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문제 정의
- 본 실험연구에서는 고지혈증에 대한 황기의 효능을 평가해보고자, 고지 방식이로 유발된 흰쥐 의 고지 혈증 모델 에 황기 를 투여하여 체중변화, 간장의 무게변화 및 혈청 중의 Total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, triglyceride, Phospholipid 함량 변화를 관찰하고자 하였다.
- 肺의 虧損을 예방 . 치료하는데 補氣藥으로 다용되고 있기에 高脂血症을 예방 또는 치료할수 있는 좋은 약재로 생각되어, 正氣의 개념 즉, '正氣存內, 邪不可 干'의 관점에서 補氣藥인 황기가 脂質대사의 효율을 높여 高脂血 症을 예방할 수 있는 약재라 생각하여 본 연구를 수행하였다.
- 肺의 虧損을 예방 . 치료하는데 補氣藥으로 다용되고 있어 高脂血症을 예방 또는 치료할 수 있는 좋은 약재로 생각되어 연구를 수행하였다.
제안 방법
- 老年에 발생하고끄对 黃茂는 後天 의 근본이며 노화에 직접적 연관성이 있는 脾 . 肺의 虧損을 예방 . 치료하는데 補氣藥으로 다용되고 있어 高脂血症을 예방 또는 치료할 수 있는 좋은 약재로 생각되어 연구를 수행하였다.
- 고지혈증은 고지방사료(Harlan, TD94095, USA)> 4주간 물과 함께 자유롭게 섭취하게 하여 유발하였으며, 고지방사료의 kg당 조성 내용과 분량은 다음과 같다.
- 정상군에는 4주간 일반 흰쥐용 사료(제일제당, 한국)를 자유롭게 섭취할 수 있도록 제공하면서 1일 1회 체중 100 g 당 증류수 1 ml를 경구투여 하였다. 대조군에는 4주간 정상군과 동일하게 증류수를 경구투여하면서, 고지방 사료(Harlan, TD94095, USA)를 자유급식케 하여 고지 혈증을 유도하였다. 실험군A(저농도 투여군, 황기의 인체 체중비 례 3배 농도 투여군)에는 4주간 고지방사료를 자유급식케 하면서인체 체중비 례 3배 에 해당하는 시료 분량인 178.
- 8 ㎎/㎏으로 다르게 하였다. 시료투여에서는 성인체중을 60 kg으로 설정하여 1일 2첩 복용하는관례를 기준으로 하여 흰쥐의 체중비례로 투여하였고, 투여 약물이 단미제여서 1첩을 15 g으로 설정하였다.
- 실험 개시일, 실험 1주, 2주, 3주 및 4주차에 각각 체중을 측정하여 변화를 관찰하였다.
- 실험 종료일에 모든 동물을 12시간 절식 시키꼬 나서, 에테르 (ether)로 마취한 후 심장 채혈하여 3, 000rpm에서 10분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 이 혈청에 대하여 효소법으로 자동분석기 (Hitachi7150, Japan)를 이용하여 total cholesterol, HDL-choles terol, LDL-cholesterol, triglyceride 및 phospholipid 의 함량을 측정하였다.
- 실험 종료일에 채혈한 후 간장을 적출하여 화학저울(Ohaus, USA)을 사용하여 그 무게를 측정하였다.
- 대조군에는 4주간 정상군과 동일하게 증류수를 경구투여하면서, 고지방 사료(Harlan, TD94095, USA)를 자유급식케 하여 고지 혈증을 유도하였다. 실험군A(저농도 투여군, 황기의 인체 체중비 례 3배 농도 투여군)에는 4주간 고지방사료를 자유급식케 하면서인체 체중비 례 3배 에 해당하는 시료 분량인 178.6 ㎎/㎏에 해 당하는 건조추출물을 생 리식 염수에 용해하여 검 액을 10 ㎎/㎏분량으로 만들어 1일 1회 경구투여하였다. 실험군B(고농도 투여군, 황기의 인체 체중비례 5배 농도 투여군)에는 실험군 A와 동일하게 하되 시료 투여 용량만 297.
- 혈청을 분리하였다. 이 혈청에 대하여 효소법으로 자동분석기 (Hitachi7150, Japan)를 이용하여 total cholesterol, HDL-choles terol, LDL-cholesterol, triglyceride 및 phospholipid 의 함량을 측정하였다.
- 실험군B 12마리로 나누었다. 정상군에는 4주간 일반 흰쥐용 사료(제일제당, 한국)를 자유롭게 섭취할 수 있도록 제공하면서 1일 1회 체중 100 g 당 증류수 1 ml를 경구투여 하였다. 대조군에는 4주간 정상군과 동일하게 증류수를 경구투여하면서, 고지방 사료(Harlan, TD94095, USA)를 자유급식케 하여 고지 혈증을 유도하였다.
