본 연구에서는 함초 추출물(나문재 및 퉁퉁마디)의 항산화능을 조사하였다. 나문재 추출물의 free radical(1,1-diphenyl-2-picrylhyazyl, DPPH) 소거활성($FSC_{50}$)은 100 % ethanol 추출물(329.33 ${\mu}g/mL$) < 50% ethanol 추출물(40.73) < ethylacetate 분획(13.87) < ethylacetate 분획에서 당을 제거시킨 aglycone 분획(7.80) 순으로 증가하였다. 퉁퉁마디의 경우, free radical 소거활성은 ethylacetate 분획 및 aglycone 분획이 각각 23.21 및 28.50 ${\mu}g/mL$이었다. Luminol-의존성 화학발광법을 이용한 $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ 계에서 생성된 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)에 대한 나문재 추출물의 총항산화능은 50 % ethanol 추출물($OSC_{50}$, $0.99{\mu}g/mL$) < ethylacetate 분획(0.05) < aglycone 분획(0.03)순으로, aglycone 분획에서 가장 큰 활성을 나타내었다. 퉁퉁마디의 경우, ethylacetate 분획 및 당을 제거시킨 aglycone 분획의 ROS 소거활성은 각각 0.10 및 0.20 ${\mu}g/mL$이었다. 나문재 및 퉁퉁마디 추출물에 대하여 rose-bengal로 증감된 사람 적혈구의 광용혈에 대한 억제 효과를 측정하였다. 100 % ethanol 나문재 추출물의 경우 농도 의존적($1{\sim}100{\mu}g/mL$)으로 광용혈을 억제하였다. 특히 ethylacetate 분획에서 당을 제거시킨 aglycone 분획은 50${\mu}g/mL$ 농도에서 $\tau_{50}$이 310 min으로 매우 큰 세포보호 효과를 나타내었다. 퉁퉁마디의 경우는 ethylacetate 분획에서 비교적 큰 세포보호 활성을 나타내었다. 이상의 결과들은 나문재 추출물이 $^1O_2$ 혹은 다른 ROS를 소광시키거나 소거함으로써 그리고 ROS에 대항하여 세포막을 보호함으로써 생체계, 특히 태양 자외선에 노출된 피부에서 항산화제로서 작용할 수 있음을 가리킨다.
본 연구에서는 함초 추출물(나문재 및 퉁퉁마디)의 항산화능을 조사하였다. 나문재 추출물의 free radical(1,1-diphenyl-2-picrylhyazyl, DPPH) 소거활성($FSC_{50}$)은 100 % ethanol 추출물(329.33 ${\mu}g/mL$) < 50% ethanol 추출물(40.73) < ethylacetate 분획(13.87) < ethylacetate 분획에서 당을 제거시킨 aglycone 분획(7.80) 순으로 증가하였다. 퉁퉁마디의 경우, free radical 소거활성은 ethylacetate 분획 및 aglycone 분획이 각각 23.21 및 28.50 ${\mu}g/mL$이었다. Luminol-의존성 화학발광법을 이용한 $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ 계에서 생성된 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)에 대한 나문재 추출물의 총항산화능은 50 % ethanol 추출물($OSC_{50}$, $0.99{\mu}g/mL$) < ethylacetate 분획(0.05) < aglycone 분획(0.03)순으로, aglycone 분획에서 가장 큰 활성을 나타내었다. 퉁퉁마디의 경우, ethylacetate 분획 및 당을 제거시킨 aglycone 분획의 ROS 소거활성은 각각 0.10 및 0.20 ${\mu}g/mL$이었다. 나문재 및 퉁퉁마디 추출물에 대하여 rose-bengal로 증감된 사람 적혈구의 광용혈에 대한 억제 효과를 측정하였다. 100 % ethanol 나문재 추출물의 경우 농도 의존적($1{\sim}100{\mu}g/mL$)으로 광용혈을 억제하였다. 특히 ethylacetate 분획에서 당을 제거시킨 aglycone 분획은 50${\mu}g/mL$ 농도에서 $\tau_{50}$이 310 min으로 매우 큰 세포보호 효과를 나타내었다. 퉁퉁마디의 경우는 ethylacetate 분획에서 비교적 큰 세포보호 활성을 나타내었다. 이상의 결과들은 나문재 추출물이 $^1O_2$ 혹은 다른 ROS를 소광시키거나 소거함으로써 그리고 ROS에 대항하여 세포막을 보호함으로써 생체계, 특히 태양 자외선에 노출된 피부에서 항산화제로서 작용할 수 있음을 가리킨다.
