[논문]새로운 항균활성을 보이는 토양 분리 세균 Paenibacillus polymyxa DY1의 분류와 동정

신은석; 이희무; 이복권; 김성훈; 권순일; 유관희

새로운 항균활성을 보이는 토양 분리 세균 Paenibacillus polymyxa DY1의 분류와 동정
Identification and Characterization of Paenibacillus polymyxa DY1 Isolated from Korean Soil with New Antibacterial Activity 원문보기

Korean journal of microbiology = 미생물학회지, v.43 no.1, 2007년, pp.47 - 53

신은석 (안동대학교 생명과학과) , 이희무 (안동대학교 생명과학과) , 이복권 (질병관리본부 국립보건연구원 장내세균팀) , 김성훈 (질병관리본부 국립보건연구원 장내세균팀) , 권순일 (대구보건대학 임상병리과) , 유관희 (상지대학교 생명과학과)

초록
AI-Helper

항생제 내성 세균의 출현으로 새로운 항생물질의 개발에 대한 필요성이 대두되고 있다. 본 연구에서는 새로운 항균활성물질을 개발하고자 강원도 대암산 용늪 토양으로부터 새로운 항균물질을 생산하는 균을 분리하였고, 이를 동정하였다. 생화학적인 시험과 16S ribosomal DNA 염기서열 분석결과 Paenibacillus polymyxa균과 가장 높은 상동성을 보여주었다. 지방산 조성의 분석에서도 이 균주는 Paenibacillus polymyxa와 가장 가까웠다. 이 균주가 생산하는 항균물질은 1군 법정 전염병을 일으키는 Samonella enterica serovar Typhi와 Shigella dysentery, enterohaemorrhagic Eschelichia coli, 그리고 Vibrio cholera등의 병원성 세균에 성장억제 효과를 나타냈으며, 다른 일반 식중독 장내세균에서도 성장억제 효과를 나타냈다. 이 균주가 생산하는 항균활성 물질은 과거에 보고된 것과 다른 새로운 것으로 보이며, 광범위한 항균활성으로 인하여 새로운 항생물질 개발 후보로 많은 잠재력을 가진 것으로 평가된다.

Abstract ▼ AI-Helper

The DY1 strain of Gram-positive, rod-shaped bacteria was isolated from the soil sample collected from Daeam mountain, Korea. The culture filtrate of DY1 strain showed a broad spectrum of antimicrobial activity on various pathogenic and food poisoning enteric bacterial species tested in vitro. It showed significant growth-inhibitory effect on Salmonella enterica sp., Shigella sp., pathogenic Escherichia coli, Vibrio cholerae, Vibrio parahemolyticus, and Yersinia enterocolitica. For the identification of the DY1 strain, morphological, biochemical and molecular phylogenetic approaches were performed. The DY1 strain was found to be a member of the genus Paenibacillus on the basis of morphological and biochemical analyses. The 16S rDNA of DY1 showed the highest pairwise identity with Paenibacillus polymyxa with 99.79% (1,413 bp/1,416 bp). The antimicrobial entity from DY1 looked different from preciously reported ones and seems to have a great potential to be further studied as a candidate of new antibiotics to control multi-drug resistant pathogens.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

본 연구에서는 각종 병원균에 대하여 항균활성을 나타내는 새로운 세균을 토양으로부터 분리하여, 그 항균활성의 기초적인 범위를 조사하고, 분리된 세균에 대하여 형태학적, 생화학적, 분자생물학적인 동정을 하고자 하였다.

