[논문]김치 추출 프로바이오틱스 섭취가 아토피 동물모델 NC/Nga mice에서 면역 지표에 미치는 영향

이인회; 이순희; 이인석; 박유경; 정대균; 조여원

김치 추출 프로바이오틱스 섭취가 아토피 동물모델 NC/Nga mice에서 면역 지표에 미치는 영향
Effects of Probiotic Extracts of Kimchi on Immune Function in NC/Nga Mice 원문보기

한국식품과학회지 = Korean journal of food science and technology, v.40 no.1 = no.197, 2008년, pp.82 - 87

이인회 (경희대학교 동서의학대학원 의학영양학과, 임상영양연구소) , 이순희 (경희대학교 동서의학대학원 의학영양학과) , 이인석 (경희대학교 동서의학대학원 의학영양학과) , 박유경 (경희대학교 동서의학대학원 의학영양학과) , 정대균 (생명공학원 및 (주)RNA) , 조여원 (경희대학교 동서의학대학원 의학영양학과, 임상영양연구소)

초록
AI-Helper

아토피 피부염에서 유산균의 유익성에 대해서는 이미 많이 알려져 있고 우리나라 전통식품인 김치유산균의 유익성에 대한 연구도 많이 진행되었으나 아토피 피부염에서 김치 유산균의 효과에 관한 연구는 아직 미비한 실정이다. 본 연구에서는 아토피 동물 모델인 NC/Nga mice에 김치유산균에서 추출한 유산균(L.plantarum K8)의 파쇄물과 유산균 및 ${\gamma}$-리놀렌산 복합체(L.rhamnosus GG 생균, B. lactis Bb-12Lb 생균, L. plantarum K8생균, L. plantarum K8 파쇄물, ${\gamma}$-리놀렌산)를 경구 투여한 후 혈청 면역지표(IgE, IL-4, IL-5, IFN-${\gamma}$)와 비장 배양액에서 IgE 농도를 측정하였다. 실험동물의 체중 및 사료섭취량은 사육기간이 지남에 따라 증가하는 경향을 보였으며 각 군 간에 유의적인 차이는 관찰되지 않았다. 실험 시작 시 혈청 IgE 농도는 각 군 간에 차이가 나타나지 않았으나 실험 전 기간 4주 동안 유산균 파쇄물(DPF), 유산균 및 ${\gamma}$-리놀렌산 복합체(DPOC), 항히스타민(DAH)을 섭취한 군에서 증류수(DDW)만을 섭취군에 비하여 유의적으로 낮게 나타났다. 혈청 IFN-${\gamma}$ 농도는 각 군에서 유의적인 차이가 나타나지 않았으나 혈청 IL-4 농도는 유산균 및 ${\gamma}$-리놀렌산 복합체를 섭취한 군(DPOC)에서 대조군에 비하여 유의적으로 낮게 나타났다. 혈청 IL-5 농도는 유산균 파쇄물(DPF), 유산균 및 ${\gamma}$-리놀렌산 복합체(DPOC), 항히스타민(DAH)을 섭취한 군에서 모두 대조군에 비하여 유의적으로 낮았다. 비장 임파구 배양 상층액의 IgE 농도는 각 군에서 군 간 유의적인 차이가 나타나지 않았다. 결론적으로, 아토피 동물모델 NC/Nga mice에 유산균 파쇄물(DPF)과 유산균 및 감마리놀렌산 복합체(DPOC)의 경구투여는 혈청 IgE, IL-4, IL-5를 감소시키는 것으로 나타났으며, 김치로부터 추출한 프로바이오틱스를 아토피 환자에게 섭취시켰을 때 IgE, IL-4, IL-5 감소와 같은 긍정적인 효과를 볼 수 있을 것으로 기대한다. 여러 종류의 프로바이오틱스는 아토피의 증상완화 또는 면역 체계에 미치는 영향과 정확한 메카니즘을 밝히기 위하여 과학적인 연구가 필요한 것으로 사료된다.

Abstract ▼ AI-Helper

Atopic dermatitis (AD) is characterized by chronic relapsing inflammation and is associated with hyper-production of immunoglobulin E (IgE). Recent studies have suggested that one of the treatments to alleviate symptoms of AD could be a supplementation of probiotics, Lactobacillus, Rhamnosus, Bifidus, etc. The purpose of this study was to evaluate the effects of probiotics on immune parameters in NC/Nga mice treated with 1-chloro-2,4-dinitro-benzene (DNCB). To induce atopic dermatitis, DNCB was treated to the back of mice for 2 weeks. Then, NC/Nga mice were divided into the four experimental groups randomly. Probiotics fragment, probiotics with other complex (Lactobacillus rhamnosus GG, Bifidobacterium lactis Bb-12LbL, L. plantarum K8, L. plantarum K8 fragment, ${\gamma}$-linolenic acid), antihistamine, and distilled water were administrated orally to the NC/Nga mouse for 4 weeks of experimental period. The groups were probiotics fragment group (DPF), probiotics with other complex group (DPOC), antihistamine group (DAH) and distilled water group (DDW) as a control group. The levels of serum IgE, interlukin-4 (IL-4), interlukin-5 (IL-5), interferon-gamma (IFN-${\gamma}$) and spleenocyte IgE were measured. The levels of serum IgE were significantly different among the four experimental groups. Before the treatment, there was no differences among the groups. However, from the first through the third week of the treatments, the levels of serum IgE in the probiotics (DPF, DPOC) and antihistamine (DAH) groups were lower than those of control group (p < 0.05). The levels of serum IL-4 of DPOC group was significantly lower than that of control group (p < 0.05) and serum IL-5 levels of DPF, DPOC, and DAH groups were significantly lower than that of control group. The levels of serum IFN-${\gamma}$ were not different among the four experimental groups. The levels of serum IgE in supernatant of spleen lymphocytes were not significantly different among the groups. These results suggest that probiotics supplementation showed partial effectiveness in the DNCB treated NC/Nga mice via modulation of IgE level and IL-4, IL-5 production. Based on these findings, probiotics exhibited the inhibitory effect via IL-4 production thereby inhibited the production of IgE in atopic animal model NC/Nga mice.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