In this study, the antioxidative effects of Sueada asparagoides and Salicornia herbacea extracts were investigated. The free radical(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activity($FSC_{50}$) of extract/fractions of Sueada asparagoides was in the order: 100 % ethanol extract(329...
In this study, the antioxidative effects of Sueada asparagoides and Salicornia herbacea extracts were investigated. The free radical(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activity($FSC_{50}$) of extract/fractions of Sueada asparagoides was in the order: 100 % ethanol extract(329.33 ${\mu}g/mL$) < 50 % ethanol extract(40.73) < ethylacetate fraction(13.87) < deglycosylated aglycone fraction (7.80). In case of Salicornia herbacea, the free radical scavenging activities of ethylacetate fraction and aglycone fraction were 13.87 and 7.80 ${\mu}g/mL$, respectively. Reactive oxygen species(ROS) scavenging activities($OSC_{50}$) of Sueada asparagoides and Solicornia herbacea extracts on ROS generated in $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ system were investigated using the luminol-dependent chemiluminescence assay. The order of ROS scavenging activity of Sueada asparagoides extracts was 50 % ethanol extract($OSC_{50}$, $0.99{\mu}g/mL$) < ethylacetate fraction (0.05) < aglycone fraction (0.03). Aglycone fraction showed the most prominent scavenging activity. In case of Salicornia herbacea, the ROS scavenging activities of ethylacetate fraction and aglycone fraction were 0.10 and 0.20 ${\mu}g/mL$, respectively. The protective effects of extract/fractions of Sueada asparagoides and Salicornia herbacea on the rose-bengal sensitized photohemolysis of human erythrocytes were investigated. The ethanol extract(100%) of Sueada asparagoides diminished photohemolysis in a concentration dependent manner($1{\sim}100{\mu}g/mL$). Particularly deglycosylated aglycone fraction exhibited the most prominent celluar protective effect($\tau_{50}$, 310 min at 50 ${\mu}g/mL$). In case of Salicornia herbacea, ethylacetate fraction exhibited more potent protective effect. These results indicate that extract/fractions of Sueada asparagoides can function as antioxidants in biological systems, particularly skin exposed to UV radiation by scavenging $^1O_2$ and other ROS, and protect cellular membranes against ROS.
In this study, the antioxidative effects of Sueada asparagoides and Salicornia herbacea extracts were investigated. The free radical(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activity($FSC_{50}$) of extract/fractions of Sueada asparagoides was in the order: 100 % ethanol extract(329.33 ${\mu}g/mL$) < 50 % ethanol extract(40.73) < ethylacetate fraction(13.87) < deglycosylated aglycone fraction (7.80). In case of Salicornia herbacea, the free radical scavenging activities of ethylacetate fraction and aglycone fraction were 13.87 and 7.80 ${\mu}g/mL$, respectively. Reactive oxygen species(ROS) scavenging activities($OSC_{50}$) of Sueada asparagoides and Solicornia herbacea extracts on ROS generated in $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ system were investigated using the luminol-dependent chemiluminescence assay. The order of ROS scavenging activity of Sueada asparagoides extracts was 50 % ethanol extract($OSC_{50}$, $0.99{\mu}g/mL$) < ethylacetate fraction (0.05) < aglycone fraction (0.03). Aglycone fraction showed the most prominent scavenging activity. In case of Salicornia herbacea, the ROS scavenging activities of ethylacetate fraction and aglycone fraction were 0.10 and 0.20 ${\mu}g/mL$, respectively. The protective effects of extract/fractions of Sueada asparagoides and Salicornia herbacea on the rose-bengal sensitized photohemolysis of human erythrocytes were investigated. The ethanol extract(100%) of Sueada asparagoides diminished photohemolysis in a concentration dependent manner($1{\sim}100{\mu}g/mL$). Particularly deglycosylated aglycone fraction exhibited the most prominent celluar protective effect($\tau_{50}$, 310 min at 50 ${\mu}g/mL$). In case of Salicornia herbacea, ethylacetate fraction exhibited more potent protective effect. These results indicate that extract/fractions of Sueada asparagoides can function as antioxidants in biological systems, particularly skin exposed to UV radiation by scavenging $^1O_2$ and other ROS, and protect cellular membranes against ROS.
