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문제 정의
- 연구는 미흡한 실정이다. 그래서 본 연구에서는 골쇄보가 피부질환인 원형탈모증의 외용제로 사용된 보고가 있어3) 실험동물을 이용하여 실험적으로 발모효과를 관찰하고자 하였다.
- 본 실험에서는 골쇄보 acetone 추출물(GSB-1)과 acetone 추출물을 EtoAc 분획층 (GSB-2) 과 n-BuOH 분획층(GSB-3) 으로 나누어 추출하여 제모제를 사용하여 제모한 C57BL/6N 생쥐 모델의 피부에 약 3주간 도포한 후 발모의 효과를 육안, 광학 및 면역조직화학기법에 의한 변화를 관찰하여 골쇄보의 발모효과를 실험적으로 입증하고자 시도하였다.
제안 방법
- 8 g을 각각 50 % 에탄올 30mℓ에 녹여 하루에 2회 200 μℓ/1회를 피부에 도포하였다. 1 % minoxidil군은 3 % minoxidil(마이녹실, 현대약품)을 50 % 에탄올에 희석하여 1 % 용액으로 만들어 사용하였고, 대조군은 50 % 에탄올만을 동량 도포하였다.
- 6일째 제모제를 사용하여 털을 완전히 제거한 날을 실험 1 일째로 정하여 피부에서 일어나는 발모와 관련된 특징들을 16일째까지 관찰하면서 디지털카메라를 이용하여 3일, 10일, 14, 16일째에 촬영하였고 더욱 세밀한 관찰을 위하여 hand scope(AT교역, X 50)를 이용하여 3일, 10일, 14일 및 16일째에 모낭이 형성된 부위와 발모부위를 촬영하였다.
- formalin 용액으로 고정하였다. 고정후 일반적인 방법에 의하여 수세, 탈수과정을 거쳐 paraffin으로 포매하며, 포매후 7 ㎛의 절편을 제작하여 H&E 염색을 시행하여 1000 ㎛당 발생중인 hair follicle의 수, 피부두께 및 조직의 변화를 관찰하였고, 비만세포 수의 변화를 관찰하기 위하여 toluidine blue 염색을 시행하였다. 또한 피부 조직내 여러가지 neuropeptide와 cytokine 을 관찰하기 위하여 면역 조직화학적 염색법을 이용하였다.
- 골쇄보 acetone 추출물과 여러가지 분획물을 이용하여 제모제를 사용하여 제모한 C57BL/6N 생쥐의 피부에 약 3주간 도포한 후 발모효과를 육안, 광학, 면역조직화학적 기법에 의하여관찰한 결과는 다음과 같다.
- 골쇄보를 acetone으로 추출한 추출물(GSB-1)을 도포한 군과, 이 추출물을 다시 EtoAc로 분획한 층(GSB-2)과 n-BuOH로 분획한 층(GSB-3)으로 나누어 제모제를 사용하여 제모한 C57BL/6N 생쥐 모델의 피부에 약 3주간 도포한 후 발모의 효과를 육안, 광학, 면역조직화학기법에 의하여 관찰한 바 다음과 같은 결가를얻었다.
- 피부에 도포하였다. 그 후 6일째에 제모제(비키로크림, 태극약품)를 이용하여 각군의 등쪽 피부에 도포하여 털을 완전히제거한 후, 흐르는 물로 남은 제모제를 수세하였다. 피부에 도포하는 방법은 오전과 오후에 1회씩 피부에 도포하였고 30초정도손으로 문질러 흡수를 촉진시켰다.
- 1 M PB 수세과정을 거친 후 peroxidase가 표지된 ABC 용액에 담가 실온에서 1시간 가량 반응시켰다. 그 후 다시 0.1 M PB로 15분간 2회 수세하고 나서 30 mg의 33 diaminobenzidine를 150 ml의 0.1 M PB에 녹인 용액에서 5분간반응시킨 후 과산화수소를 0.005 % 되게 첨가하여 갈색의 발색반응을 약 5분간 시행하였다. 반응이 끝난 조직들은 다시 0.
- 3 % Triton X-100 (Sigma) 이 섞여 있는 것을 사용하였다. 그 후 조직절편들은 실온에서 15 분간 2회 0.1 M PB로 세척하며 Hsu 등23) 의 방법에 따라 2차 항체인 1:200으로 희석된 biotinylated anti-rabbit IgG(Vector Laboratories, Inc.)에 실온에서 1시간 가량 반응시켰다 다시 15 분간 2회 0.1 M PB 수세과정을 거친 후 peroxidase가 표지된 ABC 용액에 담가 실온에서 1시간 가량 반응시켰다. 그 후 다시 0.
