HCG 처리에 의한 능성어 Epinephelus septemfasciatus의 성숙과 배란유도 Induction of Maturation and Ovulation with HCG Treatment in the Sevenband Grouper Epinephelus septemfasciatus원문보기
능성어 암컷의 난모세포 발달에 따른 성숙 및 배란유도를 위하여 제주도 연안에서 채집하여 사육중인 능성어 51마리(전장 $69.1{\pm}1.0cm$, 체중 $5.8{\pm}0.3kg$)를 대상으로 암컷의 생식소 발달을 cannulation으로 조사하였다. 난황구기 단계 이상 난모세포(난경 $300{\sim}500{\mu}m$)를 가진 어미를 대상으로 HCG 500 IU/kg BW로 주사하였다. HCG 처리 후 난경변화는 24시간째에 $300{\sim}700{\mu}m$, 48시간째에는 $800{\mu}m$ 이상이 $91.3{\sim}98.8%(95.1{\pm}3.7%)$이었다. HCG 처리 실험구에서는 실험어 8마리 중 7마리가 배란되었고, 총 배란된 알 2,480 mL이었으며, 이중 부상란은 1,360 mL이었다. 수정률과 부화율은 각각 $56.2{\sim}94.9%(77.8{\pm}2.9%),\;70.0{\sim}97.7%(92.2{\pm}2.1%)$이었다. 이들 결과들은 HCG 500 IU/kg BW 농도로 처리했을 때 난황구기 난모세포를 가진 능성어 암컷의 성숙 및 배란에 효과가 있을 것으로 사료된다.
능성어 암컷의 난모세포 발달에 따른 성숙 및 배란유도를 위하여 제주도 연안에서 채집하여 사육중인 능성어 51마리(전장 $69.1{\pm}1.0cm$, 체중 $5.8{\pm}0.3kg$)를 대상으로 암컷의 생식소 발달을 cannulation으로 조사하였다. 난황구기 단계 이상 난모세포(난경 $300{\sim}500{\mu}m$)를 가진 어미를 대상으로 HCG 500 IU/kg BW로 주사하였다. HCG 처리 후 난경변화는 24시간째에 $300{\sim}700{\mu}m$, 48시간째에는 $800{\mu}m$ 이상이 $91.3{\sim}98.8%(95.1{\pm}3.7%)$이었다. HCG 처리 실험구에서는 실험어 8마리 중 7마리가 배란되었고, 총 배란된 알 2,480 mL이었으며, 이중 부상란은 1,360 mL이었다. 수정률과 부화율은 각각 $56.2{\sim}94.9%(77.8{\pm}2.9%),\;70.0{\sim}97.7%(92.2{\pm}2.1%)$이었다. 이들 결과들은 HCG 500 IU/kg BW 농도로 처리했을 때 난황구기 난모세포를 가진 능성어 암컷의 성숙 및 배란에 효과가 있을 것으로 사료된다.
To induce of maturation and ovulation, ovary with different development stage of oocytes of sevenband grouper Epinephelus septemfasciatus(n=51, TL $69.1{\pm}1.0$ cm, BW $5.8{\pm}0.3$ kg) rearing indoor-tank in mature and spawning season(June to July) were investigated by cannul...
To induce of maturation and ovulation, ovary with different development stage of oocytes of sevenband grouper Epinephelus septemfasciatus(n=51, TL $69.1{\pm}1.0$ cm, BW $5.8{\pm}0.3$ kg) rearing indoor-tank in mature and spawning season(June to July) were investigated by cannulation. Female with yolk globule stage oocyte($300{\sim}500{\mu}m$) was injected with human chorionic gonadotropin(HCG, 500 IU/kg BW). Oocytes developed at diameter $300{\sim}700{\mu}m$ in 24 hrs after the HCG injection, and the distribution ratio of over $800{\mu}m$ of oocytes diameter in the cannulated eggs were $91.3{\sim}98.8%(95.1{\pm}3.7%)$ in 48 hrs after the HCG injection. Ovulation was induced from 7 out of 8 female after the HCG injection. The total volume of stripped eggs was 2,480 mL, and the volume of buoyant eggs was 1,360 mL. The fertilization and hatching rates of buoyant eggs were $56.2{\sim}94.9%$ and $70.7{\sim}97.9%$, respectively. These results suggested that HCG 500 IU/kg BW effects on maturation and ovulation of female sevenband grouper with yolk globule stage of oocyte.
To induce of maturation and ovulation, ovary with different development stage of oocytes of sevenband grouper Epinephelus septemfasciatus(n=51, TL $69.1{\pm}1.0$ cm, BW $5.8{\pm}0.3$ kg) rearing indoor-tank in mature and spawning season(June to July) were investigated by cannulation. Female with yolk globule stage oocyte($300{\sim}500{\mu}m$) was injected with human chorionic gonadotropin(HCG, 500 IU/kg BW). Oocytes developed at diameter $300{\sim}700{\mu}m$ in 24 hrs after the HCG injection, and the distribution ratio of over $800{\mu}m$ of oocytes diameter in the cannulated eggs were $91.3{\sim}98.8%(95.1{\pm}3.7%)$ in 48 hrs after the HCG injection. Ovulation was induced from 7 out of 8 female after the HCG injection. The total volume of stripped eggs was 2,480 mL, and the volume of buoyant eggs was 1,360 mL. The fertilization and hatching rates of buoyant eggs were $56.2{\sim}94.9%$ and $70.7{\sim}97.9%$, respectively. These results suggested that HCG 500 IU/kg BW effects on maturation and ovulation of female sevenband grouper with yolk globule stage of oocyte.