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문제 정의
따리-서, 본 연구에서는 함초인 나문재 및 퉁퉁마디의 활성 분획을 추출하여 피부노화에 있어서 주도적인 역할을 하는 |以으로 유도된 세포손상에 대한 보호작용, 총항산화능 및 free radical 소거 활성에 대하여 알아보았다. 이와 함께 몇 가지 다른 항산화세들의 황산화능을 대조군으로 하여 나문재와 퉁퉁마디의 항산화능을 비교 평가하고 활성산仝에 의한 피부노화를 방지하는데 효과가 있는 기능성 화장품소새를 개발하고자 하였다.
알아보았다. 이와 함께 몇 가지 다른 항산화세들의 황산화능을 대조군으로 하여 나문재와 퉁퉁마디의 항산화능을 비교 평가하고 활성산仝에 의한 피부노화를 방지하는데 효과가 있는 기능성 화장품소새를 개발하고자 하였다.
제안 방법
모든 실험은 20 ℃ 항온실에서 행하였다-. 함초 추출물의 광용혈에 미치는 효과는 post-incubation 시간과 용혈정도로 구성된 그래프로부터 적헐구의 50 %가 용헐되는 시간인 "0을 구하여 비교하였다.
광용혈에 필요한 광조사는 내부를 검게 칠한 50 cm X 20 cm x 25 cm 크기의 상자 안에 20 W 형광등을 장치하고, 형광등으로부터 5 cm 거리에 적헐구 현탁액이 담긴 파이렉스 시험관을 형광등과 평행이 되도록 배열한 후 15 min 동안 광조사 하였다. 광조사가 끝난 후 암반응 (post-incubation) 시간에 따른 적헐구의 파괴정도를 15 min 간격으로 700 run에서 투광도(transmittance, %)로부터 구하였다.
15 min 동안 광조사 하였다. 광조사가 끝난 후 암반응 (post-incubation) 시간에 따른 적헐구의 파괴정도를 15 min 간격으로 700 run에서 투광도(transmittance, %)로부터 구하였다. 이 파장에서 적혈구 현탁액의 투광도의 증가는 적헐구의 용헐정도에 비례한다.
2 mM DPPH 용액 1 ml止에 ethanol 1 inL를 첨가하고 여러 농도의 주출물 1 mL을 첨가하여 섞은 다음 실온에서 10 min 동안 방치 후 spectrophotometer로 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 활싱의 크기는 시료를 넣지 않은 경우를 대조군(control)으로 하고 시료를 넣은 것을 실험군(experi- ment)으로 하여 다음 식에 의해 DPPH의 활성 저해율을나타내었다. 소거 활성은 DPFH의 농도가 50 % 감소되 W 데 필요한 시료의 농도(free radical scavenging activity, FSCbo, 昭/mL)로서 표기하였다.
Ethylacetate 분획은 플라보노이드를 많이 함유하고 있다. 본 연구에서는 100 % ethanol 추출물, 50 % ethanol 추출물, ethylacetate 분획을 실험에 사용하였다. 또한 ethylacetate 분획을 산 가수분해시켜서 당을 제거한 aglycone 도 실험에 사용하였다.
9820) 에 넣은 후, 시료용액을 첨가하였다. 추출물을 농도별로 각각 50 户L씩 첨가하였다. 암소에서 30 min 동안 preincubation 시킨 후, 광증감제 rose-bengal (12 ”M) 0.
활성산소에 대한 추출물의 세포보호 효과는 rose- bengal 존재 하에서 사람 적혈구 현탁액에 15 min 광조사 후 등의 활성산소종으로 유도된 적혈구의 용혈정도를암반응 시간에 따라 측정함으로 구하였다. 대조군의 경우 적혈구 세포가 50 % 용혈되는데 걸리는 시간(”»)은 약 32 min으로 나타났다.
대상 데이터
(+)- -Tocopherol (1,000 IU vitamin E/g), L-ascorbic acid, EDTA, luminol, heparin, 증감세로 사용된 rose- bengal, free radical 소거활성에 사용한 1, 1-diphenyl-2- picrylhydrazyl radical (DPPH) 는 Sigma Chemical Co. (USA)에서 구입하여 사용하였다. 기타 FeCb・6H2O는 Junsei Chemical Co.