제안 방법

PCRe 먼저 95。。에서 5분간 변성시킨 후, 95℃ 30 sec, 55℃ 30 sec, 72℃ 2 min의열반응주기를 30 cycles 진행하였으며, 최종적으로 72℃(2에서 3분간 연장반응 마친 후 반응물을 4℃ 에 보관하였다. PCR 반응물을 DNA purification kit (Qiagen Inc., Valencia, CA, USA)를 이용하여 순수 분리한 후, automatic sequencer를 통해 염기서열을 결정하였다. 미국 NIH 산하 NCBI 홈페이지에서 제공하는 nucleotide blast search program을 이용하여 근연종에 대한 조사를 하였다(http://www.
또한 API 50 CHB kit (Bio Merieux, France)를 사용하여 50여 종의 당 이용도를 조사하였다(27). 동정을 위하여 Bergy's Manual of Systematic Bacteriology (9)와 The Genus Bacillus (13)를 참고하였다.
멸균된 disk에 진공건조기를 이용하여 8배 농축한 배양 여과액 60μ1를 disk에 적신 후 건조하여 시험균주가 도말된 평판배지에 떨어뜨려 30℃에서 18-24시간 배양시킨 후 억제대의 크기를 측정하였다.
, Valencia, CA, USA)를 이용하여 순수 분리한 후, automatic sequencer를 통해 염기서열을 결정하였다. 미국 NIH 산하 NCBI 홈페이지에서 제공하는 nucleotide blast search program을 이용하여 근연종에 대한 조사를 하였다(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST).
병원성세균의 생장을 억제하는 물질을 생산하는 균의 선발 과정에서 DY1 부터 DY11 균주까지 총 II종류의 균주를 분리하였다(자료 미제시). 분리한 11균주 중 Escherichia coli ATCC 25922 균주에 가장 큰 성장억제효과를 나타내는 DY1 균주를 최종적으로 연구대상 균주로 선발하였다.
5 ml Effendorf tube에 넣고, methanol과 NaOH가 들어 있는 용액을 1 ml 넣은 다음 KXTC에서 가열하여 지방산을 가수분해하여 얼음에서 식힌 후, methanol과 HC₁ 이 들어있는 용액 2 ml를 첨가하고, 80℃에서 10분간 정치하여 fatty acid methyl ester (FAME)화 시켰다. 상온에서 식힌 n-hexane 추출물 1.25 ml 을 가하여 혼합하고, 원심분리하여 윗부분의 n-hexane 층만을 분리하여 질소가스로 농축시킨 후, 농축용액을 NaOH와 methanol 이 들어있는 용액을 이용하여 한번 세척한 다음 GC vial에 옮겨서 분석하였다. 지방산 분석은 GCFID (Hewlett-Packard 6890, USA)으로 Gas liquid chromatography (GLC)를 사용하였고, 분석은 Sherlock software (Version 4.
선발된 균주의 16S rDNA 유전자를 Polymerase Chain Reaction (PCR)으로 부분적으로 증폭시켰다. 16S rDNA 증폭용 Universal primer인 16S Forward primer; 5'-AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG-3'와 16S Reverse primer; 5'-GTT TAC CTT GTT ACG ACT T-3, 를 사용하였다.
선발된 항균활성물질 생산 균주를 동정하기 위하여 선택배지에서 생장한 균주를 NA 배지에서 24시간 배양한 후 그람염색을 하여 균의 크기 및 모양, parasporal crystal의 형성, hemolysis, motility, catalase 및 oxidase test, VP test, glucose로부터의 acid 생성, P-galactosidase 생성, 인돌 생성능력 등을 조사하였다. 또한 API 50 CHB kit (Bio Merieux, France)를 사용하여 50여 종의 당 이용도를 조사하였다(27).
22 |im 필터를 이용하여 여과시켰다. 항균활성균의 선별은 Escherichia coli ATCC 25922와 Staphylococcus aureus ATCC 29213 균을 Brain Heart Infusion (BHI) 배지에서 18시간 배양한 후, 배양된 균을 멸균된 면봉을 이용하여 Nutrient Agar 평판배지의 전표면에 골고루 접종한 다음 표면을 건조시키고, 그 위에 여과된 분리균주 배양용액 25 μ1를 떨어뜨려 18-24시간 배양시킨 후 항균력을 확인하였다(Fig. 1).