- 1M phosphate buffer(PB)로 세척한 후조직 절편내에 내재되어 있을 과산화효소를 제거하기 위하여 0.3 % HQ?로 처리하고 1 % normal goat serum과 0.3 % triton X.100으로 1시간 처리하여 비특이성 항원의 반응을 제거하였다. 털의 성장과 관련된 여러가지 cytokine을 관찰하기 위히여 rabbit polyclonal antibody(Santa cruz)인 vascular endothelial growth factor(VEGF), protein kinase C-a(PKC-a), 그리고 stem(mast) cell factor(SCF)를 각각 l;100, 1:50, 1:50으로 희석한 1 차항체를 조직절편에 떨어뜨려 실온에서 12시간 동안 반응시켰다.
- 005 % 되게 첨가하여 갈색의 발색반응을 약 5분간 시행하였다. 반응이 끝난 조직들은 다시 0.1 M PB로 여러차례 수세하고 hematoxylin으로 20초간 대조염색한후 통상적인 방법에 따라 탈수와 투명화를 거친 후 permount로 봉입하여 광학현미경으로 관찰하였다 .
- 실험 10일째와 14일째 비만세포의 숫적 변화를 관찰하기 위하여 toluidin blue 염색을 시행하였다. 10일째 대조군의 비만세포의 수(전체적인 비만세포/탈과립 된 비만세포의 수)는 11.
- 실험군은 5개의 군으로 설정하여 대조군, 1 % minoxidil 투여군, 골쇄보 acetone 추출물 (GSB-1) 과 acetone 추출물을 EtoAc(GSB-2)와 n-BuOH(GSB-3)로 분획한 추출물을 도포한 군으로 나누어 실험에 이용하였다.
- 실험군은 acetone 추출물은 시료 8.8 g을, EtoAc 분획층은시료 4.66 g을, n-BuOH분획층은 시료 8.8 g을 각각 50 % 에탄올 30mℓ에 녹여 하루에 2회 200 μℓ/1회를 피부에 도포하였다. 1 % minoxidil군은 3 % minoxidil(마이녹실, 현대약품)을 50 % 에탄올에 희석하여 1 % 용액으로 만들어 사용하였고, 대조군은 50 % 에탄올만을 동량 도포하였다.
- 실험동물들은 털을 완전히 제거하기 전에 clipper를 이용하여 털을 깍은 후 5일동안 각각의 시료들을 이용하여 하루 2회씩미리 피부에 도포하였다. 그 후 6일째에 제모제(비키로크림, 태극약품)를 이용하여 각군의 등쪽 피부에 도포하여 털을 완전히제거한 후, 흐르는 물로 남은 제모제를 수세하였다.
- 탈발(脫髮)의 치법은 내치법과 외치법으로 나누어 치료하는데 그 중 외치법으로 除夠는 골쇄보, 강잠, 홍화 및 백지를 같은비율로 처방한 생발정(生髮酊)을 탈발된 곳에 도포하여 사용하였고, 李35)는 白蘇皮 30 g, 鮮側柏葉 30 g, 골쇄보(毛薑) 15 g, 生山 楂 15 g, 白芷 10 g을 95 % 酒精 500 皿에 1주일간 담궈 그 액을취하여 1일 1-2회 환부에 바른다고 하였다.
- 100으로 1시간 처리하여 비특이성 항원의 반응을 제거하였다. 털의 성장과 관련된 여러가지 cytokine을 관찰하기 위히여 rabbit polyclonal antibody(Santa cruz)인 vascular endothelial growth factor(VEGF), protein kinase C-a(PKC-a), 그리고 stem(mast) cell factor(SCF)를 각각 l;100, 1:50, 1:50으로 희석한 1 차항체를 조직절편에 떨어뜨려 실온에서 12시간 동안 반응시켰다. 이때 1차 항체의 희석은 0.