본 연구에서 유산균 파쇄물 섭취 군을 첨가한 이유는 최근 연구에서 유산균뿐만 아니라 유산균의 파쇄물도 면역활성에 긍정 적인 효과를 나타내는 것으로 보고된 바 있어(26) 이의 효능을 확인하고자 하였다. 또한 유산균 및 丫-리놀렌산 복합체 섭취 군 을 첨가한 이유는 아토피 피부염의 경우, n-6/n-3 지방산의 비율이 높아져 면역반응이 항진되고, 피부 염증반응이 증가하는 것으로 보고되어(27-29), Y-리놀렌산의 보충의 효과를 확인하고자 하였다. Y■리놀렌산은 아토피 피부염의 주요 발병 기전인 &6-desaturase 의 이상에 의한 인지질 조성의 변화를 정상화시킴으로써 치료 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다(29).
본 연구에서 유산균 파쇄물 섭취 군을 첨가한 이유는 최근 연구에서 유산균뿐만 아니라 유산균의 파쇄물도 면역활성에 긍정 적인 효과를 나타내는 것으로 보고된 바 있어(26) 이의 효능을 확인하고자 하였다. 또한 유산균 및 丫-리놀렌산 복합체 섭취 군 을 첨가한 이유는 아토피 피부염의 경우, n-6/n-3 지방산의 비율이 높아져 면역반응이 항진되고, 피부 염증반응이 증가하는 것으로 보고되어(27-29), Y-리놀렌산의 보충의 효과를 확인하고자 하였다.