대상 데이터

(PCR)으로 부분적으로 증폭시켰다. 16S rDNA 증폭용 Universal primer인 16S Forward primer; 5'-AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG-3'와 16S Reverse primer; 5'-GTT TAC CTT GTT ACG ACT T-3, 를 사용하였다. PCRe 먼저 95。。에서 5분간 변성시킨 후, 95℃ 30 sec, 55℃ 30 sec, 72℃ 2 min의열반응주기를 30 cycles 진행하였으며, 최종적으로 72℃(2에서 3분간 연장반응 마친 후 반응물을 4℃ 에 보관하였다.
coli (EHEC), Salmonella Typhi, Shigella sonnei, Shigella flexneri, Shigella dysenteriae, Shigella boydii, Vibrio cholerae7\ 사용되어 총 18종의 균주가 이 연구에 사용되었다(Table 1). 보존배지로써 Nutrient Agar 배지가 사용되었고, 항균활성을 위한 선택배지로써 4 |jg/ml penicillin G, 5 Hg/ml polymyxin B sulfate가 첨가된 항생제 배지가 사용되었다. 증균배지로써 Nutrient Broth, Brain Heart Infusion, MuellerHinton Broth (Difco, Maryland, USA) 배지가 사용되었으며, 식중독균 증균배지로써 TSA (Difco, Maryland, USA) 배지가 사용되었다.
본 연구에서는 대암산 토양으로부터 항균활성물질을 생산하는 균주들을 분리하고, 그 중 가장 항균활성이 높은 DY1 균주를 선발하였다. 이 DY1 균에 대한 독립적인 동정작업인 생화학적 시험, 지방산 분석 시험, 16S rDNA 염기서열 분석에서 모두 최근 연종으로 Paenibacillus polymyxd7\ 도줄되는 결과가 나왔다.
Paenibacillus 속은 발효된 소세지, olive-mill 폐수, 부엽토, 토양 등에서도 분리 및 동정되었다(5, 6, 11, 40). 본 연구에서는 사람의 접근이 거의 없는 1, 300 m 고지에 있는 대암산 용늪의 토양에서 Paenibacillus polymyxa DY1 을 분리하였다. Paenibacillus polymyxa 균주는 다양한 생태적 환경에서 분리되므로 이 세균의 생태적 환경에 대한 조사가 더 이루어져야 될 것으로 판단된다.
미제시). 분리한 11균주 중 Escherichia coli ATCC 25922 균주에 가장 큰 성장억제효과를 나타내는 DY1 균주를 최종적으로 연구대상 균주로 선발하였다. DY1 균주를 배양한 후 원심분리하여 얻은 상증액을 E.
29213 균주가 사용되었다. 식중독 균주로는 Bacillus cereus, Listeria monocytogens, Vibrio parahaemolyticus, Yersinia enterocolitica, Salmonella Typhimurium, enterotoxigenic E. coli (ETEC), enteropathogenic E. coli (EPEC), enteroinvasive E. coli (EIEC)가 사용되었다. 이에 더하여 1군 법정 전염병을 일으키는 병원체로 enterohaemorrhagic E.
coli (EIEC)가 사용되었다. 이에 더하여 1군 법정 전염병을 일으키는 병원체로 enterohaemorrhagic E. coli (EHEC), Salmonella Typhi, Shigella sonnei, Shigella flexneri, Shigella dysenteriae, Shigella boydii, Vibrio cholerae7\ 사용되어 총 18종의 균주가 이 연구에 사용되었다(Table 1). 보존배지로써 Nutrient Agar 배지가 사용되었고, 항균활성을 위한 선택배지로써 4 |jg/ml penicillin G, 5 Hg/ml polymyxin B sulfate가 첨가된 항생제 배지가 사용되었다.
보존배지로써 Nutrient Agar 배지가 사용되었고, 항균활성을 위한 선택배지로써 4 |jg/ml penicillin G, 5 Hg/ml polymyxin B sulfate가 첨가된 항생제 배지가 사용되었다. 증균배지로써 Nutrient Broth, Brain Heart Infusion, MuellerHinton Broth (Difco, Maryland, USA) 배지가 사용되었으며, 식중독균 증균배지로써 TSA (Difco, Maryland, USA) 배지가 사용되었다.
토양에서 분리한 균의 항균활성을 알아보기 위하여 표준 균주로 Escherichia coli ATCC 25922와 Staphylococcus aureus ATCC 29213 균주가 사용되었다. 식중독 균주로는 Bacillus cereus, Listeria monocytogens, Vibrio parahaemolyticus, Yersinia enterocolitica, Salmonella Typhimurium, enterotoxigenic E.