- 한약추출기 (Heating Mantle DS-1009, Korea) 에 황기 237.6 g(15.8첩분량, 황기 15 g을 1첩으로 산정)과 증류수 1,500 业를 넣고 60분간 불린 뒤에 2시간 동안 끓인 다음 고형 성분을 여과한 뒤 감압농축기 (Rotavaper R-144, BUCHI, Swiss)를 이용하여 농축 한 후동결건조하여 건조추출물 총 28.3 g을 얻었다.
- 황기가 고지혈증에 미치는 영향을 관찰하기 위하여, 흰쥐에고지방식이를 4주간 제공하여 고지혈증을 유발하면서, 실험군 A 에는 황기 178.6 ㎎/㎏, 실험군 B에는 297.8 ㎎/㎏을 경구투여하여체중 변화, 간장 무게 변화, 혈청 중의 Total cliolesterol, HDL-cholesterol, LDL-cliolesterol, trigly-ceride, Phospholipid 함량 변화에 대한 검사를 시행한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다.
- 흰쥐 총 48마리를 정상군 12마리, 대조군 12마리, 실험군A 12마리, 실험군B 12마리로 나누었다. 정상군에는 4주간 일반 흰쥐용 사료(제일제당, 한국)를 자유롭게 섭취할 수 있도록 제공하면서 1일 1회 체중 100 g 당 증류수 1 ml를 경구투여 하였다.
대상 데이터
- 시료 약재인 황기는 제천산 황기를 엄선하여 사용하였다. 한약추출기 (Heating Mantle DS-1009, Korea) 에 황기 237.
- 체중 270 g 내외의 수컷 SPF Sprague-Dawley계 흰쥐를 샘타코(주)에서 구입하여 세명대학교 청정동물사육실(온도 21+VC 및 습도 50±5%)내에서 1주일간 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
데이터처리
- 실험군간의 유의성은 실험결과를 Student's t-test를 통하여 p<0.05인 경우 유의한 차이가 있는 것으로 판정하였고, 측정값의 표현은 S.E.M.(Standard Error of Mean)으로 하였다.
성능/효과
- HDL-cholesterol 은 실험군 A에서는 대조군에 비해 증가되었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성있게 증가하였다. HDL-cholesterol의 亨치가 증가한 것으로 보아 황기는 동맥경화의 진전을 억제시키는 효과가 있는 것으로 생각된다.
- HDL-cholesterole 말초의 cholesterol을 간으로 운반하는 cholesterol 역전송계를 담당하는 지단백으로 동맥경화의 진전을억제시키는 것으로 알려지고 있다실험결과 HDL-cholesterol 은 실험군 A에서는 대조군에 비해 증가되었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성있게 증가하였다. HDL-cholesterol의 亨치가 증가한 것으로 보아 황기는 동맥경화의 진전을 억제시키는 효과가 있는 것으로 생각된다.
- LDLe 혈관 내피하에서 산화변성을 받아 산화 LDL로 되어 scavenger pathway라고 부르는 경로를 거쳐 세포내에 축적되어 동맥경화를 진전시키는 것으로 알려지고 있다心. LDL-cholesterol 함량 변화를 관찰한 결과/ 실험군 A에서는 대조군에 비해 감소되었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성있게 감소하였다. LDL-cholesterol의 수치가낮아진 것으로 보아 황기는 동맥경화의 진전을 억제하는 효과가있는 것으로 보인다.
- HDL-cholesterol 은 실험군A에서는 대조군에 비해 증가되었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성있게 증가하였다. LDL-cholesterol 함량은 실험군A에서는 대조군에 비해 감소되었으나 유의성은 없었고, 실험군 B 에서는 대조군에 비하여 유의성있게 감소하였다. Triglyceride 함량은 실험군 A 및 B 모두 대조군에 비해 유의성있게 감소하였다.
- Triglyceride 함량은 실험군 A 및 B 모두 대조군에 비해 유의성있게 감소하였다. Phospholipid 함량은 실험군 A에서는 대조군에 비해 감소하는 경향은 있었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성있게 감소하였다.
- 간장 무게 관찰결과, 실험군A 와 설험군B는 모두 대조군에 비해 유의성있게 감소한 것으로 나타났다. Total cholesterol 함량은 실험군A에서는 감소하는 경향은 있었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서 대조군에 비하여 유의성있게 감소하였다. HDL-cholesterol 은 실험군A에서는 대조군에 비해 증가되었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성있게 증가하였다.
- LDL-cholesterol 함량은 실험군A에서는 대조군에 비해 감소되었으나 유의성은 없었고, 실험군 B 에서는 대조군에 비하여 유의성있게 감소하였다. Triglyceride 함량은 실험군 A 및 B 모두 대조군에 비해 유의성있게 감소하였다. Phospholipid 함량은 실험군 A에서는 대조군에 비해 감소하는 경향은 있었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성있게 감소하였다.