제안 방법

Mce의 아토피 유발 촉진을 위해 8주령(20 g, body weigit)인 아토피 피부염 모델 NC/Nga mice를 중앙실험동물(주)(Seoul, Korea)로부터 공급 받아 Mills 등(25)의 연구에서와 같이 1주일 동안 주위 환경에 적응시킨 후 1% 1 -chloro-2,4-dinitro-benzene (DNCB) 200L를 일주일에 2번, 2주간 mice의 등 부위에 도포 하였다. DNCB 용액은 아세톤과 올리브유를 3:1의 비율로, 총 20 mL 만든 후, DNCB 0.2 g을 첨가하여 제조하였다. 아토피 NC/ Nga mice는 specific pathogen free(SPF) 환경에서는 정상이지만, 일반 환경에서는 3-4주 후 가려움증을 수반하며 아토피 피부염 이 유발된다.
HRP-streptavidin conjugate를 100 pL씩 넣고 실온 에서 30분 배양한 후 기질용액을 각 well에 100 pL씩 넣고 37oC 에서 20-30분 동안 반응시켰다. 각 단계는 0.05% PBS-Twin (Invitrogen Corporation, Grand Island, NY, USA)으로 세척하였으 며 마지막으로 발색 후 1.5% oxalic acid를 100 pL넣고 반응을 정 지시키고, ELISA reader(405nm)로 측정하였다.
시료 수집은 경구 투여 전(0주), 경구 투여 1주, 2주, 3주 후에 실험동물의 꼬리 정맥에서, 희생일인 4주 후에는 안와 동맥으로 부터 혈액을 채취하여 3,000'恕, 4oC에서 30분간으로 원심 분리 하여 혈청을 분리한 후 분석 시까지 -70oC에 보관하였다. 경구 투여 4주 후 경추 탈골로 동물을 희생시킨 후 비장을 적출하여 RPMI 1640 medium(Roswell park memorial institute 1640 medium)에서 즉시 primary culture를 실시하였다.
아토피 피부염에서 유산균의 유익성에 대해서는 이미 많이 알려져 있고 우리나라 전통식품인 김치유산균의 유익성에 대한 연 구도 많이 진행되었으나 아토피 피부염에서 김치 유산균의 효과 에 관한 연구는 아직 미비한 실정이다. 본 연구에서는 아토피 동 물 모델인 NC/Nga mice에 김치유산균에서 추출한 유산균(乙 plantarum K8)의 파쇄물과 유산균 및 丫-리놀렌산 복합체(乙 rhamnosus GG 생균, B. lactis Bb-12Lb 생균, L. plantarum K8 생균, L. plantarum K8 파쇄물, Y-리놀렌산)를 경구 투여한 후 혈 청 면역지표(IgE, IL-4, IL-5, IFN-y)와 비장 배양액에서 IgE 농도를 측정하였다. 실험동물의 체중 및 사료섭취량은 사육기간이 지남에 따라 증가하는 경향을 보였으며 각 군 간에 유의적인 차이는 관찰되지 않았다.
본 연구에서는 자발적 아토피성 피부염 유발 동물 모델로 1957 년에 Kondo 등(24)이 개발하여 널리 연구에 사용되어 온 NC/Nga mice에 김치에서 추출한 프로바이오틱스를 경구투여한 후 아토 피 증상에 대한 개선 효과를 혈청 면역지표(IgE, IL-4, IL-5, IFNY) 측정을 통해 평가하였다.
사료는 실험 실시 3일 전부터 AIN-93M을 공급하였으며 1주일 에 1회 식이섭취량과 체중을 측정하였다.
시료 수집은 경구 투여 전(0주), 경구 투여 1주, 2주, 3주 후에 실험동물의 꼬리 정맥에서, 희생일인 4주 후에는 안와 동맥으로 부터 혈액을 채취하여 3,000'恕, 4oC에서 30분간으로 원심 분리 하여 혈청을 분리한 후 분석 시까지 -70oC에 보관하였다. 경구 투여 4주 후 경추 탈골로 동물을 희생시킨 후 비장을 적출하여 RPMI 1640 medium(Roswell park memorial institute 1640 medium)에서 즉시 primary culture를 실시하였다.
아토피 NC/ Nga mice는 specific pathogen free(SPF) 환경에서는 정상이지만, 일반 환경에서는 3-4주 후 가려움증을 수반하며 아토피 피부염 이 유발된다. 실험 기간 동안 사육실의 온도는 22-24oC, 습도는 60% 전후로 유지하였으며, 광주기와 암주기를 12시간으로 조절 하였다.
Y■리놀렌산은 아토피 피부염의 주요 발병 기전인 &6-desaturase 의 이상에 의한 인지질 조성의 변화를 정상화시킴으로써 치료 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다(29). 이에 본 실험은 유산균 파쇄물을 섭취하는 군, 유산균과 Y-리놀렌산을 섭취하는 군, 항히 스타민을 섭취하는 군과 대조군으로 구성하였다.
분리하였다. 임파구 세포에 RPMI 1640 medium을 첨가 하여 300X g, 4oC에서 5분씩 3번 원심분리하였다. 임파구를 분리 한 후 RPMI 10% FBS(Invitrogen Corporation)가 함유된 RPMI 1640 medium_{에 부유시켜}24 well plate_에2 X 106 cells/well_{의 농}도로 분주하고, 임파구의 증식을 촉진시키기 위하여 125 pg/mL 의 농도로 PBS에 용해시킨 concanavalin A를 10% 첨가한 후 5% CO2, 37oC incubator에서 48시간 배양하였다.
임파구 세포에 RPMI 1640 medium을 첨가 하여 300X g, 4oC에서 5분씩 3번 원심분리하였다. 임파구를 분리 한 후 RPMI 10% FBS(Invitrogen Corporation)가 함유된 RPMI 1640 medium_{에 부유시켜}24 well plate_에2 X 106 cells/well_{의 농}도로 분주하고, 임파구의 증식을 촉진시키기 위하여 125 pg/mL 의 농도로 PBS에 용해시킨 concanavalin A를 10% 첨가한 후 5% CO2, 37oC incubator에서 48시간 배양하였다.
적응 기간을 거친 실험동물을 난괴법에 의해 7 마리 씩, 유산 균(Lactobacillus plantarum K8 109 cells/mL/300 eL) 파쇄물을 섭 취한 군(probiotics fragment, DPF), 유산균 및 Y리놀렌산 복합체 (Lactobacillus rhamnosus GG 생균 109 cells/mL/300 μL, Bifidobacterium lactis Bb-12Lb 생균 109 cells/mL/300 μL, Lactobacillus plantarum K8 생균 109 cells/mL/300 μL, Lactobacillus plantarum K8 파쇄 물 109 cells/mL/300 μL, 丫-리놀렌산 0.5 mL/300 μL)를 섭 취한 군(probiotics with other complex, DPOC), 항히스타민(1.0 ㎎/㎏/300(L)을 섭취한 군(positive; antihistamine, DAH), 증류수 (300 μL)만을 섭취한 군(control; DDW)으로 분류하여 각각 4주간 경구 투여하였다.
배양한 임파구 상층액의 IgE 함량을 sandwich ELISA 방법(32) 을 이용하여 측정하였다. 총 항체 양의 측정으로는 항체의 F(ab)2 단편을, 항원 특이적 정량법으로는 항원을 ELISA plate에 고정한 다음 배양상층(supernatant)을 반응시켰다. 항체는 ELISA plate 표 면에 비특이적으로 결합하는 경향이 있기 때문에, 고정항체 또는 항원을 고정시킨 후 단백질용액으로 처리하는 blocking 조작을 행 하였다.
총 항체 양의 측정으로는 항체의 F(ab)2 단편을, 항원 특이적 정량법으로는 항원을 ELISA plate에 고정한 다음 배양상층(supernatant)을 반응시켰다. 항체는 ELISA plate 표 면에 비특이적으로 결합하는 경향이 있기 때문에, 고정항체 또는 항원을 고정시킨 후 단백질용액으로 처리하는 blocking 조작을 행 하였다. 다음으로 고정항체 또는 항원에 결합한 항체에 효소 표 식한 항체를 결합시켜, 기질용액을 첨가하여 발색시켰다.