데이터처리

25 ml 을 가하여 혼합하고, 원심분리하여 윗부분의 n-hexane 층만을 분리하여 질소가스로 농축시킨 후, 농축용액을 NaOH와 methanol 이 들어있는 용액을 이용하여 한번 세척한 다음 GC vial에 옮겨서 분석하였다. 지방산 분석은 GCFID (Hewlett-Packard 6890, USA)으로 Gas liquid chromatography (GLC)를 사용하였고, 분석은 Sherlock software (Version 4.5)를 이용하여 분석하였다. Columne capillary column을 사용하였으며, detector는 Flame ionization detector (FID)를 사용하였다.

이론/모형

또한 API 50 CHB kit (Bio Merieux, France)를 사용하여 50여 종의 당 이용도를 조사하였다(27). 동정을 위하여 Bergy's Manual of Systematic Bacteriology (9)와 The Genus Bacillus (13)를 참고하였다.
선발된 균으로부터 얻어진 여과 배양용액을 이용하여 병원성 미생물에 대한 항균활성 시험을 disk diffusion 방법을 사용하여 수행하였다. 멸균된 disk에 진공건조기를 이용하여 8배 농축한 배양 여과액 60μ1를 disk에 적신 후 건조하여 시험균주가 도말된 평판배지에 떨어뜨려 30℃에서 18-24시간 배양시킨 후 억제대의 크기를 측정하였다.

