서는 강활의 70% 에탄올 추출물로부터 활성분획인 ethyl acetate 증을 분획하였고, 그 분획을 사용하여 in vivo에서 Griess reaction을 통한 NO 측정, 염증 및 통증 유발인자인 PGE2 활성 측정, DMB assay를 통한 PG 분해 활성 억제 정도를 측정하였다. 또한 in vivo에서는 통증 유발 마우스를 이용하여 진통효과를 시험하였다.
10,11) 따라서, 본 연구에서는 강활의 70% 에탄올 추출물로부터 활성분획인 ethyl acetate 증을 분획하였고, 그 분획을 사용하여 in vivo에서 Griess reaction을 통한 NO 측정, 염증 및 통증 유발인자인 PGE2 활성 측정, DMB assay를 통한 PG 분해 활성 억제 정도를 측정하였다. 또한 in vivo에서는 통증 유발 마우스를 이용하여 진통효과를 시험하였다. 그 결과, 긍정적인 결과를 얻었기에.
구입하였다. 강활 120 g 환저플라스크 (round bottom flask)에 5배 (w/v)의 70% 에탄올을 가하여 60℃에서 2시간 2회 추출, 감압농축 하여 얻은 70% 에탄올 추출물을 hexane, ethyl acetate(EtOAc), butanol(BuOH) 및 증류수(&0) 순으로 분획하여 각 분획물을 동결건조한 결과 다음과 같은 분말을 얻었다. 각각의 분획물을 염증성 cytokines 억제 효과 검색의 시료로 사용하여 가장 활성이 뛰어난 EtOAc 분획물을 사용하였다(Data not shown).
, USA)이 포함된 DMEM 배지에서 배양하였다. 여기에 penicillin-streptomycin(Sigma Chemical Co., USA)을 첨가하였으며, lx 10⁶개의 세포를 60 mm dish에 접종하고, 5~6일 동안 온도 37℃, 습도 95%, 5% CO₂ 습윤 조건 하에서 배양하였다. 관절 세포(passage 0)가 70-80% 정도 자랐을 때 배지는 serum free DMEM으로 바꾸고, 무처치군을 제외한 모든 dish에 cytokine mixture(CM; IL-ip 1 gg/m/, TNF-a 10 ng/ ml, IFN-a 1 ng/ml, LPS 1 ㎍/㎖ 투여한 후 20분간 배양하였다.
, USA)을 첨가하였으며, lx 10⁶개의 세포를 60 mm dish에 접종하고, 5~6일 동안 온도 37℃, 습도 95%, 5% CO₂ 습윤 조건 하에서 배양하였다. 관절 세포(passage 0)가 70-80% 정도 자랐을 때 배지는 serum free DMEM으로 바꾸고, 무처치군을 제외한 모든 dish에 cytokine mixture(CM; IL-ip 1 gg/m/, TNF-a 10 ng/ ml, IFN-a 1 ng/ml, LPS 1 ㎍/㎖ 투여한 후 20분간 배양하였다. 무처치군과 음성대조군(CM)에는 용매인 DMSO(0.
관절 세포(passage 0)가 70-80% 정도 자랐을 때 배지는 serum free DMEM으로 바꾸고, 무처치군을 제외한 모든 dish에 cytokine mixture(CM; IL-ip 1 gg/m/, TNF-a 10 ng/ ml, IFN-a 1 ng/ml, LPS 1 ㎍/㎖ 투여한 후 20분간 배양하였다. 무처치군과 음성대조군(CM)에는 용매인 DMSO(0.05%)만 처리하고 실험군에는 EtOAc 분획물 (0.8, 4.0 및 20.0 ㎍/㎖) 처리 후, 16시간 동안 배양하였다.
0x 10⁶ cells/ mlS. 조절한 후, 60 mm dish에 접종하고, EtOAc 분획물(0.8, 4.0 및 20.0 ㎍/㎖)과 cytokine mixture를 처리하고 16시간 동안 배양하였다. 생성된 NO(Nitric oxide)의 양은 Griess 시약을 이용하여 Liang⁽²⁾ 방법에 따라 시행하였다.