대상 데이터

(Ontario, Canada)에서 구입하였으며, IgE와 관련된 항체들은 Biosource International(Comarillo, CA, USA), Bethyl Laboratory, Inc.(Montgomery, TX, USA)에서 구입하였다. IL4, IL-5, IFN-y 와 관련된 항체들은 ID Labs Inc.
plantarum K8 파 쇄물은 균체를 회수하고 멸균생리식염수에 현탁하여 생균수를 조 사한 후 세포파쇄기로 파쇄하여 준비하였다. B. lactis Bb-12와 달 맞이꽃 종자유 분말(Y-리놀렌산 40 mg/g)은 CHR HANSEN (Hersholm, Denmark)과 Goerlich Pharma International(Edling, Germany)로부터 구입하였다.
L. plantarum K8((주)RNA, Suwon, Korea)과 L. rhamnosus GG는 MRS(Difco, Detroit, MI, USA) 배지를 이용하여 37oC에서 정치배양하였다. 회수한 균체는 10% 말토덱스트린, 10% 만니톨 용액에 현탁하고 동결건조하여 사용하였다.
Mce의 아토피 유발 촉진을 위해 8주령(20 g, body weigit)인 아토피 피부염 모델 NC/Nga mice를 중앙실험동물(주)(Seoul, Korea)로부터 공급 받아 Mills 등(25)의 연구에서와 같이 1주일 동안 주위 환경에 적응시킨 후 1% 1 -chloro-2,4-dinitro-benzene (DNCB) 200L를 일주일에 2번, 2주간 mice의 등 부위에 도포 하였다. DNCB 용액은 아세톤과 올리브유를 3:1의 비율로, 총 20 mL 만든 후, DNCB 0.
항히스타민(ketotifen)과 아토피 유발을 촉진시키기 위해 사용한 DNCB는 Sigma(St. Louis, MO, USA)에서 구입하였다. 면역 실험에 사용된 시약 중 monoclonal 항체는 ID Labs Inc.

데이터처리

2) Letters with different superscripts in the same row are significantly different at p < 0.05 levels by Duncan's multiple range tests.
3) Letters with different superscripts in the same row are significantly different at p < 0.05 by Duncan's multiple range tests.
01)을 이용하여 기술적인 통계치를 산출하였다. 결과는 평균(mean) 과 표준편차(standard deviation, SD)로 표시하였다. 실험군의 평균 간의 유의성을 Duncan's multiple range test로 p <0.
모든 데이터 분석은 Statistical Analysis System(SAS, Ver. 8.01)을 이용하여 기술적인 통계치를 산출하였다. 결과는 평균(mean) 과 표준편차(standard deviation, SD)로 표시하였다.
결과는 평균(mean) 과 표준편차(standard deviation, SD)로 표시하였다. 실험군의 평균 간의 유의성을 Duncan's multiple range test로 p <0.05 수준에서 검증하였다.

이론/모형

다음으로 고정항체 또는 항원에 결합한 항체에 효소 표 식한 항체를 결합시켜, 기질용액을 첨가하여 발색시켰다. IgE는 검출감도를 높일 필요가 있기 때문에 avidin-biotin법을 사용해 ELISA법으로 검출하였다.
배양한 임파구 상층액의 IgE 함량을 sandwich ELISA 방법(32) 을 이용하여 측정하였다. 총 항체 양의 측정으로는 항체의 F(ab)2 단편을, 항원 특이적 정량법으로는 항원을 ELISA plate에 고정한 다음 배양상층(supernatant)을 반응시켰다.
실험동물의 꼬리 정맥과 안와 동맥으로부터 채취한 혈액을 원 심분리 한 후 혈청 IgE 농도를 sandwich ELISA 방법을 이용하여 측정하였다(30,31). 시료를 96 well plate에 50 mM carbonate buffer로 희석한(X 1000) 1st 항체를 100 μL씩 분주한 후 4oC에서 overnight시켰다.
실험동물의 안와 동맥으로부터 채취한 혈액을 원심분리한 후 혈청 IL-4, IL-5, IFN-Y 농도를 sandiwich ELISA 방법을 이용하여 측정하였다(30, 31). 시료를 96 well plate에 PBS로 180배 희석한 capture antibody를 100 pL씩 분주하여 실온에서 overnight 시킨 후, block buffer 300 pL을 분주하여 최소 1시간 실온에서 반응시켰다.

