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문제 정의
- 그리고 재배화의 근간이 되는 식물의 기초생태에 대한 조사도 미비하다. 따라서 본 연구에서는 국내에서 자생하는 번행초의 활성물질을 탐색하기 위한 기초 자료를 얻고자 1차적으로 항산화 효과를 조사하여 그 결과를 정리 보고한다.
- 본 연구에서는 예로부터 위장병의 예방 및 치료 효과가 뛰어난 작물로 알려진 번행초(Tetragonia tetmgoHioides)의 각종 용매 추출 분획물의 항산화 효과를 명확히 하기 위해 총폴리 페놀과 플라보노이드 함량, 비타민 E함량, DPPH free radical 소거활성, Superoxide 음이온 소거활성, 과산화물생성 억제 활성, 환원능력 그리고 금속 킬레이트 효과를 측정하였다. 먼저 총 폴리페놀 화합물의 함량은 DCM 분획, EA 분획에서 높게 나타났고, 플라보노이드 함량은 HX 분획, EA 분획 순으로 나타났다.
- 번행초의 항균 . 항산화 활성에 대한 본 기초연구를 토대로하여 유효 물질 정제 . 분리 기술의 확립과 분리된 유효 성분의 구조 동정 및 약리작용과의 상관관계 분석, 활성에 대한 연구가 추가적으로 진행되면 장래에 번행초는 중요한 생물 자원으로 평가 될 수 있을 것이다.
제안 방법
- 0) 9 ml와 혼합한 후 37°C에서 암반응시켰다. 24시간 간격으로 반응시킨 추출액 100 ㎕를 75% ethanol 9.7 1讯에 희석한 후 30% ammonium thiocyanate 용액 100 ㎕, 20 mM FeCl2 (in 3.5% HC1) 100 ㎕씩을 가하여 진탕시 킨 다음 정 확히 3분 후에 spectrophotometer# 이용하여 500 nm에서 변화된 흡광도를 측정하였다. 음성대조군으로는 시료 대신 80% ethanol을 사용하여 반응시켰고, 양성 대조군으로 BHT, BHA 및 a-tocopherol을 사용하였다.
- 이 반응액에 5 mM의 ferrozine을 100 ㎕를 넣어 혼합한 뒤 5분간 반응시키면서 ferrozine으로 하여금 반응하지 않고 남은 Fe저 과의 착물을 형성시켰다. 562 nm에서 흡광도를 측정하여 시료 대신 MeOH를 넣어 반응시킨 대조구와의 차이를 통해 chelating 효과를 조사하였다.
- 방법 [2이으로 조사하였다. 6가지 농도로 조제한 추출액700 ㎕ 에 1 mM 의 P-NADH, 1 mN 의 NBT, 120 jiM 의 phe nazine methosulphate (PMS)를 각각 100 ㎕ 가하여 vortex mixer로 혼합한 뒤 상온에서 10분간 반응시켰다. 10 M 의 HC1 을 40 ㎕를 가하여 반응을 종결시키고 560 nm에서 흡광도를 측정하였다.
- 단백질이 산화적 손상을 받으면 탄소-산소 불포화결합으로 반응성이 풍부한 carbonyl기를 형성하는데 노화에 따라 조직 내의 carbonyl의 함량이 증가함이 밝혀져 있다[18]. Carbonyl기의 산화는 Ag2+, Ci* Fe2+ 또는 할로겐족 원소(Brj, l2)의 환원과 동시에 이루어지는데 이러한 능력을 reducing power라고 하며 측정한 번행초의 환원력으로 항산화 활성을 확인하였다. Reducing power 반응을 통한 항산화력 측정에서 EA 추출 분획의 1.
- DPPH를 사용하여 추출물의 전자공여능을 측정하였다 [11], 6가지 농도로 조제한 시료 용액 1 ml에 0.2 mM DPPH 용액을 1 ml을 가하였다. Vortex mixer로 10초간 진탕한 후 37°C에서 30분 동안 incubation 시켰다.