- 피부내 모낭의 수와 비만세포의 숫적 변화를 조직학적으로관찰하기 위하여 약물 도포 후 10일째에 3마리씩 희생시켜 등쪽피부의 발모된 부위를 척추선에 평행하게 절개하여 normal buffered formalin 용액으로 고정하였다. 고정후 일반적인 방법에 의하여 수세, 탈수과정을 거쳐 paraffin으로 포매하며, 포매후 7 ㎛의 절편을 제작하여 H&E 염색을 시행하여 1000 ㎛당 발생중인 hair follicle의 수, 피부두께 및 조직의 변화를 관찰하였고, 비만세포 수의 변화를 관찰하기 위하여 toluidine blue 염색을 시행하였다.
- 그 후 6일째에 제모제(비키로크림, 태극약품)를 이용하여 각군의 등쪽 피부에 도포하여 털을 완전히제거한 후, 흐르는 물로 남은 제모제를 수세하였다. 피부에 도포하는 방법은 오전과 오후에 1회씩 피부에 도포하였고 30초정도손으로 문질러 흡수를 촉진시켰다.
- 피부조직내 neuropeptide를 관찰하기 위하여 substance-P를이용하여 면역조직화학 염색을 시행하였다. 면역조직화학 염색을 위해 박절한 조직을 0.
대상 데이터
- 28 g을 얻었다. 건조한 골쇄보 acetone 추출물 32.14 g을 EtoAc(ethyl acetate)와 n-BuOH로 용매 분획하여 동결건조기를 사용하여 건조시켜 골쇄보 EtoAc분획층 8.9 g을 회수하였고, 골쇄보 n-BuOH 분획층 18.4 g을 회수하여 본 실험에 사용하였다.
- 본 실험에 사용한 약재는 시중에서 구입한 중국산 약재로서 골쇄보 acetone 추출물은 약재 2 kg을 acetone 100 % 용매에 넣어 실온에서 1주일간 방치한 후에 여과과정을 거친 여액을 감압농축기로 농축하였다. 농축액을 동결건조기를 사용하여 건조한 후 시료 64.
- 실험동물은 체중 25 g 내외의 웅성 6주령 C57BL/6N 정상 생쥐 40마리를 이용하였으며 각 군에 8마리씩 배정하였다. 실험의 정확성을 위하여 모두 출생날짜가 유사한 것을 이용하였다.
이론/모형
- 고정후 일반적인 방법에 의하여 수세, 탈수과정을 거쳐 paraffin으로 포매하며, 포매후 7 ㎛의 절편을 제작하여 H&E 염색을 시행하여 1000 ㎛당 발생중인 hair follicle의 수, 피부두께 및 조직의 변화를 관찰하였고, 비만세포 수의 변화를 관찰하기 위하여 toluidine blue 염색을 시행하였다. 또한 피부 조직내 여러가지 neuropeptide와 cytokine 을 관찰하기 위하여 면역 조직화학적 염색법을 이용하였다.
성능/효과
- 2 ㎛ 이었다. GSB-1 군에서 성숙한 모낭의 수는 7.5±2.3개 이었으며 여러 단계의 발생중인 성숙한 모낭들이 피하층에서 관찰되었고 피부를 뚫고 발모가 시작됨을 알.수 있었다.
- 강한 면역반응을 나타내었다. GSB-1 군에서는 전체적으로 미약한 반응을 보였으나 GSB~2군에서는 bulge와 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었고, GSB-3군에서는 표피, bulge 및 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었다.
- PKC- a에 대한 면역반응은 GSBT군에서는 bulge와 내, 외모근초에서 강한 면역반응을 나타내었으나 GS&2군과 GSB3군에서는 표피, bulge 및 생장기 중의 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었다 Stem ceU factor에 대한 면역반응은 GS&1 군과 GSB 2군에 서는 bulge와 내, 외모근초에서 중등도 면역반응을 나타내었으나, GSB-3군에서는 표피, bulge 및 생장기 중의 내, 외모근초에서 강한면역반응을 나타내었다. 이러한 실험결과로 골쇄보 acetone 추출물과 EtoAc 분획층은 제모한 생쥐의 털성장을 촉진시키는 양모 효과가 있음을 실험적으로 입증한 결과라고 사료되었다.
- PKC-ci에 대한 면역반응은 대조군은 표피, bulge, stem cell, 입모근 및 진피의 유두에서 강한 면역반응을 나타내었고, 1 % minoxidil을 도포한 실험대조군에서는 표피/ stem cell, 생장기중의 모간 주위의 내, 외모근초 및 모구(hair bulb)에서 강한 면역반응을 나타내었다. GSB-1군은 bulge와 내, 외모근초에서 강한면역반응을 나타내었으나 GSB-2군과 3군은 표피, bulge 및 생장기 중의 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었다.