생성된 NO(Nitric oxide)의 양은 Griess 시약을 이용하여 Liang⁽²⁾ 방법에 따라 시행하였다. 세포배양액 중에 존재하는 (NO9의 형태로 측정하였으며, 세포배양액 상등액 100B와 Griess시약 [0.1% N-(l-naphtyl)ethylenediamine - 2HC₁, 1% sulfanilamide in 5% cone. H₃PO₄ in H₂₀] 100 B를 혼합하여 96-multiwell plates에서 10분 동안 반응시킨 후, 540 nm에서 흡광도를 측정하였으며 , sodium nitrite(NaNC)a를 standard와 비교하여 NO 생성량을 확인하였다.
)를 시용하여 enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) 방법으로 정량하였다. Goat anti-mouse Ig가 부착되어 있는 96-well plate에 PGE2 표준액 또는 시료를 가한 후, PGE2-peroxidase conjugate와 mouse anti-PGE2< 각각 50 ㎕씩 가하고 실온에서 1시간 반응시킨 후, 0.05% Tween 20을 함유한 phosphate buffered salinefPBS)로 항체와 결합하지 않은 PGE2 혹은 PGEeperoxidase conjugate를 제거하였다. 항원-항체 복합체에 TMB(3, 3', 5, 5'-tetramethylbenzidine) 용액 150 ㎖를 가하고 실온에서 30분간 발색시키고, IM H₂SO₄ 100㎖를 가하여 반응을 중단시킨 후 450nm에서 흡광도를 측정하였다.
05% Tween 20을 함유한 phosphate buffered salinefPBS)로 항체와 결합하지 않은 PGE2 혹은 PGEeperoxidase conjugate를 제거하였다. 항원-항체 복합체에 TMB(3, 3', 5, 5'-tetramethylbenzidine) 용액 150 ㎖를 가하고 실온에서 30분간 발색시키고, IM H₂SO₄ 100㎖를 가하여 반응을 중단시킨 후 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 이 방법은 시료의 PGE? 와 첨가된 PGE2-peroxidase conjugate와의 경쟁 반응으로 흡광도 변화와 농도와의 관계를 나타내는 표준 검량선을 이용하여 각 세포배양액에 함유된 PGE2의 함량을 계산하였다.
항원-항체 복합체에 TMB(3, 3', 5, 5'-tetramethylbenzidine) 용액 150 ㎖를 가하고 실온에서 30분간 발색시키고, IM H₂SO₄ 100㎖를 가하여 반응을 중단시킨 후 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 이 방법은 시료의 PGE? 와 첨가된 PGE2-peroxidase conjugate와의 경쟁 반응으로 흡광도 변화와 농도와의 관계를 나타내는 표준 검량선을 이용하여 각 세포배양액에 함유된 PGE2의 함량을 계산하였다.
세포수집 후, 원심분리를 하여 세포 조각(cell debris)은 제거하고 상등액만 취한다. 상등액 샘플과 염료를 섞은 후, 37℃에서 1시간 동안 배양한 후 10% Zymogram gel을 이용하여 100 V의 전압을 가하여 3시간 동안 SDS-PAGE를 실시하였다. Gel에서 SDS 를 제거하기 위해 0.
02% NaN3H 담근 후, 37℃에서 48시간 동안 반응시켰다. 반응이 끝난 gele 0.25% Commassie Brilliant Blue R250(Sigma-aldrich, USA)으로 1시간 동안 염색한 후 탈색(25% ethanol, 8% acetic acid) 하였다.
체중 20~22g의 ICR(Institute of Cancer Research)계 mouse 수컷 8마리를 1군으로 하여 시료 200㎎/㎏과 400 mg/ kg을 각각 경구투여하고, 1시간 후에 0.6% 초산생리식염액 0.1 m//10g 단위로 복강 내 주사하고, 주사 후 10분 후부터 10분간 각각의 쥐가 나타내는 통증 반응인 롸이딩(writhing: 등을 쭉 펴거나 뒷다리를 몸 뒤로 완전히 뻗어 제치는 현상)을 보이는 횟수를 관찰하였다.'
NO? 의 양을 Greiss 시약을 사용하여 NO(Nitric oxide) 저해활성을 측정하였다. 강 활의 EtOAc 추출물은 0.