- Reducing powers 시료의 종류에 다라서 차이가 있고 또 반응조건에 따라 상이하여, 상대적인 양의 함량만을 측정할 수 있으므로 양성 대조군으로 BHT와 a-tocopherol을 사용하여 번행초의 각 용매 추출 분획 의 reducing power를 측정하여 Fig. 3에 정리하여 놓았다. 분획의 농도가 증가함에 따라 reducing power가 증가하였는데 HX, MeOH, DCM 그리고 EA 순으로 추출 분획 의 reducing power?} 높아졌다.
- Rutim을 사용하여 번행초의 각 용매 추출 분획 1 mg의 flavonoid 화합물 함량을 측정하였다. 번행초 분획 중 HX 추출 분획 에서 12.
- Superoxide anion (O2) 제거 효과는 nitro blue tetrazo- lium (NBT)를 기질로 사용하여 자유 라디칼의 감소를 측정하는 방법 [2이으로 조사하였다. 6가지 농도로 조제한 추출액700 ㎕ 에 1 mM 의 P-NADH, 1 mN 의 NBT, 120 jiM 의 phe nazine methosulphate (PMS)를 각각 100 ㎕ 가하여 vortex mixer로 혼합한 뒤 상온에서 10분간 반응시켰다.
- 각 분리단계별로 얻어진 추출물에 대한 총 페놀 화합물의 함량을 측정하였다. 1 mg/ml의 농도로 조제한 분획 1 ml에 46 ml의 증류수와 1 ml의 2N Folin-Ciocalteu's reagent를 가하여 3분 동안 상온에서 방치 시켰다.
- 음성대조군으로는 시료 대신 MeOH를 1 ml 첨가하여 반응시켰고, 양성대조군으로는 BHA와 BHT를 사용하여 같은 방법으로 측정하였다. 각 시료를 대조구와 비교하여 감소된 흡광도로부터 radical 제거율을 계산하였고, ICso치 (DPPH radi- cal 형성을 50%로 억제하는데 필요한 농도)를 계산하였다.
- 음성대조군으로는 시료 대신 dimethyl sulfoxide (DMSO)를 첨가하여 반응시켰고, 양성대조군으로는 gaUic acid를 사용하였다. 각 시료의 항산화작용은 대조 구에 비하여 감소된 흡광도로부터 anion 제거율을 계산하였고, ICso치 (Superoxide anion 형성을 50%로 억제하는데 필요한 농도)로 나타내었다.
- 분리된 HQ 층을 dichloromediane (DCM) 2 1, ethylacetate (EA) 2 1와 butanol (BuOH) 2 1 순으로 HX와 동일하게 용매 분획하였다. 각 용매 분획 층을 rotary vacuum evaporator로 감압농축하여 MeOH 분획, HX 분획, DCM 분획, EA 분획 및 BuOH 분획을 얻었다. 농축된 분획물은 상온에서 용매를 완전히 제거하여 건조시킨 뒤 냉동 보관하면서 활성 측정을 위한 시료로 사용하였다.
- 3 ml을 첨가하여 95°C에서 90분간 반응시킨 뒤 695 nm에서 흡광도를 측정하였다. 농도별로 조제하여 반응시킨 butylated hydroxyanisol (BHA), butylated hydroxytoluene (BHT) 및 a-tocopherol의 흡광도를 기준으로 하여 작성된 검정곡선에 의해 각 추출액의 측정치를 환산하여 총 항산화 능력을 비교하였다.
- 번행초 각 용매 추출 분획 의 Fe*에 대한 chelating 작용으로 Fe2+-ferrozine 착물 형성을 억제하는 정도로 항산화 활성을 측정하였다. 흡광도가 낮아질수록 Fe”이 분획과 활발히 반응하여 chclating 효과가 높아지는 것으로 나타나는데, 각 용매 추출 분획의 농도를 100 ㎍/ml에서 500 ㎍/ml까지 조절하여 측정한 결과 DCM, EA, HX 그리고 MeOH 순으로가 l elating 활성이 높았으며 MeOH 추출 분획의 경우 metal cheating에 의한 항산화 능력이 60% 이상으로 우수함이 확인되었다(Fig.
- 번행초 각 용매 추출액의 phenolic 함량을 측정하기 위해 gallic acid를 사용하여 환산하였다. 1 mg에 대한 phenolic 함량을 측정한 결과 DCM 추출 분획 73.
