[국내논문]복분자 추출물이 LPS로 유도된 산화적 스트레스와 지질대사에 미치는 영향 The Effect of Rubus coreanum Miquel Against Lipopolysaccharide-induced Oxidative Stress and Lipid Metabolism원문보기
복분자 (Rubus coreamum Miquel)는 우리나라 남부에서 야생하는 과실 생약으로, 식용으로 이용되고 있다. 예로부터 한방과 민간에서 맹안, 태생, 지사, 음위, 강장, 그리고 양모 등에 약재로 이용하고 있다. 뿐만 아니라 예로부터 한방에서 신장기능, 불임증, 음위증, 유정몽설, 강장제로 쓰였으며 혈액과 눈을 밝게 해주며 간을 보호하는 효능을 가지고 있다고 알려져 있다. LPS는 그람양성균의 세포벽을 만드는 물질의 일종으로 NO를 생성시키고 $Ca^{2+}$를 증가시키며 free radicals를 형성하여 간 조직의 막을 파괴하고 간의 지방을 축적시키고 노화를 촉진하는 역할을 한다. 그래서 복분자의 산화적 스트레스로부터의 지질개선효과를 알아보기 위해서 정상군, 대조군, 시료군 (RCM)군으로 분류하여 20일간 매일 같은 시간 내에 선 투여하고 21일째 되는 날 LPS를 4시간 전에 투여하여 그 독성이 가장 강할 때 해부를 하여서 활성도를 혈액 및 간 조직에서의 효소 활성의 변동을 평가하였다. 중성지방 (TG)의 에너지의 저장 형태로 존재하는 지방이다. 이는 안정한 물질로 몸에 축적된다. 하지만 과도할 경우 각종 성인병을 일으키는 요인으로 작용을 한다. 정상군에 비해 대조군의 경우 3.9배 증가하였으며 이는, 몸에 지질이 쌓이게 되어 성인병으로 이어지는 원인이 된다. 그에 비해 RCM을 투여한 군의 경우 56.4%로의 지질함량을 억제효과를 알 수 있었다. 총 지질 (Total lipid)는 혈청안에 있는 지질함량을 측정하는 방법으로 함량이 높을 수록 고지혈증, 동맥경화, 지방간으로 이어지며 부작용을 일으킨다. 이 경우 정상군에 비해 대조군은 1.67배로 증가를 하였지만 RCM투여군은 대조군에 비해 59.2%로 지질 함량을 유의적인 감소 효과를 알 수 있었다. 총 콜레스테롤(Total-cholesterol)은 인체의 여러 조직에서 만들어지나 주로 간에서 생성된다. 혈중 cholestrol의 증가는 비만, 동맥경화, 고혈압 등의 심혈관 질환과 당뇨병 지방 대사 장해 등을 일으킨다. 함량의 경우 정상군에 비해 대조군은 1.74배 증가하였다. 그에 비해 RCM 투여군의 경우 대조군에 비해 57.4%의 예방효과를 측정할 수 있었다. HDL-콜레스테롤은 항 동맥경화의 지표로서 콜레스테롤을 말초혈관에서 간으로 수송하여 동맥경화를 진행시키지 않는 방향으로 콜레스테롤을 운반하여 지질대사 장해에 대한 방어 작용을 지니고 있다고 볼 수 있다. 정상군에 비해 대조군은 2.62배 감소하였다. 그에 비해 RCM 투여군은 대조군보다 81.6% 증대되는 효과를 볼 수 있었다. 과산화 지질 (Malondialdehyde)의 경우 지질조직의 손상정도를 나타내는 중요한 효소로 인정되고 있으며, 조직의 손상, 발암, 염증, 성인병 및 노화 등과 같은 여러 가지 유해 작용을 일으킨다. 정상군에 비해 대조군은 1.74배 수치가 증가되었으며, RCM투여군의 대조군과 비교 시 57.4% 감소되는 효과를 볼 수 있었다. 본 연구는 LPS로부터 유도된 산화적 스트레스에 대한 복분자의 선투여 후 예방효과를 알아보았다. 생약재의 일종인 복분자의 경우 LPS로 유도된 산화적 스트레스 억제 및 지질대사로부터의 개선 효과가 있는 것으로 판단되며 지질과산화에 대해서 강한 억제 활성을 나타내는 것을 알 수 있었다. 이러한 결과로 복분자는 생활 습관병의 예방과 개선에 유효한 것으로 사료되었으며, 지질대사와 과산화지표의 검증을 통해 기능성 식품소재로 활용될 수 있음을 보여주었다.