성능/효과

결론적으로, 아토피 동물모델 NC/Nga mice에 유산균 파쇄물 (DPF)과 유산균 및 감마리놀렌산 복합체(DPOC)의 경구투여는 혈 청 IgE, IL-4, IL-5를 감소시키는 것으로 나타났으며, 김치로부터 추출한 프로바이오틱스를 아토피 환자에게 섭취시켰을 때 IgE, IL-4, IL-5 감소와 같은 긍정적인 효과를 볼 수 있을 것으로 기 대한다. 여러 종류의 프로바이오틱스는 아토피의 증상완화 또는 면역 체계에 미치는 영향과 정확한 메카니즘을 밝히기 위하여 과 학적인 연구가 필요한 것으로 사료된다.
아토피 피부염 환자에서는 IFN-Y를 생성하는 T-cell의 손상에 의하여 IFN-y 농도가 감소하는 것으로 알려져 있다(45). 그러나 본 연구에서는 프로바이오틱스 섭취를 섭취한 군에서 IFN-y 농도는 대조군에 비하여 높지 않았으나 IFN-y의 counter-regulator인 IL-4 농도는 낮게 나타났다(46- 47). 선행연구(36-38, 42, 48-50)에서 IL-4는 아토피 피부염 진행 과정에 중요한 역할을 하는 것으로 보고하였다.
) 그러나 그 후 실험 4주까지 매주 측정한 결과, 실험 1주, 2주,3주 후의 혈청 IgE 농도는 증류수를 섭취한 DDW군에 비하여 DPF, DPOC, DAH 군에서 모두 유의적으로 낮았다. 그러나 실험 4주에는 각 군에서 각각 49.0 ± 18.6, 29.2 ± 9.9, 82.6 ± 46.7, 89.6 ± 23.9 ng/mL로 측정되어 증류수를 섭취한 DDW군에 비하여 유산균을 섭취한 DPF, DPOC 군에서 유의적으로 낮았다.
최근 연구에 의하면 Lactobacillus균을 알레르기 환자에게 경구투여한 결과 장점막의 기능이 증진된 것으로 나타났다(6-7). 또한, IFN- Y, IL-4, IL-12의 분비를 조절하여 Th2 세포로의 분화를 Th1 세포로 전환시키는 것으로 나타났다(7-8). 이러한 연구결과를 바탕으로 최근에는 알레르기 예방 및 치료에 효과적인 방법으로 프 로바이오틱스의 이용을 제안하고 있다(6-8).
1A). 또한, 실험 시작 시 실험동물의 체중은 평균 23.7 ± 4.5 g으로 각 군 간에 차이가 없었으며 사육기간이 지남에 따라 군 간에 약간의 증감의 차이는 보였으나 각 군 간에 유의적인 차이는 관찰되지 않았다 (Fig. 1B).
이와 같은 결과는 아토피 동물 모델인 NC/Nga mice와 아토피 피부염 환자에서 혈청 IgE 농도가 높게 측정된다는 선행연구(33-38)와 일치하며, 프로바이오틱스를 섭취하였을 때 혈청 IgE 농도가 감소하였다는 선행연구(39-41)와도 일치하는 결과이다. 본 연구에서 프로바이오틱스 (유산균 파쇄물, 유산균)의 섭취가 아토피 피부염 동물모델에서 혈청 IgE 농도를 감소시킨 결과는 아토피 피부염 환자에서도 혈청 IgE 농도를 낮출 수 있음을 시사하는 것으로 사료된다. 프로바이오틱스를 섭취하였을 때 혈청 IgE 농도가 감소하는 것은 프로바이오틱스로 인하여 Pro-Th1 signal을 통해 Th1 cell이 활성화되고 Th2 cell의 활성이 감소되기 때문인 것으로 보고한 연구도 있다(42).
본 연구에서 항히스타민을 섭취한 군(DAH)의 IgE 농도는 3주까지 유산균 파쇄물 (DPF), 유산균 및 Y-리놀렌산 복합체를 섭취한 군(DPOC)과 유사하였으나, 4주 IgE의 농도는 다시 상승하였다. Mazzoni 등(43)의 연구에서는 히스타민이 면역조절 기능을 하며 히스타민이나 항히스타민이 여러 종류의 사이토카인 생성과 co-simulatory molecule의 발현을 변화시킬 수 있는 것으로 보고한 반면, White 등(44)의 연구에서는 항히스타민이 면역학적 지표에 영향을 미치지 않아 천식 치료 혹은 증상 완화에 효과가 없는 것으로 보고하였다.
비장임파구 배양 상층액의 IgE 농도는 유산균 파쇄물(DPF), 유산균 및 Y-리놀렌산 복합체 (DPOC), 항히스타민(DAH), 증류수 (DDW)를 섭취한 군에서 각각 2.94± 0.25, 2.88± 0.68, 3.64± 1.59, 2.80 ± 0.22 ng/mL로 각 군 간에 유의적인 차이가 나타지 않았다 (Table 3).
