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문제 정의
- 이에 본 연구에서는 hCG 투여 당시 혈청 내 에스트라디올 농도가 시험관아기 성공율에 미치는 영향을 알아보기 위해 hCG 투여 시 혈중 에스트라디올 농도와 환자의 나이에 따른 신선주기 배아이식과 과배란을 유도하지 않은 자궁 환경을 가지고 있는 동결-융해 배아이식의 임신율, 착상률과 분만율을 비교하였다.
제안 방법
- 회수된 난자는 10% Human Serum Albumin (HSA)7}- 첨 가된 G-Fert™ 배양액 (Vitrolife, Sweden)에서 4~6시간 배양 후 체외수정을 시도하거나 세포질내 정자주입술 (intra- cytoplasmic sperm injection, ICSI)^ 시 행하여 수정 을 유도하였다. 16~18시간 후 전핵 형성 유무로 수정을 확인하였다. 수정된 배아는 3~5일 간 GO series (VitroBfe, Sweden)의 Gl, G2 배양액에서 체외배양하여 자궁 내 이식을 실시하였다.
- 000 pg/ml)로 나누었다. 나이에 따른 비교를 위해 여성 환자의 배아이식 당시 나이 기준으로 35세 미만과 35세 이상으로 나누어 각각 에스트라디올 농도 그룹에 따른 양질의 배아이식율, 임신율, 착상률과 분만율 등을 비교하였다. 동결-융해 배아이식 환자의 경우 배아가 동결된 시점인 신선주기당 시 에스트라디올 농도에 따라 그룹을 나누었다.
- 대상 환자를 hCG 주사일에 측정한 에스트라디올 농도에 따라 Group A (1,000-2,000 pg/mL), B (2, 000-3, 000 pg/ml), C (3, 000-4, 000 pg/ml), D (> 4, 000 pg/ml)로 나누었다. 나이에 따른 비교를 위해 여성 환자의 배아이식 당시 나이 기준으로 35세 미만과 35세 이상으로 나누어 각각 에스트라디올 농도 그룹에 따른 양질의 배아이식율, 임신율, 착상률과 분만율 등을 비교하였다.
- 동결 보관된 배아는 적절한 시간에 급속해동법으로 융해한 후 이식 전까지 신선주기 배아이식에서와 동일한 조건 하에서 체외배양하였다. 동결-융해 배아이식을 위한 자궁내막 준비는 생리 시작 1일이나 2일째부터 estradiol valerate (Progynova, Schering AG)를 일일 용량 6 mg으로 경구 투여하였으며, 혈중 농도가 100 pg/ ml 미만이거나 자궁내막 두께가 7 mm 미만인 경우 용량을 8 mg로 증량하였다. 자궁내막의 두께가 7 mm 이상으로 두꺼워진 경우 분비기 자궁내막으로의 분화를 유도하기 위해 프로게스테론을 투여하였다.
- 16~18시간 후 전핵 형성 유무로 수정을 확인하였다. 수정된 배아는 3~5일 간 GO series (VitroBfe, Sweden)의 Gl, G2 배양액에서 체외배양하여 자궁 내 이식을 실시하였다.
- 판정하였다. 이식한 배아에 대한 태낭의 비율로 착상률을 계산하였다. 임신 후 추적 조사를 통해분만 결과를 확인하였다.
- 이식한 배아에 대한 태낭의 비율로 착상률을 계산하였다. 임신 후 추적 조사를 통해분만 결과를 확인하였다.
- 동결-융해 배아이식을 위한 자궁내막 준비는 생리 시작 1일이나 2일째부터 estradiol valerate (Progynova, Schering AG)를 일일 용량 6 mg으로 경구 투여하였으며, 혈중 농도가 100 pg/ ml 미만이거나 자궁내막 두께가 7 mm 미만인 경우 용량을 8 mg로 증량하였다. 자궁내막의 두께가 7 mm 이상으로 두꺼워진 경우 분비기 자궁내막으로의 분화를 유도하기 위해 프로게스테론을 투여하였다.
- 전체 신선주기 배아이식 1565주기와 동결-융해 배아 이식 670주기를 대상으로 임신율, 착상률과 분만율을 비교하였다. 그 결과 Table 1에서 보는 바와 같이 두 군간의 환자 나이와 이식된 배아의 수는 차이가 없었으며, hCG 투여 당시 에스트라디올 농도와 회수된 난자의 수는 동결-융해 배아이식의 동결 전 주기에서 유의하게 높았다 (p<0.
- 초음파 상에서 직경 18 mm 이상의 난포가 2개 이상일 때, hCG (Pregnyl, Serono, Switzerland) 10, 000 IU를 주사하였고, hCG 투여 36시간 후 질식 초음파를 이용하여 난자를 채취하였다. 회수된 난자는 10% Human Serum Albumin (HSA)7}- 첨 가된 G-Fert™ 배양액 (Vitrolife, Sweden)에서 4~6시간 배양 후 체외수정을 시도하거나 세포질내 정자주입술 (intra- cytoplasmic sperm injection, ICSI)^ 시 행하여 수정 을 유도하였다.