복분자 (Rubus coreamum Miquel)는 우리나라 남부에서 야생하는 과실 생약으로, 식용으로 이용되고 있다. 예로부터 한방과 민간에서 맹안, 태생, 지사, 음위, 강장, 그리고 양모 등에 약재로 이용하고 있다. 뿐만 아니라 예로부터 한방에서 신장기능, 불임증, 음위증, 유정몽설, 강장제로 쓰였으며 혈액과 눈을 밝게 해주며 간을 보호하는 효능을 가지고 있다고 알려져 있다. LPS는 그람양성균의 세포벽을 만드는 물질의 일종으로 NO를 생성시키고 $Ca^{2+}$를 증가시키며 free radicals를 형성하여 간 조직의 막을 파괴하고 간의 지방을 축적시키고 노화를 촉진하는 역할을 한다. 그래서 복분자의 산화적 스트레스로부터의 지질개선효과를 알아보기 위해서 정상군, 대조군, 시료군 (RCM)군으로 분류하여 20일간 매일 같은 시간 내에 선 투여하고 21일째 되는 날 LPS를 4시간 전에 투여하여 그 독성이 가장 강할 때 해부를 하여서 활성도를 혈액 및 간 조직에서의 효소 활성의 변동을 평가하였다. 중성지방 (TG)의 에너지의 저장 형태로 존재하는 지방이다. 이는 안정한 물질로 몸에 축적된다. 하지만 과도할 경우 각종 성인병을 일으키는 요인으로 작용을 한다. 정상군에 비해 대조군의 경우 3.9배 증가하였으며 이는, 몸에 지질이 쌓이게 되어 성인병으로 이어지는 원인이 된다. 그에 비해 RCM을 투여한 군의 경우 56.4%로의 지질함량을 억제효과를 알 수 있었다. 총 지질 (Total lipid)는 혈청안에 있는 지질함량을 측정하는 방법으로 함량이 높을 수록 고지혈증, 동맥경화, 지방간으로 이어지며 부작용을 일으킨다. 이 경우 정상군에 비해 대조군은 1.67배로 증가를 하였지만 RCM투여군은 대조군에 비해 59.2%로 지질 함량을 유의적인 감소 효과를 알 수 있었다. 총 콜레스테롤(Total-cholesterol)은 인체의 여러 조직에서 만들어지나 주로 간에서 생성된다. 혈중 cholestrol의 증가는 비만, 동맥경화, 고혈압 등의 심혈관 질환과 당뇨병 지방 대사 장해 등을 일으킨다. 함량의 경우 정상군에 비해 대조군은 1.74배 증가하였다. 그에 비해 RCM 투여군의 경우 대조군에 비해 57.4%의 예방효과를 측정할 수 있었다. HDL-콜레스테롤은 항 동맥경화의 지표로서 콜레스테롤을 말초혈관에서 간으로 수송하여 동맥경화를 진행시키지 않는 방향으로 콜레스테롤을 운반하여 지질대사 장해에 대한 방어 작용을 지니고 있다고 볼 수 있다. 정상군에 비해 대조군은 2.62배 감소하였다. 그에 비해 RCM 투여군은 대조군보다 81.6% 증대되는 효과를 볼 수 있었다. 과산화 지질 (Malondialdehyde)의 경우 지질조직의 손상정도를 나타내는 중요한 효소로 인정되고 있으며, 조직의 손상, 발암, 염증, 성인병 및 노화 등과 같은 여러 가지 유해 작용을 일으킨다. 정상군에 비해 대조군은 1.74배 수치가 증가되었으며, RCM투여군의 대조군과 비교 시 57.4% 감소되는 효과를 볼 수 있었다. 본 연구는 LPS로부터 유도된 산화적 스트레스에 대한 복분자의 선투여 후 예방효과를 알아보았다. 생약재의 일종인 복분자의 경우 LPS로 유도된 산화적 스트레스 억제 및 지질대사로부터의 개선 효과가 있는 것으로 판단되며 지질과산화에 대해서 강한 억제 활성을 나타내는 것을 알 수 있었다. 이러한 결과로 복분자는 생활 습관병의 예방과 개선에 유효한 것으로 사료되었으며, 지질대사와 과산화지표의 검증을 통해 기능성 식품소재로 활용될 수 있음을 보여주었다.