실험동물의 체중 및 사료섭취량은 사육기간이 지남에 따라 증가하는 경향을 보였으며 각 군 간에 유의적인 차이는 관찰되지 않았다. 실험 시작 시 혈청 IgE 농도는 각 군 간 에 차이가 나타나지 않았으나 실험 전 기간 4주 동안 유산균 파 쇄물(DPF), 유산균 및 y-리놀렌산 복합체(DPOC), 항히스타민(DAH) 을 섭취한 군에서 증류수(DDW)만을 섭취군에 비하여 유의적으 로 낮게 나타났다. 혈청 ifn-y 농도는 각 군에서 유의적인 차이가 나타나지 않았으나 혈청 IL-4 농도는 유산균 및 y-리놀렌산 복합체를 섭취한 군(DPOC)에서 대조군에 비하여 유의적으로 낮 게 나타났다.
실험 시작시, 혈청 IgE 농도는 유산균 파쇄물, 유산균 및 감마리놀렌산 복합체, 항히스타민, 증류수를 섭취한 DPF, DPOC, DAH, DDW군에서 각각 74.3 ± 27.5, 66.7± 13.7, 91.3 ± 30.5, 72.9 ± 26.7 ng/mL로 각 군 간에 유의적인 차이가 나타나지 않았다(Table 1. ) 그러나 그 후 실험 4주까지 매주 측정한 결과, 실험 1주, 2주,3주 후의 혈청 IgE 농도는 증류수를 섭취한 DDW군에 비하여 DPF, DPOC, DAH 군에서 모두 유의적으로 낮았다. 그러나 실험 4주에는 각 군에서 각각 49.
plantarum K8 파쇄물, Y-리놀렌산)를 경구 투여한 후 혈 청 면역지표(IgE, IL-4, IL-5, IFN-y)와 비장 배양액에서 IgE 농도를 측정하였다. 실험동물의 체중 및 사료섭취량은 사육기간이 지남에 따라 증가하는 경향을 보였으며 각 군 간에 유의적인 차이는 관찰되지 않았다. 실험 시작 시 혈청 IgE 농도는 각 군 간 에 차이가 나타나지 않았으나 실험 전 기간 4주 동안 유산균 파 쇄물(DPF), 유산균 및 y-리놀렌산 복합체(DPOC), 항히스타민(DAH) 을 섭취한 군에서 증류수(DDW)만을 섭취군에 비하여 유의적으 로 낮게 나타났다.
혈청 IFN-y 농도는 유산균 파쇄물(DPF), 유산균 및 Y-리놀렌산 복합체(DPOC), 항히스타민(DAH), 증류수(DDW)를 섭취한 군에서 각각 0.15 ± 0.03, 0.19 ± 0.06, 0.16 ± 0.05, 0.18 ± 0.08 ng/mL로 측정되었으며 각 군 간 유의적인 차이가 나타나지 않았다 (Table 2). 혈청 IL-4농도는 각 군에서 각각 0.
08 ng/mL로 측정되었으며 각 군 간 유의적인 차이가 나타나지 않았다 (Table 2). 혈청 IL-4농도는 각 군에서 각각 0.17 ± 0.06, 0.11 ± 0.03, 0.15 ± 0.05, 0.21 ± 0.01 ng/mL로 측정되어 유산균 및 y-리놀렌산 복합체를 섭취한 군 (DPOC)에서 증류수만을 섭취한 군 (DDW)에서 보다 유의적으로 낮게 측정되었다.
혈청 IL-5 농도는 각 군에서 각각 0.21 ± 0.05, 0.23 ± 0.05, 0.21 ± 0.03, 0.39 ± 0.19 ng/mL로 측정되어 유산균 파쇄물(DPF), 유산균 및 Y-리놀렌산 복합체(DPOC), 항히스타민을 섭취한 군(DAH) 에서 증류수만을 섭취한 군 (DDW)보다 유의적으로 낮았다.
혈청 ifn-y 농도는 각 군에서 유의적인 차이가 나타나지 않았으나 혈청 IL-4 농도는 유산균 및 y-리놀렌산 복합체를 섭취한 군(DPOC)에서 대조군에 비하여 유의적으로 낮 게 나타났다. 혈청 IL-5 농도는 유산균 파쇄물(DPF), 유산균 및 Y-리놀렌산 복합체(DPOC), 항히스타민(DAH)을 섭취한 군에서 모두 대조군에 비하여 유의적으로 낮았다. 비장 임파구 배양 상층 액의 IgE 농도는 각 군에서 군 간 유의적인 차이가 나타나지 않았다.
실험 시작 시 혈청 IgE 농도는 각 군 간 에 차이가 나타나지 않았으나 실험 전 기간 4주 동안 유산균 파 쇄물(DPF), 유산균 및 y-리놀렌산 복합체(DPOC), 항히스타민(DAH) 을 섭취한 군에서 증류수(DDW)만을 섭취군에 비하여 유의적으 로 낮게 나타났다. 혈청 ifn-y 농도는 각 군에서 유의적인 차이가 나타나지 않았으나 혈청 IL-4 농도는 유산균 및 y-리놀렌산 복합체를 섭취한 군(DPOC)에서 대조군에 비하여 유의적으로 낮 게 나타났다. 혈청 IL-5 농도는 유산균 파쇄물(DPF), 유산균 및 Y-리놀렌산 복합체(DPOC), 항히스타민(DAH)을 섭취한 군에서 모두 대조군에 비하여 유의적으로 낮았다.