성능/효과

균주에 대하여 항균활성을 보였다(Table 2). 1군 법정 전염병 균인 E. coli (EHEC), Salmonellia Typhi, Shigella sonnei, Shigella flexneri, Shigella dysenteriae, Shigella boydii, Vibrio choterae와 일반 식중독세균인 Vibrio parahaemolyticus, Yersinia enterocolitica, Salmonella Typhimurium, E. coli (ETEC, EPEC, EIEC)에도 성장을 억제시키는 효과를 나타냈다. 그러나 그람양성서〕 균인 Staphylococcus aureus, Bacillus cereus 및 Listeria monocytogens6^ 대해서는 생장억제 효과를 나타내지 않았다 (Table 2).
Sporangium swollen과 parasporal crystal, 혐기성 성장, VP test, gelatin의 가수분해, Egg-yolk lecithinase, indol 생성, 운동성, oxidase, g-galactosidase 반응 등은 모두 음성으로 나타났다(Table 3). API 50 CHB kit를 이용한 실험결과 DY1 균주는 glycerol 등 26종의 당에는 양성반응을 나타냈으나, erithritol 등 23종의 당에는 음성반응을 나타내었다(Table 4). Biomerieux (http:// industry.
API 50 CHB kit를 이용한 실험결과 DY1 균주는 glycerol 등 26종의 당에는 양성반응을 나타냈으나, erithritol 등 23종의 당에는 음성반응을 나타내었다(Table 4). Biomerieux (http:// industry.biomerieux-usa.com/industry/watertesting/api/ apiweb.htm, Hazelwood, MO, USA)회사 홈페이지에서 제공하는 Apiweb (https://apiweb.biomerieux.com) 을 통한 분석 결과 Paenibacillus polymyxa 균에 84%의 상동성을 나타내었다.
분리한 11균주 중 Escherichia coli ATCC 25922 균주에 가장 큰 성장억제효과를 나타내는 DY1 균주를 최종적으로 연구대상 균주로 선발하였다. DY1 균주를 배양한 후 원심분리하여 얻은 상증액을 E. coli, Sligella sonnei 및 Salmonella Typhi가 도말된 평판배지에 떨어뜨린 후 3*>7C 에서 18시간 반응시킨 결과 평판배지 상에서 뚜렷한 생장억제대를 나타내었다 (Fig. 1).
DY1 균주의 DNA를 추출하여 PCR로 16S iDNA를 부분적으로 증폭을 하여 염기서열을 결정한 결과 1, 416 bp에 대한 염기서열 정보를 얻었다(GeneBank Accession number EF 108320). 이 염기서열로 NCBI에서 제공하는 Nucleotide BLAST search를 수행한 결과, DY1 균주는 다수의 Peanibacillus polymyxa 균주 Table 3.
DY1 균주의 배양여과액은 시험된 18종류의 장내세균 중에서 15종류의 균주에 대하여 항균활성을 보였다(Table 2). 1군 법정 전염병 균인 E.
DY1 균주의 형태학적 및 생화학적 특성을 조사한 결과 세포의 크기는 1 μm 이상의 크기를 나타냈으며, catalase 양성반응을 나타냈고, L-arabionose로부터 acid를 생산하는 L-arabinose 양성반응을 나타냈다(Table 3). 그람염색에서는 그람양성 간균으로 나타났으며, 형태는 사슬로 연결된 간균의 형태이었다(자료 미제시).
GenBank에 등록된 다른 균주들의 16S rDNA 염기서열 정보와 DNASTAR 의 MegAHgn 프로그램을 이용하여 Jotun-Hein method (28)로 분석한 결과 염기서열간의 유전적 거리와 molecular phylogenetic tree를 얻을 수 있었다(Fig. 2).
이 염기서열로 NCBI에서 제공하는 Nucleotide BLAST search를 수행한 결과, DY1 균주는 다수의 Peanibacillus polymyxa 균주 Table 3. Morphological and biochemical characteristics of DY1 strain와 높은 pairwise identity 를 보였으며 이 중 Paenibacillus polymyxa strain GBR-603 (Accession number AY 359632)와 99.79% (1, 413/1, 416)로 가장 높은 상동성을 보여 주었다. Fig.
Paenibacillus polymyxa DY1은 시험된 18종 중 15종의 병원 성장 내 세균과 식중독균의 생장을 저해하는 효과를 나타냈다. 과거 Paenibacillus polymyxa 균주가 생산하는 polyxin을 사용하여 Bacillus cereiis를 포함한 17종류의 세균에 대한 항균효과를 측정한 결과, 토양에서 분리된 그람양성균에는 항균력이 있었으나, PseMdomonas와 Salmonella에는 항균력이 없었다(38).
그람염색에서는 그람양성 간균으로 나타났으며, 형태는 사슬로 연결된 간균의 형태이었다(자료 미제시). Sporangium swollen과 parasporal crystal, 혐기성 성장, VP test, gelatin의 가수분해, Egg-yolk lecithinase, indol 생성, 운동성, oxidase, g-galactosidase 반응 등은 모두 음성으로 나타났다(Table 3). API 50 CHB kit를 이용한 실험결과 DY1 균주는 glycerol 등 26종의 당에는 양성반응을 나타냈으나, erithritol 등 23종의 당에는 음성반응을 나타내었다(Table 4).
과거 Paenibacillus polymyxa 균주가 생산하는 polyxin을 사용하여 Bacillus cereiis를 포함한 17종류의 세균에 대한 항균효과를 측정한 결과, 토양에서 분리된 그람양성균에는 항균력이 있었으나, PseMdomonas와 Salmonella에는 항균력이 없었다(38). 그러나 이와 반대로 본 연구에서 분리 및 선발한 Paenibacillus polymyxa DY1 균주가 생산하는 항균물질은 Salmonella를 포함한 그람음성 식중독균 및 1군 법정전염병 균에 강한 항균력을 나타내었으나, 그람양성 세균에는 항균력이 없었다. 따라서 Paenibacillus polymyxa DY1 이 생산하는 항균물질은 종래에 보고된 것과 다른 새로운 항균물질로 판단된다.
이에 더하여 Gram 염색 특성, 형태학적 관찰까지 모두 종합하여볼 때 Paenibacillus polymyxa7\ DY1에 가장 가까운 근연종으로 결론지을 수 있었다. 그리하여 본 연구에서는 DY1 균주를 Paenibacillus polymyxa DY1 으로 명명하였다. Paenibacillus polymyxa는 rDNA를 이용한 분자생물학적 분류방법으로 분류된 3종류의 Bacillus 그룹 중 새로운 genus로 보고된 최초의 토양미생물로(24), 항균활성물질을 생산하는 균주이다.
그러나 이와 반대로 본 연구에서 분리 및 선발한 Paenibacillus polymyxa DY1 균주가 생산하는 항균물질은 Salmonella를 포함한 그람음성 식중독균 및 1군 법정전염병 균에 강한 항균력을 나타내었으나, 그람양성 세균에는 항균력이 없었다. 따라서 Paenibacillus polymyxa DY1 이 생산하는 항균물질은 종래에 보고된 것과 다른 새로운 항균물질로 판단된다. 더욱이 이 물질은 중요한 여러 가지 병원성 장내세균군에 뛰어난 항균활성을 보여(Table 2) 앞으로 새로운 항생물질 후보로 개발될 잠재력이 충분히 가진 것으로 보인다.
이 DY1 균에 대한 독립적인 동정작업인 생화학적 시험, 지방산 분석 시험, 16S rDNA 염기서열 분석에서 모두 최근 연종으로 Paenibacillus polymyxd7\ 도줄되는 결과가 나왔다. 이에 더하여 Gram 염색 특성, 형태학적 관찰까지 모두 종합하여볼 때 Paenibacillus polymyxa7\ DY1에 가장 가까운 근연종으로 결론지을 수 있었다.
이 DY1 균에 대한 독립적인 동정작업인 생화학적 시험, 지방산 분석 시험, 16S rDNA 염기서열 분석에서 모두 최근 연종으로 Paenibacillus polymyxd7\ 도줄되는 결과가 나왔다. 이에 더하여 Gram 염색 특성, 형태학적 관찰까지 모두 종합하여볼 때 Paenibacillus polymyxa7\ DY1에 가장 가까운 근연종으로 결론지을 수 있었다. 그리하여 본 연구에서는 DY1 균주를 Paenibacillus polymyxa DY1 으로 명명하였다.
지방산 분석결과를 이용하여 DY1 균주를 동정한 결과 PaehibacillMS에 속하는 Paenibavillus polymyxae 가장 가까웠다. 이 결과 Paenibacillus polymyxae Paenbacillus terraee] 지방산 분석결과와 유사한 결과를 나타냈다(35).
지방산 조성은 다른 그람양성균들처럼 iso-type과 anteiso-type 으로 구성되어 있었으며, anteiso-type0] 큰 비중을 차지하고 있었다. 지방산 분석결과를 이용하여 DY1 균주를 동정한 결과 PaehibacillMS에 속하는 Paenibavillus polymyxae 가장 가까웠다.
지방산을 주출하여 gas chromatography로 분석한 결과(자료 미제시), 선발된 균주인 DY1 균주의 지방산 조성은 주로 isobranched fatty acid와 anteiso-branched fatty acid로 구성되어 있었으며, Cl5;0 anteiso-fatty acid가 63.55%로 가장 많이 함유되어있었으며, C]6.o iso-fatty acid가 9.3%, C₁₇.o anteiso-fatty acid가 9.25% 함유되어 있었다.