- 이용하여 난자를 채취하였다. 회수된 난자는 10% Human Serum Albumin (HSA)7}- 첨 가된 G-Fert™ 배양액 (Vitrolife, Sweden)에서 4~6시간 배양 후 체외수정을 시도하거나 세포질내 정자주입술 (intra- cytoplasmic sperm injection, ICSI)^ 시 행하여 수정 을 유도하였다. 16~18시간 후 전핵 형성 유무로 수정을 확인하였다.
대상 데이터
- 2003년 1월부터 2005년 12월까지 제일병원 아이소망센터를 내원하여 과배란 유도에 의해 체외수정이식술을 시행받은 환자 중 1565 신선주기 배아이식과 2002년부터 2005년 사이에 전핵 또는 난할 중인 배아단계에서 동결된 배아를 위의 동 시기에 융해하여 이식한 동결-융해 배아이식 670주기를 대상으로 하였다.
- 과배란 유도는 Gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) agonist (Suprafact, Aventis, France, 또는 Leucrin, Abbott, France) 또는 GnRH antagonist와 recombinant FSH (puregon, Organon, Netherland 또는 Gonal-F, Serono, Switzerland) 또는 highly purified Follicular stimulating hormone (Metrodin, Serono, Switzerland) 및 human menopausal gonadotropin (Pergonal, Serono, Switzerland)을 사용하였다.
데이터처리
- 통계적인 분석은 Student's t-test와 chi-square test 를 이용하였으며, p<0.05인 경우 통계학적 유의성이 있는 것으로 간주하였다.
성능/효과
- 지금까지 과배란 유도에 의해 증가된 에스트라디올 농도가 시험관아기 성공률에 미치는 연관성에 대한 여러가지 상반된 보고가 있었다. 7T2 본 연구에서는 전체적으로 에스트라디올 농도가 증가함에 따른 임신율, 착상률과 분만율의 차이는 보이지 않았으며, 나이가 많은 여성 환자의 경우에는 신선 배아이식 주기에 비해 동결해 배아이식 주기에서 보다 양호한 임상 결과를 얻을 수 있었다.
- 각각의 그룹에서 동결-융해 배아이식에서 신선 주기 배아이식에 비해 유의하게 많은 난자가 회수되었으며 (p<0.01), 이식된 양질의 배아의 비율은 에스트라디올 농도에 따라 변화가 없었다. 즉 에스트라디올의 농도가 배아의 질에는 큰 영향을 주지 않는 것으로 보여지며, 각 군에서 모두 신선주기 배아이식에서 보다 양호한 배아가 이식되었다.
- 비교하였다. 그 결과 Table 1에서 보는 바와 같이 두 군간의 환자 나이와 이식된 배아의 수는 차이가 없었으며, hCG 투여 당시 에스트라디올 농도와 회수된 난자의 수는 동결-융해 배아이식의 동결 전 주기에서 유의하게 높았다 (p<0.01). 반면, 이식된 양질의 배아 비율은 신선주기가 유의하게 높았다 (p<0.
- 본 연구의 결과에서는 전체적으로 에스트라디올 농도가 증가함에 따른 임신율과 착상률의 유의한 차이는 보이지 않았다. 그러나 나이가 35세 이상인 군에서는 에스트라디올 수치가 낮은 Group-A의 신선주기에서 과배란을 유도하지 않은 동결-융해 배아이식에 비해 다소 낮은 임신율과 착상률을 나타내었으며, Group-D에서는 통계적으로 유의하게 낮은 임신율을 보였다 (p<0.05). 이 결과는 Mitwally 등이 과배란 시작일부터 hCG 투여일 까지의 누적 에스트라디올 농도가 평균의 표준편차 1 이하인 낮은 그룹과 1 이상인 높은 에스트라디올 농도의 그룹에서 낮은 임신율을 보인 것과 유사한 것으로 생각된다.
- 05), 임신율, 착상률과 분만율에는 신선주기 배아 이식과 비교하여 차이가 없었다. 다만, Group-D의 동결- 융해 배아이식에서 이식된 배아의 수가 다른 군에 비해 많았으며, 가장 높은 임신율을 보였다.
- 또한 배아 동결 당시 에스트라디올 농도에 따른 동결-융해 배아이식술의 결과도 신선배아이식과 동일한 양상을 보였다. 동결-융해 배아이식 당시 신선주기보다 이식된 평균적인 배아의 등급이 유의하게 낮았음에도 불구하고 (p<0.05), 임신율, 착상률과 분만율에는 신선주기 배아 이식과 비교하여 차이가 없었다. 다만, Group-D의 동결- 융해 배아이식에서 이식된 배아의 수가 다른 군에 비해 많았으며, 가장 높은 임신율을 보였다.