측정하였다. 강 활의 EtOAc 추출물은 0.8, 4.0, 20.0 m2로 처리하였고 음성대조군(CM, 5.35±0.13 M)에 비해 각각 16.62%(4.46±0.17|iM), 39.20%(3.25 ± 0.07 piM), 73.08%(1.44±0.07 “M)로 유의성 있는(***p<0.001) NO 생성 저해효과를 나타내 었다(Fig. 1). Apigenin의 K%。은 9.
관절조직의 주요 성분 중 하나인 proteoglycan의 분해 억제 활성실험을 통해서 염증성 cytokines에 의한 proteoglycan 분해가 시료에 의해 억제되는 정도를 측정하였다. Fig.
하였다.26-28) Primary culture를 통해서 토끼 무릎으로부터 관절조직을 분리해내고 관절조직세포를 이용하여 실험을 진행하였다. 관절조직에 염증성 cytokine(IL-ip, TNF-a, IFN-y, LPS)에 의해 염증반응을 유발하여 NO 생성 저해 활성을 측정을 측정함으로서29, 3) 항염증 활성을 시험해 본 결과 강활 EtOAc 추출물은 농도 의존적으로 NO 생성을 저해하는 것을 확인하였다.

대상 데이터

본 연구에 사용한 강 활은 국내산으로써 경기도에 소재한 대영제약에서 구입하였다. 강활 120 g 환저플라스크 (round bottom flask)에 5배 (w/v)의 70% 에탄올을 가하여 60℃에서 2시간 2회 추출, 감압농축 하여 얻은 70% 에탄올 추출물을 hexane, ethyl acetate(EtOAc), butanol(BuOH) 및 증류수(&0) 순으로 분획하여 각 분획물을 동결건조한 결과 다음과 같은 분말을 얻었다.
강활 120 g 환저플라스크 (round bottom flask)에 5배 (w/v)의 70% 에탄올을 가하여 60℃에서 2시간 2회 추출, 감압농축 하여 얻은 70% 에탄올 추출물을 hexane, ethyl acetate(EtOAc), butanol(BuOH) 및 증류수(&0) 순으로 분획하여 각 분획물을 동결건조한 결과 다음과 같은 분말을 얻었다. 각각의 분획물을 염증성 cytokines 억제 효과 검색의 시료로 사용하여 가장 활성이 뛰어난 EtOAc 분획물을 사용하였다(Data not shown).
Primary culture에 사용한 뉴질랜드 화이트 토끼(수컷)와 통증 유발 마우스 진통 시험에 사용한 ICR 생쥐(수컷)는 중앙실험동물(서울 소재)에서 구입하였다. 토끼는 22±2℃에서 1~2일간 사육한 후, 실험에 사용하였으며, ICR 생쥐는 20~동물 실에서 1주일간 동물실에서 적응시킨 후, 실험에 사용하였다.
소재)에서 구입하였다. 토끼는 22±2℃에서 1~2일간 사육한 후, 실험에 사용하였으며, ICR 생쥐는 20~동물 실에서 1주일간 동물실에서 적응시킨 후, 실험에 사용하였다. 동물실 내 명암은 12시간씩으로 자동조절 시켰고 사료와 물은 충분히 공급하였다.
2~3주령의 토끼(수컷)를 에테르 마취 후, 양쪽 무릎 관절로부터 연골조직을 분리하여 primary culture 하였으며, 10% fetal bovine serum(Gibco, Co., USA)이 포함된 DMEM 배지에서 배양하였다. 여기에 penicillin-streptomycin(Sigma Chemical Co.

이론/모형

토끼 연골 조직의 구성 성분인 프로테오글리칸의 분해를 유발시켜 배양액 내의 프로테오글리칸의 분해 산물인 글루코스 아미노글리칸(glucosaminoglycan, GAG)을 Mbyundula 방법에 준하여 측정하였다. 1, 9-디메틸 메틸렌블루 발색제(1, 9-dimethylmethylene blue dye, DMB)에 의해 발색 된 정도를 525nm에서 흡광도를 측정한 후, chondroitin sulfateS.
세포 내 PGE2< Ha13) 방법에 준하여 측정하였다. 염증성 cytokine들로 유발된 COX-2에 기인한 PGEe 농도변화를 assay kit(Amersham, U.