LPS induces the synthesis of several inflammatory cytokine, chemokine, NO and inflammation in the liver of rats. The purpose of this study was to investigate the preventive effects of Rubus coreanum Miquel (RCM) In lipid metabolism. RCM of 100 mg/kg concentration was intraperitoneally administered i...
LPS induces the synthesis of several inflammatory cytokine, chemokine, NO and inflammation in the liver of rats. The purpose of this study was to investigate the preventive effects of Rubus coreanum Miquel (RCM) In lipid metabolism. RCM of 100 mg/kg concentration was intraperitoneally administered into rats at dose of 1.5ml/kg for 20 days. On the day 21, 1.5ml/kg of LPS was injected 4 hours before anesthetization. We examined the lipid-related functions by measuring the levels of triglyceride (TG), total cholesterol (TC), total lipid (TL), high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) in serum and malondialdehyde(MDA) in liver tissue. The results showed that LPS treatment increased the values of TG, TC, TL and MDA, decreasing that of HDL-C. But RCM pretreatment decreased the high values of TG, TC, TL and MDA to the low values and increased the low value of HDL-C to the high value. These results suggested that RCM could be used as the potential candidate for the lipid metabolism natural supplement.
LPS induces the synthesis of several inflammatory cytokine, chemokine, NO and inflammation in the liver of rats. The purpose of this study was to investigate the preventive effects of Rubus coreanum Miquel (RCM) In lipid metabolism. RCM of 100 mg/kg concentration was intraperitoneally administered into rats at dose of 1.5ml/kg for 20 days. On the day 21, 1.5ml/kg of LPS was injected 4 hours before anesthetization. We examined the lipid-related functions by measuring the levels of triglyceride (TG), total cholesterol (TC), total lipid (TL), high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) in serum and malondialdehyde(MDA) in liver tissue. The results showed that LPS treatment increased the values of TG, TC, TL and MDA, decreasing that of HDL-C. But RCM pretreatment decreased the high values of TG, TC, TL and MDA to the low values and increased the low value of HDL-C to the high value. These results suggested that RCM could be used as the potential candidate for the lipid metabolism natural supplement.
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문제 정의
본 연구는 LPS로부터 유도된 산화적 스트레스에 대한 복분자의 선투여 후 예방효과를 알아보았다. 생약재의 일종인 복분자의 경우 LPS로 유도된 산화적 스트레스 억제 및 지질대사로부터의 개선 효과가 있는 것으로 판단되며 지질 과산화에 대해서 강한 억제 활성을 나타내는 것을 알 수 있었다.
본 연구는 각종 성인병에 관련된 효소들의 활성을 검색하여 이들에 대한 복분자 추출물의 이용 및 부가가치를 높이고자 하여 LPS로부터 유도된 산화적 스트레스 및 지질대사에 대한 효과를 혈청중의 지질 함량과 과산화 지표로 검증함으로써 복분자 추출물의 효능을 밝히고자 하였다.
이러한 TG는 정상적으로 체내에 존재할 경우에는 문제가 되지 않지만 과량으로 축적되면 성인병을 비롯한 각종 질병에 걸리기 쉬워진다. 본 실험에서는 복분자 추출물을 선투여하고 LPS를 후투여하여 TG 대사 장애에 대한 복분자 추출물 보호효과를 보았다. TG 함량에 미치는 복분자 추출물의 효과는 Fig.
제안 방법
촉진하는 역할을 한다. 그래서 복분자의 산화적 스트레스로부터의 지질개 선효과를 알아보기 위해서 정상군, 대조군, 시료군 (RCM)군으로 분류하여 20일간 매일 같은 시간 내에 선 투여하고 21일째 되는 날 LPS를 4시간 전에 투여하여 그 독성이 가장 강할 때 해부를 하여서 활성도를 혈액 및 간 조직에서의 효소 활성의 변동을 평가하였다.
7일 동안 적응시켰다. 실험흰쥐는 난괴법에 따라 총 21마리를 7마리씩 3군으로 나누었고 군별로 cage에 분리시키고 고형사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 하였다(Table 1). Auto Control System기기 (SS-2000, daejong, Korea)를 사용하여 22±rc의 온도와 60±5% 상대습도로 유지시켰다.
실험흰쥐는 난괴법에 따라 총 21마리를 7마리씩 3군으로 나누었고 군별로 cage에 분리시키고 고형사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 하였다(Table 1). Auto Control System기기 (SS-2000, daejong, Korea)를 사용하여 22±rc의 온도와 60±5% 상대습도로 유지시켰다. 정상군(NOR; normal group)은 21일 동안 1.