- 여과액을 rotary vacuum evaporator (Ratavapor R-121, Buchi, Switzerland)로 감압농축하고, 얻어진 농축액에 hexane (HX) 2 1를 가하여 HX와 H2O 층으로 분리하였으며 이 과정을 3회 반복하였다. 분리된 HQ 층을 dichloromediane (DCM) 2 1, ethylacetate (EA) 2 1와 butanol (BuOH) 2 1 순으로 HX와 동일하게 용매 분획하였다. 각 용매 분획 층을 rotary vacuum evaporator로 감압농축하여 MeOH 분획, HX 분획, DCM 분획, EA 분획 및 BuOH 분획을 얻었다.
- 시료의 각 용매 분획을 얻기 위해 번행초 전초 1 kg에 100% methanol (MeOH)을 3 1가하여 실온에서 교반하면서 12시간 동안 3회 반복 추출하여 Whatman 여과지 No. 5A로 감압 여과하였다. 여과액을 rotary vacuum evaporator (Ratavapor R-121, Buchi, Switzerland)로 감압농축하고, 얻어진 농축액에 hexane (HX) 2 1를 가하여 HX와 H2O 층으로 분리하였으며 이 과정을 3회 반복하였다.
- 5% HC1) 100 ㎕씩을 가하여 진탕시 킨 다음 정 확히 3분 후에 spectrophotometer# 이용하여 500 nm에서 변화된 흡광도를 측정하였다. 음성대조군으로는 시료 대신 80% ethanol을 사용하여 반응시켰고, 양성 대조군으로 BHT, BHA 및 a-tocopherol을 사용하였다.
- 이 후 spectropho- tometer를 이용하여 517 nm 에서 홉광도를 측정하였다. 음성대조군으로는 시료 대신 MeOH를 1 ml 첨가하여 반응시켰고, 양성대조군으로는 BHA와 BHT를 사용하여 같은 방법으로 측정하였다. 각 시료를 대조구와 비교하여 감소된 흡광도로부터 radical 제거율을 계산하였고, ICso치 (DPPH radi- cal 형성을 50%로 억제하는데 필요한 농도)를 계산하였다.
- 10 M 의 HC1 을 40 ㎕를 가하여 반응을 종결시키고 560 nm에서 흡광도를 측정하였다. 음성대조군으로는 시료 대신 dimethyl sulfoxide (DMSO)를 첨가하여 반응시켰고, 양성대조군으로는 gaUic acid를 사용하였다. 각 시료의 항산화작용은 대조 구에 비하여 감소된 흡광도로부터 anion 제거율을 계산하였고, ICso치 (Superoxide anion 형성을 50%로 억제하는데 필요한 농도)로 나타내었다.
- 5 ml을 넣어 잘 섞어준 뒤 1, 500 rpm에서 10분간 원심분리시켰다. 이 용액의 상층을 2.5 ml 취하여 증류수 2.5 ml와 10% 의 FeCb 0.5 ml과 잘 섞어 700 nm에서 흡광도를 조사하여 농도에 따라 변화된 값을 측정하였다. 음성 대조군으로는 시료 대신 MeOH를 사용하여 반응시켰고, 양성 대조군으로는 BHT 및 a-tocopherol 사용하였다.
- 총 항산화 능력 측정은 산성 상태에서 각 용매 추출액에의해 Mo(VI)가 Mo(V)로 전환되어 green phosphate/Mo(V) 형태의 화합물을 만드는 능력으로 측정하였다[23]. 0.
- 총 항산화력은 BHA, BHT 및 a-tocopherol의 항산화력을 기준으로 환산하여 나타내었다. 먼저 BHA 1 mg의 총 항산화력을 기준으로 번행초 각 용매 추출 분획 1 mg의 항산화 능력을 환산한 결과 Table 2에서와 같이 DCM 추출 분획이 0.
대상 데이터
- 5 ml과 잘 섞어 700 nm에서 흡광도를 조사하여 농도에 따라 변화된 값을 측정하였다. 음성 대조군으로는 시료 대신 MeOH를 사용하여 반응시켰고, 양성 대조군으로는 BHT 및 a-tocopherol 사용하였다.