염증성 cytokine들로 유발된 COX-2에 기인한 PGEe 농도변화를 assay kit(Amersham, U.K.)를 시용하여 enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) 방법으로 정량하였다. Goat anti-mouse Ig가 부착되어 있는 96-well plate에 PGE2 표준액 또는 시료를 가한 후, PGE2-peroxidase conjugate와 mouse anti-PGE2< 각각 50 ㎕씩 가하고 실온에서 1시간 반응시킨 후, 0.
MMP-2, 9의 활성 측정은 Fuchs14) 방법에 준하여 시험하였다. 세포수집 후, 원심분리를 하여 세포 조각(cell debris)은 제거하고 상등액만 취한다.
마우스를 이용한 통증 유발 시험은 Moon 방법에 의해 이루어졌다. 체중 20~22g의 ICR(Institute of Cancer Research)계 mouse 수컷 8마리를 1군으로 하여 시료 200㎎/㎏과 400 mg/ kg을 각각 경구투여하고, 1시간 후에 0.
0 ㎍/㎖)과 cytokine mixture를 처리하고 16시간 동안 배양하였다. 생성된 NO(Nitric oxide)의 양은 Griess 시약을 이용하여 Liang⁽²⁾ 방법에 따라 시행하였다. 세포배양액 중에 존재하는 (NO9의 형태로 측정하였으며, 세포배양액 상등액 100B와 Griess시약 [0.

성능/효과

실험결과는 mean±SIS 표시하였으며, 음성대조군(CM)과 강활 EtOAc 추출물(EARK) 사이의 유의성은 paired Student's i-test *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.00l인 경우를 유의성이 있는 것으로 판정하였다.
25 ㎍/mg)으로 유의성 있는 저해 효과를 나타내었다. 특히 4 ㎍/mg/과 20 ㎍/mg에서는 무처치군 보다 더 낮은 수준으로 proteoglycane] 분해 산물인 GAG(glucosaminoglycan) 함랑이 측정됨으로써 proteoglycan의 분해를 효과적으로 저해함을 확인하였다(**p<0.01, ***pv0.001).
촉진된다. COX-2를 나타내는 지표인 PGE2의 농도는 염증성 cytokine을 처리하지 않은 무처치군(19.65± L24pg/m/)에 비하여 처리한 음성대조군(CM, 267.72±9.98 pg/m/)에서 약 14배 이상 증가되어 통증 유발의 증가를 확인하였다. 반면에 음성대조군에 비교해 강활의 EtOAc 추출물을 처리한 군에서 농도 의존적인 감소를 확인하였다(Fig.
98 pg/m/)에서 약 14배 이상 증가되어 통증 유발의 증가를 확인하였다. 반면에 음성대조군에 비교해 강활의 EtOAc 추출물을 처리한 군에서 농도 의존적인 감소를 확인하였다(Fig. 3). 특히, 20.
그러나 질환 상태의 연골조직에서는 MMP-1, MMP-2, MMP-3, MMP-8, MMP-9, MMPJ3의 발현 및 활성이 증가하며 이러한 현상은 염증성 okii에 의해 유발된다. 본 실험에서는 Fig. 4에서와같이 염증성 cytokine에 의해 중가된 MMP-2, 9이 강 활의 EtOAc 추출물에 의해 감소하며 20 ㎍/mg에서는 무처치군 수준까지 감소되는 것을 확인하였다.
통증 유발 마우스에서의 진통 효과에 미치는 결과는 무처치군에서 10분 동안에 19.66± 1.52회의 'writing syndrom을 일으켰으며, 강활의 EtOAc 추출물 200㎎/㎏ 투여군 에서는 18.40% 감소를 보였고, 400 ㎎/㎏ 투여군 에서는 44.00%의 억제효과를 나타내어 진통효과가 탁월함을 있음을 알 수 있었다(Fig. 5, **p<0.01).
26-28) Primary culture를 통해서 토끼 무릎으로부터 관절조직을 분리해내고 관절조직세포를 이용하여 실험을 진행하였다. 관절조직에 염증성 cytokine(IL-ip, TNF-a, IFN-y, LPS)에 의해 염증반응을 유발하여 NO 생성 저해 활성을 측정을 측정함으로서29, 3) 항염증 활성을 시험해 본 결과 강활 EtOAc 추출물은 농도 의존적으로 NO 생성을 저해하는 것을 확인하였다. NO 생성저해 효과에 대한 IC₅₀은 6.
