한국인 모유에는 cis-9, trans-11 CLA 이성체만 동정되었고, 그 함량은 $4.32{\sim}10.12\;mg/100\;mL$(평균 $6.27{\pm}0.28\;mg/100\;mL$)이었고, 지방함량 중에는 $1.35{\sim}3.13\;mg/g$(평균 $1.96{\pm}0.06\;mg/g$)으로 개인에 따라 큰 차이가 있었다. 한국인 모유에 함유된 CLA의 함량은 외국의 CLA 함량에 비해 낮았고, 그 이유는 식사의 차이 때문인 것으로 추정되었다. 국내에서 제조된 조제분유에서도 cis-9, trans-11 CLA만 동정되었는데, 그 함량은 $2.35{\sim}22.82\;mg/100\;g$으로 평균치는 $17.45{\pm}1.24\;mg/100\;g$이었고, 지방에 함유된 cis-9, trans-11 CLA 함량은 $0.45\;mg/g{\sim}0.85\;mg/g$으로 그 평균치는 $0.65{\pm}0.02\;mg/g$이었다. 영유아가 조제분유 제조사의 지시된 13% 조제분유를 섭취할 경우 cis-9, trans-11 CLA를 2.27 mg 섭취하는 것으로 모유 100 mL에 함유되어 있는 양에 비해 낮다. 따라서 조제분유를 조제할 때 모유와 동일한 cis-9, trans-11 CLA를 섭취할 수 있도록 조제분유를 제조하는 것이 바람직하다.
한국인 모유에는 cis-9, trans-11 CLA 이성체만 동정되었고, 그 함량은 $4.32{\sim}10.12\;mg/100\;mL$(평균 $6.27{\pm}0.28\;mg/100\;mL$)이었고, 지방함량 중에는 $1.35{\sim}3.13\;mg/g$(평균 $1.96{\pm}0.06\;mg/g$)으로 개인에 따라 큰 차이가 있었다. 한국인 모유에 함유된 CLA의 함량은 외국의 CLA 함량에 비해 낮았고, 그 이유는 식사의 차이 때문인 것으로 추정되었다. 국내에서 제조된 조제분유에서도 cis-9, trans-11 CLA만 동정되었는데, 그 함량은 $2.35{\sim}22.82\;mg/100\;g$으로 평균치는 $17.45{\pm}1.24\;mg/100\;g$이었고, 지방에 함유된 cis-9, trans-11 CLA 함량은 $0.45\;mg/g{\sim}0.85\;mg/g$으로 그 평균치는 $0.65{\pm}0.02\;mg/g$이었다. 영유아가 조제분유 제조사의 지시된 13% 조제분유를 섭취할 경우 cis-9, trans-11 CLA를 2.27 mg 섭취하는 것으로 모유 100 mL에 함유되어 있는 양에 비해 낮다. 따라서 조제분유를 조제할 때 모유와 동일한 cis-9, trans-11 CLA를 섭취할 수 있도록 조제분유를 제조하는 것이 바람직하다.
The concentrations of conjugated linoleic acid (CLA) in twelve Korean mothers' milk samples collected in October 2006 and four infant formula samples produced by Korean manufacturers were determined. CLA detected from both mothers' milk and infant formula samples was only cis-9, trans-11 CLA isomer....
The concentrations of conjugated linoleic acid (CLA) in twelve Korean mothers' milk samples collected in October 2006 and four infant formula samples produced by Korean manufacturers were determined. CLA detected from both mothers' milk and infant formula samples was only cis-9, trans-11 CLA isomer. The amount of cis-9, trans-11 CLA in Korean mothers' milk (100 mL) ranged from 4.32 to 10.12 mg ($6.27{\pm}0.28\;mg$). Infant formula (13 g), which is the manufacturers' recommended amount to make up 100 mL with water, contained cis-9, trans-11 CLA isomer in amounts ranging from 1.61 to 2.97 mg ($2.27{\pm}0.31\;mg$).
The concentrations of conjugated linoleic acid (CLA) in twelve Korean mothers' milk samples collected in October 2006 and four infant formula samples produced by Korean manufacturers were determined. CLA detected from both mothers' milk and infant formula samples was only cis-9, trans-11 CLA isomer. The amount of cis-9, trans-11 CLA in Korean mothers' milk (100 mL) ranged from 4.32 to 10.12 mg ($6.27{\pm}0.28\;mg$). Infant formula (13 g), which is the manufacturers' recommended amount to make up 100 mL with water, contained cis-9, trans-11 CLA isomer in amounts ranging from 1.61 to 2.97 mg ($2.27{\pm}0.31\;mg$).
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문제 정의
본 연구에서는 한국인의 모유와 한국의 제조사로부터 제조된 시판 조제분유 중에 함유되어 있는 CLA를 분리하고 그 함량에 관한 연구를 하였다
제안 방법
CLA 외 분리 및 등정: CLA methyl ester를 FID가 장착된 GC로 분리하고 GC retention time을 표준품과 비교한다. 옴, 이를 GC-MS (Finneganmat mass spectrometer; Shimadzu, Japan) 에서 동정하였다.
CLA의 methyl ester 화: GC를 사용하여 CLA를 분리/ 동정하고 정량하기 위해 모유로부터 추출된 지방을 검화시킨 다옴, methyl ester 화 하였다(31). 즉, 추출된 지방 약 25 mg을 test tube에 취하고 내부표준 용액 (undecanoic acid 100 mg/100 mL heptane) 1 mL를 가하였匸}.