이론/모형
- 5 ml을 첨가하여 상온에서 1시간 동안 반응시켰다. 420 nm에서 흡광도를 측정하였으며 그 함량은 Beer's 법칙에 따라 rutin을 표준물질로 이용하여 작성한 표준검정 곡선으로부터 구하였다[29].
- Ferric thiocyanate에 의 한 지 질과산화 측정은 Osawa방법 [21]에 의해 측정하였다. 80% ethanol에 녹인 추출액 120 ㎕ 를 2.
- 4. The Fe3+-ferrozine complex formation of the T. tetragonioides extracts measured by the F2+-chelating activity method. X, MeOH fraction; ○, HX fraction; ▲, DCM fraction; ●.
- MeOH, EA와 BuOH 추출 분획에서는 각각 895 ㎍/mg, 772 ㎍/mg과 508 ㎍/mg으로 항산화력을 가지고 있음을 알 수 있었다, 마지막으로 1 mg ci-tocopherol의 총 항산화력에 대한 번행초 각 용매 추출 분획 1 mg의 항산화력을 환산한 결과 추출 분획 중 DCM 추출 분획이 391 ㎍/mg으로 높게 측정되었고, HX, MeOH, EA 그리고 BuOH 주출 분획의 순으로 총 항산화력을 가지고 있었다(Table 2). 양성 대조군과 총 항산화력을 비교하기 위해 작성한 회귀검정곡선은 Beer의 법칙에 따라 작성했으며, 상관계수(R3 값은 0.99 이상이었다.
- 6 M sulfuric acid, 28 mM sodium phosphate 와 4 mM 의 ammonium molybdate 가 포함 된 1 ml의 반응 용액을 첨가하여 37°C에서 90분간 반응시킨 뒤 695 nm에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조군으로 a-tocopherol을 사용하였으며, Beefs 법칙에 따라 표준검정 곡선으로 각 분획의 비타민 E 값을 산정하였다[23].
- 2% Na2CO3 3 ml을 가하여 간헐적으로 섞어주면서 상온에서 2시간동안 반응시킨후 spectrophotometer (UV-2100, Shimadzu, Japan)를 사용하여 760 nm에서 흡광도를 측정하였다. 총 페놀화합물 함량은 Beer's 법칙에 따라 gallic acid를 표준물질로 이용하여 작성 한 표준검 정 곡선으로부터 구하였다[27].
성능/효과
- 553 ㎍/mg으로 가장 높았으며 그 다음으로 HX, MeOH, EA 그리고 BuOH 추출 분획 순으로 측정되 었다. 1 mg BHT의 총 항산화력에 대한 번행초 각 용매 추출 분획 1 mg의 항산화력은 DCM 추출 분획이 1, 485 ng/mg 로 BHT에 비해 뛰어난 항산화력을 나타냈고, HX 추출 분획은 1, 000 ㎍/mg으로 BHT와 유사한 항산화력 이 있음을 확인할 수 있었다. MeOH, EA와 BuOH 추출 분획에서는 각각 895 ㎍/mg, 772 ㎍/mg과 508 ㎍/mg으로 항산화력을 가지고 있음을 알 수 있었다, 마지막으로 1 mg ci-tocopherol의 총 항산화력에 대한 번행초 각 용매 추출 분획 1 mg의 항산화력을 환산한 결과 추출 분획 중 DCM 추출 분획이 391 ㎍/mg으로 높게 측정되었고, HX, MeOH, EA 그리고 BuOH 주출 분획의 순으로 총 항산화력을 가지고 있었다(Table 2).
- acid를 사용하여 환산하였다. 1 mg에 대한 phenolic 함량을 측정한 결과 DCM 추출 분획 73.76 pig/mg, EA 추출 분획에서 69.17 ug/mg로 높게 측정되었고, MeOH 추출 분획에서 41.65 gg/mg, BuOH 추출 분획에서 37.06 gg/mg, HX 추출 분획에서 28.81 ng/mg으로 측정되었다(Table 1).
