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문제 정의
- 본 연구에서는 사철쑥과 더위지기의 용매별 추출물에 대한 항산화 효과를 확인하고자 한다.
제안 방법
- 4) 25ml를 취하여 50℃에서 일정 기간 동안(3, 5, 7일) 저장한 후 반응액을 분획여두에 옮겨 chloroform을 가하고 3회 반복 추출하였다. Chloroform 추출액에 acetic acid 25ml 및 포화 KI 용액 1ml를 가하고 암소에 5 분간 방치한 다음 증류수 50ml를 가한 후 가용성 전분을 지시약으로 하여 0.01N NazSQ용액으로 적정하였다.
- 각 건조시료 30g을 Accelerated Solvent Extractor(ASE 100, Dionex, USA)에 의한 용매별 분획으로 hexane, ether, ethylacetate, methanol 및 water로 연속 추출하여 166ml 추출물을 얻었다. 분획물을 농축하여 30ml로 정용한 후 실험재료로 사용하였다(Fig.
- 각 시료에 대하여 hexane, ether, ethylacetate, methanol 및 water추출물에 대해 DPPH free radical 소거 효과를 측정하였다(Table 1).
- 4ml를 가하여 15분간 방치한 다음 520nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 증류수 0.4ml를 가하여 상기와 동일한방법으로 측정하여 잔존하는 아질산 양을 구하였으며, 아질산염 소거 능은 분획물을 첨가하기 전과 후의 아질산염 백분율(%)로 표시하였다. 실험결과는 3회 반복시험하였다.
- 본 시험에서는 진안약초시험장에서 생육이 왕성한 7월에 채취한 사철쑥(Artemisia capillaris Thunb*)와 더위지기 (Artemisia iwayomogi Ktamra) 두 종식물의 잎만을 분리한 시료와 시중에서 한약재로 유통되 어질때와 마찬가지로 잎과 줄기 , 네가지 시료를 음건한 후 분쇄하여 분말로 만들었다. 분말이 된 시료를 100 mesh 체로 걸러 본 실험에 사용하였다.
- 4ml를 가하여 상기와 동일한방법으로 측정하여 잔존하는 아질산 양을 구하였으며, 아질산염 소거 능은 분획물을 첨가하기 전과 후의 아질산염 백분율(%)로 표시하였다. 실험결과는 3회 반복시험하였다.
대상 데이터
- 시료를 음건한 후 분쇄하여 분말로 만들었다. 분말이 된 시료를 100 mesh 체로 걸러 본 실험에 사용하였다.
- 얻었다. 분획물을 농축하여 30ml로 정용한 후 실험재료로 사용하였다(Fig. 1).
데이터처리
- 이 반응액을 흡수분광광도계를 사용하여 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능(electron donating ability, EDA%)으로 환산하였으며 3회 반복실험하여 얻은 결과를 평균치로 나타내었다.
이론/모형
- Kato et al.(1987)의 방법에 준하여 1mM NaNQ 용액 1ml 에 각각의 분획물 0.02ml를 가하고 0.1N HCl(pH 1.2), 0.2M citrate phosphate buffer(pH 4.2, pH 6.0)로 각각 pH를 보정한 다음 반응액의 부피를 10ml로 하였다. 용액을 37C에서 1시간 반응시 킨 후 1ml씩 취하고 2% 초산 5ml와 30% 초산에 용해한 Griess 시약(1% sulfanylic acid:1% naphthylamine = 1 : 1) 0.
- 각 시료의 전자공여능 측정은 Blois(1958)의 방법에 준하여 각 추출물의 DPPH(1.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)에 대한 수소공여 효과로 측정하였다. 즉, 일정 농도의 시료 2ml에 2x10-4M DPPH용액(dissolved in 99% methanol) 1ml를 dissolved 가하고, vortex mixing하여 37℃에서 30분간 반응시켰다.
- 한편, 이 등(1999) 의 연구에서는 침쑥 Artemisia princeps var orientalis 에서 분리한 flavonoid 화합물들이 효소적 또는 비효소적으로 지질 과산화를 억제하며 높은 항산화효과를 나타낸다고 하였다. 대부분의 flavonoid 화합물은 ethylacetate층에 존재함을 2-D paper chromatography 방법을 통하여 입증하였다(Mabry et al., 1970). 또한 최 등(2006)은 더위지기가 사철쑥에 비하여 flavonoid 함량이 현저히 높게 나타남을 확인하였다.
성능/효과
- 3일간 저장한 linoleic acid 기질에 대한 추출물별 항산화 활성은 ethylacetate추출물에서 367~423meq/kg로 가장 높게 나타났으며 , hexane, methanol, water, ether추출물순이 었고더위지기가 사철쑥에 비하여 조금 높은 활성을 보였으며 잎 추출물과 잎과 줄기추출물사이의 차이는 유의적이지 않았다.
- 3과 같다. 3일간 저장한 linoleic acid 기질에 대한 추출물별 항산화활성은 ethyl acetate 추출물에서 367~423meq/kg로 가장 높게 나타났으며 hexane, methanol, water, ether 추출물 순으로 강하게 나타났다. 시료별로는 더 위지기가 사철쑥에 비하여 조금 높은 활성을 보였으며 잎 추출물과 잎과 줄기추출물사이의 차이는 유의적이지 않았다.
- 56㎍/ml로 나타났다. Ether추출물과 methan이추출물에서도 더위지기가 사철쑥보다 강한 소거능을 나타내었으며 water추출물에서 사철쑥 잎이 더위지기 잎보다 강한 소거 능을 나타내었다. 시료별 비교는 실험결과가 일정하게 나타난 ethylacetate추출물과 ether추출물의 DPPH free radical 소거 능을 기준으로 더위지기가 사철쑥에 비하여 높은 항산화 활성을 나타내었다.