Auto Control System기기 (SS-2000, daejong, Korea)를 사용하여 22±rc의 온도와 60±5% 상대습도로 유지시켰다. 정상군(NOR; normal group)은 21일 동안 1.5 ml/kg of 0.9% saline을 투여하였다. 대조군(CON; LPS-treated group) 의 경우 20일 동안 1.
9% saline을 매일 투여한 후 21일째 되는 날 LPS를 5 ㎎/㎏의 농도로 만들어 1 ml/kg의 용량으로 복강 내로 투여하였다. 또한 시료군(RCM; Rubus coreanum Miquel extract and LPS-treated group)은 100 ㎎/㎏의 농도로 복분자 추출물을 만들어 1.5 ml/kg의 용량으로 매일 투여한 후 21일째 되는 날 LPS를 5 ㎎/㎏의 농도로 만들어 1 ml/kg의 용량으로 복강 내로 투여하였다. 대조군과 시료군에서 실험동물의 지질대사 이상 및 산화적 스트레스를 유발시켰다.
5 ml/kg의 용량으로 매일 투여한 후 21일째 되는 날 LPS를 5 ㎎/㎏의 농도로 만들어 1 ml/kg의 용량으로 복강 내로 투여하였다. 대조군과 시료군에서 실험동물의 지질대사 이상 및 산화적 스트레스를 유발시켰다. LPS를 투여하고 절식 시킨 뒤 4시간 후에 ether로 마취하고 희생시켜서 혈액을 채취하고 간을 적출하여 실험하였다.
대조군과 시료군에서 실험동물의 지질대사 이상 및 산화적 스트레스를 유발시켰다. LPS를 투여하고 절식 시킨 뒤 4시간 후에 ether로 마취하고 희생시켜서 혈액을 채취하고 간을 적출하여 실험하였다.
시료 투여 기간 종료 후 실험동물을 ether 마취 하에서 개복한 후 심장으로부터 채취한 각 혈액은 헤파린 관으로 옮긴 후, 상온에서 30분간 반응시켜 원심분리기 (Megal7R, Hanil, Korea)를 사용하였다. 800에서 10분간 혈액을 원심분리하여 혈청을 분리해 사용하였다.
Triglyceride (TG>의 측정 - 혈청 중의 중성지질로서 트리글리세리드(triglyceride)의 함량은 TG킷트 시약 (Triglyceride kit, Young Dong, Korea)을 사용하여 분석하였다. 혈액분석기를 통해 혈청의 10 ul을 사용하여 kit를 통해 함량을 측정하였다.
혈액분석기를 통해 혈청의 10 ul을 사용하여 kit를 통해 함량을 측정하였다.
Total-cholesterol의 함량 즉정 - 혈청 중에 총 콜레스테롤의 함량의 측정은 킷트 시약으로(cholesterol kit no. BC 108-E, Young Dong, Korea)을 사용하여 분석하였다. 혈액분석기를 통해 혈청의 10 ul을 사용하여 kit를 통해 함량을 측정하였다.
HDL-cholesterol의 측정 - 혈청 중의 HDL-콜레스테롤 함량의 측정은 킷트 시약(HDL-cholesterol kit no. A308-HDL, Young Dong, Korea)을 사용하여 측정하였다. 시료의 전처리 과정으로 혈청과 침전시약을 반응시켜 10분간 방치 후 3000 rpm에서 침전시킨 후 상등액을 채취하여 혈액분석기를 통해 함량을 측정하였다.
A308-HDL, Young Dong, Korea)을 사용하여 측정하였다. 시료의 전처리 과정으로 혈청과 침전시약을 반응시켜 10분간 방치 후 3000 rpm에서 침전시킨 후 상등액을 채취하여 혈액분석기를 통해 함량을 측정하였다.
Malon dialdehyde(MDA)의 측정 - 간 조직에서의 지질 과산화 정도를 특정 하는 지표로서 Ha의 방법 "으로 측정하였다. 분광광도계 (Uvikon-xs, Bio-Tek, Italy)로 535 nm의 파장으로 흡광도를 측정하였다.
관련 한다. 이러한 과산화 지질 반응의 최종산물인 MDA농도를 각 군 혈장에서 측정하였다. 혈중 과산화 지질 농도의 감소는 혈중에 존재하는 지질농도에 관계한다고 알려지고 있고 항산화작용을 하는 성분이 많이 존재할 때도 관계가 있는 것으로 알려져 있다'a?