- SCF에 대한 면역반응은 대조군은 표피, bulge, stem cell 및 진피의 유두에서 미약한 면역반응을 나타내었고, 1 % minoxidil 을 도포한 실험대조군에서는 생장기 말기의 외모근초에서 강한면역반응을 나타내었고, 그 외의 부위의 표피, stem cell, 생장기 중의 모간 주위의 내, 외모근초 및 모구(hair bulb)에서는 중등도의 면역반응을 나타내었다. GSB-1 군과 2군에서는 bulge와 내' 외 모근 초에서 중등도의 면역 반응을 나타내었으나) GSB-3 군에서는 표피, bulge 및 생장기 중의 내, 외모근초에서 강한 면역반응을 나타내었다.
- 골쇄보 추출물 (GSB-1) 과 골쇄보 분획물인 GSB-2와 GSB-3를생쥐피부에 도포한 후 실험 1일째부터 16일째까지 육안 적으로 관찰한 바 50 % 에탄올 용액을 피부에 도포한 대조군의 실험 16 일째에는 8마리 가운데 3마리에서 반점형태로 극히 일부분에서만 발모현상을 관찰할 수 있었으며, 나머지 5마리에서는 등 쪽의 피부 일부에서만 회색 반점을 띄었으나, 육안적인 발모현상은 관찰 할 수 없었다. 제모된 목과 등부위 피부영역 전체에 완전히 발모 된 경우는 1예도 관찰할 수 없었으며, 약 5 %의 발모율을 나타내었다.
- 골쇄보 추출물(GSB-1)과 골쇄보 분획물인 GSB-2와 GSB-3를생쥐피부에 도포한 후 실험 첫날부터 16일째까지 육안적으로 관찰한 바 50% 에탄올 용액을 피부에 도포한 대조군의 14일째에는 8마리 가운데 2마리에서 반점형태로 일부분만 발모가 시작되었으며 6마리에서는 육안적인 변화를 관찰할 수 없었다(Fig. la, lb). 1 % minoxidil을 피부에 도포한 실험대조군의 14일째에는 8마리 가운데 5마리에서 전체적으로 발모가 일어났으며 나머지 3마리에서는 일부분을 제외하고는 모두 발모현상을 관찰할 수 있었다.
- 골쇄보 추출물(GSB-1)파 골쇄보 분획물인 GSB-2와 GSB-3를생쥐피부에 도포한 후 육안적으로 관찰한 바 50 % 에탄올 용액을 피부에 도포한 대조군의 실험 1일째부터 10일째까지는 육안적인 발모현상은 관찰할 수 없었고, 11일째부터 목과 등 부위의 피부가 회색의 반점형태로 미약하게 관찰된 경우가 8마리 가운데 4마리에서 관찰되었고, 나머지 4마리에서는 목과 등의 피부에서 육안적인 변화를 관찰할 수 없었다. 1 % Mnoxidil을 피부에도포한 실험대조군의 7일째부터 8마리 가운데 1마리에서 등의 피부가 회색으로 변하기 시작했으며 나머지 7마리에서는 육안적인 변화는 관찰할 수 없었다.
- 본 실험에서 GSB-1, GSB-2 및 GSB-3을 도포한 후 실험 1일째부터 16일째까지 육안적으로 관찰한 바 GSB-1 군의 실험 16일째에는 등 전체에 발모 된 경우가 8마리 전체에서 관찰되었으며, 제모된 목과 등부위 피부영역의 약 98 %가 발모되었고, GSB-2군의 실험 16일째에도 8마리 가운데 7마리에서 전체적으로 발모가 일어나 제모된 목과 등부위 피부영역의 약 96 %가 발모되었다. 본 실험의 실험 14일째에 광학현미경적으로 관찰한 바 GSB-1 군의 성숙한 모낭의 수는 7.
- 본 실험의 결과도 골쇄보 추출물을 도포한 후 活血化瘀기능과 혈지를 낮추어주는 기능에 의하여 혈액의 점도를 낮추어 맑게 함으로써 혈액순환을 개선하여 모발에 영양공급과 생장작용을 촉진시킬 것으로 사료되었다.