후속연구

Paenibacillus polymyxa DY1 이 생산하는 항균활성물질이 기존의 항생제를 대체하거나 보완할 새로운 후보물질로서의 가치를 가지는 유용성을 판단하기 위해서는 현재 임상적으로 문제가 되고 있는 각종 다제 내성균에 대한 종합적인 항균력 평가가 있어야 할 것이며, 동물실험을 통한 안전성도 평가되어야 할 것이다. 본 연구에서 발견된 새로운 항균활성물질은 새로운 항균 특성과 광범위한 항균능력으로 보아 향후 새로운 항균물질 개발 후보로 좋은 잠재력을 가졌다고 생각된다.
본 연구에서는 사람의 접근이 거의 없는 1, 300 m 고지에 있는 대암산 용늪의 토양에서 Paenibacillus polymyxa DY1 을 분리하였다. Paenibacillus polymyxa 균주는 다양한 생태적 환경에서 분리되므로 이 세균의 생태적 환경에 대한 조사가 더 이루어져야 될 것으로 판단된다.
따라서 Paenibacillus polymyxa DY1 이 생산하는 항균물질은 종래에 보고된 것과 다른 새로운 항균물질로 판단된다. 더욱이 이 물질은 중요한 여러 가지 병원성 장내세균군에 뛰어난 항균활성을 보여(Table 2) 앞으로 새로운 항생물질 후보로 개발될 잠재력이 충분히 가진 것으로 보인다. 최근에 새로운 항균물질을 생산하는 균주를 찾고자 하는 연구가 세계적으로 다각적으로 이루어지고 있다.
것이다. 본 연구에서 발견된 새로운 항균활성물질은 새로운 항균 특성과 광범위한 항균능력으로 보아 향후 새로운 항균물질 개발 후보로 좋은 잠재력을 가졌다고 생각된다.