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문제 정의
이 연구는 육상 수조식 사육환경에서 능성어의 안정적인 수정란 생산을 하기 위해 적정 호르몬 처리시기와 호르몬 처리에 따른 난성숙 및 배란유무 그리고 배란된 알을 이용하여 인공수정 하였을 때 수정률과 부화율을 조사하였다.
제안 방법
, 2004). HCG 처리에 따른 체내 난경변화 조사는 cannulation 방법을 이용하여 HCG 처리 후 24시간 간격으로 생식소내에 있는 난모세포를 추출 및 배란유무를 관찰하였다. 추출된 난모세포는 만능투영기(Mitutoyo, PJ-H 3000F, Japan)와 현미경을 이용하여 호르몬 처리 후 시간경과에 따른 난모세포의 크기 변화를 조사하였다.
난황구기 단계 이상 난모세포(난경 300~500 µm)를 가진 어미를 대상으로 HCG 500 IU/kg BW로 주사하였다.
능성어 암컷의 난모세포 발달에 따른 성숙 및 배란유도를 위하여 제주도 연안에서 채집하여 사육중인 능성어 51마리(전장 69.1±1.0 cm, 체중 5.8±0.3 kg)를 대상으로 암컷의 생식소 발달을 cannulation으로 조사하였다.
제주 연안에서 채집하여 제주대학교 해양과환경연구소의 사각콘크리트 수조(5×5×2 m, 유효수량 40 ton)에서 유수식 사육 시스템으로 사육하였다. 먹이는 생사료 단독 또는 자체 제조한 모이스트펠렛 (moist pellet)을 1회/1일, 어체중의 1~2%를 공급하였다. 생식소 발달 조사는 능성어 어미 총 51마리(전장 69.
성숙유도가 가능한 암컷을 대상으로 HCG (Sigma Co., USA)을 사용하여 난성숙 및 배란 유도를 하였다. HCG처리는 조사대상 51마리 중 성숙유도가 가능한 8마리(평균전장 77.
, 2005)와 HCG 처리로 인공 채란된 알을 이용하여 수정시켰을 때 수정률과 부화율을 각각 3회 조사하였다. 수정률은 각각의 실험구에서 인공수정 후 수정란이 상실기 단계에 도달했을 때를, 부화율은 부화 후 1일째를 기준으로 조사하였다.
3 kg)를 대상으로 실험어의 자연 성성숙 시기인 6~7월에 조사하였다. 실험어는 200~300 ppm의 2- phenoxyethanol (Sigma Co., USA)에 마취시킨 후 외부 생식공의 발달정도에 따라 실험어를 선택하여 내경 0.8 mm, 외경 1.0 mm인 실리콘 재질의 튜브를 이용하여 cannulation을 하였다. 난성숙과 배란 유도를 하기위해 난황구기 단계 이상의 난모세포를 가진 어미를 선별 후 portable reader (Trovan Ltd.
1 mL)으로 하였으며, 각각 수정률과 부화율을 조사하였다. 웅성화로 유도된 능성어에서 채취한 신선한 정자(Song et al., 2005)와 HCG 처리로 인공 채란된 알을 이용하여 수정시켰을 때 수정률과 부화율을 각각 3회 조사하였다. 수정률은 각각의 실험구에서 인공수정 후 수정란이 상실기 단계에 도달했을 때를, 부화율은 부화 후 1일째를 기준으로 조사하였다.
인공수정은 건식법(알 1×106개 : 정자 0.1 mL)으로 하였으며, 각각 수정률과 부화율을 조사하였다.
HCG 처리에 따른 체내 난경변화 조사는 cannulation 방법을 이용하여 HCG 처리 후 24시간 간격으로 생식소내에 있는 난모세포를 추출 및 배란유무를 관찰하였다. 추출된 난모세포는 만능투영기(Mitutoyo, PJ-H 3000F, Japan)와 현미경을 이용하여 호르몬 처리 후 시간경과에 따른 난모세포의 크기 변화를 조사하였다.
대상 데이터
HCG처리는 조사대상 51마리 중 성숙유도가 가능한 8마리(평균전장 77.1±3.7 cm, 평균체중 7.9±1.1 kg)를 대상으로 하였다.
생식소 발달 조사는 능성어 어미 총 51마리(전장 69.1±1.0 cm, 체중 5.8±0.3 kg)를 대상으로 실험어의 자연 성성숙 시기인 6~7월에 조사하였다.
제주 연안에서 채집하여 제주대학교 해양과환경연구소의 사각콘크리트 수조(5×5×2 m, 유효수량 40 ton)에서 유수식 사육 시스템으로 사육하였다.