- 2에 나타내었다. 24시간 간격으로 측정한 결과 양성 대조군으로 사용한 BHA와 BHT에 비해서는 다소 떨어지는 지질과산화반응 억제 활성이 측정되었지만, a-tocopherol 보다는 번행초의 각 용매 추출 분획의 지질과산화반웅 억제 활성이 높게 나타났다.
- 485로 DCM 추출 분획에서 우수한 항산화제 물질이 분리될 수 있음을 확인할 수 있었다. DCM 추출 분획에서 phenolic 화합물의 함량과 비타민 E의 함량이 높게 측정되었고, EA 추출 분획의 경우 phenolic 화합물의 함량과 flavonoid의 함량이 높게 확인되었다. 특이적으로 HX 추출 분획에서는 phenolic 화합물의 함량에 비해 flavonoid의 함량뿐만 아니라 비타민 E의 함량도 높게 확인되 었다.
- 59 mg/ml으로 유사한 활성을 가지고 있음이 조사되었다. DCM 추출 분획의 superoxide anion 제거 활성 IC50 (mg/ml) 값은 2.81 mg/ml으로 번행초 추출 분획 중에서는 활성이 우수한 것으로 측정되었지만 양성 대조군으로 사용한 gallic aicd의 0.03 mg/ml에 비해서는 다소 활성이 떨어졌다.
- 비타민 E의 함량은 HX 분획, DCM 분획 순으로 높게 나타났다. DPPH radical 소거활성 효과는 DCM과 EA 추출 분획에서 ICso 값이 각각 554.25 ㎍/ml, 394.96 ㎍/ml으로 산화방지제로 널리 이용되고 있는 BHT의 784.7 ㎍/ml 보다 우수하게 측정되었다. 과산화물 생성 억제 활성에서 번행초 분획은 지질단백질을 산화로부터 보호한다고 알려진a-tocopherol과 유사한 능력을 보였으나, 페놀계 합성 항산화제인 BHT, BHA에 비해서는 억제능이 다소 낮음이 확인되었다.
- 0 g을 얻었다. MeOH 추출물을 HX, DCM, EA와 BuOH 용매 순서로 분획 추출하여 HX 추출물 14.35 g (20.5%), DCM 추출물 8.97 g (12.81%), EA 추출물 6.99 g (9.99%)와 BuOH 추출물 5.15 g (8.88%)을 얻었다(Fig. 1).
- 1 mg BHT의 총 항산화력에 대한 번행초 각 용매 추출 분획 1 mg의 항산화력은 DCM 추출 분획이 1, 485 ng/mg 로 BHT에 비해 뛰어난 항산화력을 나타냈고, HX 추출 분획은 1, 000 ㎍/mg으로 BHT와 유사한 항산화력 이 있음을 확인할 수 있었다. MeOH, EA와 BuOH 추출 분획에서는 각각 895 ㎍/mg, 772 ㎍/mg과 508 ㎍/mg으로 항산화력을 가지고 있음을 알 수 있었다, 마지막으로 1 mg ci-tocopherol의 총 항산화력에 대한 번행초 각 용매 추출 분획 1 mg의 항산화력을 환산한 결과 추출 분획 중 DCM 추출 분획이 391 ㎍/mg으로 높게 측정되었고, HX, MeOH, EA 그리고 BuOH 주출 분획의 순으로 총 항산화력을 가지고 있었다(Table 2). 양성 대조군과 총 항산화력을 비교하기 위해 작성한 회귀검정곡선은 Beer의 법칙에 따라 작성했으며, 상관계수(R3 값은 0.
- 측정 한 결과는 Table 4와 같다. Superoxide anion을 50% 억제하는데 필요한 ICso (mg/ml)을 측정한 결과 HX 추출 분획은 5 mg/ml 이상에서 반웅이 나타나 활성이 미약하였고, MeOH와 EA 추출 분획의 IC50 (mg/ml)은 4.45 mg/ml, 4.59 mg/ml으로 유사한 활성을 가지고 있음이 조사되었다. DCM 추출 분획의 superoxide anion 제거 활성 IC50 (mg/ml) 값은 2.