참고문헌 (40)

권희안. 1996. 내성균주를 겨냥한 최신 항생제 개발 동향. 대한약사회지 7, 97-102
김병섭, 임태헌, 박은우, 조광연. 1995. Benzimidazole계 및 N-phenylcarbamate계 살균제에 다중 저항성인 잿빛곰팡이균의 발생. 한국식물병리학회지 11, 146-150

원문보기 상세보기
김성규, 김준명, 김호훈, 배직현, 정윤섭, 조동택. 2003. 항균제 내성소식 11, 1-2
박윤경, 함경수. 2005. 항균펩타이드의 구조와 활성에관한 상관관계. 미생물과 산업 31, 4-14
Aguilera, M., M. Monteoliva-Sanchez, A. Suarez, V. Guerra, C. Lizama, A. Bennaser, and A. R. Corrnenzana. 2001. Paenibacillus jamilae sp. nov., an exopolysaccharide-producing bacterium able to grow in olive-mill waste water. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 51, 1687-1692

상세보기
Ash, C., F.G. Priest, and M.D. Collins. 1993. Molecular identification of rRNA group 3 bacilli using a PCR probe test. Proposal for the creation of a new genus Paenibacillus. Antonie van Leeuwenhoek 64, 253-260

상세보기
Bush, K., G.A. Jacoby, and A.A. Mederios. 1995. A functional classification scheme for $\beta$ -lactamases and its correlation with molecular structure. Antimicrob. Agents Chemother. 39, 1211-1233

상세보기
Cheong, H.J. 1997. Vancomycin resistant Enterococci. J. Korean Soc. Chemother. 15, 27-43
David, R.B. and R. N. Castenhol. 1973. Bergey's manual systematic bacteriolgy. p. 721. Springer, press 2nd ed. New York, USA
Duffy, B.K. and G. Defago. 1999. Environmental factors modulating antibiotic and siderophore biosynthesis by Pseudomonas fluorescens biocontrol srains. Appl. Environ. Microbiol. 65, 2429-2438
Elo, S., I. Suominen, P. Kampfer, J. Juhanoja, M. Salkinoja-Salsonen, and K. Haahtela. 2001. Paenibacillus borealis sp. nov., a nitrogen fixing species isolated from spruce forest humus in Finland. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 51, 535-545

상세보기
Fleming, A. 2001. On the antibacterial action of cultures of a penicillium, with special reference to their use in the isolation of B. influenzae. Bull. World Health Organ. 79, 780-90

상세보기
Gordon, R.E., W.C. Haynes, and C.H. Pany. 1973. The Genus Bacillus. Agriculture Handbook No. 427. Agriculture Research Service, U. S. Department of Agriculture, Washington D.C., USA
Hiramatsu K., N. Aritaka, H. Hanaki, S. Kawasaki, Y. Hosoda, S. Hori, Y. Fukuchi, and I. Kobayashi. 1997. Dissemination in Japanese hospitals of strains of Staphylococcus au reus heterogeneously resistant to vancomycin. Lancet 350, 1670-1673

상세보기
Hutchinson, C.R. and I. Fujji. 1995. Polyketide synthase gene manipulation; A structure function approach in engineering novel antibiotics. Annu. Rev. Microbiol. 49, 201-238

상세보기
Jacoby, G.A. 1991. More extended spectrum $\beta$ -Iactamases. Antimicrob. Agents Chemother. 35, 1697-1704

상세보기
Kabara, J.J. 1985. Medium chain fatty acids and esters, p. 109. Antimicrobial in Foods. Marcel Dekker Inc., New York, USA
Kajimura, Y. and M. Kaneda. 1997. Fusaricidins B, C and D new depsipeptide antibiotics produced by Bacillus polymyxa KT-8 isolation, structure elucidation and biological activity. Japan J. Antibiotics 50, 220-228
Kimer, S., P.E. Hammer, D.S. Hil, A. Altmann, I. Fischer. L.J. Weislo, M. Lanahan, K.H. van Pee, and J.M. Ligon. 1998. Functions encoded by pyrrolnitrin biosynthetic genes from Pseudomonas fluorescens. J. Bacteriol. 180, 1939-1943

상세보기
Koo, B.S., J.C. Ryu, T.Y. Chung, and K.C. Kim. 1998. Purification and characterization of natural antifungal protein from astragal seeds (Astragalus membranaceus). Kor. J. Appl. Microbiol. Biotechnol. 26, 379-386
Kunin, C.M. 1993. Resistance to antiMicrobiol drugs-a worldwide calamity. Ann. Intern. Med. 118, 557-561