대상 데이터
복분자 열매는 2006년 5월경 부산 구포시장의 약재상에서 국산인 것을 확인하여 구입하였다.
실험동물은 체중 170~180 g 내외의 생후 7주 암컷 흰쥐 (Sprague-Dawley)를 대구 효창 사이 언스로부터 제공받았고 7일 동안 적응시켰다. 실험흰쥐는 난괴법에 따라 총 21마리를 7마리씩 3군으로 나누었고 군별로 cage에 분리시키고 고형사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 하였다(Table 1).
데이터처리
본 실험에 대한 모든 실험 결과는 평균치와 표준편차로 나타내었고, 통계적 유의성은 SPSS를 이용한 ANOVA로 검정하였다.
이론/모형
Malon dialdehyde(MDA)의 측정 - 간 조직에서의 지질 과산화 정도를 특정 하는 지표로서 Ha의 방법 "으로 측정하였다. 분광광도계 (Uvikon-xs, Bio-Tek, Italy)로 535 nm의 파장으로 흡광도를 측정하였다.
성능/효과
작용을 일으킨다. 정상군에 비해 대조군은 1.74배 수치가 증가되었으며, RCM 투여군의 대조군과 비교 시 57.4% 감소되는 효과를 볼 수 있었다.
선투여 후 예방효과를 알아보았다. 생약재의 일종인 복분자의 경우 LPS로 유도된 산화적 스트레스 억제 및 지질대사로부터의 개선 효과가 있는 것으로 판단되며 지질 과산화에 대해서 강한 억제 활성을 나타내는 것을 알 수 있었다.
이러한 결과로 복분자는 생활 습관병의 예방과 개선에 유효한 것으로 사료되었으며, 지질대사와 과산화지표의 검증을 통해 기능성 식품소재로 활용될 수 있음을 보여주었다.
1에 나타내었다. LPS 를 투여하여 지질대사에 장애가 일어난 대조군은 LPS를 투여하지 않은 정상군에 비해 TG 함량이 3.9배 증가하였고, 복분자 추출물 투여군의 경우 대조군에 비해 56.4%정도의 억제효과를 나타낸 것으로 보아 지질 축적으로부터 예방하는 효과를 가질 수 있었다.
이어지며 부작용을 일으킨다. Fig. 2에서 보는 것과 같이 정상군에 비해 대조군의 경우 1.67배의 지질 함량이 증가함을 보았다. 대조군은 지질 함량의 증가로 성인병이 유발될 수 있는 조건이 되었으나, RCM 투여군의 경우 대조군에 비해 59.
67배의 지질 함량이 증가함을 보았다. 대조군은 지질 함량의 증가로 성인병이 유발될 수 있는 조건이 되었으나, RCM 투여군의 경우 대조군에 비해 59.2%의 억제 효과를 보여 줌으로서 복분자 추출물의 총 지질 함량이 개선됨을 볼 수 있었다.
3와 같다. 총 콜레스테롤의 측정의 경우 정상군에 비해 대조군은 1.74배로 콜레스테롤 함량이 증가되어 지질 대사의 장해를 유발하였다. 복분자 투여군의 경우 대조군에 비해 57.
Fig. 5의 결과를 보면 복분자는 지질대사에 개선 효과를 가지는 것으로 나타났고, 혈중 지질농도와 콜레스테롤을 억제하는 것으로 나타났다. 간 조직에서의 MDA 활성 정도는 대조군에서 정상군에 비해서 약 1.
74배 정도로 높게나타남으로서, LPS로 인한 지질 과산화를 확인할 수 있었다. 선 투여된 RCM군은 대조군에 비해 57.4%의 억제 효과 보임으로써 생체내의 노화를 억제할 수 있는 효과를 볼 수 있었다.
62배 감소하였다. 그에 비해 RCM 투여군은 대조군보다 81.6% 증대되는 효과를 볼 수 있었다.
5의 결과를 보면 복분자는 지질대사에 개선 효과를 가지는 것으로 나타났고, 혈중 지질농도와 콜레스테롤을 억제하는 것으로 나타났다. 간 조직에서의 MDA 활성 정도는 대조군에서 정상군에 비해서 약 1.74배 정도로 높게나타남으로서, LPS로 인한 지질 과산화를 확인할 수 있었다. 선 투여된 RCM군은 대조군에 비해 57.
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