07 μ此의 탁월한 효과를 나타내었다. DMB assay 을 실시하여 PG(proteoglycan)의 분해 억제 정도를 확인한 결과, 강활의 EtOAc 추출물은 농도 의존적으로 PG 분해를 효과적으로 억제함을 확인하였으며, 4 ㎍/m2에서는 양성 대조군인 Apigenin과 비슷한 수준으로 활성을 나타냄을 확인할 수 있었다. 이는 연골세포를 자극하고 proteoglycan을 생성시켜 연골을 재생시키거나 연골의 파괴를 막는 것을 의미한다.
이는 연골세포를 자극하고 proteoglycan을 생성시켜 연골을 재생시키거나 연골의 파괴를 막는 것을 의미한다.(2) 연골조직에서는 MMP의 합성 및 활성화에 의해 그 항상성이 파괴된퇴행성 관절염 조직에서 MMP-1, MMP-2r MMP-3, MMP-8, MMP-9, MMP-13 등의 발현 및 활성이 증가하며 이러한 현상은 염증성 cytokine0]] 의해 유발된다*)이 중 zelatin zymography 방법을 통해 강활 EtOAc 추출물에 의한 MMP-2, MMP-9에 의한 변화를 측정한 결과 0.8, 4 ㎍/㎖에서는 유의적인 감소를 보이지 않았으나 20 ㎍/㎖에서는 무처치군과 같은 수준으로 저해된 것을 확인할 수 있었다. 이는 연골조직에서 MMP의 합성 및 합성화에 의해 파괴된 항상성을 강활 EtOAc 추출물이 그 항상성을 유지시키고 균형을 이루게 하여 연골 특이적 ECM 단백질을 정상적으로 합성함을 의미한다, &9, 31) 또한 강활 EtOAc 추출물은 통증유발물질인 PGE2 생성을 농도의 존적으로 감소시켰다.
이는 연골조직에서 MMP의 합성 및 합성화에 의해 파괴된 항상성을 강활 EtOAc 추출물이 그 항상성을 유지시키고 균형을 이루게 하여 연골 특이적 ECM 단백질을 정상적으로 합성함을 의미한다, &9, 31) 또한 강활 EtOAc 추출물은 통증유발물질인 PGE2 생성을 농도의 존적으로 감소시켰다. 또한 실험동물을 이용한 진통효과시험인 Writhing syndrome에서도 무처치군에 비]하여 진통효과가 있음을 확인하였다. Moon25) 등의 보고에서는 강활의 COX-2의 억제율이 31%로 낮은 효과를 보였으나, 이런 결과는 강활 메탄올추출물을 용매별로 단계적으로 분획하고 그 중 물 분획물에 대해 저해활성을 검색하여 본 논문의 결과와는 다른 경향을 보인 것으로 사료된다.
Gelatin zymography에서도 EAKR에 의한 MMP-2와 MMR9의 활성을 확인 해본 결과, MMP-2와 MMP-9 모두 20 ㎍/㎖에서 무처치군과 비슷한 수준까지 활성이 억제됨을 확인하였다. 또한 in vivo 시험인 통증 유발 마우스 진통 효과시험에서도 유의성 있는 진통억제 효과를 확인함으로서 소염진통제 및 관절염 치료제의 훌륭한 후보약재가 될 것으로 기대된다.
7 cell line에서 염증성 cytokine의한 종류인 TNF-a의 생성을 억제한다는 보고가 알려져 있다.2) 관절염 질환에서 연골조직의 파괴는 MMP 등에 의한 연골 기질의 분해뿐만 아니라 연골세포의 탈분화에 의한 연골 기질 분자의 합성감소에도 관여한다. 또한 연골세포의 탈분화는 IL-lp, TNF-a, IFN-y 및 LPS 등의 염증성 cytokine에 의해 유발된다.

후속연구

이상과 같은 결과로 보아 강활을 70% 에탄올로 추출한 후 얻어진 활성 분획인 EtOAc 추출물은 소염 및 진통과 관련된 메커니즘에 효과적으로 관여함으로서 치료효과를 나타낼 것으로 기대된다.