상세보기
Kurusu, K., K. Ohba, T. Arai, and K. Fukushima. 1987. New peptide antibiotics LI-F03, F04, F05, F07 and F08, produced by B. polymyxa. I. Isolation and chatacterization. J. Antibiot. 40, 1506-1514
Leclereq, R., E. Derlot, J. Duval, and P. Courbalin. 1998. Plasmid mediated resistance to vancomyhcin and teicoplanin, N. Engl. J. Med. 319, 157-161

상세보기
Lee, S.H. and Y. S. Lim. 1997. AntiMicrobiol effects of Shizandra chinensis extract against Listeria monocytogenes. Kor. J. Appl. Microbiol. 25, 442-447

상세보기
Lepper, M.H., H.F. Dowling, G.G. Jackson, B. Moulton, and H.W. Spies. 1953. Effect of antibiotic usage in the hospital on the incidence of antibiotic-resistant strains among personnal earring Staphylococci. J. Lab. Clin. Med. 42, 832-839
Lim, T.H., J.M. Lee, T.H. Chang, and B.J. Cha. 2000. Antifungal activity and identification of an Actinomycetes strain isolated from mummified peaches. Kor. J. Appl. Microbiol. Biotechnol. 28, 161-166
Logan, N.A. and R.C. Berkeley. 1984. Identification of Bacillus strains using the API system. J. Gen. Microbiol. 130, 1871-82

상세보기
Lunter, G., I. Miklos, A. Drummond, J.L. Jensen, and J. Hein. 2005. Bayesian estimation of phylogeny and sequence alignment. BMC Bioinformatics 1, 83
Mark, A.D. 1985. Antimicrobial substances from lactic acid bacteria for use as food preservatives. Oregon State University, Corvailis, OR 97331
Okami, Y. and K. Hotta. 1998. Search and discovery of new antibiotics. p. 33-67. In M. Goodfellow (ed.). Actinomycetes in biotechnology. Academic Press. London, UK
Omura, S. and R. Oiwa. 1984. Studies on bioactive compounds from microorganisms. Kitasato Arch. Exp. Med. 57, 75-204

상세보기
Park, Y.J., E.J. Oh, M.K. Kang, B.K. Kim, S.M. Kim, and S.I. Sin. 1997. Emergence of teicoplanin resistant Staphylococci. J. Korean Soc. Chemother. 15, 89-95
Paulus, H. and E. Gray. 1964. The biosynthesis of polymyxin B by growing cultures of B. polymyxa. J. Biol. Chem. 239, 865-871
Pichard, B., J.P. Larue, and D. Thouvenot. 1995. Gavaserin and saltavalin, new peptide antibiotics produced by B. polymyxa. FEMS Microbiol. Lett. 133, 215-218

상세보기
Piuri, M., C. Sanchez-Rivas, and S.M. Ruzai. 1998. A novel antiMicrobiol activity of a Paenibacillus polymyxa strain isolated from regional fermented sausages. Lett. Appl. Microbiol. 27, 9-13

상세보기
Quirk, M. 2002. First VRSA isolate identified in USA. Lancet Infect. Dis. 2, 510
Seol, SY., Y.S. Kim, Y.S. Jeong, J.Y. Oh, H.Y. Kang, and D.C. Moon. 2006. Molecular characterization of antiMicrobiol resistance in Shigella sonnei isolates in Korea. J. Med. Microbiol. 55, 871-877

상세보기
Somaatmadia, D., J.J. Powers, and M.K. Hamdy. 1964. Anthocyanins. VI. Chelation studies on anthocyanins and other related compound. J. Food Sci. 29, 644

상세보기
Waxman, D.J. and J.L. Strominger. 1983. Penicillin-binding proteins and the mechanism of action of $\beta$ -Iactam antibiotics. Annu. Rev. Biochem. 52, 815-829
Yoon, J.H., H.M. Oh, B.D. Yoon, K.H. Kang, and Y.H. Park. 2003. Paenibacillus kribbensis sp. nov. and Paenibacillus terrae sp. nov., bioflocculants for efficient harvesting of algal cells. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 53, 295-301

상세보기

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증