- 96 ㎍/ml으로 우수한 항산화 능력 이 측정되 었다. 각 용매 추출 분획의 ICso을 나타내기 위해 Beer의 법칙에 따라 작성한 회귀검정곡선의 상관계수 값(R? 은 0.99 이상이었다.
- 7 ㎍/ml 보다 우수하게 측정되었다. 과산화물 생성 억제 활성에서 번행초 분획은 지질단백질을 산화로부터 보호한다고 알려진a-tocopherol과 유사한 능력을 보였으나, 페놀계 합성 항산화제인 BHT, BHA에 비해서는 억제능이 다소 낮음이 확인되었다. 환원능력을 통한 항산화 활성 측정에서는 1.
- 먼저 총 폴리페놀 화합물의 함량은 DCM 분획, EA 분획에서 높게 나타났고, 플라보노이드 함량은 HX 분획, EA 분획 순으로 나타났다. 비타민 E의 함량은 HX 분획, DCM 분획 순으로 높게 나타났다.
- 73 ㎍/mg를 함유하고 있음이 조사되었다(Table 1). 번행초 각 용매 추출 분획 1 mg에 함유된 비타민 E 양을 측정 한 결과, DCM과 HX 추출분획 에 각각 266 Hg/mg, 277 ㎍/mg의 비타민 E가 함유되어 있음이 확인되었고, MeOH 분획 143 gg/mg, EA 추출 분획에서는 172 ng/mgz BuOH 추출 분획에서 138 ng/mg로 비타민 E가 함유되어 있음을 알 수 있었다(Table 1).
- 화합물 함량을 측정하였다. 번행초 분획 중 HX 추출 분획 에서 12.41 ㎍/mg로 가장 높게 측정되 었고, DCM 분획 9.13 ng/mg, MeOH 분획 7.86 gg/mg, EA 분획 11.13 ㎍ /mg, BuOH 추출 분획에서는 3.73 ㎍/mg를 함유하고 있음이 조사되었다(Table 1). 번행초 각 용매 추출 분획 1 mg에 함유된 비타민 E 양을 측정 한 결과, DCM과 HX 추출분획 에 각각 266 Hg/mg, 277 ㎍/mg의 비타민 E가 함유되어 있음이 확인되었고, MeOH 분획 143 gg/mg, EA 추출 분획에서는 172 ng/mgz BuOH 추출 분획에서 138 ng/mg로 비타민 E가 함유되어 있음을 알 수 있었다(Table 1).
- 번행초를 대상으로 한 총 항산화력 측정에서 DCM 추출 분획의 항산화력이 우수하게 나타났으며, 특히 BHT의 항산화력 기준으로 환산된 값은 1.485로 DCM 추출 분획에서 우수한 항산화제 물질이 분리될 수 있음을 확인할 수 있었다. DCM 추출 분획에서 phenolic 화합물의 함량과 비타민 E의 함량이 높게 측정되었고, EA 추출 분획의 경우 phenolic 화합물의 함량과 flavonoid의 함량이 높게 확인되었다.
- 특이적으로 HX 추출 분획에서는 phenolic 화합물의 함량에 비해 flavonoid의 함량뿐만 아니라 비타민 E의 함량도 높게 확인되 었다. 번행초의 DCM 과 EA 추출 분획에서 DPPH radical 형성을 50%로 억제하는 데 필요한 농도인 ICso 값이 각각 554.25 gg/ml, 394.96 Rg/ml으로 산화방지제로 널리 이용되고 있는 BHT의 784.7 ㎍/ml 보다 우수하게 측정되 었다. 또한 민간요법으로 암, 당뇨, 고혈압, 동맥경화, 기침, 위염 등에 효과가 알려진 산죽잎의 MeOH 분획의 ICso 583 ng/ml 보다 우수한 radical 소거활성을 보였으몌3이, 마늘의 ICm 2, 500 ng/ml, 고추냉이 ICso 989.
- 번행초의 과산화물 생성 억제 활성을 측정한 결과, 24시간 반응 후부터 다가불포화지방산과 세포막, 지질단백질을 산화로부터 보호한다고 알려진 a-tocopherol보다 번행초 분획에서 활성 이 높게 나타났다. Hyphaene thebaica의 열수 추출물과 black tea의 열수추출물의 킬레이트 효과는 250 ㎍/ml의 농도에서 40% 이하로 나타남으로서 번행초의 MeOH 추출 분획의 킬레이트 효과가 뛰어남을 확인할 수 있었다[28].
