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문제 정의
- 본 연구는 오가피 메탄올 추출물의 생리활성 및 기능성을 검토하기 위해서 항산화효과와 아질산염 소거능을 측정하였다. 그 결고L 오가피 메탄올 추출물의 전자공여능(RGo)은 29.
- 이에 본 연구에서는 오가피의 기능성 식품 소재 또는 식품첨가물로써의 가능성을 검토하고자 오가피 메탄올 추출물의 항산화 효과와 아질산염 소거능을 조사하였다.
제안 방법
- 0, 8 mL)을 첨가하여 40C에서 암조건을 유지시켰다. 24시간 배양 후, 이 반응액(0.1 mL)을 취하여 75% 에탄올(9.7 mL) 과 30% ammonium thiocyanate(0.1 mL)을 혼합하고 3.5% HC1 에녹인 0.02 M ferrous chloride(0.1 mL)을 가한다음/ 실온에서 3분간 반응시킨 후 500 nm에서 흡광도를 측정하였다 대조구는 시료 대신 증류수를 가하여 측정하였으며, 대조구의 흡광도가 최고치를 나타낼 때까지 24시간 단위로 흡광도를 측정하였다.
- 4 mL)를 가한 다음 혼합하여 실온에서 15분간 방치한 후, 520 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 griess reagent 대신 증류수를 가하여 측정하였으며, 아질산염 소거능은 100-[(시료첨가구의 흡광도/무 첨가 구의 흡광도)X10이으로 나타내었다.
- 아질산나트륨 용액에 오가피 메탄올 추출물 0.2 mg/mL을 첨가하고 pH 조건을 각각 pH 1.2, 3.0 그리고 6.0으로 조정하여 아질산염에 대한 소거율을 측정하였다. 이들 u버 범위는 인체내 위에서의 pH 변화를 고려하였으며, 각 pH 조건(p니 1.
- 오가피 메탄올 주줄물의 superoxide(O2*) 산화억제작용을 알아보기 위해 s 니 peroxide 와 반응하여 갈변물질을 나타내는 pyrogallol 자동산화반응을 측정하여 SOD 유사활성을 측정하였다 28). 오가피 메탄올 추출물은 각각 0.
- 오가피 메탄올 추출물의 지질과산화와 관련한 항산화 효과를 검토하기 위하여 linoleic acid에 추출물을 첨가하여 4(TC에서 96시간동안 지질과산화물을 흡광도(500 nm)로 측정하였다. 그 결과, 대조구는 24, 48, 96시간 후 0.
- 측정하였다. 즉, 1 mM NaNCh용액(2 mL)에 시료(1 mL) 를 가하고 0.1 N HCl(pH1.2), 0.2 M 구연산 완충액(pH 3.0, 6.0)으로 각각 pH 1.2, 3.0, 6.0으로 보정한 다음 반응용액의 부피를 10 mL로 하였다. 이 용액을 37ul에서 1시간 반응시키고 각 반응액(1 mL)을 취하여 2% 초산용액(2 mL)과 30% 초산용액으로 용해한 griess reagent(l% suIfanilic acid: 1% naphtliylamine = 1:1, 0.
대상 데이터
- Q, Q'-Diphenyl-0-picrylhydrazyl(DPPH), pyrogallol, linoleic acid, ammonium thiocyanate, folin-ciocalteu reagent, sodium nitrite, sulfanilic acid, a-naphthylaminez sodium carbonate 그리고 gallic acid는 Sig ma(USA)에서 구입하였으며, 기타 시약은 분석용 등급 이상의 시약을 사용하였다.
- 본 실험 재료인 오가피는 전남생약농업협동조합에서 구입하여 사용하였다 음건한 오가피는 blender(시drich, USA)로 분쇄하여 메탄올로 3회 반복 추출하였고 추출액은 여과지 (Whatman No. 2 England)를 사용하여 여과하였으며 rotary vacuum evaporator (EYELA, Japan)로 감압농축한 후, 본 실험 시료로 사용하였다.
데이터처리
- 통계처리는 각각의 시료에 대해 Studenfs t-test를 사용하여 mean-S.D.로 계산하였으며, p-value를 구하여 유의성을 검증하였다
이론/모형
- Marklund와 Marklund의 방법28)에 따라 각 농도별 시료(0.2 mL)에 tris-HCl buffer(50 mM tris[hydroxymethyl]aniino-niethane containing 10 mM EDTA, pH 8.5, 3 niL)와 7.2 mM pyrogallol(0.2 mL)을 가하고 25C에서 10분간 방치하였으며, 1 N HC1(1 mL) 로반응을 정지시킨 후 420 nm에서 횹광도를 측정하였다. SOD 유사 활성은 100-[(시료첨가구의 흡광도/무첨가구의 흡광도)X10이으로 나타내었다.