- 비해 유의성 있게 감소하였다. 간장 무게 관찰결과, 실험군A 와 설험군B는 모두 대조군에 비해 유의성있게 감소한 것으로 나타났다. Total cholesterol 함량은 실험군A에서는 감소하는 경향은 있었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서 대조군에 비하여 유의성있게 감소하였다.
- 간장의 무게변화를 측정한 결과, 대조군은 정상군에 비해 유의성 있게 증가한 것으로 나타났고, 실험군 A와 실험군 B는 모두 대조군에 비해 유의성 있게 감소하였다(Table 2).
- 대조군의 HDL-cholesterol 함량은 정상군에 비해 유의성 있게 증가하였다. 실험군 A에서는 대조군에 비해 증가되었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성 있게 증가하였다(Table 4).
- 대조군의 LDL-cholesterol 함량은 정상군에 비해 유의성 있게 증가하였다. 실험군 A에서는 대조군에 비해 감소되었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다(Table 5).
- 대조군의 phospholipid 함량은 정상군에 비해 유의성있게증가하였다. 실험군 A에서는 대조군에 비해 감소하는 경향은 있었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성있게 감소하였다(Table 7).
- 대조군의 total cholesterol 함량은 정상군에 비해 유의성 있게 증가하였다. 실험군 A는 대조군에 비해 감소하는 경향은 있었으나 유의성은 없었고, 실험군 B에서는 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다(Table 3).
- 그러므로 인지질은혈중 cholesterol과 평행하게 변동하는 것이 일반적이다心. 실험결과 Phospholipid 함량은 실험군 B에서 대조군에 비하여 유의성있게 감초하였다. Phospholipid의 함량이 감소하였다는 것은 cholesterol의 감소와 관련이 있음을 의미한다.
- Triglyceride 의증가는 고혈압' 당뇨병' 알콜' 갑상선기능저하증과도 관련이 있다瓦). 실험결과 triglyceride 함량은 실험군 A 및 B 모두 대조군에비해 유의성있게 감소하였다. Triglyceride의 수치가 감소된 것으로 보아 황기는 고혈압과 당뇨병 등의 위험성을 낮추는 것으로판단된다.
- 실험결과 체중 변화에 있어서, 실험군 A는 3주차부터, 실험군 B는 2주차부터 실험종료일 까지 대조군에 비해서 각각 모두유의성있게 감소하였다. 이것으로 보아 황기는 고지방식이로 유발된 고지혈증에 대하여 체중증가 억제효과가 있는 것으로 생각된다.
- 심혈관 질환 중 고혈압성 질환에 의한 사망은 지난 10여 년동안 지속적으로 감소한데 비해, 죽상경화증성 질환인 허혈성 심혈관과 뇌혈관질환에 의한 사망률은 지속적으로 증가되었으며, 특히 허 혈성 심 질환에 의한 사망률은 지 난 10여년 사이에 약「6배정도 증가하였다'). 또한, 서구 여러 나라에서 高脂血症을 포함한동맥경화증의 여러 위험인자에 대한 철저한 교육과 치료를 통하여 1960대 말부터 혈관질환에 의한 사망률이 감소하는 추세인데비하여 우리의 사정은 반대로 심각하게 증가하고 있다는 사실은주목해야할 점이다%%
- 이상의 결과에서 황기는 인체 체중비례 5배 투여군에서 total cholesterol, LDL-cholesterol, triglyceride, phospholipid 함량을 감소시키며, HDL-cholesterole 증가시키는 효과가 있어 고지혈증 억제에 유의한 결과를 가짐을 확인하였다.
- 이상의 실험결과를 종합해 보면/ HDL・cholesterole 증가되고/ 체중과 간장의 무게/ total cholesterol, triglyceride 및 LDL- cholesterol의 함량이 감소한 것으로 나타났다. 이것으로 보아 황기는 임상에서 활용한다면 고지혈증 치료에 유효할 것으로 사료된다.
- 체중 변화를 관찰한 결과, 대조군은 1주차에서 정상군보다유의성 있게 증가하였고, 그 외에 정상군보다 증가하는 경향은있었으나 유의성은 없었다. 실험군 A는 3주차부터, 실험군B는 2 주차부터 실험종료일까지 대조군에 비해서 각각 모두 유의성 있게 감소하였다(Table 1).
후속연구
- 또한 우리나라 高脂血症의 특징은 구미에 비하여 혈중 총 cholesterol 농도 평균치는 그다지 높지 않으나 triglyceride의 수치가 월등히 높다는 점이므로찌 이에 대한 중점적인 치법 연구가요구된다.
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