- (Table 3). 또한 배아 동결 당시 에스트라디올 농도에 따른 동결-융해 배아이식술의 결과도 신선배아이식과 동일한 양상을 보였다. 동결-융해 배아이식 당시 신선주기보다 이식된 평균적인 배아의 등급이 유의하게 낮았음에도 불구하고 (p<0.
- 01). 반면, 이식된 양질의 배아 비율은 신선주기가 유의하게 높았다 (p<0.01) 즉, 신선주기 배아이식에서 동결- 융해 배아이식에 비해 상태가 양호한 배아가 이식되었다. 그러나 임신율, 착상률과 분만율은 두 군에서 유의한 차이를 보이지 않았다.
- " Papageorgiou 등은 여성 환자의 나이를 35세 미만, 35~38세 그리고, 38세 이상인 그룹으로 나누어 과배란 유도 4~6일째와 hCG 투여 당시의 에스트라디올 농도에 따른 임신율을 조사하였을 때, 각 군 간의 임신율에는 유의한 차이가 없었다고 보고하였다μ 이들은 Levi 등의 결과와 같이 에스트라디올 농도가 높은 high responder 군에서 에스트라디올 농도가 낮은 poor responder 군에 비해 양호한 IVF-ET 결과를 얻을 수 있다고 주장하였다.본 연구의 결과에서는 전체적으로 에스트라디올 농도가 증가함에 따른 임신율과 착상률의 유의한 차이는 보이지 않았다. 그러나 나이가 35세 이상인 군에서는 에스트라디올 수치가 낮은 Group-A의 신선주기에서 과배란을 유도하지 않은 동결-융해 배아이식에 비해 다소 낮은 임신율과 착상률을 나타내었으며, Group-D에서는 통계적으로 유의하게 낮은 임신율을 보였다 (p<0.
- 수정확인 후 전핵단계의 잉여 배아나 배양 3일째 배아이식 후 양질의 잉여 배아를 완만동결법으로 동결 보관하였다. 동결 보관된 배아는 적절한 시간에 급속해동법으로 융해한 후 이식 전까지 신선주기 배아이식에서와 동일한 조건 하에서 체외배양하였다.
- 임신의 확인은 배아이식 후 12일째 혈중 p-hCG 가 5 mIU/ml 이상이고, 추적 검사에서 지속적인 상승을 보이며, 임신 5~6주 사이에 태낭 (gestational sac) 이 확인되면 임상적 임신 (clinical pregnancy)으로 판정하였다. 이식한 배아에 대한 태낭의 비율로 착상률을 계산하였다.
- 전체적인 에스트라디올 농도에 따른 임상 결과는 에스트라디올 농도가 증가할수록 환자의 평균나이는 감소하였으며, 회수된 난자의 개수는 증가하였다. 각각의 그룹에서 동결-융해 배아이식에서 신선 주기 배아이식에 비해 유의하게 많은 난자가 회수되었으며 (p<0.
- 01), 이식된 양질의 배아의 비율은 에스트라디올 농도에 따라 변화가 없었다. 즉 에스트라디올의 농도가 배아의 질에는 큰 영향을 주지 않는 것으로 보여지며, 각 군에서 모두 신선주기 배아이식에서 보다 양호한 배아가 이식되었다. 그러나 전체적인 각각의 그룹에서 임상 결과의 차이는 보이지 않았다 (Table 2).
후속연구
- 결론적으로 본 연구에서는 나이가 젊은 35세 미만의 여성 환자의 경우는 에스트라디올 농도가 다소 높아도 시험관아기 시술의 임상 결과에 큰 영향을 미치지 않으나, 나이가 많은 35세 이상의 여성일 경우에는 과배란 유도에 의해 과도하게 높은 에스트라디올 농도를 나타내면 배아를 동결하여 다음 주기에 이용하는 것이 난소 과자극 증후군 발생의 위험성도 줄이고 보다 높은 임신율을 기대할 수 있는 선택이라 사료된다. 특히, 고령의 환자에서 성공적인 시험관아기 시술 결과를 기대하기 위해서는 최적의 배아 착상 환경을 유지할 수 있는 자궁내막의 적정한 에스트라디올 농도를 유지할 수 있는 과배란 유도 방법을 적용하기 위한 노력이 필요하리라 생각된다.
- 수 있는 선택이라 사료된다. 특히, 고령의 환자에서 성공적인 시험관아기 시술 결과를 기대하기 위해서는 최적의 배아 착상 환경을 유지할 수 있는 자궁내막의 적정한 에스트라디올 농도를 유지할 수 있는 과배란 유도 방법을 적용하기 위한 노력이 필요하리라 생각된다.
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