- 측정한 결과는 Table 3과 같다. 양성 대조군으로 사용한 BHA의 16.91 ㎍/ml에 비해서는 다소 떨어지지만 DCM 추출 분획의 ICsoO] 554.25 ㎍/ml으로 양성 대조군인 BHT의 784.70 ng/ml 보다 높은 항산화 능력이 나타났고, EA 추출 분획 의 경우에는 IC®이 394.96 ㎍/ml으로 우수한 항산화 능력 이 측정되 었다. 각 용매 추출 분획의 ICso을 나타내기 위해 Beer의 법칙에 따라 작성한 회귀검정곡선의 상관계수 값(R? 은 0.
- 추출물의 지질과산화 억제효능은 FTC 방법에 의해 지질 과산화의 첫 단계에서 생성되는 persdde의 양을 측정함으로써 그 능력을 확인할 수 있었다. 지질과산화 반웅에 의해서 형성된 과산화물이 Fe2+를 Fe*로 산화시키는 원리를 이용하여, 번행초의 각 용매 추출 분획의 지질과산화반응 억제 활성을 측정한 결과를 Fig.
- 과산화물 생성 억제 활성에서 번행초 분획은 지질단백질을 산화로부터 보호한다고 알려진a-tocopherol과 유사한 능력을 보였으나, 페놀계 합성 항산화제인 BHT, BHA에 비해서는 억제능이 다소 낮음이 확인되었다. 환원능력을 통한 항산화 활성 측정에서는 1.5 mg/ml 농도에서 EA 분획의 활성이 a-tocopherol보다 유의하게 높게 나타나 좋은 항산화 소재임이 확인되었다.
- 측정하였다. 흡광도가 낮아질수록 Fe”이 분획과 활발히 반응하여 chclating 효과가 높아지는 것으로 나타나는데, 각 용매 추출 분획의 농도를 100 ㎍/ml에서 500 ㎍/ml까지 조절하여 측정한 결과 DCM, EA, HX 그리고 MeOH 순으로가 l elating 활성이 높았으며 MeOH 추출 분획의 경우 metal cheating에 의한 항산화 능력이 60% 이상으로 우수함이 확인되었다(Fig. 4).
후속연구
- 3 ㎍/ml)의 활성이 번행초의 DCM 추출분획과 유사하며 EA 추출 분획에서는 더 우수함이 확인되었다[6]. 감국(IC50= 329.4 ㎍/ml)과 연교(IC50=360.6 ㎍/ml)등은 BHT (ICso= 355.0 ㎍/ml) 보다 높거나 비슷하게 측정되었는데, 조 등의 연구는 0.2 mM DPPH 용액 1 ml에 반응 시료액을 2 ml 첨가하여 반응 시킨 결과로서 번행초의 BHT (IC5o=784.7 ㎍/ ml) 보다 우수한 free radical 소거 활성을 가진 DCM과 EA 추출 분획의 경우 BHT와 같이 단일 성분이 아닌 추출 분획임을 고려해 볼 때 활성성분의 분리 및 구조 동정을 통하여 우수한 유효성을 가지는 항산화제 개발이 가능할 것으로 생각된다.
- 항산화 활성에 대한 본 기초연구를 토대로하여 유효 물질 정제 . 분리 기술의 확립과 분리된 유효 성분의 구조 동정 및 약리작용과의 상관관계 분석, 활성에 대한 연구가 추가적으로 진행되면 장래에 번행초는 중요한 생물 자원으로 평가 될 수 있을 것이다.
- 이러한 시점에서 번행초는 우수한 항균 . 항산화 활성을 가진 천연자원으로서 최근 문제가 되고 있는 활성산소로 인한 각종 질병치료 및 예방에 유효한 물질을 많이 함유하고 있음이 본 연구를 통하여 확인되어 추후 지속적인 연구가 기대된다. 번행초의 항균 .
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