후속연구

Mazzoni 등(43)의 연구에서는 히스타민이 면역조절 기능을 하며 히스타민이나 항히스타민이 여러 종류의 사이토카인 생성과 co-simulatory molecule의 발현을 변화시킬 수 있는 것으로 보고한 반면, White 등(44)의 연구에서는 항히스타민이 면역학적 지표에 영향을 미치지 않아 천식 치료 혹은 증상 완화에 효과가 없는 것으로 보고하였다. 항히스타민에 의한 IgE 농도의 감소 효과는 더 많은 연구가 필요한 것으로 사료된다.

참고문헌 (50)

The Census of Death Statistics. Korea National Statistical Office Seoul, Korea (2000)
Hoolihan KL. Prophylactic and therapeutic uses of probiotics: A review. J. Am. Diet. Assoc. 101: 229-238 (2001)

상세보기
Furrie E. Probiotics and allergy. P. Nutr. Soc. 64: 465-469 (2005)

상세보기
Park HS, Lee HS, Uhm TB. Selection of microorganisms for probiotics and their characterization. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 27: 433-440 (1998)
Gibson GR, Roberfroid MB. Dietary modulation of human colonic microbiota: Introducing the concept of probiotics. J. Nutr. 125: 1401-1412 (1995)

상세보기
Iolauri E, Arvola T, Sutas Y, Molilanen E, Salminene S. Probiotics in the management of atopic eczema. Clin. Exp. Allergy 30: 1604-1610 (2000)
Klliomaki M, Ouwehand A, Arvilommi H, Kero P, Isolauri E. Transforming growth factor beta in the breastmilk: A potential regulator of atopic disease at an early age. J. Allergy Clin. Immun. 104: 1251-1257 (1999)

상세보기
Laiho K, Hoppu U, Ouwehand AC, Salminen S, Isolauri E. Probiotics: on-going research On atopic individuals. Br. J. Nutr. 88(Suppl): S19-S27 (2002)

상세보기
Yoon SP, Kim BS, Ree JH, Lee SC, Kim YK. The environment and lifestyle of atopic dermatitis patients. Korean J. Dermatol. 37: 983-991 (1999)
Kalliomaki M, Kirjavainen P, Eerola E, Kero P, Salminen S, Islauri E. Distinct patterns of neonatal gut microflora in infants in whom atopy was and was not developing. J. Allergy Clin. Immun. 107: 129-134 (2001)

상세보기
Leung DYM. Immunopathology of atopic dermatitis. Semin. Ummunopathol. 13: 437-440 (1992)
Hanifin JM. Atotic dermatitis. J. Am. Acad. Dermatol. 6: 1-13 (1982)

상세보기
Pessi T, Sutas Y, Hurme M, Iolauri E. Interleukin-10 generation in atopic children following oral Lactobacillus rhamnosus GG. Clin. Exp. Allergy 30: 1804-1808 (2000)

상세보기
Majamaa H, Isolauri E. Probiotics: A novel approach in management of food allergy. J. Allergy Clin. Immun. 99: 175-185 (1996)
Ohmne JD, Hanifin JM, Nickoloff BJ. Over-expression of IL-10 in atopic dermatitis. J. Immunol. 154: 1956-1963 (1995)

상세보기
Yoshizawa Y, Nomaguchi H, Izaki S, Kitamura K. Serum cytokine levels in atopic dermatitis. Clin. Exp. Dermatol. 27: 225-229 (2002)

상세보기
Horiuchi Y, Bae SJ, Katayama I, Nishioka K. Therapeutic effects of streptococcal preparation OK-432 on atopic dermatitis-like lesions in NC/Nga mice: Possible shift from a Th2- to Th1-predominance. J. Dermatol. Sci. 35: 187-197 (2004)

상세보기
Yoshiko H, Shuhji S, Eiji T, Takashi O, Yuji K, Katsunori A, Takashi M, Hoshio H. The mechanism of a defective IFN-gamma response to bacterial toxins in an atopic dermatitis model, NC/ Nga mice, and the therapeutic effect of IFN-gamma, IL-12, or IL-18 on dermatitis. J. Immunol. 166: 5439-5447 (2001)

상세보기
Matusaki T, Yamazaki R, Hashimoto S, Yokokura T. The effect of oral feeding of Lactobacillus casei strain shirota on immunoglobulin E production in mice. J. Dairy Sci. 81: 48-53 (1998)

상세보기
Choi SY, Lee HW, Chung KS. Effect of addition of nisin and Leuconostoc mesenteroids IFO 12060 on Escherichia coli growth in stored kimchi. J. Korean Soc. Food Nutr. 21: 414-417 (1992)
Choi YO, Ahn C. Plasmid-associated bacteriocin production by Leuconostoc sp. LAB145 -3A isolated from Kimchi. J. Microbiol. Biotechnol. 7: 409-416 (1997)

원문보기 상세보기
Ryu SH, Jeon YS, Moon JW, Lee YS, Moon GS. Effect of kimchi ingredients to reactive oxygen species in skin cell cytotoxicity. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 26: 998-1005 (1997)
Ryu SH, Jeon YS, Kwon MJ, Moon JW, Lee YS, Moon GS. Effect of kimchi extracts to reactive oxygen species in skin cell cytotoxicity. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 26: 814-821 (1997)
Kondo K, Nagami T, Teramoto S. Differences in hematopoietic death among inbredstrains of mice. pp. 20-29. In: Comparative Cellular and Species Radiosensitivity. Bond P, Sugahara T. (eds). Williams & Wilkins, Baltimore, MD, USA (1964)
Mills LB, Mordan LJ, Roth HL, Winger EE, Epstein WL. Treatment of severe atopic dermatitis by topical immune modulation using dinitrochlorobenzene. J. Am. Acad. Dermatol. 42: 687-689 (2000)

상세보기
Chae OW, Shin KS, Chung HK, Choe TB. Immunostimulation effects of mice fed with cell lysate of Lactobacillus plantarum isolated from Kimchi. Korean J. Biotechnol. Bioeng. 13: 424-430 (1998)

원문보기 상세보기
Horrobin DF. Essential fatty acid metabolism and its modification in atopic eczema. Am. J. Clin. Nutr. 71: 367S-372S (2000)