데이터처리
모든 실험은 3반복으로 조사하였으며, 실험 결과의 통계처리는 ANOVA-test를 실시하여 Duncan's multiple range test로 평균간의 유의성을 SAS 통계프로그램으로 검정하였다.
성능/효과
6월과 7월에 능성어를 대상으로 생식소 발달을 조사한 결과, cannulation이 가능한 28마리 중 16마리가 주변인기 단계의 미성숙한 난모세포가, 8마리에서 난황구기 단계의 난모세포가 분포하였다. 그리고 4마리에서는 과숙란을 포란하였다(Fig.
능성어 어미 개체당 배란된 알은 70~710 mL였고, 7마리의 총 배란된 알은 2,480 mL이었다. 그리고 배란된 알 중 부상란은 1,360 mL로 부상률은 평균 54.9%이었다(Table 2).
이 연구에서 능성어 난소 내 300~700 µm 난황구기 단계 난모세포를 가진 개체 8마리를 대상으로 HCG 처리 후 24시간 경과 시 난경 300~700 µm 내외의 난모세포들이 분포하였고, 48시간 경과 후에는 91.3~98.8% (95.1±3.7%)가 1~8개의 유구를 가지는 난경 800 µm이상 난모세포이었다(Fig. 1C, 2).
이 연구에서 능성어 암컷에 HCG 500 IU/kg BW를 처리하여 난성숙 및 배란 유도를 할 수 있었다. 자바리와 능성어를 대상으로 Pregnant Mare's Serum Gonadotropin 150 IU/kg BW 과 HCG 1,000 IU/kg BW를 각각 3회와 1회를 동시에 처리하여 인공배란이 가능하였고(Takaya and Arakawa, 1987), 능성어에 연어 뇌하수체 7 mg/kg BW와 GTH 500 IU/kg BW를 등근육에 함께 주사하여 48시간 후에 채란이 가능하였다(Kitajima et al.
, 1996), LHRHa 처리한 능성어에서 인공채란했을 때 수정률 및 부화율은 각각 70%와 80%이었다(Shein, 2000). 이 연구에서 능성어 암컷에 HCG 처리로 배란된 알을 이용하여 인공수정 시켰을 때 수정률 및 부화율은 수조내 자연 산란한 알 보다 수정률과 부상률이 높았다. 이와같이 수조에서 자연 산란이 어렵거나 수정률과 부화율이 낮은 종에서 안정적인 수정란 확보를 위한 방법으로 호르몬 처리 방법이 유용할 것으로 생각된다.
, 2003). 이 연구에서 능성어에 HCG를 처리 했을 때 24시간 경과 후 난경이 증가하기 시작하여 48시간 후에 양질의 알이 배란되었다(Fig. 2). 이와 같은 호르몬 처리 후 배란 유도까지 소요시간 차이는 종에 따른 차이가 있으나, 사육조건, 호르몬 종류와 농도 차이도 하나의 원인으로 생각된다.
이 연구에서 성 성숙한 능성어 생식소내 난모세포 변화를 조사한 결과 300~500 µm 내외 크기를 가진 능성어 암컷에 HCG 처리로 성숙 및 배란 유도를 할 수 있었다.
이 연구에서 웅성화로 유도된 능성어에서 배정된 정자를 이용하여 인공수정 시켰을 때, 수정률은 56.2~94.9% (77.8±2.9%)였으며, 수정란 부화율은 70.0~97.7% (92.2±2.1%) 이었다(Fig. 3).
1%)이었다. 이들 결과들은 HCG 500 IU/kg BW 농도로 처리했을 때 난황구기 난모세포를 가진 능성어 암컷의 성숙 및 배란에 효과가 있을 것으로 사료된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
바리과 어류의 낮은 수정률, 부화율을 해결하기 위해 어떤 해결책을 시행하고 있는가?
, 2002). 이와 같이 사육 수조내 산란이 이루지지 않거나 또는 산란이 일어나도 수정률과 부화율이 낮은 문제점을 해결하기 위해 E. microdon, E. aeneus, E. marginatus에 각각 gonadotropin (GTH), human chorionic gonadotropin (HCG), luteinising hormone releasing hormone analogue (LHRHa) 등의 주사로 성숙 및 배란을 유도하여 수정란을 생산하고 있다(Tamaru et al., 1996; Hassin et al.
능성어의 양식산업화가 어려운 이유는 무엇인가?
akaara 등은 우리나라, 일본, 중국, 동남아시아 지역에서 식용어로 기호도가 높아 시장성이 넓다. 그러나 지금까지 바리과 어류의 수정란을 안정적으로 확보하는데 어려움이 있어 종묘생산 등 양식산업화에 애로사항이 있다.
바리과 어류의 사육 수조 내 수정률이 낮은 이유는 무엇인가?
, 1997). 바리과 어류의 사육 수조내 수정률이 낮은 이유 중 하나는 성숙 산란시기에 종 특이적인 산란행동에 적합한 사육수조환경을 조성하는데 어려움이 있기 때문이다(Okumura et al., 2002).
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