Hexane충에 0.47 M Na2SO4 5 m丄를 첨가하여 상충을 분리하고, 분리된 hexane충에 무수 NazSO, 를 사용해서 수분을 제거하고 filter paper로 여과한 다 옴, 여액을 rotary evaporator (EYELA A-36, Japan)로 hexane을 제거하여 CLA 함량을 구하기 위한 지방 시료로 사용하였다
Supelcowax-10 capillary column에서 분리된 CLA methyl ester를 CLA 표준품 methyl ester의 retention time과 비교하고(Fig. 1), 동일 위치에 나타나는 peak의 mass spectrum을 비교하여 동정하였다. 두 시료에 함유된 CLA는 as-9, trans-U CLA로 분리 및 동정 되었다.
모유와 조제분유의 지방을 hexane:isopropanol(3:2, v/v) 을 사용하여 추출한 다 옴, 검화와 m어hyl ester화 과정을 거쳐 CLA m어hyl ester를 GC로 분석하였다. Supelcowax-10 capillary column에서 분리된 CLA methyl ester를 CLA 표준품 methyl ester의 retention time과 비교하고(Fig.
모유 11 rr丄를 Gerber tube에 넣고 C-H2SO4 10 mL, amylacetate 1 mL, 증휴수 2 m丄를 가하여 혼합하고, 65℃에서 15분간 반응시켰다. 이것을 원심분리 (8, 000 tpm, 4 min, 2KC) 하고, 다시 60~ 65℃에서 5분간 반응 시 켜서 Gerber tube에 나타난 눈금으로 총 지방의 함량을 구하였다. 조제분유의 총지방함량은 조제분유를 증류수를 이용해서 13% 용액으로회석한 시료를 Gerber 법으로 축정하였다(29).
지방 추着: 모유는 전처리 없이 그대로 시료로 사용하였고, 조제분유는 증류수를 이용해서 13% 용액으로 회석한후 시료로 사용하여 Jiang 동(30)의 방법으로 추출하였다 시료 10 rr丄를 원심분리 test tube(45 mL volume)에 취하고 여기에 hexane:isopropanol(3:2, v/v) 30 nl丄를 첨가하여 Poly tron (Kinematica, Lucerne, Switzerland) 으로 1분간 주 출하고 원심분리(4, 000 rpm, 5 min, 25。하였다. Hexane충에 0.
대상 데이터
14% BFs/methanDl(125 g BF#L methanol; Sigma- Aldrich, MO, USA), n-heptane(Junsei, Inc., Japan), CLA 표준믈질 tmns-H CLA, trans-10, cis-ll CLA, 衣sTl CLA, and trctns-^, trctns-W CLA; M etry a, LLC, PA, USA) 과 내부표준믈질 Cuu undecanoic acid (99%; Sigma-Aldrich, MO, USA)를 사용하였다. 그 외 사용된 시약은 ACS 급 이상이었다.
모유는 2006년 10월에 경남 진주지 역에서 출산한 20~30 세 산모 12명으로부터 출산 후 2~3일 사이에 채취하였다. 조제분유는 시판제품 4종을 시중에서 구입하였다.
채취하였다. 조제분유는 시판제품 4종을 시중에서 구입하였다.
데이터처리
Finneganmat GC와 analyzer Quadrupole mass filter/]- 장착된 electro impact ionization mode를 사용하였다. Peak의 mass spectrum의 확인은 Wiley, NIH/EPA data base오* 비교하여 동정하였다. 이때 사용된 GC(Agilent Technologies 6890) 조건은 Supel- cowax-10 capillary column(60 mx0.
이론/모형
CLA의 정량: Gas chromatogram 상에서 CLA methyl ester임이 확인된 peak의 면적을 표준품의 peak 면적과 비교하여 내부표준믈질 방법에 따라 정량하였다
이것을 원심분리 (8, 000 tpm, 4 min, 2KC) 하고, 다시 60~ 65℃에서 5분간 반응 시 켜서 Gerber tube에 나타난 눈금으로 총 지방의 함량을 구하였다. 조제분유의 총지방함량은 조제분유를 증류수를 이용해서 13% 용액으로회석한 시료를 Gerber 법으로 축정하였다(29).
성능/효과
4종의 조제분유에 함유된 愁-9, trK-ll CLA 함량은 12.35 ~ 22.82 mg/100 g으로 평균치는 17.45 士 1.24 mg/100 g이었고, 지방에 대한 g-9, 机混$-11 CLA 함량은 0.46 mg/g ~0.85 mg扈으로 그 평 균치 는 0.65±0.02 mg/g이었다(Table 1). 조제분유 중의 衣s-9, 饨汎$-11 CLA 함량은 모유의 26~49%이었다.
5배이었다(33). 또한 버터, ghee, 치즈가 주인 Hare Kii아ma 식사를 하는 Australia인 산모의 모유 중 GLA 함량은 9.7 ~ 12.5 mg/g fat으로 일반식사를 하는 Australia 인 산모의 모유 중 CLA 함량(3.1 ~8.5 n/g fat)에 비해 2~ 3배정도 높았다(2).
조제분유를 제조할 때 formula base로 사용된 지방이 대두로부터 유래 된 것인지 유지방인지에 따라 큰 차이가 있는 것으로 보고되었다. 본 연구에서 분석용으로 사용된 4종의 조제분유는 모두 유지방과 대두유를 혼합하여 사용한 것으로 표기되어 있었으나, 사용량에 대한 정보는 알 수 없었다. 외국의 연구 결과에 의하면 우유로부터 유래 된 지방을 formula base로 사용한 조제분유의 경우 S$-9, trK-ll CLA 함량은 1.
본 연구에서 사용한 조제분유의 사용법에 의해 13 g을믈 100 mL에 타서 급유할 경우 2.27 mg CLA를 섭취하게 될 것이다. Table 1에서와같이 이 조제분유에 함유된 CLA 함량은 모유에 100 mL에 함유된 CLA 함량 6.
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