- 아질산염 소거능(nitrite scavenging ability)은 Kato 등15)의 방법으로 측정하였다. 즉, 1 mM NaNCh용액(2 mL)에 시료(1 mL) 를 가하고 0.
- 전자공여능(이ectron donating ability)은 Blosis 방법끼에 의한 DPPH free radical 소거법으로 측정되었다. 즉, 시료는 메탄올에 녹여 준비하고 메탄올에 녹인 0'3 mM DPPH 용액을 첨가하여 실온에서 30분간 방치 한 후 517 nm에서 흡광도를 측정하였다.
- 지질 과산화는 Kikuzaki와 NakatarF0의 방법에 따라 측정되었다. 즉/ 시료(3.
- 총 페놀함량은 Folin-CiocalteuM)2] 방법에 의해 측정되었다. 반응액은 시료(20 ul)/ 증류수(1.
성능/효과
- 오가피 메탄올 추출물의 총 페놀함량은 gallic acid를 표준물질로 사용하여 측정되었고 galie acid equivalents(GAE, ug/시료 mg로 나타내었다. Gallic ac너는 농도 의존적으로 유의성 있는 OD값의 증가를 나타내었고, gallic acid의 표준곡선을 토대로 시료 1 mg의 종 페놀 함량을 측정한 결과 410.25-4.74 ug GAE로 측정되었다(Fig. 4).
- 측정하였다. 그 결고L 오가피 메탄올 추출물의 전자공여능(RGo)은 29.93 ug /mL로 나타났고 SOD 유사활성은 추출물(0.96 mg/mL)을 첨가하였을때 2 2.85%로 가장 높게 관찰되었으며, linoleic acid에 대한 항산화력은 추출물(0.2 mg/mL)을 첨가하여 지질과산화물을 측정한 결과 배양시간 24, 48, 96시간 경과 후 각각 48.89%, 45.0%, 46.34% 감소율을 보임으로써 효과적인 항산화 효과를 나타내었다. 총 페놀함량은 gallic acid equivalents (GAE)로 측정되었고, 410.
- 그 결과, 대조구는 24, 48, 96시간 후 0.779, 0.903, 1.442로 흡광도가 측정되었고 0.2 mg/mL의 추출물을 첨가하였을 때에는 각각 0.398, 0.496, 0.774로 흡광도가 나타나 대조구에 비해 추출물 첨가 구의 지질과산화수치가 각각 48.89%, 45.0%, 46.34%로 유의성 있게 감소되었다(Fig. 3). 위의결과로 오가피 메탄올 추출물은 효과적으로 지질과산화를 억제하는 것으로 관찰되었다.
- 1). 그리고 표준물질로 사용된 ecarotene과 BHA의 RC50이 각각 18.02 ug/mL, 18.48 ug/mL(data not shown)으로 나타나 오가피 메탄올 추출물은 매우 우수한 전자공여능을 보이는 것으로 관찰되었다.
- 74 GAE ug/mg extract으로 조사되었다. 아질산염 소거 능은 복합 생약추출물(0.2 mg/mL)을 첨가하였을 때 pH 1.2 조건에서 88.3%로 가장 높게 나타났으며 pH가 증가할수록 감소하였다. 이상의 결과로 오가피 메탄올 추출물은 우수한 항산화 효과와 아질산염 소거능을 나타냄으로써 기능성 식품 소재 및 식품첨가물로써 사용가능 하리라 사료된다.
- 오가피 메탄올 추출물은 각각 0.23, 0.46, 0.92 ing/mL 으로 첨가했을때 8.18%, 14.07% 그리고 2 2.85%의 SOD 유사활성을 나타냈다(Fig. 2).
- 효과가 관찰되었다3D. 오가피 메탄올 추출물의 DPPH free radical 소거능은 시료를 첨가하지 않은 대조군의 홉광도를 50% 환원시키는데 필요한 시료량(RC50 ; 50% reduction concentration) 으로 측정한 결과 29.93 ug/mL으로 나타났다(Fig. 1). 그리고 표준물질로 사용된 ecarotene과 BHA의 RC50이 각각 18.
- 3). 위의결과로 오가피 메탄올 추출물은 효과적으로 지질과산화를 억제하는 것으로 관찰되었다.
- 0으로 조정하여 아질산염에 대한 소거율을 측정하였다. 이들 u버 범위는 인체내 위에서의 pH 변화를 고려하였으며, 각 pH 조건(p니 1.2, pH 3.0, p버 6.0) 하에서 아질산염 소거능은 각각 88.3%, 83.61%, 8.07%으로 나타나 매우 효과적인 pH 의존적인 아질산염 소거능을 보였다(Fig. 5).
후속연구
- 3%로 가장 높게 나타났으며 pH가 증가할수록 감소하였다. 이상의 결과로 오가피 메탄올 추출물은 우수한 항산화 효과와 아질산염 소거능을 나타냄으로써 기능성 식품 소재 및 식품첨가물로써 사용가능 하리라 사료된다.
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