상세보기
Galland L. Increased requirements for essential fatty acids in atopic individuals: A review with clinical descriptions. J. Am. Coll. Nutr. 5: 213-228 (1986)

상세보기
Yoon S, Lee J, Lee S. The therapeutic effect of evening primrose oil in atopic dermatitis patients with dry scaly skin lesions is associated with the normalization of serum gamma-interferon levels. Skin Pharmacol. Appl. 15: 20-25 (2002)

상세보기
Engvall E, Perlman P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) quantitative assay of immunoglobulin G. Immunochemistry 8: 871-874 (1971)

상세보기
Lim BO, Yamada K, Yoshimura K, Watanabe T, Pham H, Taniguchi S, Sugano M. Free bile acids inhibit IgE production by mouse spleen lymphocytes stimulated by lipopolysaccharide and interlukins. Biosci. Biotech. Biochem. 59: 624-627 (1995)

상세보기
Lim BO, Choue RW, Park DK, Kim HC, Kim SY, Yamada K, Sugano M. Effect of dietary level of pectin on immunoglobulin and cytokine production by mesenteric lymph node and interlukin- 2 receptor in rat. Food Sci. Technol. Res. 8: 14-16 (2002)

상세보기
Grewe M, Bruijnzeel-Koomen CA, Schpf E, Thepen T, Langeveld- Wildschut AG, Ruzicka T, Krutmann J. A role for Th1 and Th2 cells in the immunopathogenesis of atopic dermatitis. Immunol. Today 19: 359-361 (1998)

상세보기
Uehara M, Kimura C. Descendant family history of atopic dermatitis. Acta Derm.-Venereol. 73: 62-63 (1993)

상세보기
Horan RF, Schneider LC, Sheffer AL. Allergic skin disorders and mastocytosis. J. Am. Med. Assoc. 268: 2858-2868 (1992)

상세보기
Reinhold U, Wehrmann W, Kukel S, Kreysel HW. Evidence that defective interferon ${\gamma}$ production in atopic dermatitis patients is due to intrinsic abnormalities. Clin. Exp. Immun. 79: 74-79 (1990)
Jujo K, Renz H, Abe J, Gelfand EW, Leung DY. Decreased interferon ${\gamma}$ and increased interlukin-4 production in atopic dermatitis promotes Ig E synthesis. J. Allergy Clin. Immun. 90: 323- 331 (1992)

상세보기
Robinson DS, Hamid Q, Ying S, Sicopoulos AT, Barkans J, Bentley AM, Corrigan C, Durham SR, Kay AB. Predominant TH2- like bronchoalveolar T-lymphocyte population in atopic asthma. New Engl. J. Med. 326: 298-304 (1992)

상세보기
Trapp CL, Chang CC, Halpern GM, Keen CL, Gershwin ME. The influence of chronic yogurt consumption on populations of young and elderly adults. Int. J. Immunother. 9: 53-64 (1993)

상세보기
Halpern GM, Vruwink KG, Van De Water J, Keen CL, Gershwin ME. Influence of long-term yoghurt consumption in young adults. Int. J. Immunother. 7: 205-210 (1991)
Van de Water J, Keen CL, Gershwin ME. The influence of chronic yogurt consumption on immunity. J. Nutr. 129: S1492- S1495 (1999)

상세보기
Vaarala O. Immunological effects of probiotics with special reference to lactobacilli. Clin. Exp. Allergy 33: 1634-1640 (2003)

상세보기
Mazzoni A, Young HA, Spitzer JH, Visintin A, Segal DM. Histamine regulates cytokine production in maturing dendritic cells, resulting in altered T cell polarization. J. Clin. Invest. 108: 1865- 1873 (1991)
White MV, Slater JE, Kaliner MA. Histamine and asthma. Am. Rev. Respir. Dis. 153: 1665-1676 (1987)
Antoine OM, Laurent GM, Christophe AC, Monique MB, Felix AM, Chantal MG, Brice BC, Sabine JP, Vincent F, Pierre B, Daniel V. Assessment of the Th1/Th2 paradigm in whole blood in atopy and asthma, Am. J. Respir. Crit. Care 161: 1790-1796 (2002)
Cross ML. Microbes vs. microbes: Immune signals generated by probiotic lactobacilli and their role in protection against microbial pathogens. FEMS Immunol. Med. Mic. 34: 245-253 (2002)

상세보기
Pohjavuori E, Viljanen M, Korpela R, Kuitunen M, Tiittanen M, Vaarala O, Savilahti E. Lactobacillus GG effect in increasing IFN-gamma production in infants with cow's milk allergy. J. Allergy Clin. Immun. 114: 131-136 (2004)

상세보기
Renz H, Jujo K, Bradley J, Dementico J, Gelfand EW, Leung DV. Enhanced IL-4 production and IL-4 receptor expression in atopic dermatitis and their modulation by interferon- ${\gamma}$ . J. Invest. Dermatol. 99: 403-408 (1992)

상세보기
Pochard P, Gosset P, Grangette C. Lactic acid bacteria inhibit TH2 cytokine production by mononuclear cells from allergic patients. J. Allergy Clin. Immun. 110: 617-623 (2002)

상세보기
Ricci M. IL-4: A key cytokine in atopy. Clin. Exp. Allergy 24: 801 (1994)

상세보기

저자의 다른 논문 :

LOADING...

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증