- 발모되었다. 본 실험의 실험 14일째에 광학현미경적으로 관찰한 바 GSB-1 군의 성숙한 모낭의 수는 7.5±2.3개 이었으며 여러 단계의 발생 중인 성숙한 모낭들이 피하층에서 관찰되었고 피부를 뚫고 발모가 시작됨을 알 수 있었다. 피부의 평균두께는 654+24.
- 본 실험의 혈관내피세포 성장인자에 대한 면역반응은 대조군에서는 표피, bulge, stem cell, 입모근 및 진피의 유두에서 강한 면역반응을 나타내었으나 GSB-1 군에서는 전체적으로 미약한 반응을 보였으나 GSB-2군에서는 bulge와 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었고, GSB-3군에서는 표포], bulge 및 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었다. 이상의 실험 결과로 VEGF는 생장기 초기의 대조군에서는 강하게 나타났으나, 골쇄보 추출물과 분획층에서는 대조군에 비하여 생장기 중기나 말기로 이행하는 단계이므로 VEGF에 대한 면역반응은 미약하게 염색 된 것으로 사료되었다.
- 이러한 cytokine의 증가는 일부 피부 melanogenesis의 조절을 통하여 모낭의 성장을 촉진시키며 털의 성장을 유지시킨다고 하였고, 주로 털의 외모근초의 각질세포에서 과발현 된다고 하였다50). 본실험의 PKCv에 대한 면역반응은 대조군에서는 표피, bulge, stem cell, 입모근 및 진피의 유두에서 강한 면역반응을 나타내었으나 GSB-1 군에서는 bulge와 내, 외모근초에서 강한 면역반응을, GSB-2군가 3군에서는 표피, bulge 및 생장기 중의 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었다. 본 실험에서 대조군에 비하여 실험군에서 면역반응이 약하게 염색된 것은 대조군에 비하여 모낭의 성장단계가 빠르기 때문인 것으로 사료되었다.
- 실험 10일째에 대조군(50 % 에탄올), 실험대조군(1 % minoxidil), GSB-1 군(acetone 추출물), GSB-2(EtoAc 분획층) 및 GSB-3(n-BuOH 분획층) 군에서 가장 많이 발모된 개체 2마리의조직절편을 제작하여 H&E 염색을 시행하여 관찰한 바 대조군에서의 성숙한 모낭의 수는 관찰할 수 없었으며 모낭들은 진피층에서 직경 1-2 ㎛정도의 작은 모낭이 진피층에서 형성하기 시작했으며, 아직 피하층까지는 자라지 못하였다. 피부의 평균 두께는 252.
- 실험 14일째에 GSB-1 군의 성숙한 모낭의 수는 7.5±2.3개 이었으며 여러 단계의 발생중인 성숙한 모낭들이 피하층에서 관찰되었고 피부를 뚫고 발모가 시작됨을 알 수 있었다. 피부의 평균두께는 654+24.
- 실험 14일째에 골쇄보 acetone 추출물 도포군(GSB-1)에서는등 전체에 발모가 된 경우가 8마리 가운데 5마리에서 관찰되었고, 제모된 목과 등부위 피부영역의 약 80 % 정도 발모현상이 관찰되었다. 골쇄보 EtoAc 분획층 도포군(GSB-2)에서는 8마리 가운데 7마리에서 전체적으로 발모가 일어났으며, 제모된 목과 등부위 피부영역의 약 95 %가 발모되었다.
- PKC- a에 대한 면역반응은 GSBT군에서는 bulge와 내, 외모근초에서 강한 면역반응을 나타내었으나 GS&2군과 GSB3군에서는 표피, bulge 및 생장기 중의 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었다 Stem ceU factor에 대한 면역반응은 GS&1 군과 GSB 2군에 서는 bulge와 내, 외모근초에서 중등도 면역반응을 나타내었으나, GSB-3군에서는 표피, bulge 및 생장기 중의 내, 외모근초에서 강한면역반응을 나타내었다. 이러한 실험결과로 골쇄보 acetone 추출물과 EtoAc 분획층은 제모한 생쥐의 털성장을 촉진시키는 양모 효과가 있음을 실험적으로 입증한 결과라고 사료되었다.