- 56㎍/ml로 가장 낮은 농도를 나타내 었으며 다음으로 ether추출물 methan이추출물, water추출물 순이었으며 hexane추출물에서는 전자공여능이 뚜렷이 나타나지 않았다. ethylacetate와 ether 추출물의 DPPH free radical 소거능을 기준으로 더위지기가 사철쑥에 비하여 높은 항산화 활성을 나타내었다.
- 높은 소거능을 보였다. pH 1.2에서 ethyl acetate 추출물은 53.75~84.25%로 가장 높은 소거능을 나타내었으며 methan이추출물과 hexane추출물에서도 비교적 양호한 소거 능을 보였고, water추출물과 ether추출물에서는 소거능이 확실히 나타나지 않았다.
- 추출물에서 높은 소거능을 보였다. pH 1.2에서 ethylacetate 추출물은 53.8~84.3%로 가장 높은 소거능을 나타내었으며 methan이과 hexane 추출물에서도 비교적 양호한 소거 능을 보였다. Water추출물과 ether추출물에서는 소거능이 확실히 나타나지 않았다.
- 각 pH 조건에서 아질산염 소거능은 전반적으로 비극성 용매의 추출물보다는 극성 용매인 methanol 추출물과 ethylacetate 추출물에서 높은 소거능을 보였다. pH 1.
- 각 pH 조건에서 아질산염 소거능은 전반적으로 비극성 용매의 추출물보다는 극성 용매인 methan이추출물과 ethylacetate 추출물에서 높은 소거능을 보였다. pH 1.
- , 2002), 당귀와 감초가 linoleic acid에 대하여 강한 항산화효과를 나타낸 연구 결과(김등, 2004)보다 사철쑥과 더위지기의 linoleic acid에 대한 항산화 효과는 다소 약하지만 이 등(2002)이 보고한 시판 한약재의 항산화 활성 검정에서 쑥속 식물인 애엽의 linoleic acid에 대한 항산화 효과에 비하여는 높은 것으로 판단된다. 또한 DPPH radical 소거활성, 아질산염소거능과 linoleic acid에 대한 항산화 효과에서 더위지기가 사철쑥에 비하여 약간 높은 항산화 활성을 나타냄을 확인하였다.
- 본 실험은 전자공여능에 따른 IC50을 살펴본 것으로 ethylacetate로 추출한 사철쑥 잎추출물에서 1.74㎍/ml, 잎과 줄기 추출물에서 2.24㎍/ml, 더위지 기 잎추출물에서 1.81㎍/ml, 잎과 줄기추출물에서 1.56㎍/ml로 가장 낮은 농도를 나타내 었으며 다음으로 ether추출물 methan이추출물, water추출물 순이었으며 hexane추출물에서는 전자공여능이 뚜렷이 나타나지 않았다. ethylacetate와 ether 추출물의 DPPH free radical 소거능을 기준으로 더위지기가 사철쑥에 비하여 높은 항산화 활성을 나타내었다.
- Ether추출물과 methan이추출물에서도 더위지기가 사철쑥보다 강한 소거능을 나타내었으며 water추출물에서 사철쑥 잎이 더위지기 잎보다 강한 소거 능을 나타내었다. 시료별 비교는 실험결과가 일정하게 나타난 ethylacetate추출물과 ether추출물의 DPPH free radical 소거 능을 기준으로 더위지기가 사철쑥에 비하여 높은 항산화 활성을 나타내었다.
- 3일간 저장한 linoleic acid 기질에 대한 추출물별 항산화활성은 ethyl acetate 추출물에서 367~423meq/kg로 가장 높게 나타났으며 hexane, methanol, water, ether 추출물 순으로 강하게 나타났다. 시료별로는 더 위지기가 사철쑥에 비하여 조금 높은 활성을 보였으며 잎 추출물과 잎과 줄기추출물사이의 차이는 유의적이지 않았다. 5일, 7일이 경과하여도 각 분획물의 순서에는 변함이 없었다.
- 강 등(1995)의 연구에서 용매에 따른 쑥의 아질산염 분해능이 70% acetone추출물에서 양호하게 나타났다고 보고하여 본 실험의 결과와 유사하였다. 식물종과 부위에 따른 아질산염 소거능은 더위지기가 사철쑥에 비하여 상대적으로 높은 소거능을 나타내 었으며 잎과 줄기추출물에 비하여 잎 추출물의 소거능이 약간 높게 나타났다. 임 등(2007)의 연구에서는배암 차조기 메탄올추출물을 첨가하였을 때 아질산염소거능이 pH 1.
- 추출물별 DPPH free radical 소거능을 확인한 IG은 ethylacetate추출물에서 1.56~2.24㎍/ml, ether추출물에서 6.65~9.75㎍/ml로 나타났으며 methan이추출물은 19.43~ 36.73㎍/ml, water추출물은 12.93~82.91㎍/ml의 소거 능을 보였다. 추출용매에 따른 DPPH free radical 소거능은 ethylacetate추출물, ether추출물, methan이추출물, water 추출물 순이었으며 hexane 추출물에서는 전자공여능이 뚜렷히나타나지 않았다.
- 91㎍/ml의 소거 능을 보였다. 추출용매에 따른 DPPH free radical 소거능은 ethylacetate추출물, ether추출물, methan이추출물, water 추출물 순이었으며 hexane 추출물에서는 전자공여능이 뚜렷히나타나지 않았다.
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