Gelatin zymography에서도 EAKR에 의한 MMP-2와 MMR9의 활성을 확인 해본 결과, MMP-2와 MMP-9 모두 20 ㎍/㎖에서 무처치군과 비슷한 수준까지 활성이 억제됨을 확인하였다. 또한 in vivo 시험인 통증 유발 마우스 진통 효과시험에서도 유의성 있는 진통억제 효과를 확인함으로서 소염진통제 및 관절염 치료제의 훌륭한 후보약재가 될 것으로 기대된다.

참고문헌 (31)

Moon, H. J., Go, J. J. and Park, J. Y. : The anti-inflammatory and analgesic activities of Gumiganghwaltang. Kor. J. Pharmacogn. 1, 30 (1999)
Cho, J. Y., Lee, J. S., Park, J. S. and Park, M. H. : Isolation of inhibitory components on tumor necrosis factor- $\alpha$ production from Angelica Koreana. Yakhak Hoeji 2, 42 (1998)
Kwon, Y. S., In, K. K. and Kim, C. M. : Chemical constituents from the roots of Ostericum koreanum. Kor. J. Pharmacon. 3, 31 (2000)
Arner, E. C., Hughes, C. E., Decicco, C. P., Caterson, B. and Tortorella, M. D. : Cytokine-induced cartilage proteogltcan degradation is mediated by aggrecanase. Osteoarthrit. Cartilage. 6, (1998)
Mbvundula, E. C., Bunning, R. A. D. and Rainsford, K. D. : Effects of cannabionoids on nitric oxide production by chondrocytes and proteoglycan degradation in cartilage. Biochem. Pharmacol. 69, (2005)
Badger, A. M., Cook, M. N., Swift, B. A., Newmantarr, T. M., Gowen, M. and Lark, M. : Inhibition of interlukin-1-induced proteoglycan degradation and nitric oxide production in bovine articular cartilage/chondrocyte cultures by the natural product, Hymenialdisine. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2, 290 (1999)
Hyun, E. A., Lee, H. J., Yoon, W. J., Kang, H. K., Kim, S. J. and Yoo, E. S. : Inhibitory effect of Salvia officinalis on the inflammatory cytokines and inducible nitric oxide synthesis in murine macrophage Raw264.7. Yakhak Hoeji 2, 48 (2004)
Park, S. Y., Lee, H. J., Hyun, E. A., Moon, J. Y., Yang, H. C., Lee, N. H., Kim, S. J., Kang, H. K. and Yoo, E. S. : Inhibitory effect of Eurya emarginata on the production of pro-inflammatory cytokines in murine macrophage Raw264.7. Yakhak Hoeji 5, 47 (2003)
Nam, K. W., Je, K. H., Lee, J. H., Han, H. J., Lee, H. J., Kang, S. K. and Mar. W. C. : Inhibition of COX-2 activity and proinflammatory cytokines (TNF- $\alpha$ and IL-1 $\beta$ ) production by water-soluble sub-fractionated parts from Bee (Apis mellifera) Venom. Arch. Pharm. Res. 5, 26 (2003)
Park, K. S., Kim, H. S., Ahn, J. S., Kim, T. S., Park, P. U., Kwak, W. J., Han, C. K., Cho, Y. B. and Kim, K. H. : Preparation of anti-inflammatory herbal drug, SKI306X. Koreana. Yakhak Hoeji 4, 39 (1995)
Marnett, L. J. : Aspirin and the potential role of prostaglandins in colon cancer. Caner Res. 52, (1992)
Choi, J. H., Choi, J. H., Kim, D. Y., Yoon, J. H., Youn, H. Y., Yi, J. B., Rhee, H. I., Ryu, K. H., Juug, K., Han, C. K., Kwak, W. J. and Cho, Y. B. : Effects of SKI306X, a new herbal agents, on proteoglycan degradation in cartilage explant culture and collagenase-induced rabbit osteoarthritis model. Osteoarthritis and Cartilage. 10, (2002)
Ha, H. K., Lee, J. H. and Kim, C. S. : Extracts of Rheum ubdulatum L. inhibits COX-2 activities in lipopolysaccharidestimulated Raw 264.7 cells. J. Applied. Pharmacol. 8, (2000)
Fuchs, S., Skwara, A., Bloch, M. and Dankbar, B. : Differential induction and regulation of matrix metalloproteinases in osteoarthritic tissue and fluid synovial fibroblasts. Osteoarthritis and Cartilage. 12, (2004)