4 . 12压0, NaH2PO4 - 2压0, NaCl, 그리고 ethanol (EtOH), methanol (MeOH), ethylacetate (EtOAC) 등 각종 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다.
2006년 2월 생그린에서 제공해준 건조 함초 500 g을잘게 자른 후 100 % ethanol (또는 50 % ethanol) 5 L를이용하여 일주일 동안 침적시킨 후 여과하였다. 이 여액을 감압 건조하여 파우더를 얻고 이를 실험에 사용하였다.
(USA)에서 구입하여 사용하였다. 기타 FeCb・6H2O는 Junsei Chemical Co. (Japan) 제품을, H2O2는 Dae Jung Chemical & Metals (Korea)사 제품을 사용하였다.
OH)을 생성시키는 촉내로 작용한다. 본 실험에서 사용한 Fe'-EDTA/H2O2 계는 각종 ROS (reactive oxygen species, O2' , - OH 그리고 压0)를 생성 시킨다. 따라서 이 계를 이용하면 ROS에 내한 총 항산화 능을 측정 할 수 있다.
광용혈 실험은 이미 확립된 방법에 따라 수행하였다-. 실험에 사용된 적헐구 현탁액은 700 nm에서 O.D.가 0.6이었으며 이때 적혈구 수는 1.5 X IQ7 cells/m止이었다.
실험에 사용한 함초는 2006년 2월 (주)생그린에서 채취, 건조시킨 것을 공급받았다.
데이터처리
모든 실험은 3회 반복하였고 통계분석은 5 % 유의수준에서 Students test를 행하였다.
Rose-bengal을 첨가하고 광조사를 안 했을 경우와 rose-bengal을 첨가하지 않고 광조사만 했을 경우는 모두 암반응 120 min까지는 용혈이 거의 일어나지 않았다. 모든 실험은 4회 반복하여 평균하였다.
성능/효과
대조군(control)은 丁"〕32 min으로 오차범위 ± 1 min 이내로 모든 경우의 실험에서 재현성이 양호하게 나타났다. Rose-bengal을 첨가하고 광조사를 안 했을 경우와 rose-bengal을 첨가하지 않고 광조사만 했을 경우는 모두 암반응 120 min까지는 용혈이 거의 일어나지 않았다.
1) 나문재 주줄물의 수득율은 100 % ethanol 주줄 물인 경우 1.4 % (50 % 광용헐에 있어서 용헐 억세 기전과 용혈을 일으키는 ethanol 추출물, 7.4 %)이었고, ethyla- cetate 분획은 약 1 %였다..
Aglycone 분획의 free radical 소거활싱은 비교물질로 사용 한 지 용성 항산화세 인 (+)-q-tocopherol (FSC50, 8.98 /jg/mL) 보다도 큰 것으로 나타났다..
클수록「贝이 크게 나타난다. 나문재 추출물(100 % ethanol 추출물)의 세포보호 효과는 1 ~ 100 ㎍/mL의 농도범위에서 거의 농도 의존적(顷이 각각 34.43, 46.08, 57.50, 68.83 min)으로 세포 파괴를 억제하였다. 한편, 50 % ethanol 추출물의 경우는 1 户g/mL의 농도에서 가장 큰 세포보호 효과(252.
천연 추출물을 화장품 원료로 사용할 것인지를 결정할 경우 수득율은매우 중요한 요소이다. 나문재 추출물은 퉁퉁마디 추출물에 비하여 수득율에서 뿐만 아니라 기능성화장품 개발에 필요한 항산화 활성 등의 효과, 그리고 화장품 원료로서 갖추어야 할 요건들을 두루 갖추고 있음을 알았다.
이상의 결과로 볼 때 나문새 추출물의 ethylacetate 분획이나 aglycone 분획 등은 활성산소에 의한 피부 노화를 방지하는데 효과가 있는 기능성 화장품소재로서 응용 가능성이 있음을 알았다.
활성산소 소거활성(총항산화능, OSCGe 나문재 100% ethanol 추출물의 활성은 6.50 pg/mL, 50 % ethanol 추출물 0.99 Mg/mL, ethylacetate 분획 0.05 ㎍/mL, aglycone 추출물은 0.03 kg/mL로 나타났다. 이로부터 ethylacetate 추출물 및 aglycone의 활성산소 소거활성이 매우 큼을 알 수 있다.
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