- 반응을 한다. 이러한 인자들은 생장기 모낭에서 강한 면역반응을 나타내며, 주로 색소침작부위나 진피유두에 강한 양성반응을 나타낸다 하였고, 털의 성장주기에 의존적으로 강하게 반응을한다고 하였다% scF에 대한 면역반응은 대조군에서는 표피, bulge, stem cell 및 진피의 유두에서 미약한 면역반응을 나타내었고/ GSB-1 군과 2군에서는 bulge와 내, 외모근초에서 중등도의면역반응을 나타내었으나, GSB-3군에서는 표피, bulge 및 생장기중의 내, 외모근초에서 강한 면역반응을 나타내었다. 이상의 결과는 실험군인 골쇄보 추출물과 분획물이 대조군에 비하여 모발의성장단계가 빠르므로 강한 면역반응을 나타낸 것으로 사료되었다.
- 이러한 인자들은 생장기 모낭에서 강한 면역반응을 나타내며, 주로 색소침작부위나 진피유두에 강한 양성반응을 나타낸다 하였고, 털의 성장주기에 의존적으로 강하게 반응을한다고 하였다% scF에 대한 면역반응은 대조군에서는 표피, bulge, stem cell 및 진피의 유두에서 미약한 면역반응을 나타내었고/ GSB-1 군과 2군에서는 bulge와 내, 외모근초에서 중등도의면역반응을 나타내었으나, GSB-3군에서는 표피, bulge 및 생장기중의 내, 외모근초에서 강한 면역반응을 나타내었다. 이상의 결과는 실험군인 골쇄보 추출물과 분획물이 대조군에 비하여 모발의성장단계가 빠르므로 강한 면역반응을 나타낸 것으로 사료되었다.
- 이상의 결과로 골쇄보 추출물과 분획물의 도포에 의하여 혈지를 낮추는 기능에 의한 혈액순환의 개선에 의하여 모발의 생장을 촉진할 것으로 사료되었고, 생장기에서 퇴행기로의 빠른 모낭의 성장에 의하여 대조군과 면역반응이 상이하게 관찰된다고 사료되었다
- 중등도의 면역반응을 나타내었다. 이상의 실험 결과로 VEGF는 생장기 초기의 대조군에서는 강하게 나타났으나, 골쇄보 추출물과 분획층에서는 대조군에 비하여 생장기 중기나 말기로 이행하는 단계이므로 VEGF에 대한 면역반응은 미약하게 염색 된 것으로 사료되었다.
- 3 ㎛이었다. 이상의 실험 결과로 모든 골쇄보 추출물과 분획층에서 대조군에 비하여 모낭의 성장이 촉진되었음을 알 수 있었다.
- 할 수 없었다. 제모된 목과 등부위 피부영역 전체에 완전히 발모 된 경우는 1예도 관찰할 수 없었으며, 약 5 %의 발모율을 나타내었다. 1 % minoxidil# 피부에 도포한 실험대조군의 실험 16 일째에는 8마리 전체에서 제모된 목과 등부위 피부영역 전체에서 100 %의 발모현상을 관찰할 수 있었다.
- 혈관내피세포 성장인자에 대한 면역반응은 GSB-1군에서는 전체적으로 미약한 반응을 보였으나 GS&2군에서는 bulge와 내, 외 모근 초에서 중등도의 면역반응을 나타내었고, GS03군에서는 표피, bulge 및 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었다. PKC- a에 대한 면역반응은 GSBT군에서는 bulge와 내, 외모근초에서 강한 면역반응을 나타내었으나 GS&2군과 GSB3군에서는 표피, bulge 및 생장기 중의 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었다 Stem ceU factor에 대한 면역반응은 GS&1 군과 GSB 2군에 서는 bulge와 내, 외모근초에서 중등도 면역반응을 나타내었으나, GSB-3군에서는 표피, bulge 및 생장기 중의 내, 외모근초에서 강한면역반응을 나타내었다.
- 혈관내피세포 성장인자에 대한 면역반응은 대조군에서는 표피, bulge, stem cell, 입모근 및 진피의 유두에서 강한 면역반응을 나타내었고, 1 % minoxidil을 도포한 실험대조군에서는 표피, stem cell, 생장기중의 모간 주위의 내, 외모근초 및 모구(hair buib)에서 강한 면역반응을 나타내었다. GSB-1 군에서는 전체적으로 미약한 반응을 보였으나 GSB~2군에서는 bulge와 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었고, GSB-3군에서는 표피, bulge 및 내, 외모근초에서 중등도의 면역반응을 나타내었다.
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