Pak, J. U., Moon, S. J., Moon, G. and Wn, J. H. : Effects of seman armenicae and Radix trichosanthis on the iNOS expression and superoxide formation in the RAW264.7 cells. J. of Kor. Oriental Oncology 1, 5 (1999)
Moon, Y. H., Go, J. J. and Lee, K. J. : Anti-inflammatory and analgesic activities of SEO-KYONG-TANG. Kor. J. Pharmacogn. 2, 13 (2000)
Cho, T. S., Lee, S. M., Jung, K. H., Lee, B. K., Lee, S. Y. and Park, J. D. : Studies on the anti-inflammatory activity of ginseng total saponin, protopanaxadiol and protopanaxatriol. J. of Applied Pharmacol. 7, (1999)
Seo, B. I., Lee, E. S., Park, J. H., Kim, S. C., Byun, B. H. and Choi, H. Y. : An efficacy of Korean and Chinese Carthami semen on analgesic effect, anti-inflammation and arthritis. Kor. J. Herbology 1, 16 (2001)
Lee, E. B., Cho, S. I., Kang, S. S., Kim, K. R. and Kim, T. H. : Isolation of Torilin from Torilis japonica fruit and its analgesic and anti-inflammatory activities. Kor. J. Pharmacogn. 2, 30 (1999)
Moon, Y. H., Park, Y. J. and Kim, S. M. : Studies on the antiinflammatory and analgesic activities of Chan-Back-San and Chil-Mi-Chang-Back-San. Kor. J. Pharmacogn. 2, 29 (1998)
Moon, Y. H., Lee, D. I. and Lee, S. Y. : Studies on the antiinflammatory and analgesic activities of Ohyaksungisan. Kor. J. Pharmacogn. 3, 27 (1996)
Cho, S. K., Lee, S. G. and Kim, C. J. : Anti-inflammatory and analgesic activities of water extract of root bark of Ulmus parvifolia. Kor. J. Pharmacogn. 3, 27 (1996)
Kim, S. S., Kim, H. K., Choi, J. W. and Lee, C. K. : Antiinflammatory, analgesic and antihyperuricemic effects of 'Cyejakjimo-Tang' in rats. Kor. J. Pharmacogn. 1, 26 (1995)
Hwang, G. J. and Kim, I. H. : Anti-inflammatory and analgesic activities of the root of Caragana koreana. Kor. J. Pharmacog. 4, 14 (1983)
Moon, T. C., Chung, K. C., Son, K. H. Kim, H. P., Kang, S. S. and Chang, H. W. : Screening of cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitors from natural products. Yakhak Hoeji 2, 42 (1998)
Lee, S. H., Seo, G. S. and Sohn, D. H. : Inhibition of lipopolysaccharide-induced expression of inducible nitric oxide synthase by butein Raw 264.7 cells. Biochem. Biophys. Commun. 323, (2004)
Patel, R. N., Attur, M. G., Dave, M. N., Patel, I. V., Stuchin, S. A., Abramson, S. B. and Amin, A. R. : A novel mechanism of action of chemically modified tetracyclines: inhibition of COX- 2-mediated prostaglandin E2 production. J. Imminol. 163, (1999)
Ferrandiz, M. L. and Alcazaraz, M. J. : Anti-inflammatory and inhibition arachidonic acid metabolism by flavonoids. Agents. Actions. 32, (1991)
Kim, S. N., Kim, H. S., Nam, G. S., Hwang, S. W. and Hwang, S. Y. : Inhibition of inflammatory-cytokines production and prostaglandin E2 activity by Puerariae Radix extracts. J. Korean Soc. Food Sci. Natr. 1, 35 (2006)
Kim, S. N., Kim, H. S., Nam, G. S., Hwang, S. W. and Hwang, S. Y. : The anti-inflammatory and analgesic activities of Artemisia capillaris Thunberg. Kor. J. Pharmacogn. 4, 36 (2005)
Marcet-paracios, N., Graham, K., Cass, C., Defus, A. D., Mayers, I. and Radomski, M. W. : Nitric oxide and cyclic GMP increase the expression of matrix metalloproteinase-9 in vascular smooth muscle. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1, 307 (2003)

LOADING...

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증